专利名称：磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡及其生产和使用方法
技术领域：
本发明涉及一种磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡，属于免疫学技术领域。
背景技术：
磺胺二甲嘧啶(英文名Sulfamethazine)，曾被广泛应用于兽医临床以治疗细 菌性传染病，其亚治疗浓度又可作为畜禽的饲料药物添加剂，以控制某些动物性疾病、提高 饲料的转化率和促进动物的生长发育。但因长期使用，其在动物性食品中残留现象十分严 重，可导致人的过敏反应、诱导耐药菌株的产生、影响机体免疫系统、破坏人体造血机能等， 且可诱发人的甲状腺癌。美国FDA、欧盟、中国农业部等规定在肌肉、脂肪、肝脏和肾脏中 磺胺类药物的含量不能超过100ng/g(ppb)，在牛奶中磺胺类药物的含量不能超过IOOng/ g (PPb)。但是违法添加时间仍然时有发生。2002年中国出口至日本的鳗鱼被检出磺胺二甲 嘧啶超标。2006年12月辽宁省抚顺市在全市动物产品抽查检查中也发现多种饲料因含有 磺胺二甲嘧啶而违反国家规定。磺胺二甲嘧啶是小分子化合物，常用的检测方法有高效液相色谱分析法(HPLC) 或液相色谱/质谱联用分析法(LC/MS)。这些方法普遍存在着仪器昂贵，方法复杂，操作烦 琐，试剂消耗量大的局限性。20世纪80年代兴起的胶体金免疫层析检测，基于免疫学检测 原理，操作简单快捷、结果清晰易于判断、无需复杂的实验技能和设备，特别适于现场检测。 而国内外尚无该技术监控磺胺二甲嘧啶的报道。
发明内容
针对上诉问题，本发明提供了一种磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡，该快速诊断卡检 测快速、准确、稳定。本发明的另一个目的是提供该胶体金检测卡的应用。上述磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡的制备包括以下步骤(1)磺胺二甲嘧啶半抗原的合成(2)磺胺二甲嘧啶免疫抗原的合成；(3)磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备；(4)胶体金颗粒的制备；(5)胶体金标记磺胺二甲嘧啶单克隆抗体；(6)样品垫的制备，该垫附置一段胶体金标记磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的膜；(7)磺胺二甲嘧啶包被抗原的合成；(8)磺胺二甲嘧啶固相硝酸纤维素膜的制备，该膜包被一条含磺胺二甲嘧啶包被 抗原的检测带和一条包被羊抗鼠IgG的质控带；(9)样品垫的处理选择适当的封闭试剂、表面活性剂和(或)非离子型去污剂单 独或以适当比例组合后均勻浸于玻璃纤维素膜，室温干燥备用；(10)组装磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡，该检测卡用PVB作为背衬，在PVC衬板的中部叠置硝酸纤维素膜，两端分别叠置吸水垫和样品垫，硝酸纤维素膜和吸水垫、样品垫相搭连。所述的半抗原具有式(I)所示结构
权利要求
1.磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡，其特征在于其包括试纸条和外壳两部分，试纸条置 于外壳内。
2.根据权利要求1所述的磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡，其特征在于所述的试纸条用 PVB作为背衬，在PVC衬板的中部叠置硝酸纤维素膜，两端分别叠置吸水垫和样品垫，硝酸 纤维素膜和吸水垫、样品垫相搭连，在样品区附置一段含有磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的膜， 在硝酸纤维素膜上有一条含磺胺二甲嘧啶抗原的检测带和一条含羊抗兔IgG的质控带。
3.磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡的生产方法，其特征在于由下列过程与步骤组成(1)磺胺二甲嘧啶免疫半抗原的合成(2)磺胺二甲嘧啶免疫抗原的合成；(3)磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备；(4)胶体金颗粒的制备；(5)胶体金标记磺胺二甲嘧啶单克隆抗体；(6)样品垫的制备，该垫附置一段胶体金标记磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的膜；(7)磺胺二甲嘧啶包被抗原的合成；(8)磺胺二甲嘧啶固相硝酸纤维素膜的制备，该膜包被一条含磺胺二甲嘧啶包被抗原 的检测带和一条包被羊抗鼠IgG的质控带；(9)样品垫的处理选择适当的封闭试剂、表面活性剂和(或)非离子型去污剂单独或 以适当比例组合后均勻浸于玻璃纤维素膜，室温干燥备用；(10)组装磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡，该检测卡用PVB作为背衬，在PVC衬板的中部叠 置硝酸纤维素膜，两端分别叠置吸水垫和样品垫，硝酸纤维素膜和吸水垫、样品垫相搭连。
4.根据权利要求4所述的磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡的生产方法，其特征在于所述的 半抗原具有式(I)所示结构。
5.根据权利要求4所述的磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡的生产方法，其特征在于所述的 免疫抗原具有式(II)所示结构。
6.根据权利要求4所述的磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡的生产方法，其特征在于所述的 包被抗原具有式(III)所示结构。
7.磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡的使用方法，其特征在于将30μ 1待检液加入到加样 孔，并充分吹打混勻，放置5-10分钟内观察结果。
全文摘要
本发明涉及一种磺胺二甲嘧啶胶体金检测卡及其生产和使用方法，属于免疫学技术领域。该快速诊断卡包括外壳和试纸条，其特征在于所述外壳壳体开有加样孔和观察窗，所述试纸条安放于外壳内，在PVC衬板的中部叠置硝酸纤维素膜，两端分别叠置吸水垫和样品垫，硝酸纤维素膜和吸水垫、样品垫相搭连，在样品区附置一段含有磺胺二甲嘧啶单克隆抗体免疫胶体金复合物的膜，在硝酸纤维素膜上有一条含磺胺二甲嘧啶包被抗原的检测带和一条含羊抗鼠IgG的质控带。本发明是一种快速、准确、灵敏的诊断卡，无需专门仪器，操作简单，能满足食品安全、畜牧业、检测机构的检测要求。
文档编号G01N33/532GK101995461SQ20091018965
公开日2011年3月30日 申请日期2009年8月27日 优先权日2009年8月27日
发明者张世伟, 李细清, 谭攀, 钟松清 申请人:深圳市三方圆生物科技有限公司