一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法。
【背景技术】
[0002]作为一种常用的磺胺类抗菌剂，磺胺二甲嘧啶被广泛用于预防和治疗奶牛的细菌感染性疾病。因其在动物体内的作用时间和代谢时间较长，易残留在动物的组织中，进而进入动物分泌物中(如乳汁)。长期饮用磺胺类药物残留过高的乳制品，将对人体、特别是婴幼儿的健康造成严重后果。目前，牛奶中磺胺类药物残留的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、气-质联用法(GC/MS)、液-质联用法(LC/MS)等。现有的方法虽具有灵敏度高、检出限低等优点，但因仪器昂贵、耗时长、检测成本高等而难以满足食品安全问题频发的现状。因此，开发一种低成本、满足现场快速检测的新方法极为必要。
【发明内容】
[0003]为解决上述问题，本发明提供了一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法，通过分子印迹技术制备对磺胺二甲基嘧啶具有特异性识别作用的水凝胶，待测样品经水凝胶吸附富集后，利用便携式拉曼光谱仪进行光谱采集，通过与磺胺二甲基嘧啶的标准拉曼光谱相对比，判断样品中是否含有此药物。
[0004]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为:
[0005]一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法，包括如下步骤:
[0006]S1、制备磺胺二甲嘧啶分子印迹水凝胶:分别取0.017g磺胺二甲嘧啶(模板分子)、1.4ml丙烯酸(功能单体)、3.0g丙烯酰胺(功能单体)、0.09gN’ N-亚甲基双丙烯酰胺(交联剂)、0.09g过硫酸铵(引发剂)和4.0ml去离子水(溶剂)于烧杯中充分混合，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于60°C的烘箱中聚合反应3h，得薄膜状的磺胺二甲嘧啶印迹水凝胶；
[0007]S2、去除模板分子:将由步骤SI所得的印迹水凝胶浸泡在10%的醋酸溶液中，并超声振荡5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶；
[0008]S3、将不同浓度的磺胺二甲嘧啶储备液分别加入1ml本身不含磺胺二甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.lmg/L、0.5mg/L、lmg/L、5mg/L、lOmg/L ；
[0009]S4、将步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S3中所得的含不同浓度磺胺二甲嘧啶的牛奶中，约5min后(达到吸附平衡)，将其取出并用去离子水漂去多余的牛奶；
[0010]S5、用便携式拉曼光谱仪对步骤S4所得的溶液进行检测，将所得光谱与磺胺二甲嘧啶的标准拉曼光谱进行比对，判断样品中是否含有磺胺二甲嘧啶。
[0011]本发明具有以下有益效果:
[0012]本发明能够快速、低成本检测牛奶中过量的磺胺二甲嘧啶。通过分子印迹技术制备的水凝胶，可在5min之内完成对被测样品中磺胺二甲嘧啶的吸附富集作用，再经便携式拉曼光谱仪采集光谱信息，整个过程快速便捷，且水凝胶可多次循环重复使用，在降低检测成本的同时还具有环境友好的优点，并可满足现场、高通量检测的需求。
【具体实施方式】
[0013]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0014]本发明实施例提供了一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法，包括如下步骤:
[0015]S1、制备磺胺二甲嘧啶分子印迹水凝胶:分别取0.017g磺胺二甲嘧啶(模板分子)、1.4ml丙烯酸(功能单体)、3.0g丙烯酰胺(功能单体)、0.09gN’ N-亚甲基双丙烯酰胺(交联剂)、0.09g过硫酸铵(引发剂)和4.0ml去离子水(溶剂)于烧杯中充分混合，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于60°C的烘箱中聚合反应3h，得薄膜状的磺胺二甲嘧啶印迹水凝胶；
[0016]S2、去除模板分子:将由步骤SI所得的印迹水凝胶浸泡在10%的醋酸溶液中，并超声振荡5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶；
[0017]S3、将不同浓度的磺胺二甲嘧啶储备液分别加入1ml本身不含磺胺二甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.lmg/L、
0.5mg/L、lmg/L、5mg/L、lOmg/L ；
[0018]S4、将步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S3中所得的含不同浓度磺胺二甲嘧啶的牛奶中，约5min后(达到吸附平衡)，将其取出并用去离子水漂去多余的牛奶；
[0019]5、用便携式拉曼光谱仪对步骤S4所得的溶液进行检测，将所得光谱与磺胺二甲嘧啶的标准拉曼光谱进行比对，判断样品中是否含有磺胺二甲嘧啶。
[0020]本发明的原理为:分子印迹技术，首先通过选择合适的功能单体与模板分子在介质中预组装形成特异性识别位点，再通过交联聚合反应形成聚合物凝胶而将这种特异性识别位点固定下来，然后利用合适的溶剂将模板分子从凝胶中移除，这样便在凝胶中留下了在三维空间上与模板分子相匹配的具有“记忆”功能的空穴，即实现对模板分子的特异性识另IJ，从而可以在一定的基质中将模板分子富集。在本发明中，模板分子为磺胺二甲嘧啶，其分子结构中有多种共价键，拉曼光谱信号强度大且谱峰尖锐。利用印迹聚合物凝胶将其在被测样品中富集后，采集聚合物凝胶的拉曼光谱，通过与磺胺二甲基嘧啶的标准拉曼光谱进行比对，判断凝胶中是否含有磺胺二甲嘧啶，从而判断被测样品中是否含有此成分。
[0021]其中，本具体实施在0.05mg/L-10mg/L的浓度范围内均可检测到磺胺二甲嘧啶。
[0022]综上所述，本发明能够快速、低成本检测牛奶中过量的磺胺二甲嘧啶。通过分子印迹技术制备的水凝胶，可在5min之内完成对被测样品中磺胺二甲嘧啶的吸附富集作用，再经便携式拉曼光谱仪采集光谱信息，整个过程快速便捷，且水凝胶可多次循环重复使用，在降低检测成本的同时还具有环境友好的优点，并可满足现场、高通量检测的需求
[0023]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法，其特征在于，包括如下步骤: S1、分别取0.017g磺胺二甲嘧啶、1.4ml丙烯酸、3.0g丙烯酰胺、0.09gN，N-亚甲基双丙烯酰胺、0.09g过硫酸铵和4.0ml去离子水于烧杯中充分混合，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于60°C的烘箱中聚合反应3h，得薄膜状的磺胺二甲嘧啶印迹水凝胶； S2、将由步骤SI所得的印迹水凝胶浸泡在10%的醋酸溶液中，并超声振荡5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶； S3、将不同浓度的磺胺二甲嘧啶储备液分别加入1ml本身不含磺胺二甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、lmg/L、5mg/L、lOmg/L ； S4、将步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S3中所得的含不同浓度磺胺二甲嘧啶的牛奶中，约5min后，将其取出并用去离子水漂去多余的牛奶； S5、用便携式拉曼光谱仪对步骤S4所得的溶液进行检测，将所得光谱与磺胺二甲嘧啶的标准拉曼光谱进行比对，判断样品中是否含有磺胺二甲嘧啶。
【专利摘要】本发明公开了一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法，本发明能够快速、低成本检测牛奶中过量的磺胺二甲嘧啶。通过分子印迹技术制备的水凝胶，可在5min之内完成对被测样品中磺胺二甲嘧啶的吸附富集作用，再经便携式拉曼光谱仪采集光谱信息，整个过程快速便捷，且水凝胶可多次循环重复使用，在降低检测成本的同时还具有环境友好的优点，并可满足现场、高通量检测的需求。
【IPC分类】G01N21/65
【公开号】CN105628668
【申请号】CN201410589400
【发明人】陈达, 谭棕
【申请人】河北伊诺光学科技有限公司
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2014年10月28日