一种疏水药物的纳米晶、制备及使用方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种疏水药物的纳米晶、制备及使用方法，具体涉及一种难溶疏水药 物的纳米晶、制备及使用方法。具体地说，本发明涉及一种通过乳液结晶法制备的难溶性疏 水药物纳米晶、制备及使用方法，所制备的疏水药物纳米晶可对恶性肿瘤，例如乳腺癌、卵 巢癌、白血病、淋巴癌和胰腺癌等，产生理想的治疗和防止肿瘤转移及复发的效果。
【背景技术】
[0002] 经血液系统进行细胞毒性化学药物给药是临床肿瘤治疗的重要手段之一。与手术 治疗和放射治疗相比，化疗属于全身性治疗方案，对中晚期肿瘤、转移性和弥散型肿瘤等均 能发挥治疗效果。由于具有全系统肿瘤杀伤能力，因此化疗无论是作为一种独立的治疗手 段，还是与手术治疗联合施用，在临床治疗上均具有重要地位。尽管化学药物在肿瘤治疗中 至关重要，但目前其应用上存在一个重要瓶颈。近年来，科研人员采用高通量筛选技术得到 了大量具有抗肿瘤活性的化合物，其中至少40%存在难溶性问题。难溶性药物也被称作水 不溶性或脂溶性药物，虽然这类药物在体外展现出良好的抗肿瘤活性，但水溶性差对临床 给药带来巨大挑战，限制了化疗药物的发展速度。难溶性药物的给药困难主要表现在以下 两点：（1)疏水药物在水环境中多以大的聚集体或晶型存在，静脉注射后易造成毛细血管 堵塞，带来安全性问题；（2)机体能自发排泄大的颗粒物，导致药物聚集体体内消除较快血 药浓度容易出现峰谷，从而难以达到有治疗价值的浓度。因此，提高难溶性药物的溶解度和 生物利用度是增强化疗疗效的关键所在。
[0003] 解决化疗药物难溶性问题的方法之一是药物微粉化技术。药物微粉化技术可分为 "自上而下"和"自下而上"两种方法：前者也可称为分散法，也就是将大颗粒原药分散成小 颗粒，常用技术包括机械研磨和高压均质等；后者亦称为沉淀法，是将药物首先溶解于良溶 剂中，然后通过溶剂改变而析出形成细小的沉淀或结晶，常用技术包括沉淀法、冷冻干燥和 喷雾干燥等。
[0004] 目前，这两种技术都存在一些局限和不足之处。其中"自上而下"技术需要机械研 磨和高压均质，制备条件剧烈，过程中药物损失严重，尤其对于热敏性药物还会导致药物有 效成分的分解损失；其次，研磨介质与药物长时间接触还可能造成药物的污染；另外，大部 分机械研磨为间歇批量过程，每批药物的质量不宜精确控制，难以达到临床报批要求。而 "自下而上"技术尽管不存在上述问题，但由于该技术和"自上而下"技术一样都并未改变药 物颗粒的表面性质，药物仍为疏水性，很难避免这种疏水性颗粒在水溶液中重新凝聚，因此 未能从根本上解决药物疏水难溶的问题；另外，所得到的颗粒粒径一般较大，难以制备小于 200nm粒径的纳米颗粒，不能满足临床静脉注射给药的要求。最后，已有的制备技术同样也 不能保证药物颗粒的粒径均一性，粒径偏差极大，不利于实现理想的产品质量控制和药效 的批次重现性。
[0005] 因此，本领域亟待开发一种解决疏水药物如化疗药物难溶的微粉化方法，所述方 法得到的微粉的粒径大小可控，粒径均一，药物有效成分保持良好，水中分散性好，产品质 量易于控制，且药效批次重现性好。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的之一在于提供一种疏水药物的纳米晶，所述疏水药物纳米晶粒径大 小可控，粒径均一，药物有效成分保持良好，水中分散性好，产品质量易于控制，且药效批次 重现性好。
[0007] 本发明所述疏水药物的纳米晶包括：疏水药物和包裹在疏水药物外部的两性分 子；
[0008] 本发明所述疏水药物纳米晶通过乳液结晶法获得，具体地，本发明所述疏水药物 纳米晶通过除去含有疏水药物的0/W型乳液的溶剂分子获得。
[0009] 众所周知，0/W型乳液中含有两性分子（或称表面活性剂），在本发明所述纳米晶 中，保留了 0/W型乳液的两性分子，且所述两性分子包裹在疏水药物上，在水相溶液中能够 起到包裹屏蔽的作用，具有很好的分散性。且包裹的两性分子能够通过接枝作用与靶向分 子结合，实现靶向功能化。
[0010] 本发明所述疏水药物优选为疏水性性化疗药物，优选紫杉醇、喜树碱、姜黄素、 雷帕霉素、TNP470或槲皮素中的任意1种或至少2种的组合；所述组合例如雷帕霉素和 TNP470的组合、槲皮素和喜树碱的组合、紫杉醇和姜黄素的组合等。
[0011] 优选地，所述纳米晶制剂表面结合有靶向分子，所述靶向分子与肿瘤细胞或者肿 瘤血管有特异性亲和能力；所述革El向分子优选叶酸、核酸适体、革El向肽iRGD或亲合小体中 的任意1种或至少2种的组合；所述组合例如叶酸和核酸适体的组合、靶向肽iRGD和亲合 小体（affibody)的组合等。
[0012] 本发明所述纳米晶粒径为 2nm ?1 μ m，例如 3nm、12nm、35nm、60nm、120nm、195nm、 250nm、450nm、500nm、800nm、950nm 等，优选 2 ?600nm，进一步优选 8 ?200nm，特别优选 8 ? IOOnm0
[0013] 优选地，所述纳米晶大小可控。
[0014] 优选地，所述纳米晶粒径分布范围窄，偏差范围< 34%，优选< 20%。
[0015] 本发明通过乳液结晶法制备疏水药物的纳米晶，能够通过控制0/W型乳液的液滴 大小实现控制疏水药物的纳米晶粒径的目的；另一方面，因为乳液液滴在溶液中受到的表 面张力基本一致，所以液滴的粒径基本一致，在去除溶剂分子结晶后，获得的疏水药物的纳 米晶粒径分布范围窄，基本均一。
[0016] 本发明目的之二是提供一种如目的之一所述疏水药物的纳米晶的制备方法，所述 方法包括如下步骤：
[0017] (1)制备含有疏水药物的0/W型乳液；
[0018] (2)去除乳液中的溶剂分子获得疏水药物的纳米晶。
[0019] 本发明所述的药物纳米晶通过乳液结晶法制备，借助0/W型乳液油相液滴的空间 限域作用，保证只有有限数量的疏水性药物分子参与由溶剂分子挥发去除所推动的药物结 晶过程，从而实现对纳米晶粒径大小的精确控制。
[0020] 基于这一原理，通过降低油相液滴的大小和油相中的药物浓度，能够成功地获得 超小粒径的药物纳米晶。晶体大小可以在2nm?Ιμ??范围内进行选择性精确调控。同时， 晶体的粒径分布范围窄，偏差范围小于34%。
[0021] 另外，由于组成纳米晶的主体为药物分子，因此由所述疏水药物纳米晶制备的制 剂具有极高的载药量，药物装载率可以提高到80wt%以上。
[0022] 同时，在溶剂分子被去除并引起药物析晶的过程中，水相中的两性分子会通过结 构中的疏水部位与疏水性药物晶体结合，包裹于晶体表面，起到增加晶体稳定性和水相分 散性能的作用。
[0023] 本发明所述疏水药物为疏水性性化疗药物，优选紫杉醇、喜树碱、姜黄素、雷帕霉 素、TNP470或槲皮素中的任意1种或至少2种的组合。
[0024] 本发明所述含有疏水药物的0/W型乳液通过如下步骤获得：
[0025] 将疏水性性药物溶解于油相中，随后将溶解有疏水性药物的油相与溶解有两性分 子的水相共混，乳化后获得0/W型乳液。
[0026] 优选地，所述两性分子选自泊洛沙姆和聚乙烯吡咯烷酮、甲氧基聚乙二醇棕榈酸 或聚氧乙烯-聚ε -己内酯中的任意1种或至少2种的组合；所述水相中两性分子的浓度 优选为 〇· 1 ?2.0%，例如 0·2%、0·6%、0·9%、1%、1·5%、1·8%等。
[0027] 优选地，所述油相选自三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸乙酯中的任意1种或至少2种的 组合。
[0028] 优选地，所述难溶性药物溶解于油相中的浓度为1?1000mg/mL，例如2mg/mL、 50mg/mL、