用于治疗和诊断系统性红斑狼疮的方法
【专利说明】用于治疗和诊断系统性红斑狼疮的方法
[000。 交叉引用
[0002] 本申请要求2013年3月15日提交的美国临时专利申请系列号No. 61/792284的 优先权，该申请W引用方式全文并入本文。
【背景技术】
[0003] 系统性红斑狼疮（SLE)是自身免疫疾病，其可表征为血液中产生不常见的自身抗 体。运些自身抗体与它们各自的抗原结合，形成免疫复合物，该免疫复合物循环并最终沉积 在组织中。运种免疫复合物沉积导致慢性炎症和组织损伤。
[0004] 导致狼疮的异常自身免疫的确切原因是未知的。遗传基因、病毒、紫外光和药品可 能都起到一些作用。遗传因素增加了发展自身免疫疾病的趋势，并且诸如狼疮、类风湿性关 节炎和免疫性甲状腺素乱之类的自身免疫疾病在狼疮患者的亲属中比普通人群更常见。一 些科学家相信狼疮中的免疫系统仍容易受到外部因素（例如病毒或紫外光）的刺激。通常， 狼疮的症状可W仅由短时暴露于日光而突发或恶化。
[0005] 由于SLE患者可W具有多种症状和相关器官的不同的组合，单一的检验不能建立 SLE的诊断。为了帮助医生改善SLE诊断的精确性，American化eumatismAssociation建 立了 11个标准。运11个标准与在SLE患者中所观察到的多种症状密切相关。当个体具有 运些标准中的4个或更多，则强烈建议诊断为SLE。但是，疑似SLE的一些患者可能从未发 展出足够用于明确诊断的标准。其他患者仅在观察几个月或几年之后便累积足够的标准。 然而，在一些环境下，在仅具有运些传统标准中的几个标准的患者中，可W诊断为SLE。在运 些患者中，一定数量的患者可能后来发展出其他的标准，但是许多患者从未发展出其他标 准。常用于诊断SLE的11个标准为：
[0006] 1-高于脸颊的觀骨的红斑或"蝴蝶"红斑
[0007] 2-盘状皮肤红斑巧W导致结瘤的斑片状发红
[0008] 3-光敏感：对暴露日光产生反应的皮肤红斑 [000引 4-粘膜溃瘍：口腔、鼻或喉魄内膜的溃瘍
[0010] 5-关节炎：手和足的2处或多处肿胀的压痛关节
[0011] 6-胸膜炎/屯、包炎：屯、脏或肺周围的内膜组织的炎症，通常与呼吸的胸痛有关
[0012] 7-肾脏异常：异常量的尿蛋白或成堆的细胞基本组分（称为管型）
[001引 8-脑刺激：通过癒痛（惊厥）和/或精神病表明
[0014] 9-血细胞计数异常：少量的白细胞或红细胞、或者血小板
[001引10-免疫素乱：异常免疫检验包括抗dsDNS或抗Sm(Smith)抗体、梅毒的假阳性血 液检验、抗屯、憐脂抗体、狼疮抗凝物或阳性LEprep检验，W及
[001引11-抗核抗体：阳性ANA抗体检验
[0017] 尽管所述的标准作为运些特征（区别狼疮与其他相关的自身免疫疾病）的有用的 提示，但是它们不可避免地容易出错。测定所述的标准的存在或缺乏通常需要说明。如果 自由标准用于测定迹象或症状的存在或缺乏，则人们可W容易地将患者在实际上未患狼疮 时就诊断为患有狼疮。相似地，SLE的临床表现范围比11个标准所描述的更多，并且在患 者之间每种表现在活性和严重性水平方面彼此不同。使困难诊断进一步复杂的是，SLE的 症状在疾病的过程中不断演化。在一定时间内，新症状在之前未受影响的器官中可W发展。 由于传统上不具有狼疮的明确检验，所W通常被误诊。
[0018] 此外，监测疾病活性在护理狼疮患者中也是成问题的。狼疮发展成一系列耀斑或 急性疾病期后有所缓解。耀斑的症状（其在患者之间、甚至在相同的患者中变化相当大） 包括不适、发烧、系统性关节痛和光敏性（在短暂暴露于太阳后，发展成红斑）。狼疮的其他 症状包括脱发、粘膜溃瘍W及导致胸痛的屯、脏和肺的内膜炎症。
[0019] 在狼疮中，红细胞、血小板和白细胞可W被祀向，从而导致贫血症和出血问题。更 严重的是，血管中免疫复合物沉积和慢性炎症可W导致肾相关的间歇性衰竭，从而需要透 析或肾移植。由于在狼疮中血管是自身免疫应答的主要祀物，所W早发性中风和屯、脏疾病 都是平常的。而且，经过一定时间后，运些耀斑可W导致不可逆的器官损伤。
[0020] 发明概述
[0021] 在第一方面中，本发明提供了用于治疗处于系统性红斑狼疮（SL巧风险下的方 法，其包括：
[0022] (a)在由处于患有SLE风险之下的受试对象得到的生物样品中，根据W下主要标 志物的每一种标志物的水平来计算受试对象的SLE风险得分：
[0023] (I)红细胞C4d(EC4d)标志物；
[0024] (II)B细胞C4d@C4d)标志物讯 [002引（m)抗核抗体（ANA);
[0026] 其中所述的受试对象处于患有SLE的风险之下，并且其中根据EC4d标志物、BC4d 标志物、抗Smith(抗Sm)抗体和双链DM抗体（抗dsDNA)的各个水平，所述的受试对象是 SLE阴性的；化及
[0027] 化）至少部分根据SLE风险得分来治疗受试对象的SLE或另一种疾病。
[0028] 在另一个方面中，本发明提供了用于诊断处于SLE风险之下的受试对象患有SLE 可能性的方法，其包括：
[0029] (a)根据EC4d标志物、BC4d标志物、抗Smith(抗Sm)抗体和双链DNA抗体（抗 dsDNA)的各个水平，测定处于SLE风险之下的受试对象为SLE阴性，和
[0030] 化）在由处于患有SLE风险之下的受试对象得到的生物样品中，根据W下主要标 志物的每一种标志物的水平来计算SLE风险得分：
[0031] (I)红细胞C4d(EC4d)标志物；
[0032] (II)B细胞C4d@C4d)标志物；和
[003引 （m)抗核抗体（ANA);
[0034] 其中所述的风险得分表明了受试对象患有SLE的可能性。
[0035] 在所述的方法的一个实施方案中，所述的方法进一步包括在由所述的受试对象得 到的生物样品中测定1、2、3或所有4种被排除（rule-out)的标志物的水平，其中所述的标 志物选自SS-B化a)标志物、Scl-70标志物、Jo-1标志物和CENP标志物，并且其中所述的计 算SLE风险得分包括根据主要标志物的每种标志物W及一种或多种排除的标志物的水平 来计算SLE的风险得分。
[0036] 在另一个实施方案中，所述的方法进一步包括在由所述的受试对象得到的生物样 品中测定MCV标志物的水平，并且其中所述的计算SLE风险得分包括根据主要标志物的每 种标志物、一种或动作排除标志物和MCV标志物的水平来计算SLE风险得分。
[0037] 在另一个实施方案中，计算SLE风险得分包括通过一种或多种转化分析来调节一 种或多种主要标志物的水平。在一个此类的实施方案中，所述的一种或多种转化分析包括 逻辑回归分析，并且其中逻辑回归分析包括：
[0038] (i)调节主要标志物的每一种标志物的水平，从而产生各主要标志物的加权得分， 和
[0039] (ii)将各主要标志物的加权得分结合，从而产生SLE风险得分。
[0040] 在另一个实施方案中，计算SLE风险得分包括通过一种或多种转化分析来调节1、 2、3或所有4种被排除的标志物的水平。在一个此类的实施方案中，所述的一种或多种转化 分析包括逻辑回归分析，并且其中逻辑回归分析包括：
[0041] (i)调节主要标志物的每一种标志物的水平W及1、2、3或所有4种被排除的标志 物的每一种标志物的水平，从而产生各主要标志物W及1、2、3或所有4种被排除的标志物 的加权得分，和
[0042] (ii)将各主要标志物W及1、2、3或所有4种被排除的标志物的加权得分结合，从 而产生SLE风险得分。
[0043] 在另一个实施方案中，SLE风险得分是通过W下方法计算的：
[0044] (a)测定净平均巧光强度的自然对数，其中所述的巧光强度是通过巧光激活细胞 分选术（FAC巧针对EC4d和BC4d而测定的；
[0045] 化）根据预定的阔值来测定ANA是否为阴性（值为0)、中阳性（值为1)或强阳性 (值为2);
[0046](C)测定任何被排除的标志物是否落入上述预定阔值并因此为阳性（值为1)，或 者被排除的标志物是否均未落入上述预定阔值并因此均为阴性（值为0) 及
[0047] (d)将（a)-(c)中测定的值结合，从而得到SLE风险得分。
[0048] 附图简述
[0049] 图1为示出本发明方法的一个实施方案的流程图，其中所述的方法用于根据细胞 基补体激活产物的血液样品水平（包含2个检测层）来诊断SLE。
[0050] 图2为在抗dsDNA阴性受试对象中的指数得分。RA:类风湿性关节炎；PM/DM:多 肌炎/皮肌炎；Scl:硬皮病；SS:Sjogren综合征；NHV:正常的健康志愿者。
[00川发明详述
[0052] 本文所述的所有参考文献均W引用方式并入本文。除非内容中清楚地作出相反的 指示，本文所公开的与本发明相同或不同方面的一个或多个其他实施方案结合。
[0053] 除非内容中清楚地作出相反的要求，否则在整个说明书和权利要求书中，词语"包 括"（动词形式）、"包括"（分词形式）等与专用的或穷举的含义相反，将解释为包括一切在 内的含义；换言之，为"包括但不限于"的含义。此外，使用单数或复数的词语分别包括复数 或单数。此外，当词语"在此"、"上文"、"下文"和相似意义的词语用于本申请中时，是指本 申请作为一个整体，而非本申请的任何特定的部分。如本文所用，除非内容中清楚地作出相 反的指示，单数形式"a"、"an"和"the"包括复数指示物。除非明确地作出相反的陈述，否 贝IT和"如本文所用，可W与"或"交换使用。
[0054] 本公开的实施方案的描述无意于穷举的，或者将本公开限定为所公开的精确形 式。尽管为了说明本文描述了本公开的具体的实施方案和实施例，但是相关领域的那些技 术人员将意识到，多种相当的修改可W在本公开的范围内。例如尽管方法的步骤或功能W 给定的顺序提出，但是备选的实施方案可不同的顺序发挥功能，或者可基本同时 地发挥功能。本文提供的公开的教导可W视情况而应用于其他过程或方法中。本文所述的 多个实施方案可W结合，从而提供其他的实施方案。
[00巧]在第一方面中，本发明提供了用于治疗处于系统性红斑狼疮（SL巧风险之下的受 试对象的方法，其包括：
[0056] (a)在由处于患有SLE风险之下的受试对象得到的生物样品中，根据W下主要标 志物的每一种标志物的水平来计算受试对象的SLE风险得分（也称为"指数得分：
[0057] (I)红细胞C4d(EC4d)标志物；
[0058] (II)B细胞C4d@C4d)标志物讯 [005引（m)抗核抗体（ANA);
[0060] 其中所述的受试对象处于患有SLE的风险之下，并且其中根据EC4d标志物、BC4d 标志物、抗Smith(抗Sm)抗体和双链DM抗体（抗dsDNA)的各个水平，所述的受试对象是 SLE阴性的；化及
[0061] 化）至少部分根据SLE风险得分来治疗受试对象的SLE或另一种疾病。
[0062] 在第二方面中，本发明提供了用于诊断处于SLE风险之下的受试对象患有SLE可 能性的方法，其包括：
[0063] (a)根据EC4d标志物、BC4d标志物、抗Smith(抗Sm)抗体和双链DNA抗体（抗 dsDNA)的各个水平，测定处于SLE风险之下的受试对象为SLE阴性，和
[0064] 化）在由处于患有SLE风险之下的受试对象得到的生物样品中，根据W下主要标 志物的每一种标志物的水平来计算SLE风险得分：
[0065] (I)红细胞C4d(EC4d)标志物；
[0066] (II)