磷脂‑糖胺聚糖仿生细胞外基质纳米膜及其制备方法与应用与流程

文档序号:12076144阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1:将糖胺聚糖溶于磷酸盐缓冲溶液中,然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和添加剂,得到混合液,再将所述混合液去除氧气后活化;其中,所述添加剂为1-羟基苯并三氮唑或N-羟基丁二酰亚胺;

S2:将磷脂溶于复配乳液中,然后加入到所述S1得到的产物中进行反应;其中,所述复配乳液包括水和有机溶剂;

S3:将所述S2得到的产物干燥,得到仿生细胞外基质纳米膜。

2.根据权利要求1所述的仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于:

所述S1中,所述糖胺聚糖、所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和所述添加剂的物质的量比为1:1:(1~10);

所述S2中,所述磷脂和所述复配乳液的质量比为1:(10~100),所述复配乳液中,所述有机溶剂和所述水的体积比为1:(1~100);

所述糖胺聚糖和所述磷脂的质量比为1:(1~100)。

3.根据权利要求1所述的仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于:

所述S1中:所述糖胺聚糖包括肝素、透明质酸和硫酸软骨素中的一种或几种,所述糖胺聚糖的相对分子质量为8000~14000;

所述S2中:所述磷脂包括1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺、L-磷脂酰乙醇胺、1,2-二硬酯酰-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺、1,2-二棕榈酰基-sn-丙三基-3-磷酸乙醇氨、1,2-二肉豆蔻酰-sn-丙三基-3-磷脂酰乙醇胺、1,2-二油酰基-sn-丙三基-3-磷脂酰乙醇胺、胆固醇甲酰胺和花生四烯酰胺中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于:

所述S2中:所述有机溶剂包括乙醇、异丙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、二甲亚砜和二甲基甲酰胺中的一种或几种;所述水为双蒸水。

5.根据权利要求1所述的仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于:

所述S1中,将所述糖胺聚糖溶于磷酸盐缓冲溶液中具体包括:将所述糖胺聚糖加入所述磷酸盐缓冲溶液中,得到糖胺聚糖与磷酸盐缓冲溶液的混合物,然后在0~37℃的条件下超声10~30min;

其中,所述超声的功率为20~400W,所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为6.0~6.8,在所述糖胺聚糖与磷酸盐缓冲溶液的混合物中,所述糖胺聚糖的质量分数为10%~50%。

6.根据权利要求1所述的仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于:

所述S1中,所述活化的温度为0~37℃,所述活化的时间为15~45min;

所述S2中,所述反应的温度为0~100℃,所述反应的时间为0.5~72h;

所述S3中,所述干燥为冷冻干燥,所述冷冻干燥的温度为-60℃~-80℃,所述冷冻干燥的时间为2~48h。

7.权利要求1-6任一项所述的方法制备得到的仿生细胞外基质纳米膜。

8.一种荧光仿生细胞外基质纳米膜的制备方法,其特征在于:

包括权利要求1-6任一项所述的仿生细胞外基质纳米膜的制备方法的所有步骤,并在所述S2中的所述反应后,还包括步骤:在所述反应后的产物中加入荧光物质进行避光反应;其中,所述糖胺聚糖和所述荧光物质的物质的量比为1:1000,所述荧光物质为5-FAM-乙二胺或AF488-N-羟基琥珀酰亚胺,所述避光反应的温度为15~30℃,所述避光反应的时间为15~60min。

9.权利要求8所述的方法制备得到的荧光仿生细胞外基质纳米膜。

10.权利要求7所述的仿生细胞外基质纳米膜或权利要求9所述的荧光仿生细胞外基质纳米膜在制备胰岛培养或胰岛移植产品中的应用。

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