本发明属于食品或医药领域，具体涉及一种葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法及其应用。
背景技术：
葛根，为豆科植物葛的干燥根，味甘、辛，性平，归脾、胃、肺、膀胱经；有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻之功；常用于表证发热，项背强痛，麻疹不透，热病口渴，阴虚消渴，热泻热痢，脾虚泄泻。葛根除葛根淀粉外，还含有多种活性成分，如葛根黄酮，其代表成分为葛根素等，葛根具有广泛的药理作用，如扩张血管、降糖降脂、益智、降压和解酒等，因此，葛根除主要用于提取葛根淀粉外，近年来提取利用葛根淀粉母液中的葛根黄酮、葛根蛋白等的研究报道也很多，主要的提取方法有碱提酸沉、醇提大孔树脂柱层析或有机滤膜过滤，水提大孔树脂柱层析或有机滤膜过滤等方法，但碱提酸沉葛根淀粉母液中的有效物质提取效率较低，营养价值不高；醇提需要耗费大量的有机溶剂，成本高且有机溶剂难以管理；水提由于提取液中含有大量的蛋白质等“胶质”成分，容易堵塞大孔树脂或滤膜，导致其吸附效率下降、使用寿命不长、提取成本高、工业应用困难。如陈全斌等(食品科学，2004,25(1)：91)报道了“磨浆法从葛根中提取黄酮的研究——生产葛根淀粉废水的综合利用”，直接用大孔树脂从生产葛根淀粉废水中富集到的黄酮含葛根素39％，树脂寿命极短；专利技术(cn01127622.3)公开了一种从生产葛粉的废水中提取葛根素及提高其产量的方法，该方法直接以葛根淀粉废水上柱，无法解决大孔树脂寿命和使用周期的问题；专利技术(cn201510344920.x)发明提供了一种高效同步提取葛根淀粉和黄酮的方法，依然是直接以葛根淀粉废水上柱，仍未解决大孔树脂寿命和使用周期的问题。都贵龙等(江苏农业科学，2006，(4)：127)文中专门提到“除杂这一步非常关键,否则溶液中粘附性物质容易使树脂的吸附性能迅速下降,致使异黄酮的得率下降过快”，但是，该文献并未报道如何除杂。
冼莹莹(广西大学硕士学位论文，2013；作物研究，2014,28(1)：63)报道了一种葛根淀粉工业废水中的葛根素的回收及分离纯化研究，通过加入0.1g/l的十二水硫酸铝钾为絮凝剂，对葛粉工业废水进行化学絮凝，可以将废水中蛋白质的去除率提高至43.96％，然后用大孔树脂吸附，80％的乙醇洗脱，淀粉废水中葛根素收率达到89.2％，产品纯度达到53.9％，大孔树脂使用寿命最高延长至5个周期。
到目前为止，由于葛根淀粉母液中含有大量的蛋白质等胶质成分，现有的以葛根淀粉母液为原料制备葛根蛋白提取物和/或葛根黄酮存在较高的技术难度，难以在实际生产中使用。本发明针对现有的技术缺陷，开发了一种以葛根淀粉母液为原料，先提取葛根提取物，再提取葛根黄酮的新技术，目前尚未见报道。
技术实现要素：
本发明的一个目的是提供一种葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法。所述方法一方面高效地将葛根蛋白质和其他大分子成分沉淀下来，显著提高了葛根提取物的收率，作为葛根代用品疗效更为接近；另一方面大大提高了大孔树脂的吸附效率，延长了使用寿命，降低生产成本及葛根黄酮的提取难度。
本发明的另一个目的是提供本发明方法制备的葛根提取物和/或葛根黄酮作为葛根的代用品，用于抗氧化、扩张血管、降糖、降脂、降压、益智作用、解酒等相关功能的食品、保健食品和药品的制备。
为实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
一种葛根提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤(1)：以重量计，向葛根淀粉母液中加入葛根淀粉母液重量0.01-5％的沉淀剂，搅拌均匀，加热到50-100℃，保温0-60分钟；
步骤(2)：将步骤(1)所得溶液冷却到0-80℃，静置0.1-24h，过滤或离心，取固体物，所得固体物为葛根提取物。
根据本发明葛根提取物的制备方法，步骤(2)所得葛根提取物可以进一步经过干燥、粉碎制备成葛根提取物产品。
一种葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，包括以下步骤：
步骤(1)：以重量计，向葛根淀粉母液中加入葛根淀粉母液重量0.01-5％的沉淀剂，搅拌均匀，加热到50-100℃，保温0-60分钟；
步骤(2)：将步骤(1)所得溶液冷却到0-80℃，静置0.1-24h，过滤或离心，得到上清液和固体物，所得固体物为葛根提取物；
步骤(3)：将大孔树脂与步骤(2)获得的上清液按照体积比1:1-1000的比例和0.1-5％(倍树脂体积/分钟)的速度上柱，先用0.1-20倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用0.1-20倍树脂体积的极性有机溶剂洗脱，收集极性有机溶剂部分，浓缩得到葛根黄酮。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(1)中所述的葛根淀粉母液是指去除了葛根淀粉的母液。如将葛根洗净、粉碎、过80目筛得到的葛根浆除渣、除泥沙、除葛根淀粉后得到的母液，也可以是葛根淀粉生产中产生的废水。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(1)中所述的沉淀剂选自钙盐、镁盐、铝盐、醋酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸、葡萄糖酸内酯。优选地，所述沉淀剂选自硫酸钙、硫酸镁、酒石酸、苹果酸、柠檬酸和葡萄糖酸内酯。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，以重量计，步骤(1)中所述沉淀剂的加入量为葛根淀粉母液重量的0.05％-2％(重量/重量)。优选地，以重量计，步骤(1)中所述沉淀剂的加入量为葛根淀粉母液重量的0.1％-0.5％(重量/重量)。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(1)中加热至60-90℃；优选地，步骤(1)中加热至70-90℃。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(1)中保温2-20分钟；优选地，步骤(1)中保温5-10分钟。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(2)中步骤(1)所得物冷却至10-60℃；优选地，步骤(2)中步骤(1)所得物冷却至20-40℃。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(2)中步骤(1)所得物静置1-6h；优选地，步骤(2)中步骤(1)所得物静置2-3h。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(2)中得到的葛根提取物可以进一步干燥、粉碎得到葛根提取物产品。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(3)中大孔树脂与步骤(2)获得的上清液按照体积比1:5-200的比例上样；优选地，步骤(3)中大孔树脂与步骤(2)获得的上清液按照体积比1:10-50的比例上样。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(3)中洗脱用水的用量为1-5倍树脂体积。优选地，步骤(3)中洗脱用水的用量为2-3倍树脂体积。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(3)中所述的极性有机溶剂选自10-100％甲醇、10-100％乙醇、丙醇和丙酮中的至少一种。优选地，所述的极性有机溶剂选自10-100％乙醇。进一步优选地，所述的极性有机溶剂选自30-90％乙醇。更进一步优选地，所述的极性有机溶剂选自60-80％乙醇。
根据本发明的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，步骤(3)中极性有机溶剂的用量为1-5倍树脂体积。优选地，步骤(3)中极性有机溶剂的用量为2-3倍树脂体积。
在一些具体的实施方案中，本发明提供一种葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，包括以下步骤：
步骤(1)：以重量计，向葛根淀粉母液中加入葛根淀粉母液重量0.05-2％的沉淀剂，搅拌均匀，加热到60-90℃，保温2-20分钟，所述的沉淀剂选自硫酸钙、硫酸镁、酒石酸、苹果酸、柠檬酸和葡萄糖酸内酯；
步骤(2)：将步骤(1)所得物冷却至20-40℃，静置1-6h，过滤或离心，得到上清液和固体物，所得固体物即为葛根提取物；
步骤(3)：将大孔树脂与步骤(2)获得的上清液按照体积比1:5-200的比例和0.1-5％树脂体积/分钟的速度装柱，先用1-5倍树脂体积的水洗涤，然后用1-5倍树脂体积的10-100％乙醇洗脱，收集乙醇部分，浓缩得到葛根黄酮。
在另一些具体的实施方案中，本发明提供一种葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，包括以下步骤：
步骤(1)：以重量计，向葛根淀粉母液中加入葛根淀粉母液重量0.1-0.5％的沉淀剂，搅拌均匀，加热到70-90℃，保温3-5分钟，所述的沉淀剂选自硫酸钙、硫酸镁、酒石酸、苹果酸、柠檬酸和葡萄糖酸内酯；
步骤(2)：将步骤(1)所得物冷却至20-40℃，静置2-3h，过滤或离心，得到上清液和固体物，所得固体物即为葛根提取物；
步骤(3)：将大孔树脂与步骤(2)获得的上清液按照体积比1:10-50的比例和0.1-5％(树脂体积/分钟)的速度装柱，先用2-3倍树脂体积的水洗涤，然后用2-3倍树脂体积的60-80％乙醇洗脱，收集乙醇部分，浓缩得到葛根黄酮。
本发明提供的葛根提取物和/或葛根黄酮的制备方法，可以将蛋白质等胶质成分的沉淀率提高至95％以上，不仅提高的葛根提取物的收率和疗效，而且便于下一步用大孔树脂提取葛根黄酮，大孔树脂使用寿命可以延长至100个周期以上，且葛根黄酮的回收率可高达95％，纯度可以提高至80％。
本发明的方法制备的葛根提取物和/或葛根黄酮可以作为葛根的代用品，用于抗氧化、扩张血管、降糖、降脂、降压、益智作用、解酒等相关功能的食品、保健食品和药品的生产和配料，具有重要的经济价值。如将本发明的方法制备的葛根提取物干燥、粉碎制得的葛根提取物产品和/或本发明方法制备的葛根黄酮与药学上可接受的载体一起制成药物制剂，所述剂型可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、粉针剂、注射剂、滴丸、缓释剂、控释剂、纳米制剂、包合物等。所述的药学上可接受的载体包括填充剂、崩解剂、润湿剂、抗氧剂、螯合剂、表面活性剂、矫味剂、螯合剂、ph调节剂、色素等。本发明方法制备的葛根提取物和/或葛根黄酮与药学上可接受的载体制成药物制剂可以通过口服、喷雾、舌下含服、静脉注射、静脉输注、肌内注射、腹腔内给药、皮内给药等途径给药。
本发明方法制备的葛根黄酮和/或葛根黄酮可以与食品添加剂制备成功能性食品或保健食品，也可以与其它营养物质联合用于功能性食品或保健食品的加工制备，发挥抗氧化、扩张血管、降糖、降脂、降压、益智作用、解酒等食疗功能。
此外，通过本发明的方法，可以显著降低葛根淀粉废水的bod和cod，具有重要的环保意义。
具体实施方式
实施例1葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.01％(重量/重量)的硫酸钙，搅拌均匀；升温到100℃，保温0分钟；冷却24小时到0℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；将葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂与上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：1的比例和5％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用20倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用20倍树脂体积的100％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为96％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到95％。
以葛根素为对照，检测葛根提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素4.1％，葛根黄酮含葛根素65％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量86.3％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率85％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率66％。
实施例2葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加5％(重量/重量)的硫酸镁，搅拌均匀；升温到50℃，保温60分钟；静止0.1小时到40℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂与上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：1000的比例和0.01％(倍树脂体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用0.1倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用0.1倍树脂体积的10％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为97％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到96％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素3.5％，葛根黄酮含葛根素21.3％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量56.4％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率81％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率62％。
实施例3葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；葛根淀粉母液中添加1％(重量/重量)的硫酸铝，搅拌均匀；升温到60℃，保温10分钟；冷却6小时到40℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂与上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：100的比例和0.1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用1倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用1倍树脂体积的40％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为98％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到96％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素4.8％，葛根黄酮含葛根素13.3％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量21.5％。以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率83％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率64％。
实施例4葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.1％(重量/重量)的苹果酸，搅拌均匀；升温到70℃，保温20分钟；冷却2小时到60℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照大孔树脂：上清液溶液1：50的比例和1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用5倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用5倍树脂体积的10％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为96％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到95％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素7.5％，葛根黄酮含葛根素31.4％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量60.5％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率86％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率71％。
实施例5葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.2％(重量/重量)的柠檬酸，搅拌均匀；升温到80℃，保温5分钟；冷却12小时到20℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：200的比例和1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用10倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用10倍树脂体积的80％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为95％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到96％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素5.7％，葛根黄酮含葛根素54％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量76％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率82％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率64％。
实施例6葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.2％(重量/重量)的柠檬酸，搅拌均匀；升温到80℃，保温5分钟；冷却12小时到20℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：200的比例和1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用10倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用10倍树脂体积的80％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为95％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到95％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素5.7％，葛根黄酮含葛根素54％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量75％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率80％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率60％。
实施例7葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.05％(重量/重量)的醋酸，搅拌均匀；升温到50℃，保温40分钟；冷却12小时到30℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：50的比例和1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用15倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用15倍树脂体积的20％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为96％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到95％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素5.4％，葛根黄酮含葛根素58％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量81％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率85％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率62％。
实施例8葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.5％(重量/重量)的葡萄糖酸内酯，搅拌均匀；升温到80℃，保温5分钟；冷却6小时到40℃，过滤，得到葛根提取物和上清液；葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照体积比大孔树脂：上清液1：100的比例和0.5％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，利用5倍树脂体积的水洗涤树脂，然后利用5倍树脂体积的60％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为95％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到95％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素5.5％，葛根黄酮含葛根素36％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量52％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率81％；重复上清液上柱分离100个周期，大孔树脂吸附率63％。
实施例9葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；向葛根淀粉母液中添加0.1％的苹果酸，搅拌均匀；过滤，得到葛根提取物和上清液，将葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照大孔树脂：上清液溶液1：50的比例和1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用5倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用5倍树脂体积的10％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为46％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到67％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素4.5％，葛根黄酮含葛根素13.5％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量26.4％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率41％；重复上清液上柱分离20个周期，大孔树脂吸附率24.7％。
实施例10葛根提取物和葛根黄酮的制备
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；将葛根淀粉母液升温到90℃，保温20分钟；冷却2小时到40℃，过滤，得到葛根提取物和上清液，葛根提取物干燥，粉碎，得到葛根提取物产品。将大孔树脂和上清液按照大孔树脂：上清液溶液1：50的比例和1％(柱子体积/分钟)的速度上柱；上柱完成后，用5倍树脂体积的水洗涤树脂，然后用5倍树脂体积的10％乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
溶液中蛋白质的浓度以牛血清为对照，通过280nm波长吸收检测，根据沉淀前后葛根淀粉母液中蛋白质的含量之比，计算蛋白质的沉淀效率；葛根淀粉母液中蛋白质的沉淀率为54％。
以葛根素为对照，分析溶液中黄酮的浓度，根据上柱前葛根淀粉母液中葛根黄酮的量和得到的葛根黄酮的量之比，计算葛根黄酮的收率；葛根黄酮的收率达到56％。
以葛根素为对照，检测提取物和葛根黄酮中葛根素和黄酮的含量；hplc分析，葛根提取物含葛根素3.8％，葛根黄酮含葛根素12.5％，总黄酮(按葛根素、大豆苷、大豆苷元计算)含量24.4％。
以葛根素为对照，分析葛根淀粉母液上柱前后溶液中葛根黄酮浓度之比，计算大孔树脂吸附效率；重复上清液上柱分离10个周期，大孔树脂吸附率45％；重复上清液上柱分离25个周期，大孔树脂吸附率31.2％。
对比实施例1根据专利(cn201010555037.2)工艺提取葛根提取物和葛根黄酮
将100公斤新鲜葛根原料加水清洗，粉碎，加水磨浆，料液比为1∶10；采用过滤方法筛粉排渣，分别得到葛根淀粉浆液、主含纤维的葛根残渣，将葛根淀粉浆液离心分离，去除蛋白质，分离出废水，废水收集，将废水静置沉淀，取上清液，按照树脂比溶液1：100的比例和3％柱子体积的速度上101大孔树脂柱；上柱完成后，利用2倍水洗涤树脂，然后利用3倍80％的乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
利用实施例1的公式计算蛋白质的沉淀率为15.6％；利用实施例1的方法计算树脂的吸附效率，葛根废水上清液重复上柱10次，计算吸附率为21.5％。
对比实施例2根据专利(201510344920x)工艺提取葛根提取物和葛根黄酮
1)将葛根于水中浸泡40-60分钟；2)打浆，以料液质量比1:6加入ph为8.5的石灰水，于18-25℃下，用超声功率为100w的超声波处理20-30分钟，再过120目的滤网，取残渣和滤浆；3)对步骤2)所得残渣进行水洗，过滤，收集滤液；4)对步骤2)所得滤浆进行离心沉淀，得到上层清液和下层沉淀物，对所得下层沉淀物进行水洗，调节ph为中性，干燥，得到葛根淀粉；5)将步骤3)所得滤液和步骤4)所得上层清液合并，按照树脂比溶液1：100的比例和3％柱子体积的速度上101大孔树脂柱；上柱完成后，利用2倍水洗涤树脂，然后利用3倍80％的乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
利用实施例1的公式计算蛋白质的沉淀率为21.2％；利用实施例1的方法计算树脂的吸附效率，葛根废水上清液重复上柱10次，计算吸附率为31.3％。
对比实施例3根据冼莹莹(广西大学硕士学位论文，2013)工艺提取葛根提取物和葛根黄酮
100公斤葛根洗净后，粉碎过80目，得葛根浆；葛根浆除渣、除泥沙、分离葛根淀粉，得到葛根淀粉和葛根淀粉母液；添加0.1g/l十二水硫酸铝钾作为絮凝剂，过滤得到固体物和上清液，将大孔树脂和上清液按照体积比树脂：上清液1：100的比例和3％柱子体积的速度上101大孔树脂柱；上柱完成后，利用2倍水洗涤树脂，然后利用3倍80％的乙醇洗脱，回收乙醇，得到葛根黄酮。
利用实施例1的公式计算蛋白质的沉淀率为45.5％；利用实施例1的公式计算树脂的吸附效率，葛根废水上清液重复上柱10次，计算吸附率为46.8％。