control组与MIB+GS组相比，p〈0. 001
[0065] d:control组与LIB+GS组相比，P〈0. 001
[0066] e:GS组与SIB+GS组相比，P〈0. 001
[0067] f:GS组与MIB+GS组相比，p〈0. 001
[0068] g:GS组与LIB+GS组相比，P〈0. 001
[0069] h:GS组与IB组相比，P〈0. 001
[0070] i:SIB+GS组与IB组相比，p〈0. 001
[0071] j:MIB+GS组与IB组相比，p〈0. 001
[0072] k:LIB+GS组与IB组相比，p〈0. 001
[0073] 3. 2第二周及第四周兔胫骨骨折处三点弯曲受力实验：
[0074] 如表2及表3所示，在第二周及第四周时，进行兔胫骨骨折处三点弯曲受力实验， 发现中剂量组表现最佳。
[0075] 表2第2周兔胫骨骨折处三点弯曲受力实验
[0076]
[0077] 表3第4周兔胫骨骨折处三点弯曲受力实验
[0078]
[0079]
[0080] a :control 组与 IB 组相比，p〈0. 05
[0081] b :control 组与 SIB+GS 组相比，p〈0. 05
[0082] c :control 组与 MIB+GS 组相比，p〈0. 05
[0083] d :control 组与 LIB+GS 组相比，P〈0. 05
[0084] e :GS 组与 SIB+GS 组相比，P〈0. 05
[0085] f :GS 组与 MIB+GS 组相比，p〈0. 05
[0086] g :GS 组与 LIB+GS 组相比，P〈0. 05
[0087] h :GS 组与 IB 组相比，P〈0. 05
[0088] i :SIB+GS 组与 IB 组相比，p〈0. 05
[0089] j :MIB+GS 组与 IB 组相比，p〈0. 05
[0090] k :LIB+GS 组与 IB 组相比，p〈0. 05
[0091] 4?结论：
[0092] 通过上述动物实验发现，中剂量伊班膦酸钠加入胶原蛋白海绵中，其促进骨折愈 合效果最好。
[0093] 含药胶原蛋白海绵促进骨折愈合的临床试验：
[0094] 1、材料与方法
[0095] 1. 1临床资料：60例骨质疏松性骨折患者，随机分为两组，即实验组和对照组，各 30例。采用双盲法给予含双膦酸盐（伊班膦酸钠300mg/kg)和锁盐（氯化锁200mg/kg)胶 原蛋白酶解液所制成的胶原蛋白海绵和含生理盐水胶原蛋白海绵于骨折处。两组性别、年 龄情况比较。差异均无统计学意义（P>〇. 05)。（表4)
[0096] 表4两组患者的性别、年龄分布（n = 30)
[0097]
[0098] 1. 2材料来源：
[0099] 采用实施例6含药胶原蛋白海绵。
[0100] 1.3研究方法：
[0101] 手术暴露骨折患处，在骨折断端处复位，实验组在断端处贴附含双膦酸盐或锶盐 的胶原蛋白海绵，对照组贴附含生理盐水的胶原蛋白海绵。石膏外固定，分别于2、4周进行 X光检测，观察骨痂生长情况。
[0102] 1.4统计学分析：
[0103] 用SPSS19. 0软件进行统计学分析，数据以（x土s)表示，采用t检验，以（P〈0. 05) 为差异有统计学意义。
[0104] 2、结果：
[0105] 影像学评分比较：2周时，实验组骨性骨痂呈云雾状，软骨骨痂基本消失，骨折线 模糊。对照组局部疼痛及纵向叩击痛症状稍明显，未达到临床愈合。实验组与对照组患者 骨折复位石膏外固定术后2周时Lane-Sandhu X线评分结果差异有统计学意义（P〈0. 05)， 4周时骨痂生长评分结果与对照组相比差异有显著统计学意义（P〈0. 05)(表5)。
[0106] 表5骨质疏松实验与对照组患者骨痂生长程度评分结果（n = 30, x土 s)
[0107]
[0108] 结果表明实验组患者骨折端骨痂生长的速度、细胞数量及骨质量优于对照组，含 双膦酸盐和锶盐胶原蛋白海绵可促进骨质疏松性骨折愈合，加快愈合过程。
【主权项】
1. 一种含促骨折愈合药物的胶原蛋白海绵，组分为：胶原蛋白的酶解液、双膦酸盐 和/或锶盐、交联剂；制作方法是：将双膦酸盐和/或锶盐加入到胶原蛋白的酶解液中，配 比为胶原蛋白的酶解液lkg，双膦酸盐膦酸根的等效剂量为70-140mg/kg，锶盐的剂量为 100-800mg/kg，并按每克胶原蛋白的酶解液加入40-60U交联剂谷氨酰胺转氨酶；其中胶原 蛋白酶解产物与水的比例为1:9~1:8 ;双膦酸盐包括依替膦酸钠、氯膦酸钠、帕米膦酸钠、 替鲁膦酸钠、阿仑膦酸钠、奈立膦酸钠、奥帕膦酸钠、利塞膦酸钠和伊班膦酸钠；锶盐包括氯 化锶和雷尼酸锶。2. 根据权利要求1所述的含促骨折愈合药物的胶原蛋白海绵，其特征在于：制作方 法中：胶原蛋白的酶解液lkg，原型药中膦酸根等效剂量为70-140mg/kg，氯化锶的剂量为 100-200mg/kg，雷尼酸锶的剂量为 300-600mg/kg。3. -种含促骨折愈合药物的胶原蛋白海绵的制备方法，步骤如下： 1) 将双膦酸盐和/或锶盐加入Ikg胶原蛋白的酶解液中，其中胶原蛋白酶解产物与水 的比例为1:9~1:8 ;原型药中膦酸根等效剂量为70-140mg/kg ;锶盐的剂量为100-800mg/ kg;其中双膦酸盐包括依替膦酸钠、氯膦酸钠、帕米膦酸钠、替鲁膦酸钠、阿仑膦酸钠、奈立 膦酸钠、奥帕膦酸钠、利塞膦酸钠和伊班膦酸钠；锶盐包括氯化锶和雷尼酸锶； 2) 在含有双膦酸盐和/或锶盐的胶原蛋白酶解液中加入交联剂，按40-60U/g胶原蛋白 酶解液的比例加入交联剂谷氨酰胺转氨酶，交联2-5小时；其中交联剂为谷氨酰胺转氨酶； 3) 将步骤2)的混合液搅拌均匀，放入不锈钢盘中，把不锈钢盘置于真空冷冻干燥机 中，冻干10-16小时，经冷冻干燥成海绵状； 4) 将含有双膦酸盐或锶盐的胶原蛋白海绵切割、包装密封、钴60照射灭菌。4. 根据权利要求3所述的含有双膦酸盐或锶盐的胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在 于：所述的双膦酸盐为第一代双膦酸盐依替膦酸钠。5. 根据权利要求3所述的含有双膦酸盐或锶盐的胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在 于：所述的双膦酸盐为第二代双膦酸盐氯膦酸钠、帕米膦酸钠和替鲁膦酸钠。6. 根据权利要求3所述的含有双膦酸盐或锶盐的胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在 于：所述的双膦酸盐为第三代双膦酸盐阿仑膦酸钠、奈立膦酸钠、奥帕膦酸钠、利塞膦酸钠 和伊班膦酸钠。7. 根据权利要求3所述的含有双膦酸盐或锶盐的胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在 于：所述的促骨折愈合药物为双膦酸盐和锶盐组合，其比例为：胶原蛋白的酶解液lkg，原 型药中膦酸根等效剂量为70-140mg/kg，氯化锶的剂量为100-200mg/kg，雷尼酸锶的剂量 为 300-600mg/kg。
【专利摘要】本发明提供一种含促骨折愈合药物的胶原蛋白海绵及其制备方法，步骤如下：1)将双膦酸盐和/或锶盐加入1kg胶原蛋白的酶解液中，胶原蛋白酶解产物与水的比例为1:9～1:8；原型药中膦酸根等效剂量为70‐140mg/kg；锶盐的剂量为100‐800mg/kg；双膦酸盐包括依替膦酸钠、氯膦酸钠、帕米膦酸钠、替鲁膦酸钠、阿仑膦酸钠、奈立膦酸钠、奥帕膦酸钠等；锶盐包括氯化锶和雷尼酸锶；2)在含有双膦酸盐和/或锶盐的胶原蛋白酶解液中加入交联剂，按40‐60U/g胶原蛋白酶解液的比例加入交联剂谷氨酰胺转氨酶，交联2‐5小时；交联剂为谷氨酰胺转氨酶；3)将步骤2)的混合液搅拌均匀，放入不锈钢盘中置于真空冷冻干燥机中，冻干10-16小时成海绵状；4)将上述胶原蛋白海绵切割、包装密封、钴60照射灭菌。
【IPC分类】A61L15/44, A61L15/32
【公开号】CN105012995
【申请号】CN201510304239
【发明人】刘岩松, 夏至道, 官红霞, 张英泽
【申请人】武汉维斯第医用科技股份有限公司
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年6月4日