广泛中和性抗hiv抗体的制作方法
【专利说明】广泛中和性抗HIV抗体
[0001] 对相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2012年10月18日提交的美国临时申请No.61/715,642的在35U. S.C. § 119(e)下的优先权，并且在此完整并入。
[0003] 政府利益
[0004] 本文中公开的发明至少部分在来自国家健康研宄所的拨款号P01AI081677下得 到政府支持完成。因而，美国政府具有本发明的某些权利。 发明领域
[0005] 本发明涉及广泛且有力的针对人免疫缺陷病毒（"HIV"）的抗体。
[0006] 发明背景
[0007] HIV引起获得性免疫缺陷综合征（AIDS)，即一种以如下的临床特征为特征的人类 状况，所述临床特征包括消耗综合征、中枢神经系统变性和导致危及生命的机会性感染和 恶性的重度免疫抑制在内的。自其在1981年被发现起，HIV 1型（HIV-I)已经导致全球至 少2500万人死亡。预测2000-6000万人会在接下去的二十年里被感染，即使存在着HIV感 染的2. 5%每年下降。需要用于治疗或抑制HIV感染的治疗剂和方法。
[0008] -些HIV感染个体在其血清中显示广泛中和性IgG抗体。然而，尽管其在设计有效 疫苗中有潜在意义，关于这些抗体的特异性和活性知之甚少。在动物模型中，中和性抗体的 被动转移可以促成免于病毒攻击的保护。中和性抗体应答也可以在HIV感染个体中形成， 但是还要完全揭示血液学应答的详细组成。
[0009] 发明概述
[0010] 本发明涉及新的广泛中和性抗HIV抗体种类。抗体的共有重链和轻链氨基酸序列 在下文列出，并且在图3a和3b中显示： toon] Qvqlqesgpglvkpsetlsltcsvsgx1Sx2X3Dx 4Ywswirqspgkglewigyvhds ⑶ tnynpslksr VX5X6SLDTSKNQVSLKLX7X8VTAADSAX 9YYCARAX10HGXnRIYGIVAFGEX12FTYE YMD VffGKGTTVTVSS (SEQ ID NO ：1)
[0012] Sx1Vrpqppslsvapgetartx2Cgex3Slgsravqwyqqrpgqapsliiynnqdrpsgiperfsgspdx 4 X5FgttatltItx6veagdeadyychiwdsrx7ptx 8wvfgggttltvl(seq id no：2)
[0013] 在SEQ ID NO: 1或2的序列中，每个"X"可以是任何氨基酸残基或无氨基酸。优选 地，每个X可以是如图3a和3b中显示的克隆变体10-259,10-303,10-410,10-847,10-996， 10-1074,10-1121，10-1130,10-1146,10-1341，和 10-1369,和 10-1074 抗体的人工修饰形 式10-1074GM的相应位置处的残基。
[0014] 因而，本发明的一个方面特征在于分离的抗HIV抗体或其抗原结合部分，其具有 至少一个具有选自下组的序列的互补决定区（⑶R) :SEQ ID NO: 33-38,条件是抗体不是抗 体 PGT-121，122,或 123。SEQ ID NO: 33-38 指在 Kabat 系统下重链 CDR(CDRH) 1-3 和轻链 CDR(CDRL) 1-3的序列，如图3a和3b中显示的。在一个实施方案中，CDR可以含有选自下 组的序列：SEQ ID NO: 39-104,即在KABAT系统下的⑶R序列，如下文表1中显示的。或者， CDR可以含有选自下组的序列：在頂GT系统下的那些相应的抗体CDR序列，如下文表1中 显示的。
[0015] 在一个实施方案中，分离的抗HIV抗体或其抗原结合部分含有包含⑶RH 1，⑶RH 2,和CDRH 3的重链可变区，其中CDRH 1，CDRH 2和CDRH3包含SEQ ID N0:33-35的相 应序列。⑶RH 1，⑶RH 2和⑶RH 3也可以包含选自下组的⑶RH组的相应序列：SEQ ID N0:39-41， SEQ ID N0:45-47, SEQ ID N0:51-53, SEQ ID N0:57-59, SEQ ID N0:63-65, SEQ ID NO:69-71，SEQ ID NO:75-77, SEQ ID NO:81-83, SEQ ID NO:87-89, SEQ ID NO:93-95， SEQ ID N0:99-101，和SEQ ID NO: 131-133。或者，CDRH可以含有选自如下文表1中显示的 在頂GT系统下的那些相应的抗体CDR序列的相应序列。
[0016] 在另一个实施方案中，分离的抗HIV抗体或其抗原结合部分含有包含CDRL 1， CDRL 2和CDRL 3的轻链可变区，其中CDRL 1，CDRL 2和CDRL 3包含SEQ ID NO: 36-38的相 应序列。例如，⑶RL 1，⑶RL 2和⑶RL 3可以包含选自下组的⑶RL组的相应序列：SEQ ID NO:42-44, SEQ ID NO:48-50, SEQ ID NO:54-56, SEQ ID NO:60-62, SEQ ID NO:66-68, SEQ ID NO:72-74, SEQ ID NO:78-80, SEQ ID NO:84-86, SEQ ID NO:90-92, SEQ ID NO:96-98， SEQ ID NO: 102-104,和SEQ ID NO: 134-136。或者，CDRL可以含有选自如下文表1中显示 的在頂GT系统下的那些相应的抗体CDR序列的相应序列。
[0017] 在又一个实施方案中，上文提及的分离的抗HIV抗体或其抗原结合部分包含（i) 重链可变区，其包含⑶RH 1，⑶RH 2,和⑶RH 3,和（ii)轻链可变区，其包含⑶RL 1，⑶RL 2 和 CDRL 3。CDRH 1，CDRH 2, CDRH 3, CDRL1，CDRL 2 和 CDRL 3 可以包含选自下组的 CDR 组 的相应序列：SEQ ID NO: 39-44, SEQ ID NO: 45-50, SEQ ID NO: 51-56, SEQ ID NO: 57-62, SEQ ID NO:63-68, SEQ ID NO:69-74, SEQ ID NO:75-79, SEQ ID NO:81-86, SEQ ID NO:87-92， SEQ ID N0:93-98，SEQ ID N0:99-104,和 SEQ ID N0:131-136。或者，CDRH 和 CDRL 可以含 有选自如下文表1中显示的在頂GT系统下的那些相应的抗体CDR序列的相应序列。
[0018] 在一个进一步的实施方案中，分离的抗HIV抗体或其抗原结合部分包含下列一项 或两项：（i)具有SEQ ID NO: 1的共有氨基酸序列的重链和（ii)具有SEQ ID NO:2的共有 氨基酸序列的轻链。重链可以含有选自下组的序列：SEQ ID N0:3,5,7,9，ll，13，15，17，19， 21，23,和129,且轻链可以含有选自下组的序列：SEQ ID N0:4,6,8，10，12，14，16，18,20， 22,24,和 130。例如，重链和轻链可以包含SEQ ID N0:3-4，SEQ ID N0:5-6，SEQ ID N0:7-8， SEQ ID N0:9-10，SEQ ID N0:11-12，SEQ ID N0:13-14，SEQ ID N0:15-16，SEQ ID N0:17-18， SEQ ID N0:19-20，SEQ ID N0:21-22，SEQ ID N0:23-24,和 129-130 的相应序列。
[0019] 在一个优选的实施方案中，分离的抗HIV抗体是选自下组的抗体：10-259， 10-303,10-410,10-847,10-996,10-1074,10-1074GM，10-1121，10-1130,10-1146， 10-1341，和10-1369。图3a和3b中显示了其相应的重链可变区、轻链可变区、⑶RH 1-3 和⑶RL 1-3。在一个更优选的实施方案中，分离的抗HIV抗体是10-1074样抗体，即再选 自下组的抗体：1〇_847,10-996,10-1074,10-1074GM，10-1146,和 10-1341。此组的抗体比 PGT121在中和当代病毒上更有力。上文讨论的抗体可以是人抗体、人源化抗体、或嵌合抗 体。
[0020] 在第二个方面，本发明提供了一种分离的核酸，其具有编码上文讨论的抗HIV抗 体或其抗原结合部分的CDR、重链可变区、或轻链可变区的序列。特征还在于具有核酸的载 体和具有载体的培养细胞。
[0021] 可以在用于生成抗HIV抗体或其片段的方法中使用核酸、载体和培养细胞。方法 特别包括以下步骤：获得上文提及的培养细胞；在如下条件下在培养基中培养所述细胞， 所述条件容许由所述载体编码的多肽的表达并且装配抗体或其片段，并自所述培养细胞或 所述细胞的培养基纯化所述抗体或片段。
[0022] 在第三个方面，本发明特征在于药物组合物，其含有（i)上文提及的至少一种抗 HIV抗体，或其抗原结合部分，和（ii)药学可接受载体。
[0023] 在第四个方面，本发明提供了一种预防或治疗HIV感染或HIV相关疾病的方法。方 法包括特别包括以下步骤：鉴定需要此类预防或治疗的患者，并对所述患者施用第一治疗 剂，其包含治疗有效量的至少一种上文提及的抗HIV抗体或其抗原结合片段。所述方法可 以进一步包括施用第二治疗剂，诸如抗病毒剂。
[0024] 在第五个方面，本发明提供了一种试剂盒，其具有药学可接受剂量单位的药学有 效量的至少一种上文提及的分离的抗HIV抗体或其抗原结合部分，和药学可接受剂量单位 的药学有效量的抗HIV剂。两种药学可接受剂量单位可以任选采用单一药学可接受剂量单 位的形式。例示性抗HIV剂可以是选自下组的：非核苷逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、进 入或融合抑制剂、和整合酶抑制剂。
[0025] 在第六个方面，本发明提供了一种用于受试者中HIV感染的诊断、预后或治疗监 测的试剂盒。试剂盒含有一种或多种特异性结合来自受试者的生物学样品中的抗HIV中和 性抗体的检测试剂。试剂盒可以进一步包含用于实施PCR或质谱术的试剂。
[0026] 下文描述中列出了本发明的一个或多个实施方案的详情。本发明的其它特征、目 的和优点从描述和权利要求书看会是显而易见的。
[0027] 附图简述
[0028] 图1显示了 ：PGT121样和10-1074样变体的中和活性。（A)在TZM-bl测定法中比 较PGT121样和10-1074样抗体的中和效力的热图。较暗的颜色=更有力的中和；白色=无 中和。（B)针对9种病毒的均值IC 8tl(y轴）和结合gpl20和gpl40的表观Kd值（X轴）之 间的关联。（C)在针对扩充的一组119种病毒的TZM-bl测定法中比较PGT121，10-996和 10-1074抗体的中和宽度和效力的图。y轴显示了直至X轴上显示的浓度为止的IC 5tl值的累 积频率。蜘蛛图（左上角）显示了根据HIV-I进化枝的中和病毒的频率分布。（D)显示摩 尔中和比率（MNR;Fab和IgG IC5tl浓度的比率）的点图。水平棒代表所有病毒的均值IC 5。。 (E)比较针对自历史（Hist.)和当代（Cont.)血清转化者分离的病毒的PGT121(暗灰色） 和10-1074(亮灰色）的中和效力的柱状图。118，不显著 ；林，？〈0.005。标示了？61'121和 10-1074对当代病毒中和的中值ICJ司的倍数差异。
[0029] 图2显示了 ：PGT121eM和10-1074 eM突变体抗体的结合和中和活性。㈧比较 lO-lOTtPGTmjGTm^和10-1074^抗体结合gpl20和gpl40的表观Kd值的柱形图。误差 棒标示自三个独立实验获得的K d值的SEM。标示了"野生型"对"糖突变体（glycomutant)" 抗体的Kd值间的倍数差异。（B)与突变体抗体（PGT121 eM和10-1074 J比较PGT121和 10-1074对聚糖（图7A)结合的柱形图。以每个点5fmol排列的探针的荧光强度（在一式 两份的点上的均值）测量结合的数值得分。（C)在针对一组40种病毒的TZM-bl测定法中 比较PGT121、PGT121 eM、10-1074和10-1074eM抗体的中和宽度和效力的覆盖图。
[0030] 图3描绘了 ：PGT121和10-1074克隆变体的序列比对。⑷PGT121样和10-1074 样抗体的重链（IgH)，和所有克隆变体的可能的种系（GL)VH的氨基酸比对。标示了基于 晶体结构、框架（FWR)和互补决定区（⑶R)的氨基酸编号方式，如由Kabat (.J Exp Med 132(2):211-250)和頂 GT(Nucleic Acids Res37 (Database issue) :D1006-1012)限定的。 颜色阴影显示了酸性（红色）、碱性（蓝色）、酪氨酸（绿色）氨基酸。（B)与A相同，只是 对于轻链（IgL)而言。
[0031] 图4显示了 ：PGT121和10-1074克隆变体的结合亲和力。（A)PGT121IgG抗体变体 与YU-2 gpl40和gpl20配体的相互作用的结合亲和力，如通过表面等离振子共振（SPR)测 量的。M，mol/1 ;s，秒；RU，响应单位；/，检测不到结合。chi2值（X 2)〈10标示用于拟合曲 线的1:1结合模型充分描述实验数据。认为显示的平衡和动力学常数是"表观"常数以说 明源自IgG二价结合的亲和力效应。（B)点图，其显示PGT121样（蓝色阴影）和10-1074 样（绿色阴影）的结合GO和解离（k d)速率常数。（C)线性回归图，其比较IgG抗体在其 结合gpl20和gpl40方面的匕和k d值（X轴）对其针对表4中显示的9种病毒的中和效力 (均值IC8tl值）（y轴）。
[0032] 图5描绘了 ：PGT 121变体对gp 120 "核心"蛋白、gp 120GD324_5AA突变体和线性 gpl20V3肽的结合。（A)与完整YU-2 gpl20相比基于ELISA的PGT121样和10-1074样抗 体对HXB2 gpl20ttt'和2CC-核心蛋白的结合分析。X轴显示了获得y轴上标示的ELISA值 (OD 4tl5J 需要的抗体浓度（M)。使用抗 CD4bs 抗体 VRCOl (Science 329(5993) :856-861)、 抗 V31oop 抗体 10-188 (PLoS 0ne6 (9) : e24078)、和非 HIV 反应性抗体 mG053 (Science 301 (5638):1374-1377)作为对照。⑶与（A)相同，只是对于结合gpl20GD324_5A^变体蛋 白质而言。（c)比较PGT121和10-1074样抗体和针对gpl20 V3_G3重叠肽的对照抗体（阳性 对照 10-188、1-79、2-59 和 2-1261 (Nature 458 (7238) :636-640))，和阴性对照 mG053)的 ELISA反应性的柱形图。y轴标示通过测试2 μ g/ml的IgG抗体获得的ELISA值（OD4tl5nm)。 右下方显示了各个肽的氨基酸序列。至少一式两份实施所有实验。显示了代表性数据。
[0033] 图6描绘了 ：PGT121对gpl20糖基化突变体和脱糖基化gpl20的结合。（A)基 于 ELISA 的 PGT121 和 10-1074 抗体变体对 gpl20、gpl2(TT3。卜3CI3AAA、gpl20N3324P gpl20 N332A/ ?T3Q1_3°3AAA的结合分析。x轴显示了获得y轴上标示的ELISA值（OD 4tl5nm)需要的抗体浓度 (M)。黑色虚线和连续线显示阳性（10-188)和阴性（mG053)抗体对照针对四种抗原的平均 反应性。（B)比较未处理的gpl20 (WT，野生型）、经PNG酶F和EndoH消化的gpl20s的银染 色的SDS-PAGE凝胶。L，蛋白质梯。（C)，与（A)相同，只是比较未处理的和经PNG酶F处理 的gpl20。（D)与（A)相同，只是比较未处理的和经EndoH处理的gpl20。至少一式两份实 施所有实验。
[0034] 图7描绘了 ：PGT121和10-1074克隆变体对聚糖的结合。（A) -组15种N-聚糖探 针的单糖序列，所述N-聚糖探针用于聚糖微阵列分析以对PGT121样和10-1074样抗体检 查对N-聚糖的直接结合。DH指通过还原性胺化与N-聚糖缀合的脂质标签1，2-双十六烷 基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（DHPE)。记录的关键特征是（i)PGT121组抗体结合具有通过 1-3连接与核心甘露糖连接的以半乳糖终止的触角的单触角N-聚糖探针10 (N2)，而具有与 核心甘露糖以1-6连接的触角的非异构体N-聚糖探针11 (称作N4) ; (i i)此种以半乳糖终 止的1-6连接的触角的存在（就像在双触角探针13 (NA2)中那样）容许结合，α 2-6连接的 (而非α 2-3连接的）唾液酸的存在亦然；（iii)缺乏半乳糖且以N-乙酰基葡糖胺终止的 双触角探针12 (NGA2)不被结合。（B)比较PGT121样、10-1074样、和种系形式（GL)抗体的 聚糖结合的柱形图。使用10-188(-种抗V3环抗体）作为阴性对照。以每个点2fmol (白 色）和5fmol (灰色）排列的探针的荧光强度（在一式两份的点上的均值）测量结合的数 值得分。
[0035] 图8描绘了：针对仅高甘露糖gpl20和病毒的抗体结合和中和活性。（A)比较用 几夫碱（kifunensine) (gpl20kif)处理的细胞中生成的YU-2 gpl20和未处理的细胞（WT，野 生型）中生成的gpl20的银染色的SDS-PAGE凝胶。L，蛋白质梯。（B)PGT121样（蓝色标记 物）和10-1074样（绿色标记物）抗体对YU-2gpl20 (gpl20WT)和gpl20kif的结合的ELISA 比较。X轴显示了获得y轴上标示的ELISA值（OD4tl5nm)需要的抗体浓度（M)。（C)针对在存 在（病毒 kif)或缺乏（Virusm)几夫碱的情况中生成的选择PGT121敏感性/10-1074抗性 假病毒评估的PGT121的中和曲线。水平点线标示50%中和，其中IC 5tl值可以自X轴上的 抗体浓度得到。一式三份实施实验。误差棒标示一式三份测量的SD。（D)比较针对在HEK 293S GnT厂田胞（病毒勺中或在野生型细胞（病毒WT)中生成的YU-2和PV0.4假病 毒的选择抗体的中和活性的柱形图。y轴显示了 X轴上显示的病毒中和的均值IC5tl值（μ g/ ml)。误差棒标示自两个独立实验获得的IC5tl值的SEM。
[0036] 图9显示了 ：PGT121、10-996和10-1074的中和活性。⑷比较针对指定HIV-I进 化枝的病毒的PGT121、10-996和10-74的中和效力的图（使用TZM-bl测定法和一组119 种假病毒测定）。X轴显示了实现50%中和需要的抗体浓度（μg/ml)(IC 5CI)。y轴显示了 直至X轴上显示的浓度为止的IC5tl值的累积频率。（B)比较针对扩充的一组119种病毒 的PGT121、10-996和10-1074抗体的中和宽度和效力的图，如通过TZM-b 1中和测定法测定 的。y轴显示了直至X轴上显示的浓度为止的IC8tl值的累积频率。（C)图显示了 PGT121和 10-1074对选定病毒的中和曲线。水平点线标示50%中和，其中IC5tl值可以自X轴上的抗 体浓度得到。一式三份实施实验。误差棒标示一式三份测量的SD。
[0037] 图10描绘了：针对历史对当代进化枝B病毒的中和活性。比较选定bNAb的针对 自历史（Hist.)和当代（Cont.)血清转化者分离的进化枝B病毒的中和效力的点图。水平 棒代表每名患者的所有病毒的中值IC 5(I。使用Mann-Whitney检验评估组间的差异。ns，不 显著。
[0038] 图11描绘了 ：用一组11种广泛作用性抗HIV-I单抗中和两种R5热带SHIV。用 于中和 SHIVAD8E0(A)和 SHIVDH12-V3AD8(B)的计算 IC50 值。
[0039] 图12描绘了 ：被动施用的中和性单抗的血浆浓度与用两种不同R5SHIV攻击猕猴 后的病毒获得的关系。实心圆圈标示受保护的（无获得）猴；空心圆圈标示受感染的动物。
[0040] 图13描绘了 ：bNAb的血浆浓度。通过测量血浆样品中的中和活性测定单抗的浓 度。（A)针对对一种但非另一种bNAb敏感的HIV-I株（即HIV-I株X2088_9(10-1074敏感）； HIV-I株Q769_d22(3BNC117敏感）的10-1074和3BNC117的TZM. bl中和测定法中测量的 ID50 值。（B)抗体施用前（preP)，但是掺有 0. 01，0. 1，1，10,和 lOOμg/ml 抗体 10-1074(蓝 色）或3BNC117(绿色）的血浆的中和活性。基于（A)中的测量ID50值，以血浆ID5Q滴度 (左栏）报告并且转化成抗体浓度（右栏）的中和活性。（C)bNAb施用之前（出血前）和 之后（天）的指定猕猴血浆样品中测量的_滴度（左栏）和bNAb浓度（右栏）。
[0041] 发明详述
[0042] 本发明至少部分基于一种针对HIV的广泛中和性抗体（bNAb)新种类的意料不到 的发现，所述广泛中和性抗体能识别gpl20上的碳水化合物依赖性表位，包括复合型N-聚 糖。
[0043] 抗体对于大多数疫苗的成功是必需的，并且针对HIV的抗体似乎是最近RV144抗 HIV疫苗试验中保护的唯一关联物。一些HIV-I感染患者在感染后2-4年形成针对gpl60 病毒刺突（spike)的广泛中和性血清学活性，但是由于自体病毒经由突变逃脱，这些抗体 一般不保护受感染的人。不过，广泛中和性活性对病毒施加选择压力，并且广泛中和性抗体 (bNAb)对猕猴的被动转移针对SHIV感染提供保护。因此，已经提出了引发此类抗体的疫苗 在人中针对HIV感染可以是保护性的。
[0044] 单细胞抗体克隆技术的开发揭示了 bNAb革El向HIV_lgpl60刺突上的几种不同表 位。最有效力的 HIV-IbNAb 识别 CD4 结合位点（CD4b) (Science333 (6049) :1633-1637 ; Nature 477(7365) :466-470 ;Science 334(6060):1289-1293)和与可变环（Nature 477(7365):466-470 ；Science 326 (5950):285-289 ；Science334 (6059):1097-1103 ； Nature 480 (7377) :336-343)，包括 V1/V2(PG9/PG16) (Science 326(5950):285-289)和 V3 环（PGT) (Nature 477(7365) :466-470)有关的碳水化合物依赖性表位。由于至今研宄的抗 体是小克隆家族的独特例子或成员，关于碳水化合物依赖性表位知之甚少。
[0045] 为了更好地了解中和性抗体对HIV-I和被PGT抗体靶向的表位的应答，我们分离 出控制来自生成PGT121的进化枝A感染患者的gpl60特异性IgG记忆应答的大克隆家族 的成员。如本文中公开的，根据序列、结合亲和力、碳水化合物和V3环的中和活性和识别， PGT121抗体分成两组，即PGT121样和10-1074样组。10-1074及相关家族成员展现出罕见 的有力中和，包括针对新传播病毒的广泛反应性。与先前表征的碳水化合物依赖性bNAb不 一样，PGT121结合聚糖微阵列实验中的复合型，而非高甘露糖N-聚糖。PGT121和10-1074 与其种系前体的结构和与复合型N-聚糖结合的PGT121结构相比的晶体结构是其独特特性 合理化。
[0046] 在一个例子中，实施测定法以分离编码PGT121的B细胞克隆，所述PGT121在聚糖 依赖性bNAb间在识别复合型，而非高甘露糖N-聚糖上是独特的。PGT121克隆分成通过序 列、结合亲和力、碳水化合物识别和中和活性区别的PGT121和10-1074样组。10-1074组展 现出明显的效力和宽度，尽管可检不到对无蛋白质聚糖的结合。无配体PGT121、10-1074、及 其种系前体的晶体结构揭示了差异的碳水化合物识别定位到CDRH2和CDRH3之间的裂缝， 其被分开的PGT121结构中的复合型N-聚糖占据。PGT121和10-1074之间的交换聚糖接触 残基确认这些残基在中和活性中的意义。HIV包膜展现出高甘露糖和复合型N聚糖的可变 比例，如此这些结果（包括抗HIV bNAb的复合型N-聚糖识别的第一结构表征）对于了解 抗体及最终疫苗如何能实现广泛中和性活性是至关重要的。
[0047] 如本文中使用的，术语"抗体"（Ab)包括单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体 (例如双特异性抗体和多反应性抗体）、和抗体片段。如此，如在本说明书内的任何背景中 使用的，术语"抗体"意图包括但不限于任何特定的结合成员，免疫球蛋白类和/或同种型 (例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA、IgD、IgE和IgM);及其生物学相关片段或特异性 结合成员，包括但不限于Fab、F(ab'）2、Fv、和scFv (单链或相关实体）。本领域中应当理 解，抗体是