专利名称：皮肤和粘膜制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及基于含硝酸还原产物的硝酸水溶液的新制剂，它用于治疗皮肤和粘膜病变，特别是大面积或小面积的皮肤和粘膜表层的良性的病变，皮肤和粘膜的表面层感染还涉及这种制剂的生产方法。
几个世纪以来，皮肤缺陷、疣和类似物的“烧除”必需使用腐蚀性的制剂，特别是强酸制剂。在此情况下，皮肤病医生的“药箱”中或多或少的特异位置特别被水杨酸、浓硝酸和一些卤代乙酸所占据，而很少用盐酸。用腐蚀性制剂治疗一般疼痛，而且已知很多情况下会留下或多或少的不可见疤痕。
另外，为了治疗疣，曾建议使用乳酸、草酸和乙酸。但这些酸的角质层分离作用低，因此它们几乎总是与水杨酸一起使用(German Auslegeschriftl，266，448)。
另一方面，为治疗疣和其它皮肤疾病，十九世纪曾建议使用各种金属盐包括铜盐如乙酸铜或硫酸铜，铅盐与硫酸锌结合、硫酸铜与乙酸一起、还有锑盐、砷盐、铬盐、汞盐、银盐、锌盐和镉盐。在这些盐中，只有氯化锌与三氯乙酸联合-Mohs＇方法-产生了治疗皮肤癌的暂时显著性。
为局部治疗皮肤和粘膜的表层病变，EP-A-26，532推荐使用6-10M的硝酸水溶液，其含有硝酸金属盐或亚硝酸，其含量为每ml溶液0.01-5mg，优选0.1-0.5mg。如EP-A-26，532所公开的那样，这种制剂产生(测量皮肤变色)与浓硝酸相似的快速化学反应，但没有这种或其它强酸的剧烈腐蚀作用、不加分辨地破坏所有组织。在此制剂作用下，实际上表层蛋白当时变性，解剖结构在生活期内被固定，而没有损坏(干尸化)。
对于该已知制剂剖的组成和作用，已证明通过向硝酸中加入可氧化的有机羧酸或可能向该制剂中加入这种可氧化的有机羧酸对产生该制剂特别有利。可氧化羧酸如草酸、乳酸、乙醇酸、二羟乙酸、苹果酸和类似物与硝酸反应形成一系列产物，特别是硝酸还原产物如亚硝气和亚硝酸，还有缩合产物如O-腈和O-亚硝酰衍生物。这种氧化方法所得到的制剂特别产生长时间内的活性改进。不清楚具体哪一种反应产物对临床有用活性起主要作用，尽管当可用亚硝酸根测量的反应产物含量减低很多时这种活性消失。
可氧化有机羧酸与6-10M硝酸反应形成亚硝气、二氧化碳等。因此，根据EP-A-26，532的公开，重要的是此方法产生的制剂不密封，但被贮存在一松散关闭的容器中。由于此原因，EP-A-26，532推荐使用不同氧化速度的羧酸的混合物，如使用丙酮酸、乳酸和草酸的混合物，以补偿容器贮存和打开可能产生的亚硝酸根含量的下降。但实际上很明显，被用于形成亚硝酸根的可氧化羧酸的反应在室温下进行得太慢。
相应的制剂由本申请人公司以Solcoderm和Solcogyn的名称上市，实际上已证明它们能提供有效的亚硝酸根浓度。
但该已知制剂的缺点在于可氧化羧酸的反应速度严重依赖于温度。结果，随着贮存温度和贮存时间，亚硝酸根的浓度可能波动相当大。因此，只有尽可能准确地遵守推荐的贮存温度和所示的使用日期，才能保证制剂的组成和作用的足够重现性。另外，在某性情况下在硝酸根的浓度可能降低到制剂无活性的范围。已经观察到已变得无效的这种制剂的付作用危险增大，例如导致健康皮肤上形成溃疡。
现在发现一种新制剂具有同等优良并且可重现的活性，而无已知制剂的缺陷，同时此制剂令人惊异地允许硝酸浓度进一步降低。另外，该新制剂的制备特别简单，从1-5.5M硝酸水溶液和每升硝酸45-170mmol的一级C1-C5链烷醇制得，其组成得到简化。后者实际上是另一优势，因为由许多种活性物质组成的制剂在现代药理学上一般被认为是成问题的。
本发明局部治疗皮肤和粘膜表层病变的制剂包括1-5.5M硝酸水溶液、相当于每ml溶液0.1-6mg浓度的硝酸还原产物、浓度不高于第l溶液170mmol的C1-C5-烷酸。本发明的制剂一般每升溶液含有至少约5mmol C1-C5烷酸，例如45-170mmol C1-C5-烷酸。这些制剂一般优选每升溶液含至少约9mmol而不高于约90mmol的C1-C5烷酸。
在本发明的情况下，亚硝酸根浓度值是通过N.G.Bunton.N.T.Crosby和S.J.Patterson在Analyst94，585(1969)中描述的方法得到的，先与对氨基苯磺酸和1-萘胺反应，然后用光度计检测。在此方法中，溶液中其它的硝酸还原产物如亚硝气被转化为亚硝酸根，然后检测。因此，这样得到的亚硝酸根浓度都代表硝酸还原产物总浓度。
根据本发明，该新制剂可通过1-5.5M硝酸水溶液与每升硝酸45-170mmol的一级C1-C5-链烷醇反应简单地产生。惊人地发现，一有C1-C5-链烷醇在硝酸水溶液中甚至在室温下或加热下反应迅速完全，这样就转化为C1-C5烷酸和二氧化碳，同时形成一系列有效的硝酸还原产物。反应优选温度为约20-60℃。
优选使用C2-C5-链烷醇如乙醇或1-丙醇。特别优选乙醇，它在室温下简单地与硝酸混合即可反应完全，并被转化为角质层分离活性的乙酸(部分转化为二氧化碳)。因此，本发明的制剂中的烷酸优选为C2-C5-烷酸，特别是乙酸。
图1-5用曲线图形式表示本发明制剂和对照制剂在一系列实验中所得结果。
图1表示已知制剂Solcoderm的亚硝酸根浓度对贮存温度和贮存时间的函数曲线图。为了确定此函数，起始混合物每ml溶液含625.2mg的65%硝酸、41.5mg的98%乙酸、57.4mg二水合草酸、4.5mg乳酸和48μg三水硝酸铜(Ⅱ)的市售制剂，在不同温度下在密封玻璃安瓿中贮存数目，定期测定亚硝酸根的浓度。如图1中结果所示亚硝酸根浓度可随着温度产生相当大的波动，这使得其安全应用困难更大。特别在贮存温度低至5℃时，还观察到亚硝酸根含量减低并因此损失活性。另一方面，在30℃和45℃下，观察到亚硝酸根浓度突增，这会由于加速羧酸的反应而影响贮存寿命。
与已知制剂相反，本发明的制剂由于反应快速完全，其组成明确并可重现，从而极大地消除了活性的不确定性。
但是让制剂敞开，无论本发明的制剂还是已知制剂都会导致几小时内硝酸还原产物含量明显降低，这是亚硝气散发的结果。因此，本发明的制剂优选贮存在气体密封容器中如玻璃安瓿，或必要时在使用前短时间内制备。
本发明的制剂贮存在气密容器中，优选密封的安瓿中时，其组成和作用恒定并基本是非温度依赖性的，并且基本上其贮存期是无期限的。另外，与已知制剂相反，在长期贮存中不再继续生成二氧化碳和亚硝气，这一事实对气密贮存帮助很大。相应地，贮存中形成的过高压力的危险在本发明制剂中被减低至基本为零，这种危险在极端情况下，是贮存温度高时导致安瓿突然破裂或溶液从开口处爆炸性地喷出。
气密制剂的生产原则上可先如上所述生产该制剂然后将此制剂以气密方式密封在适当的容器中。优选步骤为在低于反应温度的温度下将1-5.5M硝酸与一级C1-C5-链烷醇混合，优选至少低于反应温度10℃(如在约0℃)，将混合物以气密方式密封在适当容器中，优选为安瓿，然后将混合物加热至反应温度或以上。如果使用乙醇，组分优选在不高于10℃下混合，如0-5℃，然后混合物在优选约20-40℃温度下反应。据研究，一级C1-C5-链烷醇与硝酸反应生成的硝酸还原产物的浓度基本不依赖于硝酸的浓度，如实施例1和2所表明。但它严重依赖于所用链烷醇的浓度，发现了链烷醇浓度和测得亚硝酸根浓度之间的非线性关系。如图2和乙醇的实施例1和2所示，在乙醇浓度低于45mmol/l时只有少量硝酸还原产物形成，测得的亚硝酸根浓度一般明显低于0.1mg/ml，后者代表治疗活性的开始。如果乙醇浓度继续升高，测得的亚硝酸根浓度都突然升高。这种效果的原因还不清楚。但它提供了通过C1-C5-链烷醇与硝酸的反应(如果所用链烷醇浓度至少为45mmol)得到有效制剂的可能性，它还提供了另一可能性，即如果链烷醇尝试继续增加，用亚硝气使溶液过饱和。
在实施例3描述的头发实验中，本发明的制剂被证明与用6.4M硝酸按相同方法产生的制剂以及市售制剂Solcoderm有相当的效果。在每种情况下，头发迅速变为黄色并抑制了头发分解，而加入链烷醇不足或用纯硝酸时则导致头发分解。因此，本发明惊异地并与EP-A-26，532相反，使得在明显低于6mol/l的硝酸浓度下还原，同时保持活性。
为了更精确地确认制剂活性的区别，实施例4中描述的胃蛋白酶实验被用作干尸化的第一步反应的模型。图3表示作为时间函数的样品1-6在胃蛋白酶实验中测得的光密度(OD)。曲线的“斜率b”用来测定活性模型(变色的速度)。图4表示在胃蛋白酶实验中斜率b对乙醇浓度(5.4M和6.4M硝酸的情况下)的依赖性。图5表示在胃蛋白酶实验中斜率b对硝酸浓度的依赖性[用恒定的乙醇浓度60mmol/l即0.35%(体积)]。
用浓度至少为45mmol/l的链烷醇产生的制剂在胃蛋白酶实验中也被证明很有效。但结果惊异地表明变色的速度在胃蛋白酶实验中不但随着硝酸浓度增加，而且随着链烷醇的浓度增加。随着这一发现，硝酸浓度降低引起的变色速度的降低很大程度上可用提高链烷醇浓度(如需要)来补偿，导致硝酸还原产物浓度的相应提高(参见图2)。
本发明的制备方法使链烷醇反应完全，形成相应的羧酸和有时(特别是当使用甲醇或乙醇时)还产生二氧化碳。
链烷醇的使用浓度以不高于约170mmol/l为好，优选不超过约130mmol/l。这意味着如果在气密下制备此制剂可避免过高的压力。从胃蛋白酶实验的结果看，一般链烷醇的使用浓度优选为60-90mmol/l。
相应地，本发明的制剂含有浓度不超过170mmol/l的C1-C5-烷酸，优选为约9-90mmol/l，硝酸还原产物的浓度(以亚硝酸根测定)较好为每ml约0.1到约6，优选为1-5，特别优选为约2-4mg亚硝酸根。
为了促进亚硝气形式的硝酸还原产物的形成，在气密容器中产生和/或贮存的情况下，容器的大小优选液体体积或容器的总容积的比例不超过1∶2，特别优选约1∶10到1∶5。本发明的制剂例如可在1ml的玻璃安瓿中产生或贮存，每个安瓿中的量为约0.1-0.2ml，这一般足够用于一次治疗。这几乎可以完全免除多余溶液的废弃和可能施用变为无效的溶液的危险。
如实验例5中皮肤实验所示，本发明的制剂甚至在上限硝酸浓度下也无任何付作用，除了轻微的发红和非常轻微的水泡，而这些也会在几小时内消失。甚至由于处理不当引起的硝酸还原产物的含量完全减低时，由于硝酸浓度低，付作用也会保持相当小。用6.4mol/l浓度的硝酸用类似方法产生的制剂其付作用略大，但已证明比市售制剂Sodcoderm好。但在两个对比制剂的情况下，存在相对严重的付作用的危险，如开放性创伤或溃疡，这会在由于处理不当时发生。所以，根据本发明，所用硝酸浓度以不超过5.5mol/l较好。
这样，本发明的制剂使得其可能有与已知制剂大约相同的良好活性而应用相当安全，因为付作用发生少，组成明确而活必存在，甚至在处理不当时付作用的危险还保持相当低。
本发明的制剂可用于化妆品和药物，并适合于EP-A-26，352所示的所有施用部位和适应症。它们特别被指明用于局部治疗表层良性皮肤病变，例如疣(如普通疣和跖疣)、良性痣、皮脂溢的和光化性的角化病，以及粘膜良性病变，例如良性颈损害如部分异位(如tetropium、增殖性红斑和假糜烂)、变形区、纳博特氏囊肿、子宫颈管息肉、湿疣和手术后肉芽肿。
因为它们的付作用危险非常小，本发明的制剂不象EP-A-26，532中描述的制剂，其不但适合于治疗皮肤和粘膜的表层小面积病变，而且还适合于治疗皮肤和粘膜的偏平损害和感染、表层大面积病变，特别还合适于治疗皮肤和粘膜的真菌疾病，例如脚真菌病和甲癣。
本发明的所有制剂原则上都适用于上述适应症。但治疗皮肤和粘膜的真菌感染和表层大面积偏平损害，一般优选使用硝酸浓度为1-4mol/l的制剂。另外，治疗增生，即皮肤和粘膜的突起的区域明确的病变，优选使用硝酸浓度为4-5.5mol/l的制剂。
正如EP-A-26，532中所描述的，本发明的制剂可用于在组织的病理改变区上和/或里局部施用或其它形式的局部治疗。施加器可能并优选使用小尖木棒或薄的多孔塑料棒或刷子，以治疗比较大的面积。
在下列实施例中更详细地说明本发明。室温均指22℃。亚硝酸根浓度均用Analyst94，585(1969)中描述的方法测定，即与对氨基苯磺酸及1-萘胺反应，该尝试均与硝酸还原产物总浓度相关，后者可用亚硝酸根衡量。
实施例11份(体积)70%的硝酸(15.7mol/l)和1.907份(体积)的水用冰浴在不同容器中预冷至低于5℃。然后将冷硝酸在搅拌和冷却下慢慢加入到冷水中，在冰浴中继续混合该溶液(5.4M硝酸)15分钟。然后该溶液与量为每l溶液60mmol的乙醇混合并搅拌。用安瓿填充机在每个1ml的有断裂环DIN安瓿中装入0.2ml此溶液，并立刻封口。在加入乙醇过程中及整个填充过程中溶液在冰浴中保持在0-2℃。样品在0-2℃保持24小时，没有观察到反应，因此此方法还能保证大批量生产。
让封好的安瓿升至室温，乙醇开始自动并完全地反应，生成乙酸和亚硝气。24小时后用高压液相色谱法测定乙醇的残留量，每个样品中都明显低于100ppm。生成的安瓿制剂由硝酸水溶液、硝酸还原产物组成，其酸当量为5.50mol/l，并且硝酸还原产物的浓度(用亚硝酸根测定)为每ml溶液1.41mg亚硝酸根。
用类似方法但用不同浓度的乙醇和硝酸制得表1中所列制剂，并测得表中所示的浓度。
表1亚硝酸根乙醇浓度硝酸浓度浓度(mmol/l)(mol/l)(mg/ml)435.40.08436.40.09604.91.61605.41.41606.41.75865.43.201295.45.331296.45.14实施例2与实施例1相似，用1份(体积)70%的硝酸和1.453份(体积)的水制备6.4M硝酸溶液，并向此溶液中加入量为每l溶液60mmol的乙醇，将混合物分装在安瓿中并升温至室温。形成的制剂其酸的当量为6.64mol/l，用亚硝酸根测定的硝酸还原产物的浓度为每ml溶液1.75mg亚硝酸根。
在精确测定范围内，发现硝酸还原产物的浓度基本与硝酸的浓度无关(参见实施例1和表1)，这是高度过量的硝酸和乙醇完全氧化的基础上所希望的。
用上述相同方法，但用不同浓度的乙醇(0-130mol/l范围内)进一步制备制剂，并测定了每个制剂中以亚硝酸根衡量的硝酸还原产物浓度。所测亚硝酸根浓度作为乙醇浓度的函数以曲线形式示于图2中。为了对比，还画出了理论上可能的亚硝酸根浓度，这是在假定溶液中可以亚硝酸根测定的硝酸还原产物完全由硝酸与乙醇的反应中产生的情况下计算得到。
图2表明测出的亚硝酸根浓度不随着乙醇浓度上升而线性增长。在乙醇浓度低于45mmol/l时，只发现少量的硝酸还原产物;测得的亚硝酸根浓度明显低于每ml0.1mg亚硝酸根，后者代表治疗活性的开始。但乙醇浓度高于45mmol/l时，随着乙醇浓度升高亚硝酸根浓度急剧升高，这表示亚硝气在溶液中过饱和。
实施例3(头发实验)与实施例1的方法相似，表2中所示浓度的硝酸和乙醇制备一系列制剂并检查它们对人头发的作用。为此目的，淡黄色人发用1%(体积)丙酮水溶液洗涤再用水洗并干燥。将用这种方法除去油污的头发切细。然后每1ml制剂中加入10mg头发，用肉眼观察颜色变黄和分解来评价其作用。颜色变化表示与制剂产生了化学反应，从而组织丧失其生命力但基本保持其解剖结构，除非发生分解作用，为了比较，同样测试了市售制剂Solcoderm。
表2(人发)硝酸浓度乙醇浓度开始变黄分解(mol/l)(mmol/l)6.402h18h后5.408h18h后6.4262min18h后5.4262min18h后6.4602min不5.4602min不4.9602min不5.4862min不Solcoderm2min不设有加入乙醇的样品在长时间后才变黄，然后头发分解，硝酸浓度降低也延迟变黄。使用6.4M或5.4M硝酸中每l26mmol的乙醇，结果迅速变黄，但最终也导致头发分解。用60或86mmol/l浓度的乙醇在所有测试的硝酸浓度下制得的样品，头发迅速变黄而无分解。没有观察到样品黄化作用的速度差别;从这一角度看证明头发试验太不敏感。
因此，乙醇与硝酸反应产物的硝酸还原产物使与组织的反应加速很多，结果使作用明显改进。另外，硝酸还原产物高于某一临界值时，可抑制组织的分解，即在足量硝酸还原产物存在下能保证解剖结构的固定化(干尸化)并降低付作用的危险。
实施例4(胃蛋白酶实验)
与实施例1类似，用表3及图4和5所示浓度的硝酸和乙醇制备一系列制剂，然后测试它们对胃蛋白酶溶液的作用。胃蛋白酶试验被发展作为干尸化第一步反应(与伯氨基和仲氨基反应，并由溶液变色来显示)的模型，它使得比头发实验中的变黄更精确地对此作用定量。
为进行胃蛋白酶实验，在打开安瓿后正好1分钟后向每1mg胃蛋白酶在1ml水中的溶液中加入100μl样品。以后的反应通过用分光光度计测定混合物的时间依赖性变色来监检。所测参数是波长438nm下从胃蛋白酶溶液中加样后300秒内的光密度。在加样后20秒后进行第一次测定。所测得光密度用方程式(1)评价(每个样品为一曲线)y=a+bx+cx2(1)其中y为光密度，x为时间(秒)，计算出参数a、b、和c。变色的速度基本由参数b-在本发明场合下称为“斜率b”-决定，因此它被作为此作用模型的量度。
样品1-10的斜率b值示于表3中。为了对比，在胃蛋白酶实验中还测试了市售制剂Solcoderm。
表3(胃蛋白酶实验)样品号硝酸浓度乙醇浓度斜率b(mol/l)(mmol/l)16.40024.9600.21235.9600.34446.4510.40455.4860.41166.4600.44373.41290.22384.41290.34095.41290.514106.41290.705Solcoderm0.316图3表示所测样品1-6作为时间函数的光密度(OD)曲线。
样品1的结果证实了不加乙醇的制剂无效。样品2-6显示良好作用，并随着硝酸浓度以及乙醇浓度的增加而明显增加。
图4表示用各种乙醇浓度和恒定的硝酸浓度5.4或6.4mol/l制得的制剂的斜率b值的曲线图。从图4可明显看出，斜主b的值大致与所用乙醇浓度成比例。用5.4M硝酸得到的制剂，其曲线斜度较小;但这种结果可通过相应地提高乙醇浓度来弥补。
图5表示用恒定乙醇浓度60mmol/l和各种4.4-6.4M范围内的硝酸浓度制得制剂的斜率b值的曲线图。从图中可看出，在此浓度范围内斜率b值随着硝酸浓度上升大致呈直线增加。
实施例5(人体皮肤实验)
为了估价在正常人皮肤上的付作用，将用硝酸(分别为6.4和5.4mol/l)和乙醇(分别为60和86mmol/l)按实施例1方法制得的两种制剂、(作为对比)不加乙醇的相应硝酸或更大稀释度的硝酸、及市售制剂Solcoderm施于前臂的下表面并作用5分钟。硝酸浓度为5.4mmol/l或更低的样品用量为40μl，其它样品用量为20μl。观察36小时内的作用并得到表4所示的图。
表4
尽管施用2倍体积，5.4M硝酸比6.4M硝酸付作用小，特别是它不形成开放性创伤。随着硝酸浓度进一步降低，还观察到付作用继续降低。特别是2.4M和1.4M碳酸不再产生水泡。Solcoderm产生与5.4M硝酸相似的反应。加入乙醇制得的两个制剂与相应的纯硝酸溶液相比，付作用明显低，另外此付作用迅速消退;也就是说，这些制剂中与乙醇反应产生的硝酸还原产物将硝酸对正常组织的付作用抑制在实用范围。另外，证明两种制剂都显著优于Solcoderm。
从5.4M硝酸和86mmol/l浓度的乙醇制得的制剂与纯2.4M硝酸具有相似的低付作用。这使得应用安全，因为甚至在由于处理不当时硝酸还原产物降低或完全消失的情况下付作用还保持比较低。打开安瓿24小时后再将样品(20μl)施于皮肤进行对照实验。同样观察其在30小时内的作用，它引起带棕色点的严重发红并形成保持闭合的水泡。因为随着硝酸浓度减低付作用还进一步减低，所以这种制剂也适合于治疗皮肤和粘膜的表层大面积疾病。
实施例6与实施例1类似，用5.4mol/l浓度的硝酸和86mmol/l浓度的乙醇制得的制剂(测得亚硝酸含量3.20mg/ml)，检查其从安瓿打开后30分钟内在胃蛋白酶实验中的作用。胃蛋白酶实验按实施例4所述方法进行。结果列于表5。
表5打开后的时间斜率b斜率b占原始(分)值的%数0.30.50610010.4839530.3927760.28957100.23947230.22144300.16733540.10220安瓿打开后几分钟到一小时内，优选半小时内施用此制剂可保证治疗活性而基本无付作用。
实施例7用表6所示浓度的硝酸和乙醇如实施例1制备数种制剂，将安瓿封口后，在22℃贮存。在不同贮存时间后，用气相色谱分析法测定制剂的乙酸含量。用酶学方法的对照检测(Boehringer的乙酸实验工具)结果与精确测量的范围一致。
表6乙醇浓度硝酸浓度乙酸浓度在22℃下(mmol/l)(mol/l)(mg/ml)贮存时间435.40.5515月436.40.9319月604.90.6121天604.90.5916月605.40.9321天605.40.9016月606.41.6327天606.41.5616月865.41.5723小时865.41.5527天865.41.6313月1295.42.9214月1296.44.6321月结果证实在长期贮存后乙酸浓度保持恒定，并且所用乙醇浓度增加时乙酸浓度提高。但所测乙酸浓度低于所用乙醇浓度。用氯化钡实验检测到二氧化碳是乙醇的另一反应产物。在整个反应溶液中，既没有检测到乙醇也没有检测到其它反应产物;换句话说，乙醇完全转化为乙酸和二氧人碳。
实施例8与实施例1类似，5.4M硝酸与86mnol/l溶液的乙醇混合，将溶液分装在一系列安瓿中。将安瓿中的溶液在各种温度下贮存14天或一个月，然后检查它们的乙酸浓度和硝酸还原产物浓度。结果列于表7中。结果证实所检查贮存温度范围对制剂的组成无明显影响。
表7亚硝酸根贮存条件浓度乙酸浓度(mg/ml)(mg/ml)14天22℃2.351.4230℃2.551.4240℃2.321.3950℃2.471.421月22℃2.371.4330℃2.221.4440℃2.271.4250℃2.811.40实施例9(治疗普通疣和跖疣)为了进行治疗普通疣和跖疣的临床研究，用实施例1中描述的方法制备下列制剂
表8制剂乙醇浓度硝酸浓度(mmol/l)(mol/l)A605.4B865.4C1294.4用A-C中一种制剂治疗总共26个疣(22个病人)，如果病人有两个相似类型的疣，其中一个用Solcoderm治疗以比较。用一小的薄的多孔塑料棒施加制剂，用小塑料棒将制剂逐滴分布在损害处，通过轻刺使其吸收在损害处。继续这种治疗直到患处变色为均一的黄色和/或到感觉到轻微的烧灼。制剂A-C均在约3-5分钟内变色，Solcoderm在约10分钟内变色。类似地，用制剂A-C发生热感或刺痛(在约5-10分钟)比用Solcoderm(在15-30分钟内)快。因此用制剂A-C治疗的时间明显比用Solcoderm短。间隔4-8天重复治疗一次或多次，直到损害完全痊愈。结果列于表9中。
表92次治疗后2次治疗后适应症/制剂总例数一次治疗后痊愈没完全治愈普通疣B4-22C7322跖疣A5221B6132C4112
表9中所列例子中，2次治疗后损害还没有完全治愈，一个普通疣用制剂B治疗第三次后痊愈，一个跖疣用制剂B治疗第三次后痊愈，另一个治疗第4次后痊愈，一个跖疣用制剂C治疗第3次后完全愈合。其它例子在写入此中间报告时还在治疗中。
用对比制剂治疗四个普通疣和两个跖疣，其中2个普通疣和一个跖疣在一次治疗后痊愈，2个普通疣和一个跖疣在第二次治疗后痊愈。
实施例10(治疗脚真菌病)在一研究例中，用本发明制剂治疗双脚有脚真菌感染的病人，用实施例1类似方法从5.4M硝酸和每升溶液86mmol的乙醇制备该制剂。
一只脚在第4和第5脚趾间有严重真菌感染，有暂时脱皮和严重发红。当分开脚趾时残留的薄皮脱落，引起出血。在用oxiconazole制剂(Oceral，Roche)治疗不成功后，用约100μl本发明的制剂施于患处，病人感觉到皮肤损坏区域有几秒钟的短时刺痛灼烧感，皮肤损坏区周围有限区域内变色为棕色。大部分其它感染皮肤和周围的健康皮肤不变色或仅有轻微变黄。治疗8小时后，治疗皮肤还有严重发红，病人还感觉有轻微的压痛，但松驰时不再痛。患处随后用伤口愈合软膏(Solcoseryl软膏，Solco Basel AG)治疗过夜。3天后，典型脚真菌皮肤损害已经消失;皮肤表面硬且紧。7天后，感染区彻底痊愈，并且不复发。
另一只脚有轻度真菌感染而无皮肤脱落。用本发明的制剂治疗感染区，无痛感。7天后，患区彻底痊愈，并且同样不复发。
实施例11(治疗甲癣)在另一研究病例中，有甲癣的病人(右手指甲环、中部和外端均受感染)用本发明的制剂治疗，后者用实施例1所述方法从3.4M硝酸和129mol/l乙醇制得。治疗前，用amorohfine制剂(Locergl-Lack，Rocbe)治疗，没有观察到真菌感染减小和指甲生长。
将本发明的制剂施于感染指甲上，几分钟后明显变色为黄一棕色。病人无痛感，只是在一点有持续约3分钟的轻度烧灼感，该从指甲床到正常皮肤过渡区皮肤有小损伤。3天后，特别严重感染的部分指甲破裂。每7天重复一次用本发明制剂的治疗。只14天后，观察到指甲有明显改善(毁坏的程度减轻了)。2个月后，观察到指甲生长;但与指甲床相连的指甲后部仍有感染，因为指甲床本身有真菌感染。因此，本发明制剂适合于治疗表面甲癣病;但在指甲床感染的病例中，治疗必须与口服抗真菌剂一起进行。
权利要求
1.基于含硝酸还原产物的硝酸水溶液、用于局部治疗皮肤和粘膜表层病变及皮肤和治粘膜表层感染的制剂，其特征在于该制剂包含1-5.5M硝酸水溶液、浓度相当于每毫升溶液中含0.1-6mg亚硝酸根的硝酸还原产物、和浓度不超过每升溶液170mmol的C1-C5烷酸。
2.权利要求1的治疗皮肤和粘膜增生病变的制剂，其特征在于其硝酸浓度为4-4.5M。
3.权利要求1的治疗皮肤和粘膜真菌疾病的制剂，其特征在于其硝酸浓度为1-4M。
4.权利要求1-3中任一项的制剂，其特征在于硝酸还原产物的浓度相当于每ml溶液中1-5mg亚硝酸根。
5.权利要求4的制剂，其特征在于硝酸还原产物的浓度相当于每毫升溶液中2-4mg亚硝酸根。
6.权利要求1-5中任一项的制剂，其特征在于C1-C5-烷酸的浓度至少为每升5mmol。
7.权利要求6的制剂，其特征在于C1-C5-烷酸的浓度为每升9-90mmol。
8.权利要求1-7中任一项的制剂，其特征在于它所含C1-C5-烷酸为乙酸。
9.权利要求1-8中任一项的制剂，其特征在于它存在于不透气的容器中，优选在密封的安瓿中。
10.权利要求9的制剂，其特征在于液体体积与容器总容积的比例不超过1∶2，优选1∶10到1∶5。
11.制备权利要求1-10的制剂的方法，其特征在于1-5.5M硝酸水溶液与量为生升硝酸45-17-mmol的一级C1-C5-链烷醇反应。
12.权利要求11的方法，其特征在于每升硝酸用60-90mmol的一级C1-C5-链烷醇。
13.权利要求11或12的方法，其特征在于乙醇用作一级C1-C5-链烷醇。
14.权利要求11-13中任一项的方法，其特征在于硝酸和一级C1-C5-链烷醇在低于反应温度的温度下混合，混合物在不透气的容器中，优选在密封的安瓿中，将混合物加热至反应温度或以上。
15.权利要求14的方法，其特征在于硝酸与乙醇在温度不超过10℃下混合，将在气密容器中的混合物加热至20-40℃，优选室温。
全文摘要
通过1－5.5M硝酸与每升硝酸45－170mmol的一级C
文档编号A61K33/30GK1103291SQ9410672
公开日1995年6月7日 申请日期1994年6月22日 优先权日1993年6月23日
发明者M·格拉博, C·斯塔利, R·迈耶, R·格劳泽, M·韦纳 申请人:索尔科巴塞尔公司