专利名称：灯盏细辛提取物在制备药物中的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及灯盏细辛提取物在制备抑制β -淀粉样多肽聚集及纤维形成的药物中的用途，属于中药技术领域。
背景技术：
阿尔茨海默症(Alzheimers Disease, AD)是ー种发生于老年人的原发性中枢神经系统退化性疾病，其主要病理特征包括大脑局部，尤其是海马和皮层神经元退行性变化， 細胞内神经原纤维缠结和細胞外老年斑沉淀。AD的发病率高，给病人的生活和工作带来了很多不便，给个人、家庭、社会造成了沉重的社会负担和经济负担。研究AD的发病机理，揭示其病理生理过程，提供进ー步的治疗机会及新药物的开发具有重大的社会价值和经济价值，有着重要的研究意义。关于AD的病理损伤过程提出了很多假说(Kaltschmidt B，et al. Proc Natl Acad Sci USA，1999，96 (16) :9409-9414)。轴浆运输障碍导致的神经退行性疾病假说认为，相关基因突变导致Tau蛋白聚集态结构变化及功能改变是AD的诱因。胆固醇变化学说则认为胆固醇稳态改变是引起突触可塑性损害、神经元退化等AD病理变化的关键原因，淀粉样斑块、Tau磷酸化及細胞骨架、氧化压力等变化都是针脑内胆固醇动力学变化的代偿反应。 Αβ (β-amyloid pepide, β -淀粉样多肽)假说认为，AD是ー种由于基因缺陷直接或间接改变淀粉样前蛋白(APP)表达或蛋白酶解过程从而影响Αβ聚集稳定性的病理综合征，Αβ 产生和清除之间的平衡逐渐改变，聚集态的Αβ累积引发连串的复杂反应，包括突触/突起的变化，Tau蛋白磷酸化，递质丢失，神经胶质增生和炎症反应等，最终出现神经元功能失调、死亡，斑块形成，神经原纤维缠积等病理现象。随着对AD研究的深入，关于疾病发生的A β假说得到了深入的发展，越来越多的证据显示Αβ可能是AD发生的原发性病理因子。首先几乎在所有AD病人的脑中都发现了大量的淀粉样斑块沉积和神经末梢退化等改变，而在与学习记忆相关的关键区域斑块的数量直接与脑カ损害程度成正比。老年斑的主要毒性成分即为淀粉样前体(APP)产生的 β -淀粉样肽，早期的A β弥散性斑块类似于胆固醇脂肪纹，而成熟的老年斑与动脉粥样硬化斑块相似。人类的其他淀粉样变性疾病，往往只要抑制病源性淀粉肽的产生就能够成功地治疗这类疾病，也给研究人员带来希望，一旦阐明Αβ的发生发展机制就有可能找到治疗AD的方法，甚至解开人类学习记忆的谜底。因此，若能够①抑制Αβ肽的形成；②抑制 Αβ的聚集(抑制Αβ的神经毒性)，加速Αβ的降解与清除；便能够减轻AD患者的症状， 甚至达到治疗AD病的目的。同吋，Αβ聚集和纤维形成还能导致血管性淀粉样病变，进而诱发中分等疾患。迄今，尚未找到能有效根治血管性淀粉样病变的药物。灯盏细辛为菊科飞蓬属植物短葶飞蓬(Erigeron breviscapus)，能够散寒解表， 祛风除湿，活络止痛。常用于感冒头痛，牙痛，胃痛，风湿疼痛，脑血管意外引起的瘫痪等。在临床上常以灯盏花为主，结合其它中西医疗法，治疗高血压脑溢血、脑血栓形成、脑栓塞、多发性神经炎、慢性蛛网膜炎等后遗瘫痪症。已有多个专利围绕灯盏细辛在治疗心脑血管方面的应用(中国发明专利 ZL03117754、ZL01115358. X、ZL0213750. X、ZL03117753. 0 等)，同时，还有关于灯盏细辛用于治疗血管性老年痴呆症报道(李富慧，灯盏细辛注射液联合吡拉西坦治疗血管性痴呆临床研究，中国实用神经疾病杂志，2011，14 :10-13)。但关于灯盏细辛抑制β -淀粉样多肽聚集和纤维形成活性以及基于β -淀粉样多肽假说用于抗老年痴呆药物均未见报道。
发明内容
本发明的目的在干提供一种灯盏细辛提取物在制备药物中的新用途。研究表明， 灯盏细辛提取物对Αβ的聚集有显著的抑制作用，并且对Αβ诱导的神经细胞毒性有良好的保护作用，可用于制备抑制β-淀粉样多肽聚集及纤维形成的药物。本发明的技术方案灯盏细辛提取物在制备抑制β -淀粉样多肽聚集及纤维形成的药物中的用途。灯盏细辛提取物还可用于制备治疗或预防由于β-淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的病症的药物。前述的灯盏细辛提取物是由菊科植物灯盏细辛(Erigeron breviscapus)的全草提取制备的含有黄酮类化合物和咖啡酰基奎宁酸酯类化合物的总酚提取物。前述灯盏细辛提取物是这样制备的取灯盏细辛全草，粉碎，用低级醇溶剂提取 2 3次，合并提取液，减压浓缩回收溶剤，浓缩液用水稀释，过滤，滤液上苯乙烯类大孔吸附树脂，水洗脱至无色后，用30% 95%的醇溶液洗脱，洗脱体积为3 20倍柱体积；洗脱液浓縮，用10%氢氧化钠溶液调pH值为7. 0 7. 5，然后喷雾干燥，得棕黄色粉末，即灯盏细辛总酚提取物。前述灯盏细辛提取物也可以这样制备取灯盏细辛全草，粉碎，用低级醇溶剂提取 2 3次，合并提取液，减压浓缩回收溶剤，浓缩液用水稀释，先用120号汽油萃取脱脂，水层用乙酸乙酯萃取3 4次，合并乙酸乙酯部分，浓縮，除去溶剤，得棕黄色粉末，即灯盏细辛总酚提取物。前述灯盏细辛提取物制备时所用低级醇为甲醇或乙醇。前述灯盏细辛提取物中含有的黄酮类化合物中野黄芩苷的含量为0. 50%。前述灯盏细辛提取物中含有的咖啡酰基奎宁酸酯类化合物中总咖啡酰基奎宁酸酷的含量为10% 99%。前述咖啡酰基奎宁酸酯类化合物中含有4，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酯和飞蓬酯乙。为了确保本发明的效果，申请人对所述的灯盏细辛提取物进行了药理实验研究， 具体如下1、灯盏细辛提取物及其中主要成分对β -淀粉样多肽聚集的抑制作用A β !_42冻干粉用少量0. 1 %氨水溶解，再加入50mM的PBS (pH = 7. 4)缓冲溶液，配成ImM的A βト42储备液，再用50mM的PBS (pH = 7. 4)缓冲溶液稀释，配成含A βト4245 μ M的溶液，或者分別加入100 μ g/mL的下列样品灯盏细辛提取物、野黄芩苷、飞蓬酯乙、4，5-ニ 咖啡酰基奎宁酸酷、3，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷，每种样品溶液同时配制18份，每份体积200 μし不同样品溶液各取2份分别在37°C水浴下孵育0、1、2、4、6、8、12、24、36小吋。孵育到规定时刻吋，取出样品溶液，用冰浴冷却猝灭聚集反应。然后加入含3 μ M的荧光黄ThT的PBS缓冲液200 μ L，混合均勻，马上在F-4600荧光分光光度计上测定其荧光值。激发波长为445 λ m,发射波长为490 λ m，一个时间点上每个样品取2份溶液測定，取平均值。如附图1所示，Ai^_42溶液在37°C水浴下孵育不同的时间后，在溶液中开始形成聚集体，体系中加入ThT后，与聚集的A β ^42结合，在445 λ m光线激发下，于490 λ m处产生最大吸收的发射光，其荧光值随着Αβト42聚集度的増加而增加。当到达一定时间后，聚集基本完全，荧光值也基本稳定。从图1可看出，12小时以后，聚集基本达到平衡。当样品溶液中含有一定浓度的聚集抑制剂时，A βト42聚集程度受到抑制，荧光值显著下降。从附图1可看出，灯盏细辛提取物能显著抑制Aβト42的聚集，并且，灯盏细辛提取物的主要成分(野黄芩苷、飞蓬酯乙、4，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5_ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷)都有不同程度的抑制作用。本实验证明，灯盏细辛提取物能显著抑制A βト42 (即淀粉样多肽)的聚集，是 ー种ムら_42聚集抑制剂。2、灯盏细辛提取物对神经細胞的毒性试验取处于对数生长期的PC12細胞接种于96孔板，将板放于37°C、5% CO2培养箱中培养。实验分为正常对照组、样品作用組。24h后正常组加相应的溶媒，样品组加10μ1各个样品，置培养箱中24h后弃培养液，每孔加新鮮的1640培养基90 μ 1，正常组加相应的溶媒，再过24h后用MTT法检测，用酶标仪测570nm波长处每孔的吸光值。实验中每个浓度平行3孔，实验重复3次。根据公式计算样品对细胞的抑制率样品对PC12細胞的抑制率=(正常组吸光度一样品组吸光度)/正常组吸光度 X 100%样品组分别采用灯盏细辛提取物，试验结果參见附图2。可见，灯盏细辛提取物对 PC12細胞未表现出明显的細胞毒性，可安全地应用于A β聚集抑制剂。3、灯盏细辛提取物对β -淀粉样多肽诱导的PC12細胞毒性的保护作用取对数生长期的PC12細胞，吹打成单细胞悬液，接种于96孔培养板上，分別加入不同浓度灯盏细辛提取物、野黄芩苷、飞蓬酯乙、4，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酯样品预处理Mh，再与模型组同时加入10 μ 1 10 μ mo 1 じ1Aβト42，继续培养Mh。培育完后，每孔加入MTT 20μ 1 (终浓度5mg/ml)，37°C孵育4小吋，再加入三联液50 μ 1，置培养箱中过夜，用酶标仪測定波长 570nm波长处每孔的吸光值(0D值)。根据公式计算細胞生存率生存率=(各处理组吸光度一空白组吸光度)/(对照组吸光度-空白组吸光度)X 100%由附图3可见，灯盏细辛提取物及其中主要成分都能显著地降低Aβト42对神经细胞的毒性作用，特別是灯盏细辛提取物及飞蓬酯乙、3，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酯等的作用明显，有显著的神经保护作用。4、灯盏细辛提取物对β -淀粉样多肽诱导的PC12細胞内产生MDA的清除作用取对数生长期的PC12細胞，接种于96孔培养板上，分別加入不同浓度灯盏细辛提取物、野黄芩苷、飞蓬酯乙、4，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、 1，3-ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酷，预处理Mh，再与模型组同时加入 10 μ IlOymol ·じ1Aβト42，继续培养24h測定。測定时，将各组细胞用吹打管吹打吸出，置于1. 5ml的离心管中，1600r离心lOmin，弃上清，然后用预冷的PBS缓冲液洗2次，弃去残留的PBS。将细胞沉淀置于4°C备用。向各组细胞沉淀中加入100 μ 1预冷的非变性細胞裂解液，将其用枪头吹散，让细胞裂解液和細胞充分混勻，然后置于4°C裂解30min。細胞裂解好后，1600r离心lOmin，取100 μ 1上清转移于一个新的离心管中进行指标的測定。称取适量ΤΒΑ，用TBA配制液配制成浓度为0. 37%的TBA储存液。配制好的TBA 储存液室温避光保存。通过超声处理以促进MDA检测工作液溶解，配制好的MDA检测工作液必须当天使用。在离心管中加入0. Iml勻浆液、裂解液或PBS等适当溶液作为空白对照，加入
0.Iml上述不同浓度标准品用于制作标准曲线，加入0. Iml样品用于测定；随后加入0. 2ml MDA检测工作液。由附图4可见，灯盏细辛提取物及其中主要成分均能显著降低PC12細胞内因受 Αβト42刺激而升高的氧化应激产物MDA。其中以灯盏细辛提取物及飞蓬酯乙、3，5- ニ咖啡
酰基奎宁酸酯等最为显著。实验结果表明，灯盏细辛提取物可以有效清除神经细胞内因受Aβト42刺激而升高的氧化应激产物MDA，灯盏细辛提取物可能通过抗氧化作用，达到对神经细胞的保护作用。5、灯盏细辛提取物对β -淀粉样多肽诱导的PC12細胞内caspase-3/7蛋白表达的影响取对数生长期的PC12細胞，接种于96孔培养板上，分別加入不同浓度灯盏细辛提取物、野黄芩苷、飞蓬酯乙、4，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷，预处理Mh，再与模型组同时加入10 μ 110 μ mol ·じ1A β卜42，继续培养Mh。测定时，将Caspase-Glo 缓冲液加入 Caspase-Glo 底物试剂瓶中，颠倒混合直到底物彻底溶解，配成Caspase-Glo 试剂。将含有培养细胞的96孔板从培养箱中取出，室温平衡；同时也把配好的Caspase-Glo 试剂室温平衡。向細胞培养物中加等体积的试剂，以300-500rpm轻轻震荡混合30s，室温孵育30min。 将样品板放入GloMax 发光检测仪中检测。由附图5可见，灯盏细辛提取物可以显著降低神经细胞内因受淀粉样多肽刺激而显著升高的caspase-3/7蛋白表达，表明灯盏细辛提取物可能通过对阻断或抑制 β-淀粉样多肽诱导神经细胞凋亡而起到神经保护作用。6、灯盏细辛提取物对β -淀粉样多肽诱导的PC12細胞内NF- κ b蛋白表达的影响取对数生长期的PC12細胞，接种于96孔培养板上，分別加入不同浓度灯盏细辛提取物及主要成分(野黄芩苷、飞蓬酯乙、4，5_ ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5_ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酯)，预处理Mh，再与模型组同时加入10 μ 1 10 μ mol ·じ1Aβト42，继续培养24h測定。将各组細胞用吹打管吹打吸出，置于
1.5ml的离心管中，1600r离心lOmin，弃上清，然后用预冷的PBS缓冲液洗2次，弃去残留的PBS。将细胞沉淀置于4°C备用。向各组细胞沉淀中加入100 μ 1预冷的非变性細胞裂解液，将其用枪头吹散，让细胞裂解液和細胞充分混勻，然后置于4°C裂解30min。細胞裂解好后，16001 离心lOmin，取100 μ 1上清转移于一个新的离心管中进行指标的測定。以空白值调零，450nm波长依序測量各孔的吸光度。测定应在加终止液后15分钟以内进行。由附图6可见，灯盏细辛提取物及其中主要成分可以显著减低PC12細胞内因 β -淀粉样多肽诱导而大幅増加的NF-K b蛋白表达。结果表明，灯盏细辛提取物可能通过抑制A βト42对神经細胞的炎症刺激而达到神经保护作用。以上药理实验结果表明，灯盏细辛提取物能显著抑制Ah_42的聚集，并在細胞内改善因A β ^42诱导产生的細胞凋亡、炎症，通过清除ROS (如MDA)，降低細胞内氧化应激，从而达到对神经細胞的保护作用，増加神经细胞活力；同时，灯盏细辛提取物本身对神经細胞毒性很小；所以，灯盏细辛提取物可用于由于淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的相关疾病的治疗或预防药物制备中。
图1是灯盏细辛提取物及其中主要成分对β -淀粉样多肽(Α βト42)聚集的抑制作用曲线图；图2是灯盏细辛提取物对PC12神经细胞的細胞毒性作用示意图；图3是灯盏细辛提取物及其中主要成分对β -淀粉样多肽(Αβト42)诱导的PC12 細胞毒性的保护作用效果图；图4是灯盏细辛提取物及其中主要成分对β -淀粉样多肽(Αβト42)诱导的PC12 細胞内MDA的影响效果图；图5是灯盏细辛提取物及其中主要成分对β -淀粉样多肽(Αβト42)诱导的PC12 細胞内Caspase-3/7表达的影响效果图；图6是灯盏细辛提取物及其中主要成分对β -淀粉样多肽(Αβト42)诱导的PC12 細胞内Nf-κ b含量的变化表达的影响效果图。在图1、图3-图6中0-Αβト42 ； 1_灯盏细辛提取物；2_野黄芩苷；3_飞蓬酯乙； 4-4，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酯；5-3，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酯；6-1，3-ニ咖啡酰奎宁酸酯； 7-1，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷。
具体实施例方式本发明的实施例1 灯盏细辛提取物的制备取灯盏细辛全草^g，粉碎，加入70%酒精约15升，以淹没药材并稍高出为准；加热回流1小时，倾出液体，继续加入适量70%酒精，重复相同操作，提取3次，最后-次将药渣过滤。合并滤液，40 60°C减压浓缩至体积约5升，浓缩液用水稀释至10升，过滤，除去滤渣。滤液在已预处理的AB-8大孔吸附树脂柱上吸附分配，先用30升水洗脱，再用20升 80%酒精洗脱。80%酒精洗脱液浓缩至1升左右，用10%氢氧化钠溶液调pH值为7. O左右，喷雾干燥，得棕黄色粉末，得量为U6g，得率为2. 52% (以灯盏细辛全草原料计)。该粉末即为灯盏细辛提取物I。经HPLC定性、定量分析，灯盏细辛提取物I中含有黄酮类组分和咖啡酰基奎宁酸酯类组分，其中主要黄酮类组分野黄芩苷含量为10. 5%，咖啡酰基奎宁酸酯类组分中4，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酯和飞蓬酯乙含量分别为5. 6%,4. 和 12. 8%。本发明的实施例2 灯盏细辛提取物的制备取灯盏细辛全草^g，粉碎，加入70%酒精约15升，以淹没药材并稍高出为准；加热回流1小时，倾出液体，继续加入适量70%酒精，重复相同操作，提取3次，最后一次将药渣过滤。合并滤液，40 60°C减压浓缩至体积约5升，浓缩液用水稀释至10升，先用120号汽油萃取脱脂，水层用乙酸乙酯萃取3-4次，合并乙酸乙酯部分，减压浓縮，除去乙酸乙酷， 得棕黄色粉末，得量为138g，得率为2. 76% (以灯盏细辛全草原料计)。该粉末即为灯盏细辛提取物II。经HPLC定性、定量分析，灯盏细辛提取物II中含有黄酮类组分和咖啡酰基奎宁酸酯类组分，其中主要黄酮类组分野黄芩苷含量为6. 5%，咖啡酰基奎宁酸酯类组分中 4，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酯和飞蓬酯乙含量分别为7.4%、6.2% 和 15. 6%。本发明的实施例3 灯盏细辛提取物中主要成分的分离取灯盏细辛提取物I 50g，过s印hadex LH-20凝胶层析柱，甲醇-水溶液梯度洗脱 (0%ヰ100% )，得3个部分，每个部分再分别进行ODS柱层折，分別以甲醇-水溶液梯度洗脱(30%ヰ100% )。从第一部分得到化合物1，从第二部分得到化合物2，第三个部分分別得到两个部位，再进ー步用HPLC进行纯化，分別得到化合物3-6。化合物1-6分別被鉴定为野黄芩苷、4，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酷、飞蓬酯乙。实施例4 灯盏细辛提取物的应用药物片剂的制备取实施例1中制得的灯盏细辛提取物I 100g、淀粉50g、10%淀粉浆IOg和硬脂酸镁2g ；将灯盏细辛提取物I与淀粉混合均勻后，加入10%淀粉浆制成软材，过14目筛制粒，在70-80で温度下干燥，过12目筛整粒，加硬脂酸镁混合后，压制成 1000片，即得片剂。每片含灯盏细辛提取物I lOOmg。该制剂可用于治疗或预防由于β-淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的老年痴呆症。实施例5 灯盏细辛提取物的应用药物片剂的制备取实施例1中制得的灯盏细辛提取物I 50g，实施例2中制得的灯盏细辛提取物II 50g，淀粉50g、10%淀粉浆IOg和硬脂酸镁2g ；将灯盏细辛提取物I和 II与淀粉混合均勻后，加入10%淀粉浆制成软材，过14目筛制粒，在70-80°C温度下干燥， 过12目筛整粒，加硬脂酸镁混合后，压制成1000片，即得片剂。每片含灯盏细辛提取物I 和II各50mg。该制剂可用于治疗或预防由于淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的老年痴呆症。实施例6 灯盏细辛提取物的应用药物胶囊的制备取实施例2中制得的灯盏细辛提取物II 100g、淀粉50g和硬脂酸镁2g ；将灯盏细辛提取物II与80°C干燥的淀粉和硬脂酸镁混合均勻后，分装成1000粒胶囊，即得胶囊剂。每粒胶囊含灯盏细辛提取物II IOOmgo该制剂可用于治疗或预防由于 β-淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的病症。
权利要求
1.灯盏细辛提取物在制备抑制β-淀粉样多肽聚集及纤维形成的药物中的用途。
2.灯盏细辛提取物在制备治疗或预防由于淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的病症的药物中的用途。
3.根据权利要求1或2所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于所述的灯盏细辛提取物是由菊科植物灯盏细辛的全草提取制备的含有黄酮类化合物和咖啡酰基奎宁酸酯类化合物的总酚提取物。
4.根据权利要求3所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于所述的灯盏细辛提取物是这样制备的取灯盏细辛全草，粉碎，用低级醇溶剂提取2 3次，合并提取液，减压浓缩回收溶剤，浓缩液用水稀释，过滤，滤液上苯乙烯类大孔吸附树脂，水洗脱至无色后，用 30% 95%的醇溶液洗脱，洗脱体积为3 20倍柱体积；洗脱液浓縮，用10%氢氧化钠溶液调PH值为7. 0 7. 5，然后喷雾干燥，得棕黄色粉末，即灯盏细辛总酚提取物。
5.根据权利要求3所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于所述的灯盏细辛提取物是这样制备的取灯盏细辛全草，粉碎，用低级醇溶剂提取2 3次，合并提取液，减压浓縮回收溶剤，浓缩液用水稀释，先用120号汽油萃取脱脂，水层用乙酸乙酯萃取3 4次，合并乙酸乙酯部分，浓縮，除去溶剤，得棕黄色粉末，即灯盏细辛总酚提取物。
6.根据权利要求4或5所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于灯盏细辛提取物制备时所用低级醇为甲醇或乙醇。
7.根据权利要求3所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于所述黄酮类化合物中野黄芩苷的含量为0.1% 50%。
8.根据权利要求3所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于所述咖啡酰基奎宁酸酯类化合物中总咖啡酰基奎宁酸酯的含量为10% 99%。
9.根据权利要求8所述灯盏细辛提取物的用途，其特征在于所述咖啡酰基奎宁酸酯类化合物中含有4，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、3，5- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，3- ニ咖啡酰基奎宁酸酷、1，5-ニ咖啡酰基奎宁酸酯和飞蓬酯乙。
全文摘要
本发明公开了灯盏细辛提取物在制备抑制β-淀粉样多肽聚集及纤维形成的药物中的用途，所述的灯盏细辛提取物是由菊科植物灯盏细辛的全草提取制备的含有黄酮类化合物和咖啡酰基奎宁酸酯类化合物的总酚提取物。实验研究表明，灯盏细辛提取物能显著抑制Aβ1-42的聚集，并在细胞内改善因Aβ1-42诱导产生的细胞凋亡、炎症，通过清除ROS(如MDA)，降低细胞内氧化应激，从而达到对神经细胞的保护作用，增加神经细胞活力；同时，灯盏细辛提取物本身对神经细胞毒性很小；因此，灯盏细辛提取物可用于由于β-淀粉样多肽聚集和纤维形成引起的相关疾病的治疗或预防药物制备中。
文档编号A61P25/28GK102526148SQ20121003675
公开日2012年7月4日 申请日期2012年2月19日 优先权日2012年2月19日
发明者杨庆雄 申请人:贵州师范大学