专利名称：一种半枝莲总多酚的制备方法
技术领域：
本发明涉及天然产物分离领域，特别是涉及一种从半枝莲总多酚的制备方法。
背景技术：
半枝莲(Scutellaria barbata D. Don)，据《中国药典》收载，正品为唇形科黄芩属植物，别名为狭叶韩信草、并头草、牙刷草，以干燥全草，以全草入药。半枝莲在我国分布很广泛，除了东北高寒地带及西北沙荒地区外，几乎各省均有分布，多为野生。其首见于蒋仪 《药镜拾遗赋》“半枝莲，解蛇伤之仙草”。半枝莲全草含黄酮类、二萜类、多糖类、生物碱、挥发油等多种活性成分。半枝莲功能主治为清热，解毒，散瘀，止血，定痛。治吐血，衄血，血淋，赤痢，黄疸， 咽喉疼痛，肺痈，疔疮，瘰疬，疮毒，癌肿，跌打刀伤，蛇咬伤等。现代药理研究表明半枝莲还具有抗肿瘤的活性。董欢欢等研究表明半枝莲的抗肿瘤成分主要存在于它的水提或醇提部分；同时还得出半枝莲的抗氧化活性与半枝莲总酚和总黄酮组分存在关系。近年来国内外学者对其黄酮类成分提取分离研究报道较多，而对半枝莲中多酚类物质的研究鲜见报道。 多酚类物质作为一类具有独特生理和药理活性的天然产物，在抗诱变、抗肿瘤、抗病毒、抗微生物、抗衰老、抗氧化等方面都具有良好的作用。现有技术对半枝莲研究主要停留在其黄酮物质的提取分离上，对半枝莲总多酚的研究涉及较少。汪铁山等发表的“半枝莲总多酚含量测定与超声提取工艺研究”，该文献公开的最佳提取工艺是35倍量的65%乙醇超声提取45min，该文献采用的溶剂量较大，且仅制得粗提液，未得到半枝莲多酚产物。
发明内容
本发明的目的是提供一种半枝莲总多酚的制备方法。本发明的目的是通过下述方案实现的—种半枝莲总多酚的制备方法，其特征在于将半枝莲全草粉碎，与混有纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温30 50°C，酶解1 3h，酶解结束后高温灭酶，再采用6 10倍水恒温连续逆流法浸提，收集水提液与残渣；残渣再采用6 10倍的30 65%乙醇回流提取， 得醇提液；将上述水提液和醇提液合并，加醇沉析，除去杂质，浓缩干燥得半枝莲总多酚。所述的纤维素酶用量是物料的1 6 %。所述的高温灭酶步骤为加热煮沸，保沸15min。所述的连续逆流提取法分为4 8个单元，恒温控制在40 70°C，提取时间为2 5h。所述的乙醇回流提取次数为1 3次，提取时间为0.5 3h，控制温度为60 80 "C。所述的醇沉析为加乙醇至醇浓度达70%。所述的干燥方法是冷冻干燥、喷雾干燥或低温真空干燥中的一种。
本发明的优点是本方法操作简单、提取完全；连续逆流法浸提，节省溶剂，酶解法反应温和，收率高；所用溶剂毒性小，可回收重复使用，对环境污染小，适合工业规模化生产。
具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。实施例1取半枝莲全草粉碎，取1kg，加入5L混有IOg纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温50°C， 搅拌酶解lh，酶解结束后加热保沸15min灭酶，再加入6L70°C水恒温动态逆流浸提5h，提取分为4个单元进行，离心分离得水提液和残渣；残渣再加入6L的30 %乙醇恒温60°C回流提取3h，得醇提液；将上述水提液和醇提液合并，加乙醇至醇浓度达70%，过滤除去蛋白质、多糖等杂质，滤液浓缩喷雾干燥得半枝莲总多酚10. 3g，含量达50%以上。实施例2取半枝莲全草粉碎，取1kg，加入6L混有60g纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温30°C， 搅拌酶解3h，酶解结束后加热保沸15min灭酶，再加入10L40°C水恒温动态逆流浸提2h， 提取分为8个单元进行，离心分离得水提液和残渣；残渣再加入IOL的65%乙醇恒温80°C 回流提取3次，每次0. 5h，合并得醇提液；将上述水提液和醇提液合并，加乙醇至醇浓度达70%，过滤除去蛋白质、多糖等杂质，滤液浓缩冷冻干燥得半枝莲总多酚13. lg，含量达 50%以上。实施例3取半枝莲全草粉碎，取5kg，加入20L混有IOOg纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温 45°C，搅拌酶解1. 5h，酶解结束后加热保沸15min灭酶，再加入40L50°C水恒温动态逆流浸提3h，提取分为5个单元进行，离心分离得水提液和残渣；残渣再加入30L的40%乙醇恒温 65°C回流提取2次，每次lh，得醇提液；将上述浸提液、酶解液和醇提液合并，加乙醇至醇浓度达70%，过滤除去蛋白质、多糖等杂质，滤液浓缩低温真空干燥得半枝莲总多酚49. Sg, 含量达50%以上。实施例4取半枝莲全草粉碎，取10kg，加入50L混有220g纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温 35°C，搅拌酶解2h，酶解结束后加热保沸15min灭酶，再加入100L55°C水恒温动态逆流浸提3. 5h，提取分为6个单元进行，离心分离得水提液和残渣；残渣再加入70L的45 %乙醇恒温70°C回流提取2h，得醇提液；将上述浸提液、酶解液和醇提液合并，加乙醇至醇浓度达70%，过滤除去蛋白质、多糖等杂质，滤液浓缩喷雾干燥得半枝莲总多酚94. 9g，含量达 50%以上。实施例5取半枝莲全草粉碎，取10kg，加入60L混有500g纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温45°C， 搅拌酶解2. 5h，酶解结束后加热保沸15min灭酶，再加入80L65°C水恒温动态逆流浸提4h，提取分为7个单元进行，离心分离得水提液和残渣；残渣再加入80L的50%乙醇恒温75°C回流提取2. 5h，得醇提液；将上述浸提液、酶解液和醇提液合并，加乙醇至醇浓度达70%，过滤除去蛋白质、多糖等杂质，滤液浓缩喷雾干燥得半枝莲总多酚105. 7g，含量达50%以上。
权利要求
1.一种半枝莲总多酚的制备方法，其特征在于将半枝莲全草粉碎，与混有纤维素酶的蒸馏水混勻，恒温30 50°C，酶解1 3h，酶解结束后高温灭酶，再采用6 10倍水恒温连续逆流法浸提，收集水提液与残渣；残渣再采用6 10倍的30 65%乙醇回流提取， 得醇提液；将上述水提液和醇提液合并，加醇沉析，除去杂质，浓缩干燥得半枝莲总多酚。
2.如权利要求1所述的一种半枝莲总多酚的制备方法，其特征在于所述的纤维素酶用量是药材量的1 6%。
3.如权利要求1所述的一种半枝莲总多酚的制备方法，其特征在于所述的连续逆流提取法分为4 8个单元，恒温控制在40 70°C，提取时间为2 5h。
4.如权利要求1所述的一种半枝莲总多酚的制备方法，其特征在于所述的乙醇回流提取次数为1 3次，提取时间为0. 5 3h，控制温度为60 80°C。
5.如权利要求1所述的一种半枝莲总多酚的制备方法，其特征在于所述的干燥方法是冷冻干燥、喷雾干燥或低温真空干燥中的一种。
全文摘要
本发明提供一种半枝莲总多酚的制备方法，方法步骤包括将半枝莲全草粉碎，与混有纤维素酶的蒸馏水混匀，恒温30～50℃，酶解1～3h，酶解结束后高温灭酶，采用水恒温连续逆流法浸提，收集水提液与残渣，残渣再采用醇回流提取，将上述水提液和醇提液合并，加大量醇沉析，滤除杂质，浓缩干燥得半枝莲总多酚。本方法操作简单、提取完全，适合工业规模化生产。
文档编号A61P35/00GK102225091SQ201110117899
公开日2011年10月26日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司