本发明涉及禽畜疫病防治技术领域，特别涉及一种治疗仔猪腹泻的黄芩苷锌干混悬剂及其制备方法。
背景技术
仔猪腹泻是集约化养猪生产条件下的一种典型的多因素性疾病。该病是目前最严重的仔猪疾病群之一，也是引起仔猪死亡的重要原因。据相关报道，仔猪因腹泻死亡占仔猪死亡总数的39.8％。近年来，我国仔猪腹泻十分普遍，30kg以下的仔猪，全年平均发病率46.5％，死亡率10.3％。在养猪业较发达的国家如美国，仔猪断奶前死亡率约15.5％，荷兰11.5％～14.2％，仔猪腹泻在养猪业危害中居首位，严重威胁着养猪业的健康发展，导致饲料报酬率较低，仔猪成活率下降、生长缓慢、生长发育停滞，甚至死亡。
目前治疗仔猪腹泻最常用的方法是使用抗菌药物，由于目前细菌的耐药性严重，导致治疗效果较差。也有相关技术采用中药代替抗菌药物，例如采用黄芩苷锌干混悬剂，该黄芩苷锌干混悬剂通过黄芩提取物(黄芩中提取的有效成分)和锌盐反应制备而成，然而，该黄芩提取物中的有效成分复杂，纯度低，对仔猪有一定副作用。
技术实现要素：
本发明的主要目的是提出一种治疗仔猪腹泻的黄芩苷锌干混悬剂及其制备方法，旨在提供一种对仔猪腹泻治疗效果好、副作用小的黄芩苷锌干混悬剂。
为实现上述目的，本发明提出一种治疗仔猪腹泻的黄芩苷锌干混悬剂，以质量份数计包括以下组分：
活性成分：510～550份；
填充剂：435～485份；
助悬剂：5～15份；
其中，所述活性成分为黄芩苷和锌盐制备成的黄芩苷锌配合物。
优选地，所述活性成分的质量份数为520～540份，所述填充剂的质量份数为450～470份，所述助悬剂为10～15份。
优选地，所述填充剂为甘露醇、微晶纤维素和乳糖中的一种或多种。
优选地，所述助悬剂为黄原胶、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠中的一种或多种。
优选地，所述助悬剂为黄原胶，所述黄原胶的质量份数为10份。
优选地，所述活性成分的粒径为100～200目；和/或，
所述填充剂和所述助悬剂的粒径为100～200目。
优选地，所述活性成分的粒径为200目；和/或，
所述填充剂和所述助悬剂的粒径为100目。
为实现上述目的，本发明还提出一种如上所述的黄芩苷锌干混悬剂的制备方法，包括以下步骤：
将黄芩苷锌配合物粉碎后过筛，得活性成分；
将填充剂和助悬剂分别粉碎后过筛，对应得填充剂粉料和助悬剂粉料；
将所述活性成分与所述填充剂粉料和所述助悬剂粉料混和均匀，得到黄芩苷锌干混悬剂。
优选地，将所述活性成分与所述填充剂粉料和所述助悬剂粉料混和均匀，得到黄芩苷锌干混悬剂的步骤，具体为：
将所述活性成分与所述填充剂粉料和所述助悬剂粉料按照等量递增法混合均匀，得到黄芩苷锌干混悬剂。
本发明提供的的技术方案中，利用黄芩苷原料与锌盐反应所制备的黄芩苷锌配合物作为活性成分，与填充剂和助悬剂混合制备成黄芩苷锌干混悬剂，提高了所述干混悬剂中黄芩苷锌配合物的纯度，降低了所述黄芩苷锌干混悬剂在用于治疗仔猪腹泻时的使用剂量，而且提高了治疗效果、减少了副作用。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明提出一种治疗仔猪腹泻的黄芩苷锌干混悬剂，以质量份数计包括以下组分：活性成分：510～550份；填充剂：435～485份；助悬剂：5～15份；其中，所述活性成分为黄芩苷和锌盐制备成的黄芩苷锌配合物。
黄芩是一种传统中药，其以根入药，味苦、性寒，有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效，主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩的临床抗菌性比黄连好，而且不产生抗药性。
黄芩苷是从黄芩的干燥根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，常温下为淡黄色粉末，味苦，具有显著的生物活性，具有抑菌、利尿、抗炎、降胆固醇、抗血栓形成、缓解哮喘、泻火解毒、止血、安胎、抗变态反应及解痉作用。研究表明，黄芩苷抗菌范围较广，尤其对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌作用较强，甚至对耐药性金黄色葡萄球菌也有抑菌作用。
现有的黄芩苷锌干混悬剂是通过黄芩提取物(黄芩中提取的有效成分)和锌盐反应制备而成，然而，该黄芩提取物中的提取成分复杂、黄芩苷纯度低，在用作治疗仔猪腹泻的药物时，对仔猪有一定副作用。
本发明中直接利用黄芩苷原料与锌盐反应所制备的黄芩苷锌配合物作为活性成分，与填充剂和助悬剂混合制备成黄芩苷锌干混悬剂，提高了所述干混悬剂中黄芩苷锌配合物的纯度，降低了所述黄芩苷锌干混悬剂在用于治疗仔猪腹泻时的使用剂量，可以用于治疗主要由于细菌感染引起的仔猪腹泻，以及断奶、转群应激等原因引起的仔猪腹泻，对仔猪腹泻的治疗效果显著、副作用少。需要说明的是，以黄芩苷与金属盐反应制备黄芩苷金属配合物属于现有技术，本发明在于选取以高纯度的黄芩苷原料作为反应物与锌盐反应制备的黄芩苷锌作为所述干混悬剂的活性成分，因此，对黄芩苷与锌盐反应制备黄芩苷锌配合物的制备方法和过程不做赘述。
作为本发明提供的一种优选的实施例，所述活性成分的质量份数为520～540份，所述填充剂的质量份数为450～470份，所述助悬剂为10～15份。
干混悬剂是指难溶性药物与适宜辅料制成粉状物或粒状物，临用时加水振摇即可分散成混悬液供口服的液体制剂，干混悬剂既有固体制剂(颗粒)的特点，如方便携带、运输方便、稳定性好等，又有液体制剂的优势，方便服用，适合于吞咽有困难的患者，如儿童、老人等。理想的干混悬剂除应具有有效性和化学稳定性外，还应沉降缓慢、沉降后轻轻振摇能再分散，因而在制备过程中除加入填充剂作为载体外，还需要加入助悬剂。
在本实施例中，所述填充剂为甘露醇、微晶纤维素和乳糖中的一种或多种，既可以是上述三种物质中的任意一种，也可以是上述三种物质中的任意两种或者三种的混合物，均可以作为本发明实施例中的所述填充剂。
所述助悬剂为黄原胶、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠中的一种或多种，既可以是上述三种物质中的任意一种，也可以是上述三种物质中的任意两种或者三种的混合物，均可以作为本发明实施例中的所述助悬剂，所制备的所述干混悬剂的沉降体积比均能够满足相关标准的要求。
更优选地，所述助悬剂为黄原胶，且所述黄原胶的质量份数为10份。选用黄原胶作为所述助悬剂，所制备的所述干混悬剂不仅沉降体积比能够满足相关标准的要求，而且具有良好的再分散性能。
由于所述黄芩苷锌干混悬剂在用于治疗仔猪腹泻的使用过程中，需要使仔猪口服入体内，为了避免仔猪出现吞咽困难的现象，所述黄芩苷锌干混悬剂的粒径不宜过大，在本发明实施例中优选为所述活性成分的粒径为100～200目；和/或，所述填充剂和所述助悬剂的粒径为100～200目，如此，不仅有利于仔猪在服用所述黄芩苷锌干混悬剂时能够顺利吞咽，也能使得所述黄芩苷锌干混悬剂在制备过程中原辅料的高效混合。
更优选地，所述活性成分的粒径为200目；和/或，所述填充剂和所述助悬剂的粒径为100目，所述活性成分的粒径小于所述填充剂和所述助悬剂的粒径，使得所述活性成分能够更均匀地分散于所述填充剂和所述助悬剂中。
本发明还提出一种如上所述的治疗仔猪腹泻的黄芩苷锌干混悬剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤s10、将黄芩苷锌配合物粉碎后过筛，得活性成分；
步骤s20、将填充剂和助悬剂分别粉碎后过筛，对应得填充剂粉料和助悬剂粉料；
步骤s30、将所述活性成分与所述填充剂粉料和所述助悬剂粉料混和均匀，得到黄芩苷锌干混悬剂。
其中，步骤s10和步骤s20可以是步骤s10在前，步骤s20在后；也可以是步骤s20在前，步骤s10在后；也可以是同时分开进行，在此不做具体限制。
步骤s10和步骤s20在具体实施时，可以采用高速粉碎机或者研钵、磨盘等常规设备进行，以下将以采用万能粉碎机为例进行说明，步骤s10和步骤s20的具体实施方法如下：将黄芩苷锌配合物粉碎后过100～200目筛，得活性成分；将填充剂和助悬剂分别粉碎后过100～200目筛，对应得填充剂粉料和助悬剂粉料。
在步骤s10中，更优选为将黄芩苷锌配合物粉碎后过200目筛，得活性成分；在步骤s20中，更优选为填充剂和助悬剂分别粉碎后过100目筛，对应得填充剂粉料和助悬剂粉料，如此，所述活性成分的粒径小于所述填充剂和所述助悬剂的粒径，使得所述活性成分能够更均匀地分散于所述填充剂和所述助悬剂中。
步骤s30在具体实施时，具体为：将所述活性成分与所述填充剂粉料和所述助悬剂粉料按照等量递增法混合均匀，得到黄芩苷锌干混悬剂。等量递增法是为了避免在生产药品或食品的过程中，由于配方中各成分比例相差悬殊而不易混匀的问题，其具体操作方法是：取小量的组分和等量的量大的组分，同时置于混合机械中混合均匀，再加入同混合物等量的量大的组分混合均匀，如此倍量增加直至加完全部量大的组分为止。在本实施例中，即为：先取所述助悬剂和与所述助悬剂等质量的所述活性成分以及所述填充剂，置于高速混合机中混合均匀形成混合物，再向其中加入与所述混合物等质量的所述活性成分以及所述填充剂，再次混合均匀，如此，直至所述活性成分和所述填充剂全部添加完毕且混合均匀后，即制得所述黄芩苷锌干混悬剂。
以下结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细说明，应当理解，以下实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
一、黄芩苷锌干混悬剂的制备
实施例1
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物530g，黄原胶15g，乳糖455g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备：将黄芩苷锌配合物用万能粉碎机粉碎后过200目筛，得活性成分；将黄原胶和乳糖分别用万能粉碎机粉碎后过100目筛，得黄原胶粉料和乳糖粉料；将活性成分与黄原胶粉料和乳糖粉料按照等量递增法混合均匀，制得黄芩苷锌干混悬剂。
实施例2
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物520g，黄原胶13g，乳糖467g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备：将黄芩苷锌配合物用万能粉碎机粉碎后过150目筛，得活性成分；将黄原胶和乳糖分别用万能粉碎机粉碎后过100目筛，得黄原胶粉料和乳糖粉料；将活性成分与黄原胶粉料和乳糖粉料按照等量递增法混合均匀，制得黄芩苷锌干混悬剂。
实施例3
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物540g，黄原胶10g，乳糖450g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备：将黄芩苷锌配合物用万能粉碎机粉碎后过100目筛，得活性成分；将黄原胶和乳糖分别用万能粉碎机粉碎后过100目筛，得黄原胶粉料和乳糖粉料；将活性成分与黄原胶粉料和乳糖粉料按照等量递增法混合均匀，制得黄芩苷锌干混悬剂。
实施例4
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物525g，黄原胶12g，乳糖463g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备：将黄芩苷锌配合物用万能粉碎机粉碎后过200目筛，得活性成分；将黄原胶和乳糖分别用万能粉碎机粉碎后过150目筛，得黄原胶粉料和乳糖粉料；将活性成分与黄原胶粉料和乳糖粉料按照等量递增法混合均匀，制得黄芩苷锌干混悬剂。
实施例5
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物535g，黄原胶12g，乳糖453g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备：将黄芩苷锌配合物用万能粉碎机粉碎后过200目筛，得活性成分；将黄原胶和乳糖分别用万能粉碎机粉碎后过200目筛，得黄原胶粉料和乳糖粉料；将活性成分与黄原胶粉料和乳糖粉料按照等量递增法混合均匀，制得黄芩苷锌干混悬剂。
实施例6
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物510g，黄原胶5g，甘露醇485g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例7
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物550g，黄原胶10g，微晶纤维素440g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例8
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物510g，海藻酸钠5g，乳糖485g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例9
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物525g，海藻酸钠15g，乳糖460g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例10
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物510g，海藻酸钠10g，乳糖480g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例11
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物550g，羧甲基纤维素钠5g，乳糖445g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例12
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物540g，羧甲基纤维素钠10g，乳糖450g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
实施例13
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物525g，羧甲基纤维素钠15g，乳糖460g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
对比例1
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物450g，黄原胶3g，乳糖547g；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
对比例2
(1)原料称取：黄芩苷锌配合物490g，黄原胶4g，乳糖500g，其中，本对比例中的黄芩苷锌配合物为以黄芩提取物与锌盐反应制备的产物；
(2)黄芩苷锌干混悬剂的制备方法同实施例1。
根据《中华人民共和国兽药典》(2015年版一部)有关干混悬剂沉降体积比的规定进行试验，测定实施例1至实施例12制备的黄芩苷锌干混悬剂的沉降体积比，结果见下表1。按照《中国兽药典》(2015年版)关于干混悬剂的质量评价方法，测定实施例1至12制备的黄芩苷锌干混悬剂的混悬性能，结果见表1。
表1实施例和对比例制备的黄芩苷锌干混悬剂的混悬性能
根据《中华人民共和国兽药典》(2015年版一部)附录中关于混悬剂项下的有关规定，重量差异＜10％，干燥失重＜2％，判定干混悬剂是否合格的主要指标为沉降体积比不小于0.90。由表1中的数据可知，本发明实施例1至12制备的黄芩苷锌干混悬剂的沉降体积比均大于0.90，符合规定；而且，当选用的活性成分过200目筛、以10份黄原胶作为助悬剂、且助悬剂和填充剂过100目筛时，所制备的黄芩苷锌干混悬剂的再分散性明显优于其他实施例。而对于黄芩苷锌配合物添加量少于250份的对比例1、以及黄芩苷锌配合物添加量多于400份的对比例2而言，其沉降体积比小于0.90不符合固定，且再分散性也较差。
二、黄芩苷锌干混悬剂用于治疗仔猪腹泻的疗效试验
1、病例诊断：以自然病例根据流行病学、临床症状、病理变化，实验室确诊。综合分析，进行确诊。
2、结果判定：
治愈：用药3-4次后患畜病症完全消失，精神、体温、食欲恢复正常，尿液粪便正常。
有效：用药3-4次后患畜病症基本消失，精神、体温、食欲有所改善，尿液粪便正常。
无效：用药4次后患畜病症未消失，病情恶化或死亡，尿液粪便颜色、性状不正常。
分别验证实施例1至实施例13、以及对比例1、对比例2制备的黄芩苷锌干混悬剂对5日龄、10日龄、15日龄以及断奶一周仔猪腹泻的疗效试验，包括统计黄芩苷锌干混悬剂对仔猪的有效率、治愈率以及有无明显副作用。
应用实施例15日龄腹泻仔猪
选取5日龄腹泻仔猪300头，20头为一组，分为15组(试验组1至试验组13、以及对比组1和对比组2)，给药方式为：取实施例1至实施例13以及对比例1制备得到的黄芩苷锌干混悬剂(实施例1至实施例13制备得到的干混悬剂分别对应给药试验组1至试验组13，对比例1制备的干混悬剂给药对比组1)，每20g一包，使用时加水混均，配成100ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌干混悬剂的浓度为0.2g/ml)，每天灌喂1次，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1g/头)；取对比例2制备得到的黄芩苷锌干混悬剂给药对比组2，每15g一包，使用时加水混匀，配成50ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌混悬剂的浓度为0.3g/ml)，每天灌喂1次，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1.5g/头)。给药1天后，观察治疗结果。结果如下表2所示。
表2应用实施例1中的疗效结果对比
应用实施例210日龄严重腹泻仔猪
选取10日龄严重腹泻仔猪300头，20头为一组，分为15组(试验组1至试验组13、以及对比组1和对比组2)，给药方式为：取实施例1至实施例13以及对比例1制备得到的黄芩苷锌干混悬剂(实施例1至实施例13制备得到的干混悬剂分别对应给药试验组1至试验组13，对比例1制备的干混悬剂给药对比组1)，每20g一包，使用时加水混均，配成100ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌干混悬剂的浓度为0.2g/ml)，每天灌喂2次，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1g/头)；取对比例2制备得到的黄芩苷锌干混悬剂给药对比组2，每15g一包，使用时加水混匀，配成50ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌混悬剂的浓度为0.3g/ml)，每天灌喂2次，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1.5g/头)。给药2天后，观察治疗结果。治疗结果如下表3所示。
表3应用实施例2中的疗效结果对比
应用实施例315日龄腹泻仔猪
选取15日龄腹泻仔猪300头，20头为一组，分为15组(试验组1至试验组13、以及对比组1和对比组2)，给药方式为：取实施例1至实施例13以及对比例1制备得到的黄芩苷锌干混悬剂(实施例1至实施例13制备得到的干混悬剂分别对应给药试验组1至试验组13，对比例1制备的干混悬剂给药对比组1)，每20g一包，使用时加水混均，配成100ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌干混悬剂的浓度为0.2g/ml)，每天灌喂1次，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1g/头)；取对比例2制备得到的黄芩苷锌干混悬剂给药对比组2，每15g一包，使用时加水混匀，配成50ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌混悬剂的浓度为0.3g/ml)，每天灌喂1次，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1.5g/头)。给药1天后，观察治疗结果。结果如下表4所示。
表4应用实施例3的疗效结果对比
应用实施例4断奶一周后的腹泻仔猪
选取断奶一周后的腹泻仔猪300头，20头为一组，分为15组(试验组1至试验组13、以及对比组1和对比组2)，给药方式为：取实施例1至实施例13以及对比例1制备得到的黄芩苷锌干混悬剂(实施例1至实施例13制备得到的干混悬剂分别对应给药试验组1至试验组13，对比例1制备的干混悬剂给药对比组1)，每20g一包，使用时加水混均，配成100ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌干混悬剂的浓度为0.2g/ml)，每天灌喂2次(早晚各一次)，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1g/头)；取对比例2制备得到的黄芩苷锌干混悬剂给药对比组2，每15g一包，使用时加水混匀，配成50ml的混悬液(混悬液中黄芩苷锌混悬剂的浓度为0.3g/ml)，每天灌喂2次(早晚各一次)，每次5ml/头(相当于每次灌喂黄芩苷锌干混悬剂的剂量为1.5g/头)。连续给药3天后，观察治疗结果。结果如下表5所示。
表5应用实施例4的疗效结果对比
从表2至表5中的疗效结果可以看出，相比于黄芩苷锌配合物添加量少于510份的对比例1而言，试验组1-13的平均治愈率和平均有效率明显高于对比组1，说明本发明实施例1至13提供的黄芩苷锌干混悬剂对仔猪腹泻的治疗效果更为显著；相比于以黄芩提取物与锌盐反应中制备的黄芩苷锌配合物为活性成分的对比例2而言，试验组1-13与对比组2的平均有效率相差不大，但是试验组1-13的平均有治愈率更高，而且，对比组2中的干混悬剂在治疗仔猪腹泻过程中所使用的剂量为1.5g/头，明显高于试验组1-13的1g/头，而且试验组1-13中的仔猪在治疗过程中并没有出现明显的副作用，这可能是由于实施例1至13提供的黄芩苷锌干混悬剂中黄芩苷锌配合物的纯度更高，而使得干混悬剂的使用剂量更小，说明本发明实施例1至13提供的黄芩苷锌干混悬剂在用于治疗仔猪腹泻时，不仅使用剂量小，而且治疗效果更显著、副作用少。
以上仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包括在本发明的专利保护范围内。