专利名称：具有止喘、抗变态反应、抗炎、免疫调节和神经保护作用的新的1,2,5－三取代1,2－二氢 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的吲唑-3-酮衍生物的制备，及其作为具有止喘、抗变态反应、抗炎、免疫调节和神经保护特性的药物的应用。
背景技术：
环孢菌素A(CsA)和FK506是源自真菌的免疫抑制天然物，它们抑制一些细胞类型中的Ca2+-依赖性信号传导途径。在T细胞中，这两种化合物都能抑制多种基因的转录。CsA和FK506都以高亲和力与可溶性受体蛋白例如亲环蛋白(Cyp)或FK506结合蛋白(FKBP)结合(G.Fischer等人，Nature 337(1989),476-478；M.W.Harding等人，Nature 341(1989),755-760)。
复合物CsA-Cyp或FK506-FKBP结合钙调磷酸酶(CN)并抑制其磷酸酶活性。转录因子NF-AT的胞质磷酸化部分作为CN的细胞靶分子被识别，因此当缺乏CN活性时，IL2启动子上的活化转录复合物就不能被接通(M.K.Rosen,S.L.Schreiber,Angew.Chem.104(1992),413-430；G.Fischer,Angew.Chem.106(1994),1479-1501)。
变态反应性、哮喘性疾病是由于通过T细胞及其介体控制的炎性反应所致。在许多变态反应性疾病的治疗中，皮质类固醇仍然是选择的治疗剂。在动物实验和临床实验中也证实了CsA和FK506在支气管哮喘和是其发病基础的炎症中的有益治疗作用。
尽管为了鉴定出新的活性亲免素(immunophilin)抑制剂人们已经作了大量尝试，但是迄今为止，仍没能制得或分离出比CsA、FK506、雷怕霉素或这些天然物的衍生物更有活性的结构。然而，CsA、FK506和雷怕霉素的高抑制潜力被多种副作用、尤其是肾毒性大大地削弱了(N.H.Sigal等人，J.Exp.Med.173(1991)，619-6128)。在这一事实背后的是亲免素配体与细胞特异性结合蛋白之间的相互作用的非特异性。结果严重限制了这些免疫抑制剂的已知医疗作用。此外，这些化合物缺乏选择性就意味着它们的应用成问题，尤其是在长期治疗中更是如此。
抑制肽基脯氨酰基异构酶(PPIase)例如Cyp或FKBP的活性的物质具有神经保护作用，能刺激神经元生长，并适于治疗神经变性疾病(WO96/40140、US5696135、WO97/18828)。
在取代基X、Y、Z、R1、R2和R3以及其药效学方面与本发明要求保护的化合物不同的取代吲唑衍生物是已知的。
Baiocchi等人(Synthesis 1978(9),633-648)对1,2-二氢-3H-吲唑-3-酮的合成和特性作了总体评述。
Schindler等人(WO97/34874)描述了具有止喘、抗变态反应、抗炎和免疫调节作用的1,3,5-三取代吲唑。
EP0199543描述了1,6-二取代的1,2-二氢-吲唑-3-酮及其药物应用。
WO94/24109描述了适于治疗HIV感染的吲唑衍生物。
Ketami等人(J.of Heterocycl.Chem.7(4),807-813(1970))描述了1,5-二取代1,2-二氢吲唑-3-酮。
US3470194提及了使用极性溶剂时二取代(1,2-二氢-3-氧吲唑-2-基)链烷酸的形成。
K.V.Auwers(Ber.Dtsch.Chem.Ges.58,2081-2088(1925))和K.V.Auwers等人(Justus Liebigs Ann.Chem.451,281-307(1927))描述了酰基吲唑及其迁移物的结构。
Zoni等人(Il Farmaco Ed.Sci.23(5),490-501(1968))和Zoni等人(Boll.Chim.Farm.107,598-605(1968))描述了1-取代的1H-吲唑-3-醇的烷基化。
Evans等人(Tetrahedron 21,3351-3361(1965))描述了1,3-取代的酰基吲唑和甲苯磺酰基吲唑的合成。
Tse等人(Arch.Pharm.329(1),35-40(1996))报道了N-取代吲唑的抗炎特性。
Anderson等人(J.Chem.Soc.C,3313-3314(1971))描述了1,3-取代甲苯磺酰基吲唑。
Palazzo等人(J.Med.Chem 9,38-41(1996))和Gyula等人(Acta pharm.Hung.44,49-57(1974))描述了2-二甲基氨基烷基-1-苯基吲唑-3-酮的合成。
Klicnar(Coll.Czech.Chem.Comm.42,327-337(1977))描述了乙酰基吲唑。
Tserng等人(J.Org.Chem.38,3498-3502(1973))描述了1,2-二取代1,2-二氢吲唑-3-酮的合成。
Aran等人(Heterocycles 45,129-136(1997))描述了没有N-1取代的2-取代吲唑-3-酮的选择性合成。
Aran等人(Liebigs Ann.1996,683-691)、Aran等人(LiebigsAnn.1995,817-824)和Aran等人(J.Chem.Soc.Perkin Trans.I,1119-1127(1993))描述了1,2-取代的5-硝基吲唑-3-酮及其细胞抑制活性。
Bruneau等人(J.Med.Chem.34,1028-1036(1991))描述了作为5-脂氧合酶抑制剂的1-取代和2-取代吲唑-3-酮。
Wyrick等人(J.Med.Chem.27,768-772(1984))描述了具有降低胆固醇作用的1,2-二取代吲唑-3-酮。
Schmutz等人(Helv.Chim.Acta 47,1986-1996(1964))描述了吲唑酮的烷基化。
Yamaguchi等人(Chem.Pharm.Bull.43(2),332-334(1995))描述了2-取代的(1-吡啶-3-基)吲唑-3-酮及其止喘作用。
由于现有技术中的制剂具有很多副作用，缺乏治疗作用，以及迄今为止非特异性太强的治疗，因此非常需要具有高有效性和安全性的化合物来治疗哮喘性疾病。
本发明的目的是发现具有旋转异构酶抑制和/或肺嗜酸性细胞渗入抑制特性的新化合物，并且使得所述化合物可通过目标合成来获得。
本发明式Ⅰ化合物代表能令人惊奇地特异性结合亲免素的一类完全新的物质。本发明化合物对亲免素例如CypB具有高亲和力。
本发明描述令人惊奇的是，现在已经发现本发明新的吲唑衍生物能抑制PPIase的作用。因此，本发明化合物对于制备用于治疗其中抑制PPIase对其有利的疾病的药物有重要价值。所述疾病是例如外周神经病、神经变性、中风、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、创伤性脑疾病、多发性硬化。
此外还已证实，本发明化合物能抑制嗜酸性粒细胞渗入到组织中，这种渗入是哮喘后期反应的特征。
本发明涉及通式Ⅰ所示新的1,2,5-三取代1,2-二氢吲唑-3-酮类化合物， 式Ⅰ其中X、Y、Z、R1、R2和R3具有下述含义X可以是-SO2-、-SO-、-(CH2)p-、-(CH2)p-O-、-(CH2)p-(C=O)-、-(CH2)p-(C=O)-NH-、-(CH2)p-CHOH-、-CHOH-(CH2)p-、-(CH2)p-CH=CH-、-CH=CH-(CH2)p-，其中p=1-4,Y可以是-(C=O)-、-(C=O)-NH-、-(C=O)-NH-(CH2)p-、-(C=O)-(CH2)p-、-(CH2)p-、-(CH2)p-O-、-(CH2)p-(C=O)-、-(CH2)p-(C=O)-NH-、-(CH2)p-(C=O)-NH-(CH2)p-、-(CH2)p-CHOH-、-CHOH-(CH2)p-、-(CH2)p-CH=CH-、-CH=CH-(CH2)p-，其中p=1-4,Z可以是-O-、其中p=1-4的-O-(CH2)p-、-NH-、-NH-(C=O)-、-NH-(C=O)-NH-、-NH-(C=O)-O-、-NH-CH2-(C=O)-和-NH-(C=O)-CH2-，R1、R2和R3可相同或不同，并具有下述含义具有5-14个环原子的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和碳环，特别是苯基、萘基、蒽基、芴基；或具有5-15个环原子、有1-6个杂原子、并且杂原子优选为N、O和S的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和杂环，特别是噻吩基、吡啶基、异噁唑基、苯并咪唑基、苯并[1,3]间二氧杂环戊烯基、嘧啶基、喹啉基、喹唑啉基、吗啉基、吡咯烷基、吡咯基、苯并[1,2,4]噁二唑基、苯并噻唑基，其中所述碳环和杂环可被下述基团单取代或多取代-C1-6-烷基，-O-C1-6-烷基，-O-C3-7-环烷基，具有3-14个环原子的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和碳环，具有5-15个环原子、有1-6个杂原子、并且杂原子优选为N、O和S的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和杂环，-F,-Cl,-Br,-I,-OH,-SH,-NO2,-NH2,-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2,-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2,-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NHCOC1-6-烷基，-NHCOC6-14-芳基，-CONHC1-6-烷基，-CONHC6-14-芳基，-CONHSO2C1-6-烷基，-CONHSO2C6-14-芳基，-CN,-(CO)C1-6-烷基，-(CS)C1-6-烷基，-COOH，-COOC1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-O-(CO)C1-6-烷基，-O-(CO)C6-14-芳基，苄基，苄氧基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-CF3，其中p=1-4的-(CH2)p-COOH，其中p=1-4的-(CH2)p-COOC1-6-烷基，-SO2-C1-6-烷基，-SO2-C6-14-芳基，R1还可以是H(但是当X=CH2时R1不是H)，R3-Z还可以是NO2。
本发明化合物是新化合物，但是要依据下述限制条件排除一些式Ⅰ化合物如果Z是-NH-(C=O)-、-NH-(C=O)-NH-、-NH-(C=O)-O-、-NH-(C=O)-CH2-，并且同时R1=被-COOH、-COOC1-6-烷基、其中p=1-4的-(CH2)p-COOH、其中p=1-4的-(CH2)p-COOC1-6-烷基、-CONHC1-6-烷基、-CONHC6-14-芳基、-CONHSO2C1-6-烷基、-CONHSO2C6-14-芳基、1H-四唑-5-基单取代或多取代的苯基，则R2必须不是被CN、卤素、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、CF3单取代或多取代的苯基，如果R3-Z=NO2，则R1-X和R2-Y不能同时具有下述含义R1-X=苄基、4-甲氧基苄基，R2-Y=苄基、2-甲基吡啶基。
本发明还涉及式Ⅰ化合物的生理可接受盐。
所述生理可接受盐是依据常规方法通过用无机酸或有机酸将碱中和或通过用无机碱或有机碱将酸中和而获得的。合适的无机酸有例如盐酸、硫酸、磷酸或氢溴酸，有机酸有例如羧酸或磺酸，例如乙酸、酒石酸、乳酸、丙酸、乙醇酸、丙二酸、马来酸、富马酸、鞣酸、琥珀酸、藻酸、苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、柠檬酸、苹果酸、水杨酸、3-氨基水杨酸、抗坏血酸、扑酸、烟酸、异烟酸、草酸、氨基酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1,2-二磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸或萘-2-磺酸。合适的无机碱是例如氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氨，有机碱是例如胺，优选为叔胺，例如三甲基胺、三乙胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、喹啉、异喹啉、α-甲基吡啶、β-甲基吡啶、γ-甲基吡啶、喹哪啶或嘧啶。
此外，式Ⅰ化合物的生理可接受盐可通过依据本身已知的方法将具有叔氨基的衍生物转化成相应的季铵盐而获得。合适的季铵化试剂是例如卤代烷例如碘甲烷、溴乙烷、和正丙基氯，但是也可以是芳烷基卤例如苄基氯或2-苯基乙基溴。
此外，含有不对称碳原子的本发明式Ⅰ化合物涉及D型、L型和D,L混合物，并且当有多个不对称碳原子时，还涉及非对映异构型。含有不对称碳原子的式Ⅰ化合物通常是以消旋体形式得到的，并且可通过本身已知的方法拆分成旋光异构体，例如使用旋光性酸进行拆分。然而，还可以使用旋光性原料从头进行合成，以获得相应的旋光性或非对映异构化合物作为终产物。
本发明还涉及本发明化合物或其生理可接受盐的制备及其作为下述抑制剂在制备用于治疗下述疾病的药物中的应用1．作为旋转异构酶抑制剂在制备用于治疗由该酶介导的疾病的药物中的应用，和/或2．作为后期嗜酸性细胞增多抑制剂在制备用于治疗通过这些细胞介导的疾病的药物中的应用。
这些疾病包括例如外周神经病，神经变性，中风，帕金森氏病，阿尔茨海默氏病，创伤性脑疾病，多发性硬化，支气管哮喘，变应性鼻炎，变应性结膜炎，特应性皮炎，湿疹，变应性脉管炎，由嗜酸性细胞介导的炎症例如嗜酸细胞性筋膜炎、嗜酸细胞性肺炎和PIE综合征，自身免疫性疾病例如类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、红斑狼疮、牛皮癣、肾小球性肾炎和眼色素层炎，胰岛素依赖型糖尿病和脓毒病。
本发明化合物或其生理可接受盐还可用于制备用于防止细胞、组织或器官移植后排斥反应的药物。
为了制备药物，除了常规辅料、载体和添加剂以外，还使用有效剂量的本发明化合物或其盐。
活性化合物的剂量可根据给药途径、患者年龄、体重、欲治疗疾病的性质和严重程度以及类似因素而变。
日剂量可作为单剂量给药，每天给药1次或分2次或多次给药，并且日剂量通常为0.001-1000mg。
合适的给药剂型有口服制剂、非胃肠道给药制剂、静脉内给药制剂、透皮给药制剂、局部给药制剂、吸入剂和鼻内给药制剂。
为了给药，可采用常规药物剂型例如片剂、包衣片剂、胶囊剂、可分散粉剂、粒剂、水溶液、水悬浮液或油悬浮液、糖浆剂、果汁剂或滴剂。
固体药物剂型可含有惰性组分和载体，例如碳酸钙、磷酸钙、磷酸钠、乳糖、淀粉、甘露糖醇、藻酸盐、明胶、瓜尔胶、硬脂酸镁或硬脂酸铝、甲基纤维素、滑石、高分散硅酸、硅油、高分子量脂肪酸(例如硬脂酸)、明胶、琼脂或植物或动物脂肪和油、固态高分子量聚合物(例如聚乙二醇)；如果需要的话，适于口服给药的制剂还可含有矫味剂和/或甜料。
液体药物剂型可灭菌和/或任选含有辅料例如防腐剂，稳定剂，湿润剂，渗透剂，乳化剂，涂布剂，助溶剂，调节渗透压或用于缓冲的盐、糖或糖醇，和/或粘性调节剂。
这类调节剂是例如酒石酸盐和柠檬酸盐缓冲剂、乙醇、络合剂(例如乙二胺四乙酸及其无毒盐)。为了调节粘度，可使用高分子量聚合物例如液态聚氧化乙烯、微晶纤维素、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖或明胶。固体载体是例如淀粉、乳糖、甘露糖醇、甲基纤维素、滑石、高分散硅酸、高分子量脂肪酸(例如硬脂酸)、明胶、琼脂、磷酸钙、硬脂酸镁、动物和植物脂肪、固态高分子量聚合物例如聚乙二醇。
非胃肠道给药或局部给药用的油悬浮液可以是植物油、合成油或半合成油，例如在脂肪酸链中具有8-22个碳原子的液态脂肪酸酯，例如用具有1-6个碳原子的一元-三元醇例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或它们的异构体、乙二醇或甘油酯化的棕榈酸、月桂酸、十三烷酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、肉豆蔻酸、二十二烷酸、十五烷酸、亚油酸、反油酸、巴西酸、芥酸或油酸。这类脂肪酸酯是例如市售Miglyols、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、PEG 6-癸酸、饱和脂肪醇的辛酸/癸酸酯、聚氧化乙烯甘油三油酸酯、油酸乙酯、蜡状脂肪酸酯例如人工鸭尾羽腺脂肪、可可酸异丙酯、油酸油醇酯、油酸癸酯、乳酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、己二酸二异丙酯、多元醇脂肪酸酯等。同样适用的有具有不同粘度的硅油或脂肪醇例如异十三烷醇、2-辛基十二烷醇、十六烷基硬脂醇或油醇，脂肪酸例如油酸。还可以使用植物油例如蓖麻油、杏仁油、橄榄油、芝麻油、棉子油、花生油或豆油。
可使用的溶剂、胶凝剂和助溶剂是水或可与水混溶的溶剂。合适的有例如醇如乙醇、异丙醇、苯甲醇、2-辛基十二烷醇、聚乙二醇、邻苯二甲酸酯、己二酸酯、丙二醇、甘油、一缩二丙二醇、二缩三丙二醇、蜡、甲基溶纤剂、溶纤剂、酯、吗啉、二氧杂环己烷、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、环己酮等。
成膜剂是既可在水中又可在有机溶剂中溶解或膨胀的纤维素醚，例如羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素或可溶淀粉。
介于胶凝剂和成膜剂之间的混合型也完全是可适用的。尤其可使用离子型大分子，例如羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸及其盐、支链淀粉半羟乙酸钠、藻酸或丙二醇藻酸盐例如钠盐、阿拉伯胶、黄原胶、瓜尔胶或角叉菜胶。
可使用的其它制剂辅料有甘油、具有不同粘度的石蜡、三乙醇胺、胶原、尿囊素、novantisolic acid。
在配制制剂时，可能还需要使用表面活性剂、乳化剂或湿润剂，例如十二烷基硫酸钠、脂肪醇醚硫酸酯、N-十二烷基-β-亚氨基二丙酸二钠、聚乙氧基化蓖麻油或脱水山梨醇一油酸酯、脱水山梨醇一硬脂酸酯、聚山梨酸酯(例如吐温)、鲸蜡醇、卵磷脂、甘油一硬脂酸酯、聚氧化乙烯硬脂酸酯、烷基苯基聚乙二醇醚、氯化十六烷基三甲基铵、或一/二烷基聚乙二醇醚正磷酸一乙醇胺盐。
为了制备所需制剂，也可能需要使用用于稳定乳液的稳定剂例如蒙脱石或胶体硅酸或用于防止活性组分变化的物质例如抗氧化剂如生育酚或丁基羟基苯甲醚或防腐剂例如对羟基苯甲酸酯。
制剂的配制、分装和密封是在常规抗微生物和无菌条件下进行的。
药物制剂的剂量取决于患者的年龄、身体状况和体重以及给药形式。本发明活性化合物的日剂量一般为0.001-25mg/kg体重。
制备依据本发明，通式Ⅰ化合物可通过下述方法制得制备通式Ⅰ化合物的方法，其特征在于a)对于X=-SO2-、-SO-，依据反应方案1进行反应。
在碱存在下、适当时在稀释剂存在下，将磺酸(1H-吲唑-3-基)酯Ⅱ反应以生成通式Ⅲ化合物，其中R1、R3、X和Z的定义同上。
适当时在碱、尤其是氢化钠存在下，并且适当时在稀释剂、尤其是二甲亚砜存在下，将磺酸(1H-吲唑-3-基)酯Ⅱ或1-磺酰基吲唑类Ⅲ与下述通式化合物反应Hal-Y-R2、O=C=N-(CH2)p-R2、[R2-(CH2)p-C=O]2O其中p=0-5,R1、R2、R3、X、Y和Z定义同上，并且Hal是卤素原子F、Cl、Br或碘，以生成通式Ⅰ化合物，其中R1、R2、R3、X、Y和Z定义同上。反应方案1 式Ⅱ 式Ⅲ 式Ⅰb)对于X=-(CH2)p-、-(CH2)p-O-、-(CH2)p-(C=O)-、-(CH2)p-(C=O)-NH-、-(CH2)p-CHOH-、-CHOH-(CH2)p-、-(CH2)p-CH=CH-、-CH=CH-(CH2)p-，其中p=1-4，依据反应方案2进行反应。
适当时在碱、尤其是吡啶或氢化钠存在下，并且适当时在稀释剂、尤其是四氢呋喃或二甲亚砜存在下，将通式Ⅲ化合物与下述通式化合物反应Hal-Y-R2、O=C=N-(CH2)p-R2、[R2-(CH2)p-C=O]2O其中p=0-5,R1、R2、R3、X、Y和Z定义同上，并且Hal是卤素原子F、Cl、Br或碘，以生成通式Ⅰ化合物，其中R1、R2、R3、X、Y和Z定义同上。反应方案2 式Ⅲ 式Ⅰ其中依据反应方案3，式Ⅲ还可以作为互变异构形式式Ⅳ存在。反应方案3 式Ⅲ 式Ⅳ通式Ⅰ化合物是新化合物。
有效实施例提及下述代表性本发明化合物以举例说明2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-三氟甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-氯苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氟苯磺酰基)-2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1,2-二氢吲唑-3-酮；N-(4-[2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢吲唑-1-磺酰基]苯基)乙酰胺；2-(4-氟苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(4-氟苄基)-5-甲氧基-1-(4-氯苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氟苯磺酰基)-2-(4-氟苄基)-5-甲氧基-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-氟苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；
1-(4-氟苯磺酰基)-2-(2-氟苄基)-5-甲氧基-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(3-甲氧基苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(3-三氟甲基苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(4-氯苯基)噻唑-4-基甲基]-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；5-甲氧基-2-(3-苯基烯丙基)-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；5-甲氧基-2-(3-氧代-3-苯基丙基)-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(2,6-二氟苯氧基)乙基]-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(2-溴-4,6-二氟苯氧基)乙基]-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(2-溴-4,6-二氟苯氧基)乙基]-5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；N-(4-{2-[2-(2,4-二氧代-1,4-二氢-2H-喹唑啉-3-基)乙基]-5-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢吲唑-1-磺酰基}苯基)乙酰胺；2-{3-[4-(3-氯苯基)哌嗪-1-基]丙基}-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氯苯磺酰基)-2-{3-[4-(3-氯苯基)哌嗪-1-基]丙基}-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；N-苄基-2-[5-甲氧基-3-氧代-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,3-二氢吲唑-2-基]乙酰胺；2-[5-甲氧基-3-氧代-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,3-二氢吲唑-2-基]-N-(4-甲氧基苯基)乙酰胺；2-(2,6-二氯苯甲酰基)-5-硝基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(3,4-二氯苄基)-2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲硫基-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2-氟苯基)酰胺；5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺；5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2-氟-6-三氟甲基苯基)酰胺；3-[2-(2-氟苯基氨基甲酰基)-5-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢吲唑-1-基甲基]苯甲酸甲酯；1-(4-氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺；1-(4-氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(4-硝基苄基)酯；1-(2,6-二氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺；1-(2-氯-6-氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺。
通过熔点、薄层色谱法、元素分析、NMR光谱、IR和UV-VIS光谱以及任选使用质谱来描绘化合物的特性。
使用柱液体色谱法纯化在实施例1-35化合物的制备中，可形成副产物通式Ⅴ1-和3-O-取代的1H-吲唑类化合物。 式Ⅴ
一般可通过重结晶将通式Ⅰ化合物与通式Ⅴ化合物分离开。如果使用重结晶不成功的话，则需要使用在下述条件下的柱色谱法分离固定相正相硅胶，例如Si60-100，粒径为5-100μM。洗脱剂二氯甲烷/乙酸乙酯=95/5或二氯甲烷/甲醇=95/5。
通式Ⅰ化合物的极性比通式Ⅴ化合物大，因此在这些色谱条件下通式Ⅰ化合物在通式Ⅴ化合物之后被洗脱下来。该纯化操作适用于所有实施例1-35。
实施例12-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮 将5.01g(15mmol)4-甲氧基苯磺酸(5-甲氧基-1H-吲唑-3-基)酯溶于70ml DMSO中，并用1.5g(37.5mmol)氢化钠(60％)分批处理。搅拌2小时后，滴加2.81g(15mmol)2-羟基-5-硝基苄基氯在25ml DMSO中的溶液，将该混合物在90-100℃搅拌3小时。冷却后，加入400ml水，将该混合物搅拌3小时，用400ml乙酸乙酯萃取3次。合并有机相，用100ml水洗涤，用硫酸钠干燥，真空蒸馏至干，将残余物在乙醇中重结晶。
产量3.0g(产率为理论产率的41.1％)熔点215-217℃13C NMR(DMSO-d6；300MHz):δ=46.0 CH2N；55.82×CH3O；165.1C=O。
IR(KBr):v=1669cm-1C=O。
表1所列化合物是通过类似方法制得的。表1 式ⅥR1=CH3O 实施例252-(2,6-二氯苯甲酰基)-5-硝基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮 将5g(0.015mol)甲苯-4-磺酸(5-硝基-1H-吲唑-3-基)酯溶于50ml吡啶中，并与3.77g(0.018mol)2,6-二氯苯甲酰氯在80℃搅拌30分钟。冷却后，将该混合物搅拌到150ml水中，用100ml 5N盐酸处理，抽滤出固体，并用水洗涤。通过使用硅胶Si60的制备性HPLC将粗产物纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯=99/1洗脱。
产量2.4g(理论产率的32％)熔点195-197℃(EtOAC)13C NMR(DMSO-d6；300MHz):δ=20.27CH3；159.33 C=O；162.87C=O。
IR(KBr):v=1726cm-1C=O。
实施例261-(3,4-二氯苄基)-2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲硫基-1,2-二氢吲唑-3-酮水合物 将3.6g(11mmol)1-(3,4-二氯苄基)-5-甲硫基-1H-吲唑-3-醇溶于100ml DMSO中，并用0.34g(13.2mmo1)氢化钠(95％)分批处理。搅拌2小时后，滴加2.1g(11mmol)2-羟基-5-硝基苄基氯在20ml DMSO中的溶液，将该混合物在60℃搅拌3小时。冷却后，滴加200ml水，将该混合物搅拌4小时，抽滤出固体。在搅拌下趁热用甲醇提取沉淀，并用2-丙醇重结晶。
产量1.0g(理论产率的18.5％)熔点225℃13C NMR(DMSO-d6；300MHz):δ=13.7CH3S；48.82×CH2N；160.6C=O。
IR(KBr):v=1623cm-1C=O。
表2所示化合物是使用5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-1H-吲唑-3-醇作为原料、通过类似方法制得的。
表2 式ⅦR1=CH3O 实施例285-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2-氟苯基)酰胺 将1.8g(0.013mol)异氰酸(2-氟苯基)酯加到3.0g(0.01mol)5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-1H-吲唑-3-醇在100ml四氢呋喃内的溶液中，将该混合物加热回流4小时．然后浓缩至20ml，抽滤出沉淀物，并用乙酸乙酯重结晶。
产量1.1g(理论产率的25％)熔点149-151℃13C NMR(DMSO-d6300MHz)δ=157.22 C=O165.15 C=O。
IR(KBr)v=1682;1727cm-1C=O。
表3所列化合物是通过类似方法制得的。
表3 式ⅧR1=CH3O 为了确定本发明化合物的止喘、抗变态反应、抗炎和/或免疫调节作用，进行体外和体内实验。
本发明式Ⅰ化合物令人惊奇地表现出亲免素结合以及抑制肽基脯氨酰基顺式-反式异构酶(PPIase)的活性。为了进行初步筛选(10μmol/1)，在该PPIase实验中测定对人亲环蛋白B的抑制作用。
测定肽基脯氨酰基异构酶(PPIase)活性和抑制的实验方法依据全球通用的常规酶测试法测定PPIase活性G.Fischer,H．Bang,C.Mech,Biomed.Biochim.Acta 43 1101-1111:G.Fischer,H.Bang,A.Schellenberger,Biochim.Biophys.Acta 791(1984),87-97:D.H.Rich等人，J.Med.Chem.38(1995),4164-4170。
将本发明通式Ⅰ化合物在4℃与10 nmol Gyp B一起预培养15分钟。加入胰凝乳蛋白酶和HEPES缓冲液后，用测试肽Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-Nan启始该酶反应。然后监视和评价在390 nm的消光变化。该通过光度法测定的消光改变是由于两个子反应所致a)该反式肽的迅速的胰凝乳蛋白酶裂解；b)通过亲环蛋白催化的非酶顺式-反式异构化。测定的所选通式Ⅰ化合物对PPIase活性的抑制如表4所示表4
在活性致敏的豚鼠中吸入卵清蛋白攻击24小时后对后期嗜酸性细胞增多的抑制方法在使用通过卵清蛋白(OVA)致敏的雄性Dunkin-Hartley豚鼠(200-250g)的体内测试中，测试本发明化合物对肺嗜酸性细胞渗入的抑制。致敏是这样进行的在连续2天内，给每只动物腹膜内注射20μg OVA与20mg氢氧化铝(佐剂)在0.5ml生理盐水中的悬浮液，共注射2次。第2次注射14天后，用马来酸甲氧苄二胺(10mg/kg，i.p.)对动物进行预治疗，以防止动物过敏性死亡。30分钟后，在塑料盒中将动物暴露于OVA气雾(0.5mg/ml)30秒(变应原攻击)，其中该气雾是由压缩空气(19.6kPa)驱动喷雾器产生的。给对照动物喷雾生理盐水溶液。攻击24小时后，用过量乙基乌拉坦(1.5g/kg体重，i.p.)将动物麻醉，用2×5ml生理盐水溶液进行支气管肺泡灌洗(BAL)。收集该BAL液体，以300rpm转速离心10分钟，然后将细胞沉积物重悬在1ml生理盐水溶液中。使用嗜酸性细胞用Becton-Dickinson测试试剂盒(N.5877)将嗜酸性细胞染色，在Neubauer室中计数。在每一测试中还包括2个对照组(用生理盐水溶液喷雾的组和用OVA溶液喷雾的组)。
依据下述公式计算用测试物治疗的测试组的嗜酸性细胞增多的％抑制(A-C)-(B-C)/(A-C)×100=％抑制在变态原攻击前2小时，将测试物以在10％聚乙二醇300和0.5％浓度5-羟基乙基纤维素中的悬浮液形式腹膜内或口服给药。对照组用依据测试物给药剂型的载体治疗。每一对照组和测试组中动物的数目为3-10。结果如表5所示表5
A=在用OVA攻击的、用载体治疗的对照组中的嗜酸性细胞数目B=在用OVA攻击的、用测试物治疗的组中的嗜酸性细胞数目C=在用0.9％浓度NaCl攻击的、用载体治疗的对照组中的嗜酸性细胞数目x=平均值s=标准偏差因此，本发明化合物特别适用于制备用于治疗与免疫过程抑制有关的疾病的药物。
权利要求
1．通式Ⅰ所示新的1,2,5-三取代1,2-二氢吲唑-3-酮类化合物 式Ⅰ其中X、Y、Z、R1、R2和R3具有下述含义X可以是-SO2-、-SO-、-(CH2)p-、-(CH2)p-O-、-(CH2)p-(C=O)-、-(CH2)p-(C=O)-NH-、-(CH2)p-CHOH-、-CHOH-(CH2)p-、-(CH2)p-CH=CH-、-CH=CH-(CH2)p-，其中p=1-4,Y可以是-(C=O)-、-(C=O)-NH-、-(C=O)-NH-(CH2)p-、-(C=O)-(CH2)p-、-(CH2)p-、-(CH2)p-O-、-(CH2)p-(C=O)-、-(CH2)p-(C=O)-NH-、-(CH2)p-(C=O)-NH-(CH2)p-、-(CH2)p-CHOH-、-CHOH-(CH2)p-、-(CH2)p-CH=CH-、-CH=CH-(CH2)p-，其中p=1-4,Z可以是-O-、其中p=1-4的-O-(CH2)p-、-NH-、-NH-(C=O)-、-NH-(C=O)-NH-、-NH-(C=O)-O-、-NH-CH2-(C=O)-和-NH-(C=O)-CH2-,R1、R2和R3可相同或不同，并具有下述含义具有5-14个环原子的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和碳环，特别是苯基、萘基、蒽基、芴基；或具有5-15个环原子、有1-6个杂原子、并且杂原子优选为N、O和S的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和杂环，特别是噻吩基、吡啶基、异噁唑基、苯并咪唑基、苯并[1,3]间二氧杂环戊烯基、嘧啶基、喹啉基、喹唑啉基、吗啉基、吡咯烷基、吡咯基、苯并[1,2,4]噁二唑基、苯并噻唑基，其中所述碳环和杂环可被下述基团单取代或多取代-C1-6-烷基，-O-C1-6-烷基，-O-C3-7-环烷基，具有3-14个环原子的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和碳环，具有5-15个环原子、有1-6个杂原子、并且杂原子优选为N、O和S的单环、二环或三环饱和或单不饱和或多不饱和杂环，-F,-Cl,-Br,-I,-OH,-SH,-NO2,-NH2,-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2,-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2,-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NHCOC1-6-烷基，-NHCOC6 -14-芳基，-CONHC1-6-烷基，-CONHC6-14-芳基，-CONHSO2C1-6-烷基，- CONHSO2C6-14-芳基，-CN，-(CO)C1-6-烷基，-(CS)C1-6-烷基，-COOH，-COOC1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-O-(CO)C1-6-烷基，-O-(CO)C6-14-芳基，苄基，苄氧基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-CF3，其中p=1-4的-(CH2)p-COOH，其中p=1-4的-(CH2)p-COOC1-6-烷基，-SO2-C1-4-烷基，-SO2-C6-14-芳基，R1还可以是H(但是当X=CH2时R1不是H)，R3-Z还可以是NO2，但是要依据下述限制条件排除一些式Ⅰ化合物如果Z是-NH-(C=O)-、-NH-(C=O)-NH-、-NH-(C=O)-O-、-NH-(C=O)-CH2-，并且同时R1=被-COOH、-COOC1-6-烷基、其中p=1-4的-(CH2)p-COOH、其中p=1-4的-(CH2)p-COOC1-6-烷基、-CONHC1-6-烷基、-CONHC6-14-芳基、-CONHSO2C1-6-烷基、-CONHSO2C6-14-芳基、1H-四唑-5-基单取代或多取代的苯基，则R2必须不是被CN、卤素、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、CF3单取代或多取代的苯基，如果R3-Z=NO2，则R1-X和R2-Y不能同时具有下述含义R1-X=苄基、4-甲氧基苄基，R2-Y=苄基、2-甲基吡啶基。
2．权利要求1的化合物，所述化合物是2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-三氟甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(4-氯苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氟苯磺酰基)-2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1,2-二氢吲唑-3-酮；N-(4-[2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢吲唑-1-磺酰基]苯基)乙酰胺；2-(4-氟苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(4-氟苄基)-5-甲氧基-1-(4-氯苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氟苯磺酰基)-2-(4-氟苄基)-5-甲氧基-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-氟苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氟苯磺酰基)-2-(2-氟苄基)-5-甲氧基-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(3-甲氧基苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(3-三氟甲基苄基)-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(4-氯苯基)噻唑-4-基甲基]-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；5-甲氧基-2-(3-苯基烯丙基)-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；5-甲氧基-2-(3-氧代-3-苯基丙基)-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(2,6-二氟苯氧基)乙基]-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(2-溴-4,6-二氟苯氧基)乙基]-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-[2-(2-溴-4,6-二氟苯氧基)乙基]-5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；N-(4-{2-[2-(2,4-二氧代-1,4-二氢-2H-喹唑啉-3-基)乙基]-5-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢吲唑-1-磺酰基}苯基)乙酰胺；2-{3-[4-(3-氯苯基)哌嗪-1-基]丙基}-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(4-氯苯磺酰基)-2-3-[4-(3-氯苯基)哌嗪-1-基]丙基}-5-甲氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；N-苄基-2-[5-甲氧基-3-氧代-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,3-二氢吲唑-2-基]乙酰胺；2-[5-甲氧基-3-氧代-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,3-二氢吲唑-2-基]-N-(4-甲氧基苯基)乙酰胺；2-(2,6-二氯苯甲酰基)-5-硝基-1-(甲苯-4-磺酰基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；1-(3,4-二氯苄基)-2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲硫基-1,2-二氢吲唑-3-酮；2-(2-羟基-5-硝基苄基)-5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-1,2-二氢吲唑-3-酮；5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2-氟苯基)酰胺；5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺；5-甲氧基-1-(3-硝基苄基)-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2-氟-6-三氟甲基苯基)酰胺；3-[2-(2-氟苯基氨基甲酰基)-5-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢吲唑-1-基甲基]苯甲酸甲酯；1-(4-氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺；1-(4-氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(4-硝基苄基)酯；1-(2,6-二氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺；1-(2-氯-6-氟苄基)-5-甲氧基-3-氧代-1,3-二氢吲唑-2-甲酸(2,6-二氯苯基)酰胺。
3．权利要求1或2的新式Ⅰ化合物的生理可接受盐，其特征在于，所述生理可接受盐是通过用无机酸或有机酸将碱中和或通过用无机碱或有机碱将酸中和或通过将叔胺季铵化以生成季铵盐而获得的。
4．权利要求1-3的式Ⅰ化合物及其盐作为治疗活性化合物在制备用于治疗由PPIase介导的疾病的药物中的应用。
5．权利要求1-3的式Ⅰ化合物及其盐作为治疗活性化合物在制备用于治疗与免疫过程抑制有关的疾病的药物中的特别优选的应用。
6．制备依据权利要求1-3的通式Ⅰ化合物的方法，其特征在于，a)对于X=-SO2-、-SO-，依据反应方案1进行反应，即在碱存在下、适当时在稀释剂存在下，将磺酸(1H-吲唑-3-基)酯Ⅱ 式Ⅱ反应以生成通式Ⅲ化合物， 式Ⅲ其中R1、R3、X和Z的定义同权利要求1或同上，并且适当时在碱、尤其是氢化钠存在下，以及适当时在稀释剂、尤其是二甲亚砜存在下，将磺酸(1H-吲唑-3-基)酯Ⅱ或1-磺酰基吲唑类Ⅲ与下述通式化合物反应Hal-Y-R2、O=C=N-(CH2)p-R2、[R2-(CH2)p-C=O]2O其中p=0-5,R1、R2、R3、X、Y和Z定义同权利要求1或同上，并且Hal是卤素原子F、Cl、Br或碘，以生成通式Ⅰ化合物，其中R1、R2、R3、X、Y和Z定义同权利要求1或同上，b)对于X=-(CH2)p-、-(CH2)p-O-、-(CH2)p-(C=O)-、-(CH2)p-(C=O)-NH-、-(CH2)p-CHOH-、-CHOH-(CH2)p-、-(CH2)p-CH=CH-、-CH=CH-(CH2)p-，其中p=1-4，依据反应方案2进行反应，即适当时在碱、尤其是在吡啶或氢化钠存在下，并且适当时在稀释剂、尤其是四氢呋喃或二甲亚砜存在下，将通式Ⅲ化合物与下述通式化合物反应Hal-Y-R2、O=C=N-(CH2)p-R2、[R2-(CH2)p-C=O]2O其中p=0-5,R1、R2、R3、X、Y和Z定义同权利要求1或同上，并且Hal是卤素原子F、Cl、Br或碘，以生成通式Ⅰ化合物，其中R1、R2、R3、X、Y和Z定义同权利要求1或同上，其中依据反应方案3，式Ⅲ还可以作为互变异构形式式Ⅳ存在 式Ⅳ
7．药物组合物，其特征在于，所述组合物含有至少一种权利要求1-3的式Ⅰ化合物作为活性组分和生理可接受载体和/或稀释剂或辅料。
8．药物制剂，其特征在于，所述制剂含有至少一种权利要求1-3的式Ⅰ化合物作为活性组分和合适的载体。
9．权利要求1、2、3、7和8的药物制剂，其特征在于，所述制剂是以片剂、包衣片剂、胶囊剂、气雾剂、粉剂、贴剂、溶液剂、安瓿剂或栓剂的剂型给药。
10．权利要求1-3的式Ⅰ化合物和/或权利要求7和8的药物制剂自身或彼此组合或与载体的组合作为具有止喘、抗变态反应、抗炎和/或免疫调节作用的活性剂的应用。
全文摘要
本发明涉及新的1,2,5－三取代1,2－二氢吲唑－3－酮类化合物,其制备方法以及其药物应用。所述化合物具有止喘、抗变态反应、抗炎、免疫调节和神经保护作用。
文档编号A61K9/12GK1309642SQ99808515
公开日2001年8月22日 申请日期1999年4月1日 优先权日1998年5月11日
发明者R·欣德勒, N·赫夫根, H·波佩, K·布鲁尼 申请人:德雷斯顿药品工厂有限公司