本发明涉及组织工程技术领域，尤其涉及一种乳房补片及其制备方法。
背景技术：
近年来，乳房整形术是最为常见的一种整形手术之一，在乳房整形术中最为常见的是：隆乳术、乳房下垂矫正术、乳房修复术以及乳房重建术；在这些乳房整形术中，通常需要将乳房假体植入胸大肌，在术后患者经常会出现机体对异物的排斥反应，产生乳房发硬、疼痛等包膜挛缩现象。尤其是奥美定取出患者和乳腺癌患者，通常会由于切除大面积乳房组织而使得乳房的肌肉组织较为薄弱，在植入乳房假体后，还会出现假体移位、下垂等并发症，这些并发症还会加剧术后的感染和排斥反应，给患者造成巨大的痛苦。
技术实现要素：
本发明的主要目的在于，提供一种乳房补片及其制备方法。该乳房补片在植入乳房假体与机体之间时，不但能够减少机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，而且能够起到支撑固定的作用，防止假体移位、下垂。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
一方面，本发明实施例提供一种乳房补片，所述乳房补片为双层结构的膜组织，所述双层结构包括致密层与疏松层，所述致密层由胶原蛋白束紧密交错排列而成，所述疏松层由胶原蛋白束松散交错排列而成。
优选的，所述膜组织选自动物的小肠粘膜下层、心包膜、腹膜、羊膜、胸膜或者隔膜中的任意一种。
另一方面，本发明实施例提供一种如上述所述的乳房补片的制备方法，包括：
步骤1)剔除动物膜组织的脂肪组织、结缔组织，获得初步处理后的膜组织；
步骤2)将初步处理后的膜组织用碱溶液浸泡进行脱细胞处理，获得脱细胞后的膜组织；
步骤3)将脱细胞后的膜组织用有机溶剂浸泡进行脱脂处理，获得脱脂后的膜组织；
步骤4)将脱脂后的膜组织进行表面修饰、干燥，获得乳房补片。
可选的，所述哺乳动物的膜组织选自动物的小肠粘膜下层、心包膜、腹膜、羊膜、胸膜或者隔膜中任意一种。
优选的，所述步骤2)中所述碱溶液为氢氧化钠、氢氧化钾或者氢氧化钙。
可选的，所述步骤3中所述有机溶剂为异丙醇、丙酮或者乙醇中的一种或者几种。
进一步地，所述步骤4)中将脱脂后的膜组织进行表面修饰包括：在所述膜组织的疏松层表面进行机械刮除。
可选的，所述步骤4)中将脱脂后的膜组织进行表面修饰还包括：对所述膜组织的致密层表面进行选择性交联反应。
优选的，所述步骤4)中的干燥为冷冻干燥。
本发明实施例提供的一种乳房补片及其制备方法。由于该乳房补片为细胞外基质，主要成分为胶原蛋白，由胶原蛋白束交错排列而成，具有良好的生物相容性，在将所述乳房补片植入乳房假体和机体之间时，可以将所述双层结构的疏松层朝向机体组织，所述双层结构的致密层朝向乳房假体进行设置，所述乳房补片的疏松层表面有较大的孔隙结构，更有利于细胞的粘附、迁入与组织的生长，能够诱导机体再生、减少机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，并且，所述乳房补片能够起到支撑固定的作用，防止假体移位、下垂。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明实施例提供的一种乳房补片的致密层表面的外观图；
图2为本发明实施例提供的一种乳房补片的致密层表面的扫描电镜图；
图3为本发明实施例提供的一种乳房补片的疏松层表面的外观图；
图4为本发明实施例提供的一种乳房补片的疏松层表面的扫描电镜图；
图5为本发明实施例提供的一种乳房补片的制备方法的流程图。
具体实施方式
现将详细地提供本发明实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本发明。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本发明进行多种修改和变化而不背离本发明的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。因此，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例所涉及的材料均可以通过商业途径或通过申请人获取。
一方面，本发明实施例提供一种乳房补片，所述乳房补片为双层结构的膜组织，所述双层结构包括致密层与疏松层，所述致密层由胶原蛋白束紧密交错排列而成，所述疏松层由胶原蛋白束松散交错排列而成。
其中，所述致密层与所述疏松层是一个相对概念，从外观上看，如图1所示，所述致密层表面较为光滑平整，参见图2，为所述致密层表面的扫描电镜图，可见所述致密层由胶原蛋白束紧密交错排列而成，其表面较为致密，可见少量的微孔状结构，所述疏松层与所述致密层相比，如图3所示，所述疏松层表面较为粗糙，参见图4，为所述疏松层表面的扫描电镜图，可见所述疏松层表面可见粗大的纤维，以及较多较大的孔状结构。
通过将细胞分别接种于所述致密层表面和疏松层表面，在37℃的孵化箱中培养5天，进行组织学分析，可以得出：细胞在所述致密层表面呈单层生长，在所述疏松层表面可复层生长，说明疏松层更有利于细胞的粘附和增殖。
本发明实施例提供的一种乳房补片。由于该乳房补片保留了天然膜组织的双层结构，具有较好的生物相容性，在植入机体之后，能够与机体较好地长合在一起，降解速率较慢，能够促进患者的恢复，将所述乳房补片植入乳房假体和机体之间时，可以将所述双层结构的疏松层朝向机体组织，所述双层结构的致密层朝向乳房假体进行设置，所述乳房补片的疏松层表面有较大的孔隙结构，更有利于细胞的粘附、迁入与组织的生长，能够诱导机体再生，减少机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，并且，所述乳房补片能够起到支撑固定的作用，防止假体移位、下垂。
其中，对所述致密层的致密程度不做限定，由于所述致密层由胶原纤维束紧密交错排列而成，在显微镜下可以看到少量的微小的孔状结构，由于交联剂可以增强胶原纤维中原纤维、弹性蛋白等分子间的分子交互作用，增强分子键之间的作用力，从而使得分子结构发生变化，能够提高致密层的致密程度，因此，可以通过对所述致密层表面进行选择性交联反应来增大所述致密层的致密程度，从而提高所述乳房补片的机械强度，延长乳房补片在体内的降解时间。
其中，对所述乳房补片的机械强度不做限定。
本发明的一实施例中，所述乳房补片有较好的拉伸强度。拉伸强度是指外力作用下，材料抵抗永久变形和破坏的能力。本发明实施例中，所述乳房补片的机械强度较好，为用于临床创造了条件。
其中，对所述疏松层的粗糙程度不做限定，由于所述疏松层由胶原纤维束松散交错排列而成，在显微镜下可以看到表面具有较为粗大的孔状结构，有利于细胞的迁移、粘附和生长，可以通过对所述疏松层表面进行机械刮除来增大所述疏松层表面的粗糙度，增多并增大所述疏松层表面的孔状结构，使得所述疏松层更有利于细胞的迁移、粘附和生长。
其中，所述致密层表面和所述疏松层表面的孔状结构用孔隙率来表示，可以得知：所述致密层表面的孔隙率小于所述疏松层表面的孔隙率。
其中，对所述致密层表面与所述疏松层表面的孔隙率不做限定。
本发明的一实施例中，所述致密层表面的孔隙率为0.5-7.0um，所述疏松层表面的孔隙率为25-60um。
本发明的一实施例中，所述脱脂后的膜组织的脂肪含量小于等于2％。由于脱脂后的膜组织的脂肪含量较低，使得所述乳房补片有较低的免疫原性，能够最大程度上降低患者的免疫排斥反应，减少术后感染，减轻患者痛苦。
其中，对所述膜组织的来源不做限定。
本发明的又一实施例中，所述膜组织选自动物的小肠粘膜下层、心包膜、腹膜、羊膜、胸膜或者隔膜中的任意一种。
另一方面，本发明实施例提供一种如上述所述的乳房补片的制备方法，参见图5，包括：
步骤1)剔除哺乳动物膜组织的脂肪组织、结缔组织，获得初步处理后的膜组织；
步骤2)将初步处理后的膜组织用碱溶液浸泡进行脱细胞处理，获得脱细胞后的膜组织；
步骤3)将脱细胞后的膜组织用有机溶剂浸泡进行脱脂处理，获得脱脂后的膜组织；
步骤4)将脱脂后的膜组织进行表面修饰、干燥，获得乳房补片。
由于哺乳动物膜组织本身为具有致密层和疏松层的双层结构，因此，对所述动物膜组织进行脱细胞处理能够保留所述动物膜组织天然的双层结构。
本发明实施例提供的一种乳房补片的制备方法。该方法工艺简单、成本低廉，能够保留动物膜组织天然的双层结构，具有良好的生物相容性，在将所述乳房补片植入乳房假体和机体之间时，所述乳房补片能够将乳房假体与机体隔离开来，从而能够减小机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，在将所述乳房补片植入机体时，可以将所述双层结构的疏松层朝向机体，所述致密层朝向乳房假体进行设置，所述乳房补片的疏松层表面具有较大的孔状结构，有利于细胞的粘附、迁入与组织的生长，能够诱导机体再生，进一步减小术后并发症。
其中，对所述哺乳动物膜组织的来源不做限定。
可选的，所述哺乳动物膜组织选自动物的小肠粘膜下层、心包膜、腹膜、羊膜、胸膜或者隔膜中任意一种。
其中，对所述碱溶液不做限定。
本发明的一实施例中，所述碱溶液为氢氧化钠、氢氧化钾或者氢氧化钙。
优选的，所述碱溶液为氢氧化钠溶液。在所述步骤2)中通过氢氧化钠溶液对初步处理后的膜组织进行脱细胞处理的过程中，氢氧化钠溶液能够破坏细胞结构以及免疫原性物质，杀灭病毒，并且具有软化胶原纤维结构防止胶原变性的作用。
其中，对所述氢氧化钠溶液的浓度不做限定。
本发明的一实施例中，氢氧化钠溶液的浓度为0.25-1.0M。由于氢氧化钠的浓度越大，腐蚀性越强，因此，针对不同种类的哺乳动物膜组织所选用的氢氧化钠的浓度不同，当选用牛源性的膜组织时，氢氧化钠的浓度相对高一些，这样能够提高氢氧化钠溶液的脱细胞效果；但是，若氢氧化钠溶液的浓度过大，腐蚀性过强，容易对膜组织的胶原纤维造成损害，若氢氧化钠的浓度过小，会影响脱细胞效果，从而延长脱细胞时间，效率较低。
其中，对所述步骤2)中的浸泡时间不做限定。
本发明的一实施例中，所述步骤2)中浸泡时间为0.5-3.0h。若浸泡时间过短，会影响动物膜组织的脱细胞质量，若浸泡时间过长，使得动物膜组织处于强碱性环境下，容易造成膜组织的胶原纤维破损，影响成品质量；在本发明实施例中，能够在保证膜组织成品完整性的同时提高动物膜组织的脱细胞质量。
本发明的一实施例中，在所述步骤2)之后还包括：用磷酸盐缓冲液或纯化水对所述脱细胞后的膜组织进行清洗，使得所述脱细胞后的的膜组织的pH值为6.0-8.0。
通过将所述膜组织的内部环境保持在中性，能够进一步减少氢氧化钠残留，从而减少对所述膜组织的胶原纤维的损害程度，通过磷酸盐缓冲液或纯化水可清洗掉所述脱细胞后的动物膜组织上残留的碱溶液。
本发明的又一实施例中，用磷酸盐缓冲液或纯化水对所述脱细胞后的动物膜组织进行清洗，具体为：用三份质量为所述脱细胞后膜组织15倍的磷酸盐缓冲液或纯化水分别对所述脱细胞后的膜组织清洗10-15min。
本发明的一实施例中，所述步骤2)之前还包括：将初步处理后的膜组织用过氧化氢溶液、酸溶液或者醇溶液浸泡0.5-3h，对所述初步处理后的膜组织进行杀菌消毒。
其中，所述过氧化氢溶液具有杀灭病毒的作用，所述酸溶液具有杀菌消毒的作用，所述醇溶液能够渗透入细菌菌体内，使得细菌细胞内的蛋白质发生变性，对微生物的酶系统造成破坏，从而能够抑制细菌生长繁殖，起到杀菌消毒的作用。
其中，对所述过氧化氢溶液的浓度不做限定，本发明的一实施例中，所述过氧化氢的浓度为30mol/L。
其中，对所述酸溶液的种类和浓度不做限定。本发明的一实施例中，所述酸溶液为体积浓度为0.5-3.0％的盐酸水溶液、醋酸水溶液或者过氧乙酸水溶液中的一种或几种混合液。
其中，对所述醇溶液的种类以及浓度不做限定。本发明的一实施例中，所述醇溶液为乙醇含量为60％-80％的水溶液，乙醇含量为60％-90％的盐酸溶液、乙醇含量为60％-90％的次氯酸溶液或者异丙醇含量为60％-90％的水溶液。
本发明的一实施例中，在对所述初步处理后的膜组织进行杀菌消毒之后还包括：用生理盐水或者磷酸盐缓冲液对杀菌消毒之后的膜组织振荡清洗1-2h，再用水清洗至pH值为6.0-8.0。
其中，对所述步骤3)中有机溶剂不做限定。
本发明的一实施例中，所述有机溶剂为异丙醇、丙酮或者乙醇中的一种或者几种。
优选的，所述有机溶剂为异丙醇。通过实验我们发现：异丙醇相比于丙酮毒性较小，且在有机溶剂中异丙醇的脱脂效果最好。
其中，对所述步骤3)中的振荡时间不做限定。由于随着振荡时间的不同，脱脂量也不同，在实际操作中，通常脱脂后的膜组织的脂肪含量越小越好。
本发明的一实施例中，所述振荡时间为3-4h。在本发明实施例中，
通过异丙醇在振荡下浸泡膜组织脱脂3-4h，所获得的膜组织的脂肪含量小于等于2％，能够满足引导组织再生膜在临床中的免疫原性要求。
本发明的又一实施例中，在所述步骤3)之后还包括：用水对所述脱脂后的动物膜组织上残留的有机溶剂进行清洗，使得有机溶剂的残留量的质量浓度小于等于100μg/g。
通过在制备过程中将有机溶剂清洗干净，能够减小成品用于临床时的毒性，提高成品的质量。
本发明的又一实施例中，用水对所述脱脂后的动物膜组织上残留的有机溶剂进行清洗具体为：在振荡下，用五份质量为所述脱脂后的膜组织15倍的水分别对所述脱脂后的膜组织清洗10-15min。
其中，对所述步骤4)中干燥的具体操作不做限定。所述干燥可以为自然风干，也可以为烘干，也可以为冷冻干燥。
优选的，步骤4)中的干燥为冷冻干燥。
其中，所述冷冻干燥是指将物料冷冻到冰点以下从而使水转变为冰，在真空下冰直接转变为蒸汽而除去的干燥方法，冷冻干燥适用于热敏物质，在真空和低温下进行操作，使得物料中酶的活性受到抑制，将物料中的生物活性因子的损伤降至最低限度，能够保持物料的稳定性与生物活性，并且冷冻干燥后的成品物理结构与分子结构变化极小，能够较好地保持原有的组织结构和外观形态，成品呈多孔状，具有优异的复溶性，能够迅速恢复物料的组织结构。
在本发明实施例中，通过冷冻干燥，能够最大限度地保持生物材料的结构，并且，通过冷冻干燥，所述疏松层表面的孔状结构更大，更明显，更有利于细胞的粘附和生长。
其中，对所述冷冻干燥的具体操作不做限定。冷冻干燥具体分为三个阶段：预冻结段、升华阶段与再干燥阶段，在预冻结段要严格控制预冻温度(通常比预冻物质的共熔点低几度)。如果预冻温度不够低，则可能会发生不能被完全冻结，在抽真空升华时会膨胀起泡；若预冻温度太低，不仅会增加不必要的能量消耗，而且对于某些生物活性物质，会降低其冻干后的活性保持率。在真空下升华的阶段，为保证冰的升华，应开启加热系统，不断供给冰升华所需的热量；再干燥阶段所除去的水分为结合水分，此时固体表面的水蒸气压呈不同程度的降低，干燥速度明显下降。在保证产品质量的前提下，在此阶段内应适当提高温度，以利于水分的蒸发。
本发明的一实施例中，所述冷冻干燥具体为：
预冻结段：将脱脂后的膜组织在-30--40℃冻结1.5-3h，脱脂后的膜组织中的水分冻结为冰；
升华阶段：在真空度为10-30Pa下，在1h内升温至-10℃，保温8-10h；在1h内升温至0℃，保温8-10h，在1min内升温至10℃，保温2-3h，将预冻结段形成的冰升华除去脱脂后的膜组织中大部分水分；
再干燥阶段：在真空度为10-30Pa下，在1min内升温至20℃，保温3-5h，除去脱脂后的膜组织中的结合水分。
本发明的又一实施例中，所述步骤4)中将脱脂后的膜组织进行表面修饰包括：在所述膜组织的疏松层表面进行机械刮除。
通过在所述疏松层表面进行机械刮除，能够提高所述疏松层的粗糙度，使得细胞更容易粘附与迁入所述疏松层上，加快引导机体再生。
本发明的又一实施例中，所述步骤4)中将脱脂后的膜组织进行表面修饰还包括：对所述膜组织的致密层表面进行选择性交联反应。由于交联剂可以增强胶原纤维中原纤维、弹性蛋白等分子间的分子交互作用，增强分子键之间的作用力，从而使得分子结构发生变化，能够提高致密层的致密程度，这样，能够延长所述乳房补片在体内的降解时间；同时，随着所述乳房补片的致密层的致密程度的提高，所述乳房补片的机械强度也随之加大，在用于乳房整形时，不容易发生破损，更有利于机体的恢复。
实施例
下面的实施例用来说明本发明，并不是想限制本发明的范围。以下实施例仅以具体实施过程中各组分的实际添加浓度为例进行说明，实际使用时，各组分的浓度并不对本发明目的的实现构成影响。
实施例1
S101、将牛心包膜表面的脂肪组织以及结缔组织剔除，清洗表面异物，获得初步处理后的牛心包膜；
S102、将初步处理后的牛心包膜用30％的过氧化氢溶液浸泡3h进行消毒，再用生理盐水振荡清洗1h，再用水清洗至pH值为6.0。
S103、将步骤S102所获得的牛心包膜用5倍量的1M的氢氧化钠浸泡0.5h，获得脱细胞后的牛心包膜；
S104、用三份质量为所述脱细胞后的牛心包膜15倍的磷酸盐缓冲液分别对所述脱细胞后的牛心包膜清洗15min，使得所述牛心包膜上水的pH值为6.0；
S105、将步骤S104所获得的牛心包膜用5倍量的异丙醇振荡脱脂4h，获得脱脂后的牛心包膜，所述脱脂后的牛心包膜的脂肪含量为0.8％；
S106、用五份质量为所述脱脂后的牛心包膜15倍的水分别对所述脱脂后的牛心包膜清洗10min，使得所述牛心包膜上的异丙醇的含量为100μg/g；
S107、将脱脂后的牛心包膜的致密层表面朝上平铺于一器具中，边缘向上折起形成一小凹槽，将交联剂倒在所述致密层表面，使得所述交联剂刚好覆盖所述致密层表面，交联反应24h，交联之后将15倍量的水分为10份，分别对所述致密层表面清洗10min。
S108、将脱脂后的牛心包膜致密层朝下平铺于不锈钢板上，冷冻干燥，得到乳房补片。
其中，所述冷冻干燥具体为：
预冻结段：将脱脂后的牛心包膜在-30℃冻结1.5h，脱脂后的膜组织中的水分冻结为冰；
升华阶段：在真空度为10Pa下，在1h内升温至-10℃，保温8h；在1h内升温至0℃，保温8h，在1min内升温至10℃，保温2h，将预冻结段形成的冰升华除去牛心包膜中大部分水分；
再干燥阶段：在真空度为10Pa下，在1min内升温至20℃，保温3h，除去脱脂后的牛心包膜中的结合水分。
结论：本发明实施例提供的乳房补片在使用时，通过复溶获得具有致密层与疏松层的细胞外基质，在将该乳房补片植入乳房假体和机体之间时，能够起到对假体的支撑固定作用，防止假体发生移位、下垂，能够减少机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，进一步地，在将该乳房补片植入乳房假体和机体之间时，将所述疏松层朝向机体，所述致密层朝向乳房假体，所述乳房补片的疏松层表面更有利于细胞的粘附、迁入与组织的生长，能够诱导机体再生，进一步减小术后并发症，所述乳房补片经过交联，能够提高所述乳房补片的致密程度，提高乳房补片的机械强度，延长乳房补片在体内的降解时间，能够最大程度上减小包膜挛缩的发病率，减小术后并发症。
实施例2
S101、将羊小肠粘膜表面的脂肪组织以及结缔组织剔除，清洗表面异物，获得初步处理后的羊小肠粘膜；
S102、将初步处理后的羊小肠粘膜用60％的盐酸溶液浸泡0.5h进行消毒，再用磷酸盐缓冲液振荡清洗2h，再用水清洗至pH值为7.0。
S103、将步骤S102的羊小肠粘膜用5倍量的0.5M的氢氧化钠浸泡3h，获得脱细胞后的羊小肠粘膜；
S104、用三份质量为所述脱细胞后的羊小肠粘膜15倍的磷酸盐缓冲液分别对所述脱细胞后的羊小肠粘膜清洗12min，使得所述羊小肠粘膜上水的pH值为8.0；
S105、将步骤S104所获得的羊小肠粘膜用5倍量的异丙醇振荡脱脂4h，获得脱脂后的羊小肠粘膜，所述脱脂后的羊小肠粘膜的脂肪含量为1％；
S106、用五份质量为所述脱脂后的羊小肠粘膜15倍的水分别对所述脱脂后的羊小肠粘膜清洗10min，使得所述羊小肠粘膜上的异丙醇的含量为80μg/g；
S107、将脱脂后的羊小肠粘膜的致密层朝下平铺于不锈钢板上，在所述羊小肠粘膜的疏松层表面用钢板进行往返性刮除4-5次，冷冻干燥，得到乳房补片。
其中，所述冷冻干燥具体为：
预冻结段：将脱脂后的羊小肠粘膜在-40℃冻结3h，脱脂后的羊小肠粘膜中的水分冻结为冰；
升华阶段：在真空度为30Pa下，在1h内升温至-10℃，保温10h；在1h内升温至0℃，保温10h，在1min内升温至10℃，保温3h，将预冻结段形成的冰升华除去脱脂后的羊小肠粘膜中大部分水分；
再干燥阶段：在真空度为30Pa下，在1min内升温至20℃，保温5h，除去脱脂后的羊小肠粘膜中的结合水分。
结论：本发明实施例提供的乳房补片在使用时，通过复溶获得具有致密层与疏松层的细胞外基质，在将该乳房补片植入乳房假体和机体之间时，能够起到对假体的支撑固定作用，防止假体发生移位、下垂，能够减少机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，进一步地，在将该乳房补片植入乳房假体和机体之间时，将所述疏松层朝向机体，所述致密层朝向乳房假体，所述乳房补片的疏松层经过机械刮除更加粗糙，能够加快细胞的粘附、迁入与组织的生长，诱导机体再生，减小术后并发症。
实施例3
S101、将牛腹膜表面的脂肪组织以及结缔组织剔除，清洗表面异物，获得初步处理后的牛腹膜；
S102、将初步处理后的牛腹膜用90％的盐酸乙醇溶液浸泡2h进行消毒，再用磷酸盐缓冲液振荡清洗1.5h，再用水清洗至pH值为8.0。
S103、将步骤S102的牛腹膜用5倍量的0.8M的氢氧化钠浸泡2h，获得脱细胞后的牛腹膜；
S104、用三份质量为所述脱细胞后的牛腹膜15倍的纯化水分别对所述脱细胞后的牛腹膜清洗15min，使得所述牛腹膜上水的pH值为7.0；
S105、将步骤S104所获得的牛腹膜用5倍量的异丙醇振荡脱脂3h，获得脱脂后的牛腹膜，所述脱脂后的牛腹膜的脂肪含量为2％；
S106、用五份质量为所述脱脂后的牛腹膜15倍的水分别对所述脱脂后的牛腹膜清洗12min，使得所述牛腹膜上的异丙醇的含量为90μg/g；
S107、将脱脂后的牛腹膜的致密层表面朝上平铺于一器具中，边缘向上折起形成一小凹槽，将交联剂倒在所述致密层表面，使得所述交联剂刚好覆盖所述致密层表面，交联反应24h，交联之后将15倍量的水分为10份，分别对所述致密层表面清洗10min。
S108、将脱脂后的牛腹膜的致密层朝下平铺于微孔板上，在所述牛腹膜的疏松层表面用钢板进行往返性刮除4-5次，冷冻干燥，得到乳房补片。
其中，所述冷冻干燥具体为：
预冻结段：将脱脂后的牛腹膜在-35℃冻结2h，脱脂后的牛腹膜中的水分冻结为冰；
升华阶段：在真空度为20Pa下，在1h内升温至-10℃，保温9h；在1h内升温至0℃，保温9h，在1min内升温至10℃，保温2.5h，将预冻结段形成的冰升华除去脱脂后的牛腹膜中大部分水分；
再干燥阶段：在真空度为20Pa下，在1min内升温至20℃，保温4h，除去脱脂后的牛腹膜中的结合水分。
结论：本发明实施例提供的乳房补片在使用时，通过复溶获得具有致密层与疏松层的细胞外基质，在将该乳房补片植入乳房假体和机体之间时，能够起到对假体的支撑固定作用，防止假体发生移位、下垂，能够减少机体的排斥反应，降低包膜挛缩的发病率，减轻患者痛苦，进一步地，在将该乳房补片植入乳房假体和机体之间时，将所述疏松层朝向机体，所述致密层朝向乳房假体，所述乳房补片的疏松层经过机械刮除更加粗糙，能够加快细胞的粘附、迁入与组织的生长，诱导机体再生，减小术后并发症，所述乳房补片经过交联，能够提高所述乳房补片的致密层的致密程度，提高乳房补片的机械强度，延长乳房补片在体内的降解时间，能够最大程度上减小包膜挛缩的发病率，减小术后并发症。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。