一种用于毛发生长的多肽组合物的制作方法

本发明属医药化妆品
技术领域：
，提供了一种适合促进人和其他哺乳动物毛发生长的多肽组合物。采用复合活性多肽的方法制备成各种产品包括但不限于精华液，乳液、香波、洗液、霜剂、喷雾剂、凝胶、软膏和膏剂，用于促进毛发生长，防止脱发，使毛发增浓增长等领域。
背景技术：
：以下描述包含对理解本发明可能有用的背景信息。但既不是承认在此提供的任何信息是目前要求保护的本发明或有关申请的现有技术，也不是承认任何具体或隐含涉及的公开的现有技术。1、脱发情况介绍头发、眉和睫毛缺失或稀疏问题，不仅影响一个人的外貌，还会造成患者各种心理疾病。各国都有致力于解决头发、眉和睫毛缺失或稀疏问题的研究，特别是头发缺失的研究。脱发影响了20％的20岁年龄段的男性，且以每10年10％的速度增长，也就是说，50岁左右的男性，将有50％患脱发病。95％的脱发病由雄性激素引起，与毛根鞘存在的5α-lidarutase酶有关。5α-lidarutase酶可将男性激素睾酮(testostearone)转化成5α-二氢睾酮(5α-DHT)。5α-DHT有抑制毛母细胞的作用，使皮脂腺活化而促进皮脂的分泌流动性脂肪，使毛发光泽防止干燥。若皮脂腺分泌增加，影响毛囊发育，毛囊变小，毛发变细，从而导致大量头发成片脱落。反之毛发则变粗、变硬、变黑。这解释了男性脱发比女性多的原因，而女性如疾病、重压或经绝期(此时女性荷尔蒙分泌急降，不能抵消在身体内循环的雄性激素)，才有可能得上脱发病。2、毛发的结构与生成毛发是一种角质蛋白，主要分为皮肤上的毛干和皮肤下的毛根二部分组成。毛囊是包围在毛发根部的囊状组织，是令毛发生长的皮肤组织。毛囊是促进毛发角质蛋白生成的关键部位。正常有活力的毛囊，通过基底部的毛乳头与皮肤内的毛细血管相连接，而这些血管则通过血液循环把营养运输给毛发。皮肤中的胶原蛋白则是毛发营养的供应站，毛发根部胶原蛋白的充足，可以使毛发强韧牢固。头发横切面的显微镜观察：最中心的是发髓，中间是胶原蛋白，最外的一层是毛鳞片。胶原蛋白主要控制着头发的粗幼、弹性和湿润度。每一根头发都起始于位于皮肤真皮处的毛乳，它形成一个毛球，然后，通过角化细胞的细胞分裂，促进一根毛发的的长成。头发、眉毛以及睫毛的生长周期类似，分为生长期—终止期—休止期，区别是其生长周期时间不同。头发的生长初期寿命约为2-6年，之后进入休止期并脱落，每天生长长度约0.3mm。睫毛平均生长速度为(0.12±0.05)mm/天，显著低于头发0.3mm/天的生长速度，睫毛生长周期被估计为约5-6个月，其中生长期持续时间平均为(34±9)天。眉毛生长周期约为2个月，每天生长约0.2mm3、毛发治疗状况针对头发、眉和睫毛缺失或稀疏问题，根据严重程度，使用的治疗方案不一样。手术疗法有皮瓣移植扩张器法，但手术创伤大，局部留瘢痕，恢复期长，患者一般不愿意接受；自体毛发移植，移植健康毛囊到脱发部位，让其生长出新毛发，这手术操作不当，会容易导致毛囊坏死。药物方面防治脱发如比马前列胺，又称贝美前列素、露泌根等，该物质是美国眼力健公司于2006年底生产的治疗青光眼的处方药Lumigan(卢美根)中内含的成分，可促进睫毛生长，于是被不少化妆品公司作为原料生产睫毛增长液。但马前列胺过量会造成视神经损伤，可能导致视力下降甚至失明，此外还可能造成视网膜肿胀和眼睛发炎等症状。米诺地尔(Minoxidil)是目前临床上常用于毛发治疗的药物，发现于美国，FDA批准在男性和女性中可以局部使用2％米诺地尔，的可以使大部分男性和女性雄性遗传性脱发患者长出肉眼可见的头发/细发，但是发现给药的副作用包括头皮发炎以及面部毛发增加。此外，至少花费一年的时间评估这种药物是否有效。近年来采用中草药以具有益气养血、行血祛瘀、浊经通络之功能治疗脱发，通过局部刺激头皮，促进血液循环的中草药提取物为主要原料，再配以辅料而成。但是中草药的作用机理不明确，其研究还需要进一步的深入，并且中药的提取过程复杂，成本高。4、多肽用于促进毛发生长的状况随着生物技术发展，用于治疗脱发和促进毛发生长的生化药层出不穷。近年来，活性多肽应用于解决脱发和促进毛发再生被各国皮肤科以及美容美发专家的重视。上世纪八九十年代，美国发现铜胜肽在头发增生中的治疗作用，它主要刺激发根毛囊，生成头发，被作为原料应用于生发护发产品中。含铜肽成分的生发养发产品是美国医药公司ProCyte旗下的品牌Tricomin系列，且拥有多个专利(USAPatNo5538945,5177061,5120831)。日本公开发明的专利：毛发促进活性的寡肽(公开号：CN1445236A)，是一种长度约为5-104个氨基酸残基的分离寡肽，优选包含一种或多种上述寡肽作为活性成分再添加一种或多种可药用药物制备成霜剂、喷雾剂，涂敷液和斑贴等的形式施用，可以促进上皮新毛囊的活性，从而促使毛发生长。美国专利(国内公布号CN102596170A)公开用于增强睫毛的组合物和方法，主要为N-生物素基-gly-his-lys和肌酸，这两者组合作用于睫毛毛囊部位，可以协同增加睫毛数目，且肌酸刺激角蛋白5的生成。美国专利(国内公开号CN1622797A)公开一种肌动蛋白结合肽促进毛发生长的组合物，该肽含有β胸腺素片段，能促进毛囊活性增强，数目增多，从而刺激毛发生长。韩国公开发明的专利(申请号200680039713.2)：用于促进毛发生长和改善皱纹的肽以及包含该肽的化妆品组合物，也包含具有人类胸腺β-4活性肽，但是C-末端用羟基或氨基修饰，N-末端用选自有乙酰基、棕榈酰即、肉豆蔻基等组中的保护基保护。国内专利公开号CN1634568A，其生发液基本成分是天然生物材料角蛋白，经过一些列化学处理成含药用功能蛋白、功能肽类物质和19种氨基酸，以调节细胞角化速度，有效抑制皮脂腺的分泌，改善毛囊生理功能达到防治脱发和促进毛发生长的效果，后以三壹多肽护发精华上市。以上各种专利以及研究都显示，多肽具有激活毛囊，或活化角质蛋白基因，促进角质蛋白生成，从而使毛发生长。但是公开专利中的多肽，其分子质量大，不利于皮肤的吸收，降低多肽的使用率。以上专利侧重是促进毛发长出，忽视对新长出毛发的瞄固及毛发不易脱落的研究。已上市的产品使用中也仅仅是单一多肽的使用，这限制了多肽功效的发挥。技术实现要素：本发明根据毛发的结构以及生理活性，采用具有促进毛发角质蛋白生成的多肽与具有刺激胶原蛋白生成的多肽结合，不仅可以刺激毛囊的生长，促使毛发生长，而且还增强了毛囊周围皮肤的胶原蛋白的生成，补充新长头发的营养，加固毛发根部，使毛发更粗壮，韧性更强。这比仅仅使用促进毛发角质蛋白生成的单一功效多肽具有更显著的效果，反应出明显的协同效应，并能够有助于毛发健康成长，以达到毛发增长增浓的目的。本发明公开提出一种用于毛发生长的多肽组合物，包含具有刺激胶原蛋白生成作用的多肽和促进角质蛋白生成的多肽组合：a、选自具有促进角质蛋白生成的一种或是多种以下多肽，包含但是不限于肉豆蔻酰五肽-17、肉豆蔻酰六肽-16；b、选自具有刺激胶原蛋白生成的一种或是多种以下多肽，包含但是不限于生物素三肽-1(Biotinyl-GHK)、乙酰基四肽-3、铜肽(GHK-Cu)、棕榈酰三肽-1、三肽-1、棕榈酰五肽-3、四肽-21、棕榈酰六肽-6、棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-11、豆蔻酰五肽-11、豆蔻酰六肽-4、豆蔻酰八肽-1、六肽-3、五肽-31，其中各多肽组分的浓度为0.01ppm～5％(w/w)，溶剂为水。本发明中具有促进角质蛋白生成的多肽的作用机制如下：肉豆蔻酰五肽-17、肉豆蔻酰六肽-16的作用机理相同，都是刺激角蛋白基因的表达，从而达到促进毛发生长的目的，是德国德之馨公司出品的SymPeptideTM系列产品。本发明中，多肽组合物可以添加另外一些生物活性物质，添加成分包括一些有助于育发生发的活性成分，优选生物素、(5，7，4′)—三羟基黄酮、齐墩果酸、鹰嘴豆芽素a(Biochanina)。(5，7，4′)—三羟基黄酮是一种从柑橘类植物中提取的类黄酮，具有舒张血管的作用。齐墩果酸是一种从油橄榄树叶中提取的物质，可抑制5α-还原酶将睾丸素还原成DHT；鹰嘴豆芽素a的作用与其类似。本发明具有胶原蛋白生成的多肽能够维持毛囊周围皮肤的完整，提供毛发生长所需营养，令毛发瞄固。优选生物素三肽-1、铜肽、乙酰基四肽-3。生物素三肽-1是一种属于Matrikines系列的多肽，它刺激产生的胶原蛋白可将头发固着在真皮毛囊内。铜肽主要刺激毛囊，促使毛发生长。乙酰基四肽-3已在多篇研究证实促进胶原蛋白生长，有助于头发、睫毛的生长。本发明结合以上各组分的作用机理，根据毛发生长规律和毛发的结构，多肽组合物可以是以下的组合：本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17和生物素三肽-1组合。本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17、生物素三肽-1和铜肽组合。本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17、肉豆蔻酰六肽-16、生物素三肽-1和铜肽组合。本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17、肉豆蔻酰六肽-16、生物素三肽-1、乙酰基四肽-3和铜肽组合。本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17、生物素三肽-1、齐墩果酸和(5，7，4′)—三羟基黄酮组合。本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17和乙酰基四肽-3组合。本发明所述多肽化合物可以是肉豆蔻酰五肽-17、鹰嘴豆芽素a和乙酰基四肽-3组合。本发明的组合物，可以施用于可能正在产生毛发减少和/或存在毛发减少的患者。包括患者的头部、睫毛和眉毛部位。本发明还包括添加成分可以是提取脂质和/或合成脂质、水或脂溶性活性成分，植物提取物，组织提取物，海洋提取物，抗氧化剂，保湿剂，稳定剂或防腐剂等，具体各组分的浓度为0.01ppm～5％(w/w)。本发明包括添加保湿剂，优选如甘油、芦荟胶、透明质酸钠等；多醇类防腐剂，优选辛甘醇；包括抗菌类维持成分稳定的综合性试剂，优选1,2-己二醇；以上各组分的浓度为0.01ppm～5％(w/w)等等。本发明包括pH调节剂，所述pH调节剂选自：三乙醇胺、碳酸氢钠、碳酸氢钾，优选三乙醇胺；pH值范围为3.0～8.0，优选5.0-7.0。本发明的实施例中，多肽组合物可以制成各种产品包括但不局限于护发精华液，乳液、香波、洗液、霜剂、喷雾剂、凝胶、软膏和膏剂、睫毛膏、眼线剂、眉笔。剂型可以是各种制剂包括但不局限于溶液、乳液、凝胶、固体和脂质体。本发明相对于现有技术的有益效果，包括：本发明通过在实施例体外培养毛囊组织试验中，与2％米诺地尔相比较，多肽组合物在促进毛发生长上，明显优于米诺地尔，这为临床上治疗脱发提供新的药物依据。众多的资料已经显示，单个多肽如生物素三肽-1、乙酰基四肽-3、豆蔻酰五肽-17已经证实与毛发生长有间接/直接的作用效果，并有大量的临床数据，故在该试验中，多肽组合物组在促进毛发生长中，与以上单肽相比，具有明显优于单肽的效果，表现出明显的协同作用。本发明的实施例的临床试验发现，优选实施1、实施例3作为睫毛生长液，实施例5作为头发生长液，实施6作为眉毛生长液，这些多肽组合物在临床实验上，能够明显促进头发、眉毛、睫毛的数量增加，密度加大。附图说明图1为用于促进头发生长临床试验毛发生长初期的平均密度示意图；图2为用于促进头发生长临床试验毛发生长终期的平均密度示意图；图3为用于促进睫毛生长临床试验睫毛密度增加示意图；图4为用于促进睫毛生长临床试验睫毛长度增长示意图；图5为用于促进睫毛生长临床试验眉毛增长示意图。具体实施例下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不限于此。实施例1促进睫毛生长的精华液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入肉豆蔻酰五肽-17，生物素三肽-1，生物素，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。实施例2促进睫毛生长的精华液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入肉豆蔻酰五肽-17，生物素三肽-1，铜肽，生物素，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。实施例3促进睫毛生长的精华液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入肉豆蔻酰五肽-17，肉豆蔻酰六肽-16，生物素三肽-1，铜肽，生物素，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。实施例4促进头发生长的精华液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入肉豆蔻酰五肽-17，肉豆蔻酰六肽-16，生物素三肽-1，铜肽，乙酰基四肽-3，生物素，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至6.5左右。实施例5促进头发生长的精华液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入溶解好的5,7,4′-三羟基黄酮，齐墩果酸，N-生物素基-gly-his-lys，铜胜肽，丁二醇，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至6.5左右。实施例6眉毛生长液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入肉豆蔻酰五肽-17，乙酰基四肽-3，生物素，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。实施例7眉毛生长液处方(1公斤精华液)：配制方法：将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入肉豆蔻酰五肽-17，乙酰基四肽-3，鹰嘴豆芽素a，生物素，辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。实施例8在体外培养模型中对毛发生长影响的试验样品来源：取健康志愿者头皮组织，志愿者无染发、头部皮肤病等问题，年龄20-40岁之间。在显微镜下分离头皮组织，收集生长初期的毛囊组织。组织培养：把毛囊组织加入包含10ng/mL皮质醇(hydrocortisone)、10μg/mL胰岛素、2mML-谷氨酰胺、100U/mL青霉素的培养基，并置于37℃，5％CO2的培养箱中，连续培养14天。加入各多肽组合物以及单个多肽，另两组分别加入等体积的生理盐水作为对照组和2％的米诺地尔。数据测定：分别在培养0天、7天、14天测定头发长度的增长率。表1头发增长率分组7天14天对照组4.5％10.1％米诺地尔7.5％12.9％实施例1多肽组合物组10.9％18.7％实施例2多肽组合物组10.1％18.9％实施例3多肽组合物组11.2％19.8％实施例4多肽组合物组10.8％18.5％实施例5多肽组合物组12.1％19.7％实施例6多肽组合物组11.7％18.6％实施例7多肽组合物组10.5％17.9％乙酰基四肽-17.9％12.5％豆蔻酰五肽-178.4％14.9％生物素三肽-18.0％13.9％结果可以看出，加入2％米诺地尔的组毛发生长明显长于对照组，说明该培养成功。以上数据得知，单独加入促进角质蛋白生成的多肽组，其头发也明显长于对照组，显示促进角质蛋白的多肽明显具有促进毛发生长的作用。数据显示，促进角质蛋白和胶原蛋白生成的多肽组合物组的毛发明显长于对照组，同时也长于单独加入促进角质蛋白生成的多肽组，说明包含促进胶原蛋白和角质蛋白生成的多肽组合物组明显起到促进毛发生长的作用，并且该组合在毛发生长上优于单独促进角质蛋白生成的多肽组。试验结果侧面说明，含促进胶原蛋白和角质蛋白生成的多肽组合物具有很好的协同效应。从后续的临床实验可知，促进角质蛋白和胶原蛋白生成的多肽组合物组促进毛发生长上优于2％米诺地尔的组，这为临床治疗脱发使用新药物提供依据。实施例9促进头发生长临床试验选择60名因雄激素性秃发的志愿者，平均年龄46岁，所有志愿者均无缺铁性贫血，甲状腺以及相关的病理特状，其头部毛发也均没有接受过任何的治疗。在本实验区域，至少有200根头发，其中70％处于生长初期。15人使用实施例5多肽组合物组，15人使用米诺地尔，15人使用安慰剂，15人使用生物素三肽-1，各组药物的浓度一样。在检测的头部区域削发(削发区域面积约1.8cm2)，连续3天采集削发部位图片，评估生长初期和终期的毛发。每天晚上使用药物一次，连续4个月。采用显微镜与自动数据图像采集分析仪器记录D0(第0天)和4个月的数据。绘图：比较D0(第0天)与4个月，各组头发处于生长期的平均密度以及各组头发处于毛发终期的平均密度，毛发初期和终期的平均密度对比结果分别如图1和图2所示。试验结果表明，多肽组合物组能有效促进毛发生长，使处于毛发生长期的头发增多；表上数据显示，多肽有望替代米诺地尔，在临床上用于秃头的治疗；多肽组合物组明显优于单个多肽，表现显著的协同效应。试验结果表明，多肽组合物组能有效降低生长终期的毛发，有效防治毛发的脱落；表上数据显示，多肽组合物组明显优于单个多肽，表现显著的协同效应。实施例10促进睫毛生长临床试验选择50名志愿者，分别记录这些志愿者上眼脸睫毛的数量以及长度，下眼脸睫毛的数量和长度。平均分成五组：实施例1多肽组合物和实施例3多肽组合物、比马前列胺、豆蔻酰五肽-17、安慰剂。连续使用4周、8周早晚涂抹一次，并记录上眼脸/下眼脸睫毛的数量以及长度。结果：记录4周与8周睫毛的密度，如图3所示；以及增长的长度，如图4所示。从图3可以看出来，多肽组合物组能够明显增大睫毛密度，多肽组合物组的密度明显大于单一多肽的效果，这说明了多肽组合物优于单一多肽。图3也显示，多肽组合物优于比马前列胺，有望替代比马前列胺。从图4可以看出来，多肽组合物组能够明显促进睫毛长度，多肽组合物组的长度增长明显大于单一多肽的效果，这说明了多肽组合物优于单一多肽。图4也显示，多肽优于比马前列胺，有望替代比马前列胺。实施例11促进眉毛生长临床试验选择60名具有明显眉毛缺失的志愿者，分别记录眉毛的数量，把志愿者平均分成四组：实施例6多肽组合物组，乙酰基四肽-3，比马前列胺，安慰剂。每天早晚涂抹一次。记录使用60天后眉毛增多的百分比。如图5。从图中可以看出来，多肽组合物组能够明显促进眉毛增长的数量，多肽组合物组对眉毛的增长率明显大于单一多肽的效果，这说明了多肽组合物优于单一多肽。图中也显示，多肽组合物优于比马前列胺，在眉毛数量增长上有望替代比马前列胺。以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所做的进一步详细的说明，但是不表示本发明的具体实施是局限于这些说明。对于本发明所属拘束领的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或是替换，都应视为属于本发明的保护范围内。当前第1页1 2 3