本发明涉及一种通过高静流体压力处理化妆品的方法，尤其用于使得可能对其造成污染的病原体微生物以不可逆的方式失活，从而保持其性能。本发明还旨在提供获得的产品以及用于处理化妆品并在处理之后用于保存的适配容器。
背景技术：
化妆品是可能受某些微生物污染的敏感产品。为了避免所有卫生问题，尤其是用于皮肤而与皮肤接触时，必须使得产品去除污染。为此，已有记载多种不同的技术：诸如巴斯德灭菌法并且最终进行消毒的热技术，通过电离辐射的处理技术，以及最近诸如超声或微波的其他物理技术。然而，所有这些方法，尤其通过发展的能量，可能导致经处理化妆品的内在结构发生改变(使得乳状液不稳定、形成自由基)，因而导致其内在属性发生改变。
此外，为了避免在采用前述方法处理的化妆品或未处理的化妆品中残余的微生物的增生，有必要借助于使用具有杀菌效果或者限制微生物生长的效果的称为“防腐剂”的药剂。然而，多年以来，各种规定限制了对某些添加防腐剂的使用。而且，在具有“天然”标签的产品中，这种化学性质的防腐剂将改变与产品相关的中性形象。
同样，仍然强烈需要一种克服在先方法缺点的方法，尤其能够对化妆品灭菌并且得以保存而不借助于化学添加剂，完全保留其特征属性。
本发明的目的是提供一种基于高静流体压力(或者“High Hydrostatic Pressure”HHP)技术的处理方法。
方法HHP对于一些介质的处理是公知的。尤其，已经显示，对一些食物使用HHP可能导致减少微生物量(酵母、霉菌、细菌......)，并且因此能够使得保存持续时间增长(E.RENDUELES等人在LWT-Food Science and Technology(2011)第44期第1251-1260页发表的《Microbiological food safety assessment of high hydrostatic pressure processing：a review》)。然而，应当强调的是，这些微生物的失活条件同时取决于微生物的性质(例如菌株的属性)以及介质的组成。尤其，碳水化合物、蛋白质、脂类和其他组成物(盐或糖的浓缩物)可以在面对高压效应时对微生物起到保护作用(JC.CHEFTEL在Food Science and Technology International(1995)第1(2-3)期第75-90页发表的《Review：High Pressure，microbial inactivation and food preservation》，C.GARCIA-GRAELLS等人在J.Food Prot.(1999)第62期第1248-1254页发表的《Inactivation of E.coli in milk by high hydrostatic pressure treatment in combination with antimicrobial peptides》)。同时，经处理的介质的某些物理化学属性对于微生物的压力敏感性具有较强的影响，尤其是pH值和水活性aw的值(J.P.P.M.SMELT在Trends Food Sci.Technol.(1998)第9期第152-158发表的《Recent advances in the microbiology of high pressure processing》)。因此，在使用HHP的影响下的微生物失活是复杂的现象，因为这取决于已处理的截至的大量特征因素。
因而，在通常富含脂类的或者包含多糖的各种化妆品介质内通过HPP方法使得微生物失活，直到目前也显得难以实现。
此外，属性不稳定的一些化妆品、例如乳液，由于其亚稳定特性(从热动力学的观点来看)，其内在结构易于因应用高压而发生改变。
尽管如此，意外的是，由于协同作用的特定参数的特定组合，本发明提供了一种化妆品的HHP处理方法，其能够对其杀菌并以不可逆的方式使得易受污染的病原体微生物失活，而不使用任何防腐剂类型的添加剂，同时维持其特征属性。
技术实现要素：
本发明提供了一种通过高静流体压力的化妆品处理方法，其包括向化妆品应用压力P，采用持续或循环应用模式MA，其特征在于用于压缩的压力P的施加速度VA在0.5至50MPa.s-1之间，以及下列参数中至少之一、优选全部：
○减压速度VAD在0.5至50MPa.s-1之间，
○压力P的应用总持续时间t在2至60分钟之间，
○压力P在200Mpa和600Mpa之间，
○待处理的化妆品的初始温度在-10℃和40℃之间。
有利的是，这种方法通过不可逆的方式使得易受污染的病原体微生物失活，而能够使得经处理的化妆品去除污染，同时维持其内在属性。
本发明还旨在对该尤其用于对化妆品灭菌的方法的应用，以及获得的化妆品。
最后，本发明还旨在提供一种适于保存将处理的产品并且经受高压处理的装置，所述产品尤其是化妆品。
附图说明
下文将详细描述本发明，对装置的描述基于随附附图，随附附图中示出了：
图1：带盖的柔软外壳的横截面示意图。
图2：用于接收柔软外壳的上容器的横截面视图。
图3：分配器塞子的示意图。
图4：已组装的图1-3的元件的示意图。
具体实施方式
因此，本发明旨在提供一种通过高静流体压力的化妆品处理方法，其包括向化妆品应用压力P，采用连续或循环应用模式MA。优选地，应用模式为循环模式。
术语“化妆品”在本发明中应当理解为：
-用于应用在皮肤、粘膜、表皮上的制备完成的化妆品合成物，以及
-这些合成物的组成物，尤其是化妆活性要素和添加剂或赋形剂，例如植物提取物或花水。
这些“化妆品”可以采用适于进行HHP处理的所有形式，即易于传导压力的所有形式，尤其是护肤霜、软膏、乳清、洗剂、基于花水的产品、乳液以及具有表面处理和适应性颗粒尺寸的特定粉末，以及本领域技术人员所熟知的产品，以减小压缩效应。
根据本发明的高静流体压力方法特征在于具有一定数量的参数，尤其：
-压力值P，
-用于压缩的压力应用速度VA，
-减压速度VAD，VA和VAD可以相同或不同，
-压力应用模式MA，其呈现处理期间应用压力的方式：或者是持续的，一旦达到所需值，则在整个处理持续期间维持相同的压力值，或者是循环的，
-待处理的化妆品的初始温度Ti，
-用于该方法的压力P的应用总持续时间t。
根据本发明的方法的压力P在200MPa和600MPa之间。
用于压缩的压力P的应用速度VA在0.5和50MPa.s-1之间，并且优选地，减压速度VAD在0.5和50MPa.s-1之间。
优选地，该方法的压力P的应用总持续时间t在2至60分钟之间。
待处理的化妆品的初始温度Ti优选在-10℃和40℃之间。
根据特别改变的实施方式，本发明旨在提供一种通过高静流体压力对化妆品的处理方法，包括对化妆品应用压力P，其中应用模式MA为连续或循环，优选为循环，其特征在于包括下列参数的至少一个集合：
○压力P的应用总持续时间t在2至60分钟之间，
○压力P在200Mpa和600Mpa之间，
○用于压缩的压力P的应用速度VA在0.5至50MPa.s-1之间，
○减压速度VAD在0.5至50MPa.s-1之间，
○待处理的化妆品的初始温度在-10℃和40℃之间。
在循环应用的情况下，该方法包括一系列的周期。在一个周期中，压力以速度VA上升，在持续时间tc(tc＜t)期间维持压力处于值P，随后压力以速度VAD下降：
-或者直至环境压力P0，
-或者直至中间压力Pin，其在环境压力P0和在所述两个周期期间所应用的最高压力P之间。
每个周期的压力P的应用持续时间tc优选在2至20分钟之间，优选在3至15分钟之间。或者所有周期具有相同的持续时间tc，或者至少两个周期具有不同的持续时间tc。
相同地，对于所有的周期，压力P可以相同，或者对于至少两个周期，所应用的压力P不同。
对于所有的周期，压缩速度VA和/或减压速度VAD可以相同，或者至少两个周期具有不同的压缩速度VA和/或减压速度VAD。在一些情况下，对于特殊产品，必须施加特定的压缩或减压剖面，速度VA或MAD可以改变。
事实上，每个周期具有一个压缩和减压剖面。压缩或减压剖面对应于在压力上升或下降期间应用压力的普遍进度。因而，压缩和减压可以是单调方式(速度恒定或者速度可变)，或者具有一个或多个压力水平。每个水平是通过应用中间恒定压力而实现，其压力值在周期的最低压力和周期的最高压力之间。平台可以通过恒定速度或可变速度而实现。在每个平台之前和之后，应用速度可以相同或不同。
同样，根据一个实施方式，对于至少一个周期，压缩速度VA和/或减压速度VAD变化直至达到压力P。或者所有的周期具有相同的压缩和/或减压剖面，或者至少两个周期具有不同的压缩和/或减压剖面。
此外，对于同一周期，压缩剖面和减压剖面可以相同或不同，即对于同一周期，速度VA和VAD可以相同或不同。
在第一周期和/或多个周期之间和/或每个周期之间，可以应用潜伏时间tlat：或者处于环境压力P0，或者处于中间压力Pin。该潜伏时间tlat在2至20分钟之间。根据一个特定实施方式，该方法包括至少三个周期以及至少一个潜伏时间tlat。如果有至少两个潜伏时间tlat，这些潜伏时间可以相同或不同。
该方法的压力P的应用总持续时间t在2至60分钟之间。在循环应用MA的情况下，其取决于周期的数量以及每个周期tc处于处理压力P下的持续时间，潜伏时间tlat的持续时间，以及速度VA和VAD。
周期的数量取决于将使之失活的微生物以及处理的化妆介质的大气压力变化敏感度，因而归纳处高压下的总维持时间t。周期的数量不能超过15个周期。
介质的初始温度Ti在-10℃和40℃之间。该温度可以是环境温度(20℃和25℃)，或者为更低的温度，甚至零下温度，或更高的温度。低温(小于10℃)或零下温度很好地适应于非常不稳定的化妆品(例如包括不耐热物质的化妆品)，因为这些温度维持了特定特征，而更高的温度包括在30和40℃之间，能够在保存化妆品时确保对孢子的非常好的失活。
压缩速度、即压力上升的速度，包括在0.5和50MPa.s-1之间，尤其在1和50MPa.s-1之间。优选地，其包括在1和10MPa.s-1之间，尤其在1和6.6MPa.s-1之间。该速度是恒定的或可变的，直至达到所需压力。同样，对于两个不同的周期，压缩速度可以相同或不同。
减压速度、即压力下降的速度，在0.5和50MPa.s-1之间，尤其在1和50MPa.s-1之间。优选地，其在1和10MPa.s-1之间，尤其在1和6.6MPa.s-1之间。该速度是恒定的或可变的，直至达到所需压力。同样，对于两个不同的周期，减压速度可以相同或不同。
对于同一周期，或者当压力应用模式MA是持续时，压缩速度和减压速度可以相同或不同。
该方法借助于适于本发明条件的高压装置而实施。
为了在HHP处理之后避免之后的所有污染，待处理的化妆品应当预先包装在其最终包装或者其最终包装的一部分内。该包装应当：
○完全或部分可变形，以能够传递压力，即为了使得压力应用能够补偿待处理的化妆品介质的可压缩性，
○不因HHP处理的应用而改变，即其应当具有机械稳定性、化学整体性以及适当的屏障属性，
○优选在消费者使用时不再对产品进行污染，诸如尤其是“单剂量”型系统，或者避免因返回少量产品或者进入包装容器的空气而产生再次污染的所有系统。
例如，其指的可能是刚性材料制成的包装，诸如玻璃、塑料或者适于用作容器的所有材料，所述包装由可变形或者具有可变形部分的盖所封闭。
因此已包装的化妆品随后被置于高压设备内，称为“高压壳体”的该设备随后由确保密封性的至少一个封闭器而闭合。通常，当“高压”壳体处于垂直位置时，仅具有一个闭塞器，而当壳体处于水平位置时，通常具有两个闭塞器(每端一个)。
在使用根据本发明HHP方法进行处理时，压力通过不改变包装的液体传递至样品。在一些情况下，可以使用气体以保护包装(尤其是无气类型)
压力的增长或者通过多个泵(在该情况下，“高压”壳体的容积通常是恒定的)，或者通过减少壳体的容积而实现。
将应用的HHP处理的不同特征参数用于自动装置或者在电脑上(根据将数据传输至设备的系统)。
一旦处理终止，“高压”壳体打开并且回收样品。在化妆品已经在其最终包装(商业包装)内直接处理的情况下，其可以或者再包装在外包装中，或者存储或发送至客户。在包装是最终包装的一部分的情况下，其因而连接至所述最终包装的不同元件。
可以处理包装的外表面或者选择该包装的外层，以便于避免因使用例如压力传输介质的液体而引起的所有湿润效应。
根据特别改变的变化方案，该化妆品包装在特定装置中，其允许同时应用根据本发明的方法并且在处理之后保存产品。
能够对产品、尤其是化妆品应用高压方法、尤其是根据本发明的方法的该装置，能够采取以下形式。
图1示出了柔软包裹容器10，在上部部分具有开口11。在化妆品的情况下，产品12通过未示出的、本领域已知的所有工具、诸如填装喷嘴而引入该外壳内。
在填装化妆品之后，该柔软包裹容器10由盖13密封封闭，以使得所述柔软容器密封。
柔软包裹容器或者固定或者包括头部垫圈14。
化妆品的该包裹容器经受根据本发明的处理方法，其旨在以特定方式破坏可能处于所述产品内和处于所述包裹容器10内的微生物。
一旦处理完成，将柔软包裹容器10设置于外包装15内，形成能够携带信息、通信方式和所有希望出现的其他文字和图示的硬外周壳体(图2)。
连接至包裹容器的垫圈14装配在外包装15上，尤其通过螺钉或夹具(图3)。
包裹容器10配置有开口11，配置有螺纹或者夹具，以便于接收塞型分配器17，以“不通风”方式，即其功能为能够分配产品，而无需输入等体积的空气以补偿所分配的产品的体积。在安装头部时，塞型分配器17包括将产品吸入柔软且适于穿孔13的容器包裹内的套管18，并且接触该柔软容器包裹的内容物(图3)。
外包装包括空气入口19，因为未将平衡空气引入硬外包装15内，以补偿产品的分配。应当平衡因空气进入所述外包装15内引起的塌陷容积的减少。该空气不接触容器包裹的内容物，因此这不引起任何再污染。如果希望包裹和外包装之间的容积仅限于空气进入，则空气入口可以是可能配置有活门或阀的简单孔。
塞型分配器17可以由聚合物材料制成，其具有杀菌属性并且已经预先得到处理，并且适于在设置于合适的位置之前从包装中伸出，以便于避免引入微生物。
该装置尤为适于在根据本发明的高静流体压力处理期间容纳化妆品，并且用于在处理之后保存产品。
有利的是，根据本发明的方法的不同特征组合对可能污染已处理的化妆品的病原微生物造成了不可逆的破坏。
化妆品中微生物制剂具有多种类型。多个报告或文献根据所使用基底的成分、根据化妆品的类型和制备，基于使用模式，而指出了污染物的属性(R.M.BAIRD在J.Soc.Cosmet.Chem.(1977)第28期第17至20页的《Microbial contamination of cosmetics products》，R.CAMPANA等人在Letters in Applied Microbiology(2006)第43期第301-306页的《Microbiological study of cosmetic products during their use by consumers：health risk and efficacy of preservative systems》，A.VARVARESOU等人在Int.J.Cosmet.Sci.(2009)第31(3)期第175页的《Self preserving in cosmetics》，A.DETMER等人在Danish Ministry of Environment、2010年Environmental project N°1336的《A guidance document on microbiological control of cosmetics products》)。
在污染化妆品的微生物制剂中，包括细菌(尤其是葡萄球菌属)、霉菌(诸如曲霉属)以及有时可能存在孢子(尤其是在花水或植物提取物用作化妆组成物的制剂时)。
因此，可以使用该方法使得在化妆品中存在的植物型或孢子型病原微生物失活。
本发明尤其旨在提供一种对化妆品处理方法的应用，以对化妆品灭菌和/或改善其保存。
该方法能够实现与低温灭菌等效的完全和不可逆的去污染。
根据本发明的方法的参数的特定组合能够在单一步骤中实现对污染化妆品的微生物制剂的完全失活，其可能是植物型或孢子型。根据微生物的属性以及化妆品的组成，该水平可以实现：用于植物型达到109(破坏有效性ED＝9)，而对于孢子型、尤其是细菌型高于106(ED＞6)。
根据另一方面，根据本发明的处理方法还可以用于改变化妆品的结构质地。事实上，可以通过应用根据本发明的方法而用于微生物安全处理，如果在引入在所述根据本发明的化妆品处理方法的条件下可能以不可逆方式凝胶化的成分或组成物(例如多糖)时改变化妆品的结构质地。
最后，本发明还旨在提供一种实施该方法获得的化妆品，其不包括防腐剂并且其相对于初始产品而对存在于介质中的病原微生物的失活率至少等于6log(破坏有效性至少等于6)。
本发明的失活率，应当理解为例如：
-2log的失活率，指的是使得介质中99％的病原微生物失活，
-4log的失活率，指的是使得介质中99.99％的病原微生物失活，
-5log的失活率，指的是使得介质中99.999％的病原微生物失活，
-6log的失活率，指的是使得介质中99.9999％的病原微生物失活。
优选地，化妆品不包含任何防腐剂，并且不包括任何病原微生物，且其属性和结构与处理前相同。由此，经该方法处理的化妆品保留了其天然特征，该方法看来尤为适于贴有“生物”标签的产品。
此外，与通过例如能够杀除病原制剂的热巴斯德灭菌法而以高温处理的化妆品相反，根据本发明处理的化妆品不因热度而变质，并且保持其结构和属性，因为根据本发明的方法不将化妆品加热至高温。
因此，通过根据本发明的方法，可以获得无防腐剂、细菌和任何添加剂的化妆品(旨在使得病原微生物失活，或者限制其发展)，并且完全免于微生物污染，而不改变这些产品的内在结构以及其感官刺激属性。因此，该处理等效于低温灭菌。
根据本发明的方法的条件可以在根据待处理的化妆品指定的值的范围内得以优化，根据污染产品的病原微生物的属性并且根据所寻求的应用，以获得最优的失活率。这些条件还可以在指定的值范围内得以优化，使得处理方法的总持续时间随着适于已处理介质的经济限制而增加。
现在将作为实例以及示出本发明方法有效性的非限制性试验而示出本发明。
对于这些实例，面对化妆品的去污染，根据本发明的方法有效性由一定量的参数而估算：
-Ni表示污染化妆品的微生物的初始浓度，而Nf是在应用根据本发明的方法之后的最终浓度。
-ED是与该方法相关的破坏有效性
实例1
无防腐剂且未经微生物失活技术处理的化妆品的去污染测试
根据本发明的方法的有效性已经在悬浮液基底的乳液中进行测试，并且未添加任何防腐剂。由水和少数组成物(数量级在5-6％)形成的该乳液，所含的各种脂质(植物油等)浓度不可忽略，大于15％。在成形并制备之后，其已经设置在非密封容器中并且在常温下保存4天。
通过微生物分析观察得到的初始污染的数量级为3*104UFC/g。该结果显然一方面由于存在初始内源性污染，或者是在成形时使用的成分所产生，或者因操作引入，而另一方面由于没有任何防腐剂，由于微生物增生，在数日之后的该污染可能达到不可忽略、甚至非常大的数值。
下文的表I中给出了不同的处理参数，诸如初始污染(Ni)、HHP处理之后的最终污染(Nf)以及对于内源性菌丛的破坏有效性(ED)。
表I
可观察到，采用周期性应用模式或持续模式(4分钟，3个周期或12分钟)，在400Mpa的压力和20℃或36℃的温度下，使得内源性污染完全失活。相反地，可以观察到，采用循环应用模式且在在20℃的温度(试验B)下，从300MPa起，可以使得所有微生物量失活。该结果显示，根据本发明的方法能够在平均压力下使得化妆品失活，因此作为交换保留尤其敏感的物质(或组成物)。
可观察到，在试验B和D的条件下应用根据本发明的方法使得污染化妆品的内源性菌丛完全失活。
实例2
使得与实例1相同的化妆品去污染的测试，但是其接种了各种微生物
为了评估根据本发明的方法的破坏有效性，已经选择两种微生物进行免疫性试验：细菌Gram+(金黄色葡萄球菌)以及霉菌(巴西曲霉)，通常被化妆品领域技术人员认为常遇到的污染物。
使用与实例1(试验A至D)(参考表I)所提及的跟进本发明的方法的相同参数值。
表II
通过应用表示根据本发明的方法的测试，可以总结得：
(i)在相同的处理条件下，巴西曲霉比金黄色葡萄球菌对所应用的方法而敏感
(ii)为了在该研究的条件下使得金黄色葡萄球菌完全失活，必须采用循环应用(此次，3个周期，每个周期4分钟，压力400MPa，温度20℃或36℃)(参考试验B和D)
(iii)值得注意的是，对于该出名的细菌Gram+，在现有技术中可以实现非常好的抗压性，ED值的数量级为7。
实例3
在具有与实例1和2非常不同的特征的另一乳液内测试根据本发明的方法对化妆品的灭菌
测试的化妆品与前述不同之处在于未观察到任何初始污染(在所有接种微生物之前)。
下表(表III)给出了已经采用的根据本发明的方法的处理参数。
表III
该产品已经接种有多剂量的微生物(免疫性试验)。已经使用两种微生物：细菌Gram+(金黄色葡萄球菌)以及霉菌(巴西曲霉)，通常被化妆品领域技术人员认为常遇到的污染物。
表IV中给出了应用根据本发明的方法使得化妆品去污染之后该微生物的破坏有效性(采用了表II提及方法的参数)。
表IV
同样应当注意到，对于前述产品(参考实例2)，霉菌型的微生物(巴西曲霉)比Gram+细菌金黄色葡萄球菌对于根据本发明的方法的效果更敏感，因为其失活状况是完全失活。
相反地，金黄色葡萄球菌的总失活情况更极端，但是其情况类似于另一化妆品所观察到的情况(参见实例2)。
因此，通过选择根据本发明的方法的参数，能够使得所有微生物量(巴西曲霉和金黄色葡萄球菌)以不可逆的方式完全失活。该完全且不可逆的失活类似于低温灭菌。
实例4
如果在应用这种HHP方法之后产品的内在结构仍然不改变，通过根据本发明的方法使得化妆品完全去污染仅可用于工业。
在化妆品的多幅视图中，在显微镜下可以观察到乳状液的大量特征小气泡，其尺寸均匀，覆盖整个表面。
在根据使得所有接种的病原微生物(巴西曲霉和金黄色葡萄球菌)失活的条件进行处理之后，显微镜观察(放大率×500)显示了，覆盖显微镜载物台的整个表面的尺寸均匀的气泡，具有与范例样品相同的分布。其结果是，乳液(乳状液)的内在结构未因根据高静流体压力方法的处理而改变。同样还维持了其生物刺激属性(颜色、气味和视觉方面)。
表V
使得巴西曲霉和金黄色葡萄球菌完全失活的试验条件
因此，实施根据本发明的方法能够使得所含的微生物完全失活，而不改变产品的内在结构以及生物刺激属性(颜色、气味和视觉方面)。
实例5
无任何防腐剂、也无易于引起杀菌效果或限制微生物增生的添加剂的化妆乳液，已经受4种微生物污染，或者是植物型(金黄色葡萄球菌ATCC6538、产气肠杆菌ATCC13048)，或者是孢子型(巴西曲霉ATCC16404)。
因此，该已污染的乳液进行了根据本发明的两种HHP处理(参见表VII)。
表VI：HHP A和HHP B处理的实验条件
在下表VII中示出了获得的结果：
表VII：通过应用根据本发明的HHP处理而对每种微生物的去污染评估
实例6
无任何防腐剂、也无易于引起杀菌效果或限制微生物增生的添加剂的化妆乳液，与实例5种相同，已经受2种微生物污染，或者是植物型(金黄色葡萄球菌ATCC6538)，或者是孢子型(蜡状芽孢杆菌ATCC14579)。
在表VIII中给出了该乳液的HHP处理条件。
表VIII：HHP处理条件
表IX中给出了微生物分析结果。
表IX
实例7
化妆乳液与实例5和6相同，因此无任何防腐或杀菌添加剂，一方面已经接种有植物型品种金黄色葡萄球菌，其初始污染水平非常大，接近109UFC/mL，另一方面接种有孢子型品种蜡状芽孢杆菌，其初始污染水平接近106UFC/mL。
该乳液已经设置在柔软可形变容器内，以便于确定能集中向产品传递高静流体压力方法(HHP)的特征参数。该试验容器随后密封，以便于避免乳液受压力传递介质的所有再污染。
在表X中给出了HHP处理方法的特征参数。
表X
对于每个周期的压力应用持续时间tc是5分钟。
该处理结束后，未处理的范例和已处理的乳液样品用于接种在适于微生物增生的介质中。在潜伏期之后，进行计数。表XI中给出了该微生物分析结果。
表XI。