、三七13份 制备方法同实施例1。
[0020] 实施例5本发明中药组合物及制备工艺 中药组分的重量份：牛蒡子12份、荆芥8份、黄芪9份、菟丝子5份、生地12份、穿心莲 12份、川弯5份、雷公藤5份、银杏叶12份、桂枝10份、旱莲草9份、银柴胡12份、半枝莲 12份、丹参12份、蒲黄15份、麦冬12份、当归8份、三七12份。
[0021] 制备方法同实施例1。
[0022] 实施例6本发明中药组合物及制备工艺 中药组分的重量份：牛蒡子11份、荆芥7份、黄芪7份、菟丝子4份、生地11份、穿心莲 11份、川弯4份、雷公藤4份、银杏叶11份、桂枝9份、旱莲草8份、银柴胡11份、半枝莲11 份、丹参11份、蒲黄13份、麦冬10份、当归6份、三七15份。
[0023] 制备方法同实施例1。
[0024] (二）药效实施例部分 实施例7本发明中药组合物对系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠的影响 1.实验材料 1. 1实验动物及分组 8周龄系统性红斑狼疮（SLE)MRL/lpr小鼠50只，雌性，由上海斯莱克实验动物有限公 司提供，适应性饲养一周后，按体重随机分为5组，每组10只。ICR小鼠10只，雌性，作为正 常对照组小鼠。
[0025] 正常对照组：灌胃给予溶剂； SLE模型组：灌胃给予溶剂； 泼尼松组：灌胃给予5mg/kg的泼尼松； 中药组合物低剂量组：灌胃给予本发明实施例1制备的药物0. 5g/kg ; 中药组合物中剂量组：灌胃给予本发明实施例1制备的药物lg/kg ; 中药组合物高剂量组：灌胃给予本发明实施例1制备的药物4g/kg。
[0026] 所有试验组每天给药1次，连续给药3周，于给药结束时取血备用，摘取脾脏。
[0027] 1. 2 试剂 (1) IL-10、抗ds-DNA抗体试剂盒购自h海柯丰牛物试剂有限公司 (2) PBS:称取下列试剂 8. 5gNaCl，0. 2gKCl，2.85gNa2HP04.12H20,0. 27gKH2P04,用 IL 双 蒸水定容，以上试剂均是为市售分析纯 (3) 红细胞裂解液：先配制0· 83%NH4C1，再配制tris溶液（称取tris20. 594g溶于 500-700ml蒸馏水中，再用IMHCl调pH7. 65至1L)，把0. 83%NH4C1与tris溶液按9:1比例 混合后即得。
[0028] (4)抗小鼠荧光标记单克隆抗体CD3 (FITC)，为BeckmanCoulter公司产品 (5)抗小鼠突光标记单克隆抗体⑶4 (PE)、Q)8a (PE), Caltaglaboratories产品 2. 实验方法 2.1 T淋巴细胞亚群分析 脾细胞单细胞悬液的制备：把小鼠的脾脏放入盛有冷PBS液的培养皿中清洗，在玻璃 匀浆器中加入3mlPBS研磨，再用200目不锈钢网过滤，把脾匀浆液离心以转速1500rpm/min 离心7分钟，弃上清液，并加入红细胞裂解液2. 5ml，混匀，静置2分钟后再加入PBS液2ml 终止裂解反应，再以1500rpm/min离心7分钟，弃去上清液，用PBS洗三次后加入PBS，在荧 光显微镜下计算细胞数。以上的操作均需在冰上。
[0029] 用以上脾细胞单细胞悬液，计细胞数后，把细胞浓度调整为5X106 cells/ml。每 一组取其中一只小鼠脾细胞样本做亚群分析，把已调整浓度的小鼠脾细胞样本加入流式细 胞分析专用管，每只小鼠脾细胞样本制备两管，每管加入样本100 μ 1。
[0030] 在含有样品专用管的第一管加5μ1⑶3 (FITC)和3μ1⑶4 (ΡΕ)，第二管加5μ1⑶3 (FITC)和3μ1⑶8 (ΡΕ)。室温闭光孵育20min，各管加入500 μ 1鞘液，振荡混匀。准备上机 分析。
[0031] 2. 2血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量测定 按试剂盒操作说明操作即可。
[0032] 2. 3尿微量白蛋白的测定： 实验试剂：10% (v/v)的冰醋酸溶液（PH2.8) ;0. 303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液 (PH3. 0):称取22. 72g甘氨酸，用10%冰醋酸溶液稀释成1000ml，加 NaN3IOOmg,室温密 封可稳定1年；溴酚蓝（I. 924mmol/L)贮存液：精确称取257. 36mgBPB，用无水乙醇溶 至200ml，4°C冰箱可稳定1年；溴酚蓝（0· 231mmol/L)显色剂：取60mlBPB贮存液，加入 2. 5mlTritonX-100,用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。
[0033] 标本的采集和检测：于第20天将小鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12小时 尿，准确记录尿量。叠氮钠处理后，离心（2000r/min)10min，量取储存的小鼠尿液2ml，各加 显色剂lml，混匀（防止产生气泡)，用紫外分光光度计于600nm下测定吸光度A。吸光度A 反映尿微量白蛋白的含量大小，A值越小，尿微量白蛋白含量越低。
[0034] 实验数据按照以下方法进行统计学处理：采用SPSS10. 0统计软件，计算数据以均 数土标准差（X土 s)表示，多组资料比较采用方差分析，组内比较采用t检验。以p〈0. 05为 有统计学意义。
[0035] 实验结果 3. 1本发明对SLE小鼠 T淋巴细胞亚群的影响 ⑶3+CD4+淋巴细胞是辅助性T细胞（Th)，⑶3+⑶8+淋巴细胞主要起抑制性调节作用， SLE小鼠模型组CD3+CD4+淋巴细胞水平比正常对照组的下降，SLE小鼠模型组CD 3+CD8+淋巴 细胞水平比正常对照组的上升，本发明能使SLE小鼠下降的⑶ 3+CD4+T细胞上升，使上升的 ⑶3+⑶8+T下降，其中中药组合物中剂量组效果较好，这表明，本发明的药物能够纠正SLE小 鼠 T细胞亚群的失衡状态。试验结果见表1。
[0036] 表1本发明对SLE小鼠 T淋巴细胞亚群的影响
【主权项】
1. 一种治疗系统性红斑狼疮合并血管炎的中药组合物，其特征在于，其由下列重量份 的原料制成：牛蒡子10-12份、荆芥5-8份、黄芪6-9份、菟丝子3-5份、生地10-12份、穿心 莲10-12份、川芎3-5份、雷公藤3-5份、银杏叶10-12份、桂枝8-10份、旱莲草6-9份、银 柴胡10-12份、半枝莲10-12份、丹参10-12份、蒲黄12-15份、麦冬9-12份。
2. 如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的中药组合物还含有当归5-8份 和三七12-15份。
3. 如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于所述的中药组合物为散剂、水剂、 片剂或胶囊剂。
4. 如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于所述的中药组合物的制备方法包 含下述步骤：取处方量上述中药材碎成粗粉，按照粗粉总重量的4?9倍加入体积浓度为 40%?95%的乙醇溶液，回流提取三次，回流时间为2?5h，滤过，滤液回收乙醇，冷却过滤， 用水洗涤，干燥后即得中药浸膏；本领域技术人员可在该制备方法技术上制备得到临床上 常用中药药物剂型，如片剂、胶囊剂等。
5. 权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗系统性红斑狼疮合并血管炎药物中的 用途。
【专利摘要】本发明属于医药领域，涉及一种治疗系统性红斑狼疮合并血管炎的中药组合物及其用途。为了弥补现有技术的不足，减轻系统性红斑狼疮患者的痛苦，本发明提供了一种治疗系统性红斑狼疮合并血管炎的中药组合物，其由下列重量份的原料制成：牛蒡子10-12份、荆芥5-8份、黄芪6-9份、菟丝子3-5份、生地10-12份、穿心莲10-12份、川芎3-5份、雷公藤3-5份、银杏叶10-12份、桂枝8-10份、旱莲草6-9份、银柴胡10-12份、半枝莲10-12份、丹参10-12份、蒲黄12-15份、麦冬9-12份。该治疗药物具有显著的调节T细胞亚群活性，并对于血管炎具有治疗作用,其疗效显著，具有广阔的临床应用前景。
【IPC分类】A61K36-8968, A61P37-02, A61P9-00
【公开号】CN104547514
【申请号】CN201410812739
【发明人】邓凤桂
【申请人】广东聚智诚科技有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月24日