专利名称：镰形棘豆总黄酮在制备防晒用品中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于精细化工技术领域，涉及一种防晒化妆品，尤其涉及一种利用 从藏药镰形棘豆中提取的总黄酮作为活性成分制备的防晒化妆品。
背景技术：
紫外线可分为短波(190 280nm)、中波(2S0 320nm)和长波(320 400 nm)。短波紫外线波长最短，能量最强，但是它可被距地面25公里上空的臭氧 层吸收，不能到达地面，因而不会对皮肤造成晒伤。对皮肤造成晒伤的紫外线 波段主要有中波和长波。其中，中波紫外线透射能力可达地面，是导致皮肤晒 伤的主要波段，也是防晒的重点波段， 一般称之为"B区紫外线(UVB)"。它 可使皮肤表皮细胞内的核酸或蛋白质变性，发生急性皮炎，皮肤出现红肿或产 生痛感，严重的有红斑、水疤及脱皮现象。红斑反应一般在阳光直晒几个小时 内出现，数日后可逐渐消退。长波紫外线一般被称为"A区紫外线(UVA)"， 可渗透到真皮，这一波段一般不会晒红，但可晒黑，成为色素沉着的直接原因， 如形成雀斑、老年斑等。长波紫外线引起红斑的可能性仅为中波的千分之一， 但由于有很强的穿透力，到达身体皮肤的能量高达紫外线总能量的98%以上， 并对人体的作用有累积性，这种积累是不可逆的，引起难以控制的皮肤损伤。 所以长波紫外线助长中波对皮肤的伤害，促进皮肤衰老。目前人们逐渐认识到 紫外线的危害，因此，开发高效、安全、使用方便的天然防紫外线产品便受到 人们的重视。
植物黄酮类化合物的紫外吸收峰有两部分， 一是产生自肉桂酰部分的吸收 峰带I (300 400 nm)，在长波区；二是产生自苯甲酰部分的吸收峰带II (240 280 nm)，在短波区。具有消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛 细管、疏通微循环、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大脑及其他脏器细胞的功能， 能起到抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质 疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老等作用。
镰形棘豆(Oxj^rap^/a/cato 5w"ge)为豆科棘豆属的多年生无茎草本植物， 藏药称"莪大夏"。主要产于我国青海、甘肃南部、四川西部，生长在海拔2700 4300m的河滩、沙地、沟谷、山坡、灌木林、草甸，资源丰富。据《晶 珠本草》记载其以根及根茎或全草入药，被称为"草药之王"，是我国青藏高 原常用的民间草药之一。大量文献报道镰形棘豆的化学成分有黄酮类，生物碱 类和甾类等，其中黄酮类是镰形棘豆的主要化学成分。
采用大孔吸附树脂柱从镰形棘豆中提取的总黄酮(黄酮的含量在 10%~30%之间)，其组成成分是以鼠李拧檬素为代表的黄酮、黄酮醇、査尔酮 等。具有增加肾上腺皮质的功能，主要用于治疗慢性气管炎。但是，将从镰形 棘豆中提取的总黄酮对紫外线的防御功能方面的研究尚未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种从镰形棘豆中提取的总黄酮在制备防晒用品中 的应用。
一、紫外吸收性能的测试
由于镰形棘豆中提取的总黄酮的主要成分是鼠李拧檬素，其结构式如下
上述结构式中，3， 5， 4'位具有羟基，7位为甲氧基，即具有多个酚羟
基。这种多羟基结构有利于进行自身氧化达到清除自由基的作用；同时分子中
3，5位羟基和4位羰基以及C-吡喃酮环上的A-B双键是黄酮类化合物螯合金属 离子的功能基团，而且A-B双键所决定的平面结构增强了分子的稳定性，有 利于增强其抗氧化的活性，对紫外和可见光均显示强吸收。此外，黄酮结构中 的酚羟基具有还原性，其分子中的多个酚羟基可以作为H供体，这些结构特 性都赋予植物类黄酮具有清除皮肤中的自由基，避免自由基对细胞的损伤等作 用。
经紫外扫描测试，从镰形棘豆中提取的总黄酮在240 400nm的波段间有 较强的紫外吸收。
4二、动物实验
下面通过具体的动物实验说明本发明中由镰形棘豆总黄酮为主要成分的 防晒霜的防紫外线辐射能力。
1、 实验目的研究由镰形棘豆总黄酮为主要成分的防晒霜的防紫外线辐 射能力。
2、 实验条件三级动物实验室，室温20 25。C，空调恒温。
3、 实验对象动物SD大鼠60只，体重200士2 g ，由兰州大学医学部动物 实验中心提供，合格证号SCXK (甘)2009-0004 。
4、 药材及仪器镰形棘豆总黄酮提取物由实验室自制，临用前制成质量
分数为1%的水包油型(0/W)霜剂，涂抹剂量为10mg/cm2 。
Na2S (成都化学试剂厂)，戊巴比妥钠(北京通县育才精细化工厂)，电 子分析天平(赛多利斯有限公司)，SH4型紫外线光疗仪(上海希格玛高技术 有限公司)，光谱范围UVB(280 330腦)，辐射强度为llmw/cm2进行照射。
5、 试验方法及结果 (1)总黄酮的提取
将干燥、粉碎的藏药镰形棘豆植物用其质量为10倍的蒸馏水煎煮提取3 次、过滤、干燥；精密称取干燥物3.0g，用20倍量蒸馏水溶解，上样于20mL D-101型大孔吸附树脂柱(柱径柱高-l: 4)。先以蒸馏水冲洗上述大孔树脂， 再用5 %乙醇洗至无色，然后用60 %乙醇洗脱充分，收集60 %乙醇洗脱液、 干燥得总黄酮提取物。 (2)实验方法
大鼠腹腔注射3%的戊巴比妥钠进行麻醉，麻醉后用弯剪剪去背部适当 面积的长毛，再用棉花蘸取10c/。Na2S溶液涂于大鼠背部进行脱毛，脱毛后皮 肤恢复1 2周。随机将其分成空白对照组、空白基质对照组、UVB对照组、UVB+ 空白基质组、UVB+阳性对照组(市售防晒霜)和UVB+1 %药物组，每组各 IO只。
UVB+空白基质组、UVB+阳性对照组(市售防晒霜)和UVB+药物组， 麻醉后分别以10mg/cm2剂量均匀涂抹。半小时后与UVB对照组置于紫外灯下 (距灯20cm)照射10min，连续照射4天，每天观察紫外灯照射后大鼠背部颜 色的变化。空白对照组不做紫外线照射处理，空白基质对照组只涂抹空白霜剂 不照射。实验结束后，颈椎脱臼法处死各组大鼠，取背部皮肤用体积分数为10% 福尔马林固定，脱水，石蜡包埋，切片，HE染色，显微镜下观察，拍照。(3)实验结果
实验发现，空白基质对照组和空白对照组的大鼠背部皮肤光滑，细腻，即 无过敏反应。UVB对照组大鼠背部皮肤的颜色变红，发生溃烂；UVB+空白基
质组大鼠背部皮肤也变红并发生溃烂，UVB+阳性对照组(市售防晒霜)和 UVB+1%药物组大鼠背部皮肤接近空白对照组。见图l 。
从病理切片中可以看出空白对照组和空白基质对照组皮肤各层纹理清晰， 无炎症反应；UVB对照组表皮增厚，角化过度，灶状角化不全；角质层血桨 渗出；棘层肥厚，局部可见微脓肿形成；真皮浅层水肿出血，有较多的中心粒 细胞浸润；UVB+空白基质组均出现了与UVB对照组相同的症状，但症状较 轻；UVB+阳性对照组(市售防晒霜)禾n UVB+1%药物组仅表现出表皮和角 质层略有增厚，偶见炎症。如图2 。
上述实验证明，镰形棘豆总黄酮具有显著的防御紫外线辐射的能力，并且 该防晒霜无过敏反应。同时，实验表明，随着霜剂中药物含量的增加，其防紫 外线损伤效果也增加。
三、防晒霜的制备
由于，镰形棘豆总黄酮具有显著的防御紫外线辐射的能力，因此，可以作 为防晒的有效活性成分，用于制备防晒用品。在防晒用品种，使用最为广泛的 是防晒霜，因此，以从镰形棘豆中提取的总黄酮为活性成分，采用制备霜剂化 妆品的常规基质和工艺制备成防晒霜。其具体配方和制备工艺如下
1、配方以重量百分比计
油相硬脂酸 5~10%
液体石蜡 10~20%
白凡士林 5~10%
司盘 1~4%
尼泊金 0.01 1%
水相十二烷基磺酸钠 1 5%
三乙醇胺 2 6%
甘油 4~10% 镰形棘豆总黄酮水提物1 6%
去离子水 余量
2、制备工艺将油相、水相中的各成分分别混合后，分别置于60。C 85 。C水浴锅中溶解，保温；同时研钵也置于水浴锅上保温。当油相、水相、研钵三者都处于60。C 85。C时，将水相在研磨下缓慢倒入油相，并继续向同方向研 磨，直到霜剂成形，冷却至室温时出料即可。
上述制备的防晒霜采用紫外分光光度法测试，其防晒指数(SPF值)在 25 40。
四、临床试验
采用上述制备的SPF值为25的防晒霜，对不同肤质的人群进行临床试验。
1、 实验目的观察镰形棘豆总黄酮防晒霜的确切疗效和毒副反应。
2、 实验对象及方法从临床中筛选出60名紫外线损伤患者(日光性皮炎 患者30人，日光疹患者30人)，将患处分为两部分， 一部分涂抹市售防晒霜， 另一部分涂抹镰形棘豆总黄酮防晒霜。通过观察患者皮肤变化来确定镰形棘豆 总黄酮防晒霜的疗效和毒副反应。
3、 实验结果
日光性皮炎患者30人，男性15人，女性15人。治疗前皮肤呈弥漫性红斑， 严重者可见水肿和水泡。涂抹两种防晒霜后，涂抹镰形棘豆总黄酮防晒霜的 75%患者两周后红斑量明显减少、水肿减轻、水泡结痂脱落，25%患者红斑量 略有减少、水肿减轻、大多数水泡结痂脱落；涂抹市售防晒霜的60%患者两周 后红斑量略有减少、水肿减轻、水泡结痂脱落，40%患者红斑量减少不明显、 水肿略有减轻、少数水泡结痂脱落。
日光疹患者30人，男性10人，女性20人。治疗前皮肤皮疹呈多形性，如红 斑、水肿性红斑、丘疹、痒疹等。患者有明显瘙痒或烧灼痒感。涂抹两种防晒 霜后，涂抹镰形棘豆总黄酮防晒霜的80%患者两周后红斑明显减少，瘙痒或烧 灼痒感消失，20%患者红斑量略有减少、瘙痒或烧灼痒感明显减轻；涂抹市售 防晒霜的70%患者两周后红斑量略有减少、瘙痒或烧灼痒感消失，30%患者红 斑量略有减少、瘙痒或烧灼痒感减轻。在整个临床实验过程中未出现过敏及其 他不良反应。
通过上述临床试验，说明本发明制备的防晒霜有很好的抗紫外线能 力，对各种肤质的皮肤均具有良好的防晒效果。同时也证明此防晒霜无过 敏及其他不良反应。
图1为本发明防晒霜对大鼠紫外线损伤的防护效果图 (a)空白对照组 (b)空白基质对照组 (c) UVB对照组
7(d) UVB+空白基质组 (e) UVB+阳性对照组(f) UVB+1 %药物组
图2为本发明防晒霜对大鼠紫外线损伤的病理切片图 (a)空白对照组 (b)空白基质对照组 (c) UVB对照组
(d) UVB+空白基质组 (e) UVB+阳性对照组(f) UVB+1 %药物组
具体实施例方式
下面通过具体实施例对本发明防晒霜的制备作详细说明。各实施例中采用 的镰形棘豆总黄酮可通过以下方法制备而得
将干燥、粉碎的藏药镰形棘豆植物用其质量为10倍的蒸馏水煎煮提取3 次、过滤、干燥；精密称取干燥物3.0g，用20倍量蒸馏水溶解，上样于20mL D-101型大孔吸附树脂柱(柱径柱高=1:4);先以蒸馏水冲洗上述大孔树脂， 再用5%乙醇洗至无色，然后用60%乙醇洗脱充分，收集60%乙醇洗脱液， 干燥得总黄酮提取物。
实施例l、防晒霜的制备
配方以重量百分比计
硬脂酸8%
液体石蜡15%
白凡士林8%
司盘1.5%
尼泊金0.02%
十二烷基磺酸钠3%
三乙醇胺2%
甘油5%
镰形棘豆总黄酮5%
去离子水余量
制备工艺将油相、水相的各成分分别混合后，置于6(TC 85。C水浴锅中 溶解，保温，同时研钵也置于水浴锅上保温。当油相、水相、研钵三者都处于 6(TC 85"C时，将水相在研磨下缓慢倒入油相，并继续向同方向研磨，直到霜 剂成形，冷却至室温时出料即可。
上述制备的防晒霜采用紫外分光光度法测试，其防晒指数SPF值 40。
实施例2、防晒霜的制备
配方以重量百分比计硬脂酸8%
液体石蜡15%
白凡士林8%
司盘1.5%
尼泊金0.02%
十二垸基磺酸钠3%
三乙醇胺2%
甘油5%
镰形棘豆总黄酮1 %
去离子水余量
制备工艺将油相、水相中的各成分分别混合后，置于6(TC 85t:水浴锅 中溶解，保温，同时研钵也置于水浴锅上保温。当油相、水相、研钵三者都处 于6(TC 85X:时，将水相在研磨下缓慢倒入油相，并继续向同方向研磨，直到 霜剂成形，冷却至室温时出料即可。
上述制备的防晒霜采用紫外分光光度法测试，其防晒指数SPF值为30。
实施例3、防晒霜的制备
配方以重量百分比计
水相:
硬脂酸8%
液体石蜡15%
白凡士林8%
司盘1.5%
尼泊金0.02%
十二垸基磺酸钠3%
三乙醇胺2%
甘油5%
镰形棘豆总黄酮0.2 %
去离子水余量
制备工艺将油相、水相的各成分分别混合后，置于6(TC 85'C水浴锅中 溶解，保温，同时研钵也置于水浴锅上保温。当油相、水相、研钵三者都处于 6CrC 85"C时，将水相在研磨下缓慢倒入油相，并继续向同方向研磨，直到霜 剂成形，冷却至室温时出料即可。
上述制备的防晒霜采用紫外分光光度法测试，其防晒指数SPF值为25。
权利要求
1、镰形棘豆总黄酮在制备防晒用品中的应用。
2、 如权利要求1所述镰形棘豆总黄酮在制备防晒用品中的应用，其特征 在于以镰形棘豆总黄酮为活性成分，采用制备霜剂化妆品的常规基质和工艺 制备成防晒霜。
3、 如权利要求2所述镰形棘豆总黄酮在制备防晒用品中的应用，其特征在于所述防晒霜由以下配方和工艺制备而成配方以重量百分比计油相硬脂酸 5 10%液体石蜡 10~20%白凡士林 5~10%司盘 1 4%尼泊金 0.01 1%水相十二烷基磺酸钠 1~5%三乙醇胺 2 6%甘油 4~10% 镰形棘豆总黄酮水提物0.2~6%去离子水 余量工艺将油相、水相中的各成分分别混合后，置于6(TC 85。C水浴锅中溶 解，保温，同时研钵也置于水浴锅上保温；当油相、水相、研钵三者都处于60 "C 85。C时，将水相在研磨下缓慢倒入油相，并继续同方向研磨，直到霜剂成 形，冷却至室温时出料即可。
4、如权利要求2或3所述镰形棘豆总黄酮在制备防晒用品中的应用，其特征在于所述镰形棘豆总黄酮由以下工艺提取将干燥、粉碎的镰形棘豆植物用其质量8 20倍的水煎煮提取2 3次，过 滤，合并滤液，干燥；精密称取干燥物3.0g，用20倍量蒸馏水溶解，上样于 20mLD-101型大孔吸附树脂柱；先以蒸馏水冲洗上述大孔树脂，再用5%乙 醇洗至无色，然后用60%乙醇洗脱充分，收集60%乙醇洗脱液，干燥得总 黄酮提取物。
全文摘要
本发明提供了一种从镰形棘豆中提取的总黄酮在制备防晒用品中的应用。经紫外扫描测试，从镰形棘豆中提取的总黄酮在240～400nm的波段间有较强的紫外线吸收能力。动物实验证明，镰形棘豆总黄酮具有显著的防御紫外线辐射能力，因此可以作为防晒有效活性成分，用于制备防晒用品。临床试验证明，本发明制备的防晒霜有很好的抗紫外线能力，对各种肤质的皮肤均具有良好的防晒效果。同时也证明此防晒霜无过敏及其他不良反应。
文档编号A61K8/96GK101658474SQ20091011742
公开日2010年3月3日 申请日期2009年8月19日 优先权日2009年8月19日
发明者兰芝荟, 张汝学, 李茂星, 贾正平 申请人:李茂星