专利名称：一种抗老年性脑痴呆症的中药组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明属于中药领域，涉及一种抗老年性脑痴呆症的中药组合物及其用途。
背景技术：
老年性脑痴呆症(Senile dementia)，亦称阿尔茨海默病(Alzheimer，s disease,AD)是一种以临床和病理为特征的进行性退行性神经病，该病严重影响着患者的生活能力和生活质量，给家庭和社会带来沉重的监护负担和医疗费用负担。目前全世界约有1800万人患有老年性脑痴呆症。据推测，至2025年，全球老年性脑痴呆症患者将剧增至3400万人。在美国，65岁以上的人有10%患有老年性脑痴呆症，是老年人死亡的第四位原因；在英国，65岁以上人群的发病率也达10%，85岁以上人群的发病率高达47% ；在我国超过60岁的人口占总人口的10. 15 %，约1.四亿人，其中老年性脑痴呆症患病率约为5 %，患者约为700万人。这么庞大的发病群体势必会日益加重社会负担、家庭负担，带来一系列的家庭和社会问题。目前临床上用于治疗老年性脑痴呆的药物集中在胆碱酯酶抑制剂、NMDA受体阻滞剂、清除自由基的抗氧化剂、雌激素类药物四个方面，上述药物多是临床对症治疗药物，只能一定程度上缓解AD某些症状，而不能使这些症状得到根本的治疗和逆转，也不能有效的预防AD，更为严重的是上述药物均存在不同程度的毒副作用。因此研究治疗作用确切、安全低毒、廉价易得的中药复方创新药物具有较大的市场竞争优势。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗老年性脑痴呆症的中药组合物。本发明的另一目的在于提供一种抗老年性脑痴呆症的药物。本发明的又一目的在于提供上述抗老年性脑痴呆症药物的制备方法。本发明的又一目的在于提供上述中药组合物在制备抗老年性脑痴呆症药物中的应用。本发明的目的可以通过以下技术方案实现一种抗老年性脑痴呆症的中药组合物，其在于由以下原料药组成化橘红、知母、杜仲叶和人参，所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为(1 10) (1 10) (1 10) (0.4 8)，所述原料药的来源为中药材或相当于中药材生药量的中药提取物。优选为化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为O 6) (1 5) (1 5) (0.6 4)。更进一步优选为化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为4 2 2 1。上述的抗老年性脑痴呆症的中药组合物，其在于所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参为药材的水提取物、醇提取物或者中药材直接打粉。一种抗老年性脑痴呆症的药物，其在于由上述的中药组合物和药学可接受的辅料制成。所述的药物为口服剂型。所述的口服剂型优选为胶囊剂、颗粒剂、片剂、口服液、滴丸剂、软胶囊剂、蜜丸剂或水丸剂。
上述的抗老年性脑痴呆症药物的制备方法，包括以下步骤制得化橘红、知母、杜仲叶和人参的醇提取物或水提取物，再向醇提取物或水提取物中加入药学可接受的辅料，得到所述的药物。上述的中药组合物在制备抗老年性脑痴呆症药物中的应用。化橘红芸香科植物化州袖Citrus grandis iTomentosa'或袖Citrusgrandis (L)Osbeek的未成熟或近成熟的干燥外层果皮。前者习称“毛橘红”，后者习称“光七爪”、“光五爪”性味与归经辛、苦，温。归肺、脾经。功能与主治散寒，燥湿，利气，消痰。用于风寒咳嗽，喉痒痰多，食积伤酒，呕恶痞闷。知母为百合科知母属植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bunge)的根状茎。性味功能苦、寒、清热除烦，润肺滋肾。主治烦躁口渴、肺热燥咳、消渴、午后潮热等症。临床常用药，不仅清肺火，又能清胃火，特别是清虚热、胃阴热等虚热症。杜仲叶为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥叶。性状杜仲叶面呈椭圆形或卵形，长7-15cm，宽3.5-7cm。表面黄绿色或黄褐色，微有光泽。先端渐尖，基部圆形成广楔形，边缘有锯齿，具短叶柄。质脆，搓之易碎，折断面有少量银白色橡胶丝相连。气味，味微苦。性味与归经微辛，温。归肝、肾经。功能与主治补肝肾，强筋骨。用于肝肾不足，头晕目眩，腰膝酸痛，筋骨痿软。人参为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Mey的干燥根。优选为生晒参。本发明的有益效果本发明的中药组合物对抗老年性脑痴呆症具有显著的作用，可用于预防和治疗老年性脑痴呆症；且为纯中药制剂，安全低毒、廉价易得；经药理药效学实验证明，与现有技术中常用的西药和重要对照物相比，其治疗效果明显提高。
具体实施例方式实施例1中药组合物治疗老年性脑痴呆症的体外药效学试验中药组合物由化橘红、知母、杜仲叶和人参组成，组方I药味质量配比为4:2:2: 1 ；组方II药味质量配比为10 10 10 1 ；组方III药味质量配比为1:1:2:4。通过测定“叠氮钠诱导的PC12细胞”的增殖率、LDH释放量、细胞内钙离子浓度进行体外药效学实验。1、中药组合物醇提取液和水提取液的制备组方I醇提取液称取化橘红22. Mg、知母11. 12g、杜仲叶11. 12g和人参5. 56g，加600ml 60%乙醇浸泡lh，然后回流提取，提取3次，每次提取时间为池；将3次滤液合并，旋蒸回收乙醇至无醇味，250ml容量瓶加蒸馏水定容，按照生药材计算，得到浓度为200mg/ml药液；取Iml浓度为200mg/ml的药液，置于IOml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，得到浓度为20mg/ml药液；将药液在超净台内过滤除菌，4°C冰箱保存，备用。加药前，将药液用RPMI1640培养液稀释到浓度为2mg/ml。组方II醇提取液分别称取化橘红16. 14g、知母16. 14g、杜仲叶16. 14g和人参1. 61g，制备浓度为20mg/ml的药液；制备方法同组方I制备醇提取液方法。加药前，将药液用RPMI1640培养液稀释到浓度为2mg/ml。组方III醇提取液分别称取化橘红6. 25g、知母6. 25g、杜仲叶12. 50g和人参25. 00g，制备浓度为20mg/ml的药液；制备方法同组方I制备醇提取液方法。加药前，将药液用RPMI1640培养液稀释到浓度为2mg/ml。组方I水提取液称取化橘红22. 24g、知母11. 12g、杜仲叶11. 12g和人参5. 56g，用10倍量的水浸泡组方药材lh，直火加热提取3次，每次提取时间为lh，抽滤，将3次滤液合并浓缩后，置于250ml容量瓶加蒸馏水定容，按照生药材计算，得到浓度为200mg/ml药液；取Iml浓度为200mg/ml的药液，置于IOml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，得到浓度为20mg/ml药液；将药液在超净台内过滤除菌，4°C冰箱保存，备用。加药前，将药液用RPMI1640培养液稀释到浓度为2mg/ml。组方II水提取液分别称取化橘红16. 14g、知母16. 14g、杜仲叶16. 14g和人参1. 61g，制备浓度为20mg/ml的药液；制备方法同组方I制备水提取液方法。加药前，将药液用RPMI1640培养液稀释到浓度为2mg/ml。组方III水提取液分别称取化橘红6. 25g、知母6. 25g、杜仲叶12. 50g和人参25. 00g，制备浓度为20mg/ml的药液；制备方法同组方I制备水提取液方法。加药前，将药液用RPMI1640培养液稀释到浓度为2mg/ml。2.细胞接板培养、分组造模与给药实验细胞大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)，购于中国医学科学院基础医学研究所。实验药品叠氮钠(Amersco)，胰蛋白酶(AMRESCO，USA)；新生牛血清(NewbornCalf Serum, GIBCO Invitrogen Corporation, New Zealand) ；RPMI Medium 1640干粉培养基(GIBC0 Invitrogen) ；二甲基亚砜(dimethyl-sulfoxide，DMS0，江苏永华精细化学品有限公司)；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(南京建成生物制品有限公司，20101123)D-Hank' s 平衡盐溶液配制NaCl 4. 00g, KCl 0. 20g, Na2HPO4 ‘ 12H20 0. 067g,KH2PO4O. 03g, NaHCO3 0. 175g,酚红 0. Olg,三蒸水 500mL，调节 pH 至 7. 0 7. 4 ；PBS 平衡盐溶液配制:NaCl 8. 00g, KCl 0. 20g，Na2HPO4 · 12H20 3. 49g，KH2PO40. 20g,三蒸水 IOOOmL,调节 pH 至 7. 2 7. 4 ；RPMI1640 培养液配制RPMI Medium 1640 干粉培养基(GIBC0Invitrogen) 10. 4g，NaHCO3 2. 0g,青霉素 000 万 U 单位市售)0. 06g,链霉素(100 万 U 单位市售)0. 1006g，三蒸水900mL配制，抽滤除菌；细胞营养液配制含10%新生牛血清的RPMI 1640培养基溶液；0.25%胰蛋白酶消化液配制将胰蛋白酶(Trypsind 250)AMRESC0，USA)溶解于PBS平衡盐溶液中，0.22 um滤器过滤除菌；Triton X-100 (10% )配制精密移取 Triton X-100 1. OmL 用 PBS 平衡盐溶液稀释定容至IOmL即得。EGTA (Imo 1/L)配制精密称取EGTA 3. 8006mg用4mL PBS平衡盐溶液溶解，再用4M氢氧化钠调节PH为8. 4，最后用PBS平衡盐溶液定容至IOmL即得。Fura 2-AM(lmmol/L)配制精密称取 0. 5mg Fura 241，用 499口1^ DMSO 溶解即得，-20°C冰箱冻存。细胞培养取生长良好的PC12细胞经0.25%胰蛋白酶消化，离心后用细胞营养液重悬制成细胞悬液，计数后调节细胞浓度为1 X IO5个/mL。将此细胞悬液接种于96孔细
5胞培养板中，除细胞板四周各孔外，每孔接种100 μ L0 96孔细胞培养板各孔各加入100 μ LD-Hank' s平衡盐溶液。将接种细胞后的培养板置于5% C02、37°C恒温培养箱中培养Mh。细胞分组、造模与给药将96孔细胞培养板除掉四周的孔外，其余各孔按列分组。从细胞板的第二列开始，依次设为空白组；模型组；给药组，每组设置6个复孔。按照下述方法对各组细胞进行造模和给药，并放入5 % CO2、37 °C恒温培养箱中培养Mh，备用。给药组接种的PC12细胞培养24h后，弃去原培养液，分别加入含NaN3 (浓度为50mmol/l)的培养液100 μ 1，再加入分别含有组方I、II、III的水提取物和乙醇提取物的RPMI1640培养液20 μ 1。其中各组方的药物在RPMI1640培养液中的含量为ang/ml。培养12h，测定OD值。模型组接种的PC12细胞培养24h后，弃去原培养液，加入含NaN3(浓度为50mmol/l)培养液100 μ 1，再加入新鲜培养液20 μ 1。培养12h，测定OD值。空白组接种的PC12细胞培养24h后，弃去原培养液，加入培养液120 μ 1。培养12h，测定OD值。3.组方药物对叠氮钠诱导的PC12细胞损伤修复作用-对受损细胞增殖活性的影响，检测结果见表1。表1 各组方水提取物和醇提取物Omg/ml)对NaN3诱导的PC12细胞增殖活性的影响
权利要求
1.一种抗老年性脑痴呆症的中药组合物，其特征在于由以下原料药组成化橘红、知母、杜仲叶和人参，所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为(1 10) (1 10) (1 10) (0.4 8)，所述原料药的来源为中药材或相当于中药材生药量的中药提取物。
2.根据权利要求1所述的抗老年性脑痴呆症的中药组合物，其特征在于所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为O 6) (1 5) (1 5) (0.6 4)。
3.根据权利要求2所述的抗老年性脑痴呆症的中药组合物，其特征在于所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为4 2 2 1。
4.根据权利要求1所述的抗老年性脑痴呆症的中药组合物，其特征在于所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参为药材的水提取物、醇提取物或者中药材直接打粉。
5.一种抗老年性脑痴呆症的药物，其特征在于由权利要求1-4中任意一项所述的中药组合物和药学可接受的辅料制成。
6.根据权利要求5所述的抗老年性脑痴呆症的药物，其特征在于为口服剂型。
7.根据权利要求6所述的抗老年性脑痴呆症的药物，其特征在于为胶囊剂、颗粒剂、片剂、口服液、滴丸剂、软胶囊剂、蜜丸剂或水丸剂。
8.权利要求5所述的抗老年性脑痴呆症药物的制备方法，其特征在于包括以下步骤制得化橘红、知母、杜仲叶和人参的醇提取物或水提取物，再向醇提取物或水提取物中加入药学可接受的辅料，得到所述的药物。
9.权利要求1所述的中药组合物在制备抗老年性脑痴呆症药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种抗老年性脑痴呆症的中药组合物及其用途。该中药组合物由以下原料药组成化橘红、知母、杜仲叶和人参，所述的化橘红、知母、杜仲叶和人参的质量比为(1～10)∶(1～10)∶(1～10)∶(0.4～8)，所述原料药的来源为中药材或相当于中药材生药量的中药提取物。本发明的中药组合物对抗老年性脑痴呆症具有显著的作用，可用于预防和治疗老年性脑痴呆症；且为纯中药制剂，安全低毒、廉价易得；经药理药效学实验证明，与现有技术中常用的西药和中药对照物相比，其治疗效果明显提高。
文档编号A61K36/8964GK102380024SQ201110336170
公开日2012年3月21日 申请日期2011年10月28日 优先权日2011年10月28日
发明者杨中林 申请人:杨中林