镰形棘豆总黄酮在用于制备治疗糖尿病药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明公开镰形棘豆总黄酮在用于制备治疗糖尿病药物中的应用，属于天然药物 化学技术领域。
【背景技术】
[0002] 镰形棘豆（OxytropisfalcataBunge)是豆科棘豆属的一种，属于多年生草本植 物，藏药称为"俄大夏"，在我国主要分布在西部地区，包括青海、西藏、甘肃、四川等地。全草 入药，主要功效有清热解毒、愈创生肌、止血等，可以治疗湿疹、炎症、黄水、疫疠、疥疮、肿痛 等 [1]，被称为"草药之王"。既往研究表明，镰形棘豆药材氯仿提取物、总黄酮苷元以及主要 黄酮化合物具有较强的抑菌、抗炎、抗氧化的作用 [2' 3]。
[0003] 本课题选用的镰形棘豆总黄酮，是从藏药镰形棘豆中提取的有效活性成分。研究 发现，镰形棘豆内大量的黄酮类化合物及其衍生物主要以黄酮苷、黄酮及二氢黄酮、黄酮 醇、查耳酮、二氢查耳酮、异黄烷及黄烷酮等形式存在，具有较强的抗炎、抗氧化作用。镰形 棘豆是一种比较重要的传统藏药材，在西藏资源丰富且药用价值较高，近年来虽然开展了 一些有关镰形棘豆化学成分的研究，但其药理作用研究仍然不足，很多研究尚处于初级阶 段，生物活性物质基础不明确，导致该药的临床应用受到限制，这对于开发我国藏药资源十 分不利。因此，加快研究该药材的药用价值，阐明其化学成分和药理活性，开发出疗效确切 稳定的新药是非常必要的。
[0004] 糖尿病是危害人类健康的常见慢性病之一，在我国已成流行趋势，据2009年全国 糖尿病调查结果显示，2009年我国农村人群糖尿病的发病率为8. 2%，城市人群为11. 4%， 糖尿病患者高达9200万，糖尿病前期患者1. 48亿，20岁以上成年人的糖尿病患病率平 均为9.7% [1°]。这些数字说明，糖尿病在中国的发病率很高，将给中国人民的生活和经 济带来巨大的损失。糖尿病的发病因素很多，机制复杂，研究表明，胰岛素抵抗（Insulin Resistance，IR)是糖尿病的发病基础。IR是指胰岛素作用的靶器官对胰岛素的敏感性下 降，产生的生物学效应低于正常状态，胰岛素的作用没有得到很好的发挥。目前认为，IR 与很多代谢性疾病有关，如高血压、高血脂、糖尿病、痛风等，是这些疾病的共同病理生理基 础。因此，研究改善胰岛素抵抗对于预防糖尿病等许多慢性疾病具有重要的意义。
[0005] 研究显示，肥胖是2型糖尿病的独立危险因素，由肥胖引起的脂肪组织分泌脂 肪因子失衡与2型糖尿病的发生关系密切。目前已发现的脂肪细胞因子主要有：瘦素 (Leptin)、脂联素（Adiponectin)、抵抗素（Resistin)、内脂素（Visfatin)、肿瘤坏死因 子-a(TNF-a)、白细胞介素-6等这些脂肪因子广泛作用于胰岛素靶细胞，通过影响胰岛 素细胞内信号转导，引起胰岛素抵抗而导致机体糖、脂代谢异常。因此，调节脂肪因子代谢 对于预防胰岛素抵抗、防止糖、脂代谢异常具有重要意义。
[0006]目前，西医在治疗胰岛素抵抗方面存在着较多局限性，最常见的是药物的副作用 使患者不能长期耐受，药物的不良反应及长期服用所产生的耐药性等。因此，纯植物药的开 发和应用具有很大的优势和广阔的市场前景。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是：提供了镰形棘豆总黄酮在用于制备治疗糖尿病药物中的应用。
[0008] 本发明还提供了镰形棘豆总黄酮在用于制备促进胰岛素、脂肪因子瘦素或者脂联 素分泌的药物中的应用。
[0009] 所述的治疗糖尿病药物的剂型是口服制剂。
[0010] 上述的药物制剂可以是将镰形棘豆总黄酮加入相应的辅料，制备成适合口服给 药。适合口服给药的药物制剂是指药学上口服给药的常规剂型包括片剂、粉剂、颗粒剂、胶 囊、滴丸、口服液、微丸剂等。优选为片剂、胶囊、滴丸剂。其中片剂包括素片、包衣片、缓释 片、分散片、肠溶片、含片、咀嚼片、泡腾片等；胶囊包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊、肠溶胶 囊等；微丸剂包括普通微丸、缓释微丸、肠溶微丸、控释微丸等。口服制剂中所含的药学上 常规的赋形剂如粘合剂包括羟丙甲纤维素、糊精、聚乙二醇、糖浆、阿拉伯胶、山梨醇、明胶 或聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂包括乳糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸等；压片润滑 剂包括硬酯酸镁、聚乙二醇等；崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉乙醇酸钠或微晶纤 维素；或药学上可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠等；矫味剂和甜味剂包括甜叶菊甙、 阿斯巴甜、甜菊素、木糖醇、薄荷醇、桔子香精等。制备方法采用本领域常规的制备方法。
[0011] 有益效果 镰形棘豆总黄酮具有较好地控制糖尿病的作用。
【附图说明】
[0012] 图1是正常对照组光镜下胰腺组织HE染色显微镜照片； 图2是模型组光镜下胰腺组织HE染色显微镜照片； 图3是镰形棘豆总黄酮低剂量组光镜下胰腺组织HE染色显微镜照片； 图4是镰形棘豆总黄酮中剂量组光镜下胰腺组织HE染色显微镜照片； 图5是镰形棘豆总黄酮高剂量组光镜下胰腺组织HE染色显微镜照片； 图6是吡咯列酮组光镜下胰腺组织HE染色显微镜照片； 以上照片都是放大100倍。
【具体实施方式】
[0013] 下面通过【具体实施方式】对本发明作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理 解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技 术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试 剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0014] 以下实施例中的镰形棘豆总黄酮的检测方法如下： 1、仪器与试药 超声波清洗器（SB-5200DTN)，紫外分光光度仪（UV-1800)，电子天平（CP22?)，芦丁 (中国药品生物制品检定所，批号=0080-9705)所用试剂均为分析纯。
[0015] 2、方法及结果 ①试剂配制： 5%NaN02溶液：精密称取亚硝酸钠5. 0014g，用蒸馏水定容至100ml容量瓶中； 10%A1(N03) 3溶液：精密称取硝酸铝10. 0094g，用蒸馏水定容至100ml容量瓶中； 4%NaOH溶液：精密称取氢氧化钠10. 0285g，用蒸馏水定容至250ml容量瓶中。
[0016] ②对照品溶液的配制： 取芦丁对照品适量(批号=0080-9705)，精密称定，用80vol. %的乙醇超声溶解，定容至 50ml容量瓶中，得到浓度为0. 0320mg.ml1的对照品溶液。
[0017] ③溶液的配制及含量测定 取样品粉末适量，精密称定； 加入80vol. %乙醇，超声提取，过滤，滤液定容至100ml容量瓶中，精密移取1. 0ml至 25ml容量瓶中，加入5%NaN02溶液1ml摇匀，振摇6min、10%A1 (N0 3) 3溶液1ml摇匀，振摇 6min、4%NaOH溶液10ml，加80vol. %的乙醇定容至刻度，摇勾，放置15min，于510nm波长 处测吸光度，按外标一点法计算含量。
[0018] 实施例1镰形棘豆总黄酮的提取 (一） 材料 1. 原料：镜形棘 2. 试剂：水，磷酸，氢氧化钠，乙酸乙酯，乙醇 (二） 方法 镰形棘豆原料4kg，加15倍量水(约60L)煮沸2小时，冷却，用滤布滤出残渣，水溶液再 浓缩至约20L。再将浓缩后的水提液置于50L的玻璃反应器中，加0. 3wt%磷酸（使pH为 2左右）于90°C搅拌水解3小时。水解结束后加氢氧化钠溶液调节pH值至中性。水解液 置萃取桶用等体积的乙酸乙酯萃取一次，再用等体积的乙酸乙酯-乙醇（5:2)萃取两次。第 一次的乙酸乙酯萃取液因不含黄酮而有较多叶绿素在回收溶剂后弃去。用乙酸乙酯-乙醇 混合溶剂萃取的萃取液浓缩至干，得总黄酮提取物。20kg镰形棘豆按以上工艺分5次提取， 最后得到约100克的总黄酮提取物。以芦丁计，提取得到的镰形棘豆总黄酮纯度为26. 58%。 本实施例提取得到的总黄酮供以下实施例中的药效试验使用。
[0019] 实施例2镰形棘豆总黄酮对2型糖尿病KKAy小鼠血糖及胰岛素抵抗的作用 以下实施例中采用自发性2型糖尿病动物模型KKAy小鼠，探讨以上实施例制备得到的 镰形棘豆总黄酮对糖尿病小鼠血糖和胰岛素抵抗的作用。
[0020] 目前，研究胰岛素抵抗公认的动物模型主要有：转基因型、遗传性、诱导型[4]。转基 因型动物模型是在动物原来遗传背景上，通过改变某种基因的表达建立的人类疾病的动物 模型。遗传型动物模型又称自发性动物模型，取自动物自发疾病，或由于基因突变定向培育 的模型。已有的遗传型胰岛素抵抗模型有Zucker肥胖大鼠、Wistar肥胖大鼠、db/db小鼠 和0LETF大鼠等。诱导型动物模型主要通过高脂高糖饮食或链脲佐菌素（STZ)和四氧嘧啶 等化学药品诱导建立的模型。上述三类模型相比，转基因型及遗传型动物模型比较接近人 类疾病的发病过程，模型稳定，但来源相对较少，饲养、繁殖条件严格，价格昂贵，应用和普 及有限。诱导型动物模型价格低廉，应用较广，但模型不稳定，成模条件难以控制，模型的科 学性较低。本课题选用的KKAy小鼠模型属于遗传型动物模型，是在KK小鼠的基础上转入 突变毛色基因（ay)而成，ay基因可引起代谢紊乱，出现肥胖、高血糖、脂质代谢紊乱和高胰 岛素血症等[