一种复方干粉剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种复方干粉剂及其制备方法，该复方干粉剂按重量百分比由以下组分组成：长松萝40％～60％，黑穗石蕊20％～40％，石蕊10％～20％，雪茶2％～10％；该复方干粉剂的制备方法将长松萝、黑穗石蕊、石蕊、雪茶混合，粉碎，过80目筛网，制成粉剂。本发明含有地衣次生代谢产物松萝酸、地茶酸及黑茶渍素为有效成分的复方干粉剂，配方明确，成本适中，安全高效，使用方便的药物，有效预防和控制水产养殖中经常遇到的水霉病。本发明生产符合食品药品安全要求的含有地衣次生代谢产物松萝酸、地茶酸及黑茶渍素为有效成分的复方干粉剂，成为防治水霉病的安全高效的新型药物，采用的地衣种类易获得，在所使用的剂量范围对人、畜及养殖的水生生物安全无害。
【专利说明】-种复方干粉剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于水产养殖【技术领域】.，尤其涉及一种复方干粉剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 水霉病（Saprolegniasis)又叫肤霉病（Dermatomyucosis)，是由卵菌及丝状 真菌所引起的一种水产养殖常见病，其中最主要的病原体是卵菌门（Oomycota)、卵菌纲 (Oomyctes)、水霉目（Saprolegniales)、水霉科（Saprolegniaceae)中水霉（Saprolegnia) 和绵霉（Achlya)两个属的种类。长期以来，水霉病的防治是鱼类病害防治中最棘手的一个 难题，因在传统上卵菌归在真菌界中，在水产养殖领域一般将其归之为真菌性病害，养殖鱼 类患了真菌性疾病很难治愈。水霉病在国内外养殖地区均有流行。引起水霉病的卵菌在淡 水水域中广泛存在，对温度的适应范围广，5-26°C间均可生长繁殖；对养殖水体环境有很强 的适应能力，抗逆性强，能形成雄器和藏卵器进行有性生殖以抵御不良环境，且对水产动物 的种类没有选择性；一般药物难以将其杀灭，从而给水霉病的防治带来了极大的困难。
[0003] 水霉病危害的水产动物种类多，分布范围广，是水产养殖中常见的危害严重的病 害之一，给水产养殖业造成较大的损失。生产上曾试用过多种药剂进行防控，大多效果不 佳，仅"孔雀石绿（Malachitegreen) "有较好的效果。
[0004] 孔雀石绿为一种三苯甲烷类染料，分子式为C23H25C1N2。孔雀石绿可用作治理鱼 类或鱼卵的寄生虫、真菌、卵菌或细菌感染，对付水霉菌Saprolegniasp.特别有效。但研 究发现，孔雀石绿进入水生动物体内后，会快速代谢成脂溶性的无色孔雀石绿。孔雀石绿 具有潜在的致癌、致畸、致突变的作用，其在养殖业中的使用未得到美国食品与药物管理局 (FDA)的认可；日本也明确规定在进口水产品中不得检出孔雀石绿残留；我国在农业行业 标准《NY5071-2002无公害食品鱼药使用准则》中也将孔雀石绿列为禁用药物。但由于没有 低廉有效的替代品，孔雀石绿在水产养殖中的使用仍屡禁不止，带来安全隐患。
[0005] 在较为理想的替代药物问世之前，在保证水产食品安全的前提下，进行广泛的筛 选，探讨菌藻共生生物地衣及其特有的次生代谢产物对水霉病的防治效果，十分迫切。
[0006] 此前已有研究对一些消毒剂如氯化钠、福尔马林、过氧化氢、臭氧等用于防治水霉 病进行探讨，结果显示氯化钠使用浓度太高，无法用于池塘泼洒；福尔马林对操作人员的危 害较大且对环境会造成不利影响；过氧化氢使用成本较高；臭氧需要相应的制备装置，使 用和储运都不方便，很难推广。当然福尔马林和过氧化氢由于已获得FDA认可，目前仍然被 采用。常用的（食品）防腐剂如丙酸钙、山梨酸钾、双乙酸钠、脱氢乙酸钠、异噻唑啉酮、尼 泊金乙酯等也被选择进行对水霉游动孢子及菌丝的体外抑菌效果试验。结果表明，异噻唑 啉酮与尼泊金乙酯效果较好，而丙酸钙、山梨酸钾、双乙酸钠、脱氢乙酸钠等防霉剂对水霉 孢子的抑制浓度、对水霉菌丝的杀灭浓度远高于实际生产中可能的使用浓度。其它在生产 实践中使用的药剂还包括："检科牌"消毒剂，臭灵丹煎剂，PP粉（高锰酸钾），"水霉净"，硫 醚沙星等，虽有一定的效果，但均不理想。
[0007] 目前，尚无利用药用地衣及其地衣次生代谢产物对水霉病病原菌抑制效果的研究 报道，大多研究集中在防霉剂和常见消毒剂及中草药对水霉菌的抑菌作用，或对水霉病的 临床防治。
[0008] 地衣是菌藻互惠共生的典范，全球约2万种，我国已报道2500余种。地衣可产生近 千种特有的次生代谢产物，许多具有抗菌活性，一些对植物病原菌具一定的抑制作用。我国 有药用地衣100余种，使用安全（FDA评估：成人每天剂量药用地衣6?9克，松萝酸60? 120毫克）。目前松萝酸抑制水霉等卵菌的机理尚不清楚，推测与几丁质酶活性有关，进而 影响细胞壁的合成，最终导致水霉等卵菌细胞死亡。相关研究拓展了抑制水霉菌生长繁殖 药物的选择途径，为水霉病有效防治药物筛选提供了新的资源，具有较好的研究和开发前 旦 -5^ 〇
【发明内容】
[0009] 本发明实施例的目的在于提供一种复方干粉剂及其制备方法，旨在解决现有防治 水霉病的药剂存在的防治效果不佳，操作复杂，安全性较低，容易污染环境的问题。
[0010] 本发明实施例是这样实现的，一种复方干粉剂，该复方干粉剂按重量百分比由以 下组分组成：长松萝40 %?60 %，黑穗石蕊20%?40%，石蕊10 %?20%，雪茶2%? 10%。
[0011] 本发明实施例的另一目的在于提供一种复方干粉剂的制备方法，该复方干粉剂的 制备方法包括以下步骤：
[0012] 步骤一，按重量百分比由以下组分组成：长松萝40 %?60%，黑穗石蕊20 %? 40%，石蕊10%?20%，雪茶2%?10% ;
[0013] 步骤二，将长松萝、黑穗石蕊、石蕊、雪茶混合，粉碎，过80目筛网，制成粉剂。
[0014] 进一步，该复方干粉剂的使用方法：
[0015] 制成溶于20倍的95%乙醇后泼洒，用量：按照浓度为0. 2ppm?0. 5ppm，计算好制 剂用量，加入20倍95%乙醇浸泡2-5小时，将药液和药渣直接泼洒到养殖水体中。
[0016] 本发明提供的复方干粉剂及其制备方法，是将自然干燥的长松萝、黑穗石蕊、石蕊 及雪茶的地衣体按设定的比例混合，经中草药粉碎机粉碎，过80目筛网后，充分混合，制成 粉剂；也可将四种干燥的地衣体各自经中草药粉碎机粉碎，过80目网后，按设定的比例分 别取样，充分混匀后，制成粉剂。所获得的含有地衣次生代谢产物松萝酸、地茶酸及黑茶渍 素为有效成分的复方干粉剂，是配方明确，成本适中，安全高效，使用方便的药物，能有效预 防和控制水产养殖中经常遇到的水霉病。本发明生产符合食品药品安全要求的含有地衣次 生代谢产物松萝酸（usnicacid)、地茶酸（thamnolicacid)及黑茶渍素（atranorin)为有效 成分的复方干粉剂，成为防治水霉病的安全高效的新型药物，采用的地衣种类在中国较易 获得，均为药用地衣，在所使用的剂量范围对人、畜及养殖的水生生物安全无害。
【专利附图】
【附图说明】
[0017] 图1是本发明实施例提供的复方干粉剂的制备方法流程图。
【具体实施方式】
[0018] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明 进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于 限定本发明。
[0019] 下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
[0020] 本发明实施例的复方干粉剂，按重量百分比由以下组分组成：长松萝40 %? 60%,黑穗石蕊20%?40%，石蕊10%?20%，雪茶2%?10%。
[0021] 有效成分来源于长松萝（Usnea Iongissima)或其它松萝（Usnea sp.)、黑 穗石蕊（Cladonia amaurocraea)、石蕊(Cladonia rangiferina)及雪茶（Thamnolia vermicularis)〇
[0022] 如图1所示，本发明实施例的复方干粉剂的制备方法包括以下步骤：
[0023] S101 :按重量百分比由以下组分组成：长松萝40 %?60 %，黑穗石蕊20 %? 40%，石蕊10%?20%，雪茶2%?10% ;
[0024] S102:将自然干燥的长松萝、黑穗石蕊、石蕊及雪茶的地衣体按设定的比例混合， 经中草药粉碎机粉碎，过80目筛网后，充分混合，制成粉剂；也可将四种干燥的地衣体各自 经中草药粉碎机粉碎，过80目网后，按设定的比例分别取样，充分混匀后，制成粉剂。。
[0025] 本发明实施例复方干粉剂的使用方法：
[0026] 制成溶于20倍的95%乙醇后泼洒，用量：按照浓度为0.2--111?0.5-- 111，计算好制 剂用量，加入20倍95%乙醇浸泡2-5小时，将药液和药渣直接泼洒到养殖水体中。
[0027] 通过以下的试验对本发明的应用效果做进一步的说明：
[0028] 按照水霉病病原菌抑菌效果研究常规方法进行试验，水霉病病原菌菌株CBS购 买1株（寄生水霉Saprolegnia parasitica)，养殖水体分离1株（两性绵霉Achlya bisexualis)，经形态鉴定及DNA序列测定确认。
[0029] 松萝酸，4种地衣及混合制剂对寄生水霉及两性绵霉菌丝及游动孢子的抑菌作用 结果见表1和表2。试验结果表明，松萝酸、4种地衣及混合制剂对水霉病病原菌游动孢子 及菌丝的生长均有明显抑制作用，松萝酸在浓度为〇. 5mg/L以上时可使80%的寄生水霉及 绵霉游动孢子的活性被抑制，达到2. Omg/L时，对寄生水霉及绵霉的菌丝生长具有明显的 抑制作用；当松萝、黑穗石蕊、石蕊及雪茶地衣体的用量分别为50, 200, 200和100mg/L时具 有与松萝酸相同的效果。其效果优于目前使用或推荐使用的4种药物福尔马林、过氧化氢、 异噻唑啉酮及尼泊金乙酯。
[0030] 表1.筛选药物对水霉病原菌菌丝的最小抑制浓度（MIC)
[0031]
【权利要求】
1. 一种复方干粉剂，其特征在于，该复方干粉剂按重量百分比由以下组分组成：长松 萝40%?60%，黑糖石蕊20%?40%，石蕊10%?20%，雪茶2%?10%。
2. -种复方干粉剂的制备方法，其特征在于，该复方干粉剂的制备方法包括以下步 骤： 步骤一，按重量百分比由以下组分组成：长松萝40 %?60 %，黑穗石蕊20 %?40 %，石 蕊10%?20%，雪茶2%?10% ; 步骤二，将长松萝、黑穗石蕊、石蕊、雪茶混合，粉碎，过80目筛网，制成粉剂，将自然干 燥的长松萝、黑穗石蕊、石蕊及雪茶的地衣体按比例混合，经中草药粉碎机粉碎，过80目筛 网后，充分混合，制成粉剂；也可将四种干燥的地衣体各自经中草药粉碎机粉碎，过80目网 后，按设定的比例分别取样，充分混匀后，制成粉剂。
3. 如权利要求2所述的复方干粉剂的制备方法，其特征在于，该复方干粉剂的使用方 法： 制成溶于20倍的95%乙醇后泼洒，用量：按照浓度为0. 2ppm?0. 5ppm，计算好制剂用 量，加入20倍95%乙醇浸泡2-5小时，将药液和药渣直接泼洒到养殖水体中。
【文档编号】A61P31/10GK104435010SQ201410645824
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年11月12日 优先权日:2014年11月12日
【发明者】郭守玉 申请人:中国科学院微生物研究所