专利名称：一种水包油型复方磺胺二甲嘧啶纳米药物的制备方法
技术领域：
本发明属于医药领域，涉及一种兽药抗菌消炎药物的新剂型，特别涉及一种复方磺胺二甲嘧啶纳米乳及制备方法。
背景技术：
磺胺二甲嘧啶为一种抗菌磺胺药，分子式为C12H13N4NaO2S,白色或微黄色结晶或粉末，无臭，味微苦，遇光色渐变暗，几乎不溶于水和乙醚，易溶于稀酸或碱溶液。磺胺二甲嘧啶可诱导CYP3A4表达，以及通过N-乙酰转移酶乙酰化；表现出性依赖的药物代谢动力学，通过雄性特定同源异构体CYP2C11产生代谢变化；抑制二氢叶酸合成酶，达到阻碍叶酸合 成的效果。该药主要用于牲畜由于敏感菌引起的轻症感染，如急性单纯性下尿路感染、急性中耳炎和皮肤软组织感染。并且适用于治疗溶血性链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等感染疾病，药效持久。用作饲料添加剂，用于防治葡萄球菌及溶血性链球菌等的感染，即主要治疗禽霍乱、禽伤寒，鸡球虫病等。肉桂醒(Cinnamaldehyde)通常称为桂醒,无色至淡黄色油状液体,具有强烈的肉桂气味。天然存在于斯里兰卡肉桂油、桂皮油、藿香油、风信子油和玫瑰油等精油中。具有杀菌消毒防腐作用，特别是对真菌有显著疗效。已有相关研究表明对22种条件致病性真菌进行肉桂醛抗真菌实验，肉桂醛是抗真菌的活性物质，主要是通过破坏真菌细胞壁，使药物渗入真菌细胞内，破坏细胞器而起到杀菌作用。对其精油的药理作用在国内外已开展了一定的研究。香芹酚(carvacrol)用于配制香料、杀菌剂和消毒剂，作为香料用于牙膏、香皂等日用品，也用作食用香精。因为磺胺类药物不溶于水，传统的片剂状吸收不完全，生物利用度低，并且生物毒性高，对干肝脏和肾脏都有损害，即磺胺血浓度不应超过200 μ g/mL,超过此浓度，不良反应发生率增高，毒性增强。
发明内容
针对上述现有技术的问题与缺陷，本发明的目的在于提供一种水包油型复方磺胺二甲嘧啶纳米药物，该纳米药物增强了药物的溶解度，提高抑菌效果，生物利用度高，缓释性和靶向性好。实现上述发明目的的技术方案是一种水包油型复方磺胺二甲嘧啶纳米药物，由下列质量百分比的原料组成
磺胺二甲嘧啶O. 01% I. 6%、表面活性剂27. 3 % 36. 6%、助表面活性剂0% 8. 6%、油2. 7% 6. 0%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100%。本发明的水包油型复方磺胺二甲嘧啶纳米药物的粒径在I IOOnm之间，易穿过细菌细胞膜，抗菌性大大提高。
根据纳米乳形成的机理，当表面活性剂的亲水亲油平衡(HLB)值与油所需的HLB值相等或相近时，容易形成性质非常稳定的纳米乳。本发明选用毒性相对较小，不易受电解质及酸碱影响的非离子表面活性剂聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油(RH-40)、吐温-80及EL-40的其中一种。助表面活性剂是用来调节表面活性剂的HLB值的，使表面活性剂与油更容易形成纳米乳，本发明选用的助表面活性剂为无水乙醇，并且可有可无。本发明还有一个目的是提供上述复方磺胺二甲嘧啶纳米乳的制备方法，具体包括下列步骤
1)称磺胺二甲嘧啶、表面活性剂、助表面活性剂、油、离子水，备用；
2)将磺胺二甲嘧啶加入油中搅拌直至完全溶解作为油相；
3)将表面活性剂或表面活性剂和助表面活性剂混合物加入步骤2)制备的油相中，在室温下边搅拌边逐滴滴加蒸馏水，加水搅拌过程中该体系会出现由稀变粘稠，最后又由粘稠变稀的一系列变化，直至形成水包油型纳米乳。验证稳定性试验
1)温度稳定性试验
将复方磺胺二甲嘧啶纳米乳药物放在一 4°c、25°C、40°C的条件下观察其形态变化看是否出现分层、破乳、沉淀、变色等现象。2)加速离心试验
取复方磺胺二甲嘧啶纳米乳药物适量于离心管中，置离心机中并以12000r/min的转速，离心20min之后，观察其形态变化看是否出现分层、破乳、沉淀、变色等现象。3)光稳定性试验
取适量复方磺胺二甲嘧啶纳米乳药物装入玻璃瓶内，放置于日光下照射10d，于ld，3d, 5d, IOd取样观察。以上试验后观察到复方磺胺二甲嘧啶纳米药物依然保持澄清透明，未见分层、析出及破乳等不稳定现象，证明复方磺胺二甲嘧啶纳米乳药物稳定性良好。本发明复方磺胺二甲嘧啶纳米乳的用途
主要用于牲畜由于敏感菌引起的轻症感染，如急性单纯性下尿路感染、急性中耳炎和皮肤软组织感染。并且适用于治疗溶血性链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等感染疾病(也用于牲畜)，药效持久。用作饲料添加剂，用于防治葡萄球菌及溶血性链球菌等的感染，即主要治疗禽霍乱、禽伤寒，鸡球虫病等。本发明复方纳米乳与现有的片剂型药物相比，其优点在于
O为各向同性的透明液体，属热力学稳定系统，经热压灭菌或离心也不能使之分层；
2)热力学稳定性高，澄清透明，不分相、不沉淀，贮存稳定性提高；
3)复方磺胺二甲嘧啶纳米乳具有缓释和靶向作用；
4)提高磺胺药物的溶解度，减少药物在体内的酶解，可形成对药物的保护作用并提高胃肠道对药物的吸收，提高磺胺二甲嘧啶药物的生物利用度。
、
5)复方磺胺二甲嘧啶纳米乳粒径小，易吸收。6)复方磺胺二甲嘧啶纳米乳融合了磺胺二甲嘧啶与肉桂醛的抑菌效果，增强了体系的抗菌力。并且使磺胺二甲嘧啶与肉桂醛优势互补，磺胺二甲嘧啶可以用于牲畜由于敏感菌引起的轻症感染，如急性单纯性下尿路感染、急性中耳炎和皮肤软组织感染，肉桂醛对22种条件致病性真菌的抑菌效果，增强了药物效用。
具体实施例方式以下通过发明人给出试验例和制备方法实施例来进一步说明本发明的有益效果。最低抑菌浓度(MIC)测定
以磺胺二甲嘧啶片，莫能菌素，复方磺胺二甲嘧啶纳米乳，肉桂醛纳米乳作比较，比较四种药在试管中的抑菌活性，以最小抑菌浓度来表示MIC值。具体步骤为
(I)取四试管长势相同，面积相同的金黄色葡萄球菌，再分别取等量少量复方磺胺二甲嘧啶纳米乳，磺胺二甲嘧啶片剂(碾碎)，莫能菌素及10%的肉桂醛纳米乳于这四支试管中。 (2)每隔12h观察菌落长势，如果有菌落残存，则在加入相应药物，如果菌落已经完全被抑制了生长，就不再添加。最后记录在72h后的最小抑菌浓度MIC (mg/100c. c.)比较四种药在试管中的抑菌活性。其他菌种的实验方法同上。实验结果如表所示
复方磺胺二甲嘧啶纳米乳的最小抑菌浓度MIC(mg / 100c. c.)
微生物I磺胺二甲嘧啶片剂状I复方磺胺二甲嘧啶纳米乳I莫能菌素I肉桂醛纳米乳
金黄色葡萄球菌10. 10_3JO_ 15. 2012. 56_
无乳链球菌20.05.6.2129.0520.80
酿浓链球菌20.20~7.2032.5017.40
马链球菌10.08~3.0218.208.65
猪疫巴氏杆菌5.05' 1.909.055.25
猪霍乱沙氏杆菌ho. 02\&. 05|30. 26|l6. 50
结果表明磺胺二甲嘧啶和肉桂醛纳米乳的抗菌效果较好，都约为莫能菌素的两倍，不同的是磺胺二甲嘧啶和肉桂醛纳米乳在抑菌的菌种选择上有差异，制成的复方磺胺二甲嘧啶纳米乳综合了磺胺二甲嘧啶和肉桂醛抑菌力，并使其优势互补，抑菌效力大大提高，约为磺胺二甲嘧啶和肉桂醛纳米乳的3 4倍，这是因为复方磺胺二甲嘧啶纳米乳综合两种药的抑菌力，纳米乳剂型又提高了生物利用度，更加提高了抗菌药效。抑菌圈测定
(I)采用纸片扩散法，分别将10%的复方磺胺二甲嘧啶纳米乳，10%的磺胺二甲嘧啶片剂状，10%的莫能菌素，10%的肉桂醛纳米乳供试样。(2)无菌条件下，将圆滤纸片(d = 6mm)浸入已称取好的试样中，取出自然风干后，贴到涂抹适宜菌液浓度菌悬液的培养基平板上，每皿(d = 9 cm) 4片，各供试液4个重复，分在4个培养皿中完成，每皿中央以乙醇作对照，平皿置于培养箱适温下培养，观察结果。(3) 24h后，以出现抑菌圈提取物视为具有抑菌效果并测定抑菌圈大小。磺胺二甲嘧啶抑菌能力(抑菌圈直径mm)
权利要求
1.一种复方磺胺类药物磺胺二甲嘧啶纳米乳，其特征在于，由下列质量百分比的原料组成 磺胺二甲嘧啶0. 01% I. 6%、表面活性剂27. 3 % 36. 6%、助表面活性剂0% 8. 6%、油2. 7% 6. 0%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100% ； 所述的表面活性剂是吐温-80、RH-40或EL-40中的任一种； 所述的助表面活性剂是无水乙醇； 所述的油是肉桂醛或香芹酚中的一种。
2.根据权利要求I所述复方磺胺类药物磺胺二甲嘧啶纳米乳，其特征在于，该纳料乳的其粒径在I IOOnm之间。
3.权利要求I所述复方磺胺类药物磺胺二甲嘧啶纳米乳的制备方法，其特征在于，包括下列步骤 1)称磺胺二甲嘧啶、表面活性剂、助表面活性剂、油、离子水，备用； 2)将磺胺二甲嘧啶加入油中搅拌直至完全溶解作为油相； 3)将表面活性剂或表面活性剂和助表面活性剂混合物加入步骤2)制备的油相中，在室温下边搅拌边逐滴滴加蒸馏水，加水搅拌过程中该体系会出现由稀变粘稠，最后又由粘稠变稀的一系列变化，直至形成水包油型纳米乳。
全文摘要
本发明公开了一种复方磺胺二甲嘧啶纳米乳，该纳米乳的粒径在1～100nm之间，由下列质量百分比的原料组成磺胺二甲嘧啶0.01%～1.6%、表面活性剂27.3%～36.6%、助表面活性剂0%～8.6%、油2.7%～6.0%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100%。该纳米乳药物可提高药物的可利用度，使药物的半衰期延长，疗效增强，并且透皮性好，具有缓释性和靶向性。可以作为抗菌药用于牲畜由于敏感菌引起的轻症感染，如急性单纯性下尿路感染、急性中耳炎和皮肤软组织感染，也适用于治疗溶血性链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等感染疾病，药效持久。
文档编号A61K47/34GK102697722SQ20121013435
公开日2012年10月3日 申请日期2012年5月3日 优先权日2012年5月3日
发明者兰莹, 杨婷, 欧阳五庆 申请人:西北农林科技大学