一种包载qk多肽的聚丙交酯共聚物电纺纤维膜及制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜及制备方法，属于组织工程和原位药物控释的纤维膜技术。
【背景技术】
[0002]聚乙二醇-b-聚(丙交酯-Co- ε -己内酯)(PELCL)和聚(乙交酯_co_丙交酯)(PLGA)具有良好的生物相容性、生物可降解性和优良的力学性能，并且无免疫性。通过静电纺丝制备成纤维膜，可以作为组织工程的支架材料。壳聚糖作为天然高分子，有良好的生物相容性，巯基化改性后可以与聚乙二醇二丙烯酸酯发生Michael加成反应而形成凝胶，用于包载生物活性因子(Teng D, Wu Z, Zhang X，Wang Y, Zheng C，Wang Z, LiC.Synthesis and characterizat1n of in situ cross-linked hydrogel based onself-assembly of th1l-modified chitosan with PEG diacrylate using Michael typeaddit1n.Polymer, 2010，51 (3):639-646) o由凝胶分散电纺制备的芯/壳结构电纺纤维能够包载生物活性因子并控制其缓释，用于组织工程领域(Han F，Zhang H, Zhao J, ZhaoYHj Yuan XY.1n situ encapsulat1n of chitosan hydrogel in ultrafine fibers byelectrospinning as system for the controlled release of b1active proteins.Journal of Controlled Release，2013，I(172):el01_el02) 0
[0003]作为血管内皮生长因子(VEGF)模拟肽的QK多肽(氨基酸序列KLTffQELYQLKYKGI)，可以结合和激活VEGF在细胞膜表面的受体，从而激活VEGF信号通路，促进内皮细胞的粘附和增殖(D，Andrea LDj Iaccarino G，Fattorusso R，SorrientoD，Carannante C，Capasso D，Trimarco B，Pedone C.Targeting ang1genesis: structuralcharacterizat1n and b1logical properties of a de novo engineered VEGFmimicking peptide.Proceedings of the Nat1nal Academy of Sciences of the UnitedStates of America，2005，102 (40): 14215-14220)。将QK多肽包覆于凝胶内部或接枝在材料表面，通过控制QK的加入量，促进体外内皮细胞的粘附和生长，在文献中已有报道(CaiLj Dinha CB，Heilshorn SC.0ne-pot synthesis of elastin—like polypeptide hydrogelswith grafted VEGF-mimetic peptides.B1materials Science，2014，2 (5):757-765 ；Chen YCj Sun TPj Su CTjWu JTj Lin CYj Yu J，Huang Cffj Chen CJ，Chen HY.Sustainedimmobilizat1n of growth factor proteins based on funct1nalized parylenes.ACSApplied Materials&Interfaces, 2014，6(24):21906-21910)0
[0004]现有的负载QK多肽材料一般为水凝胶，不能有效地控制QK多肽的包载量和释放量。将QK多肽负载入电纺纤维膜中进行保护和缓释，从而促进血管内皮细胞增殖，用于小口径人工血管的再生，目前文献中未见报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜及制备方法，所述的纤维膜可以完善包载的QK多肽，其释放后活性高，该膜材料具有良好的生物相容性及药物控释性能，其制备方法过程简单。
[0006]为达到上述目的，本发明是通过下述技术方案加以实现:一种包含QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜，该聚丙交酯共聚物纤维膜是由直径为10nm?900nm的聚乙二醇-b-聚(丙交酯-Co- ε -己内酯)(PELCL)或聚(乙交酯_co_丙交酯)(PLGA)纤维，和包载在纤维内直径小于10nm的壳聚糖凝胶粒子，形成厚度为50 μπι?200 μπι的纤维膜。其中，每毫克聚丙交酯共聚物含有壳聚糖O?2.8微克，壳聚糖与QK多肽的质量比为(O?12):1。聚乙二醇-b-聚(丙交酯-Co- ε -己内酯)或聚(乙交酯-Co-丙交酯)数均分子量为5 X 14?1.2X10 5;巯基化壳聚糖重均分子量为5 X 10 4?1.5 X 10 5。
[0007]上述包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜的制备方法，其特征在于包括以下过程:
[0008](I)室温下在磷酸盐缓冲液中，配制成QK多肽浓度100?500 μ g/mL，巯基化壳聚糖O?6mg/mL，聚乙二醇二丙稀酸酯O?376 μ g/mL的溶液作为水相(W)，并加入牛血清蛋白I?4mg/mL作为保护；
[0009](2)聚乙二醇-b_聚(丙交酯-CO- ε -己内酯)或聚(乙交酯-C0_丙交酯)溶于氯仿/N，N- 二甲基甲酰胺混和溶剂(体积比8:2)中，配制成浓度140?180mg/mL的溶液作为油相溶液(O)；
[0010](3)水相溶液与油相溶液按体积比1:15?1:25，将水相加入油相中，并按油相体积量计加入8?10mg/mL的F127作为乳化剂，搅拌20?40分钟形成W/0分散液；
[0011](4)将制得的W/0分散液采用单针头电纺装置，以电压为14?19kV，分散液流量为0.2?0.4mL/h，接收距离13?18cm进行电纺，得到厚度为50 μπι?200 μπι的包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜。
[0012](4)将步骤(3)所制得的W/0分散液采用单针头电纺装置，以电压为14?19kV，分散液流量为0.2?0.4mL/h，接收距离13?18cm进行电纺，得到厚度为50 μ m?200 μ m的包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜。
[0013]本发明的优点在于，通过将包覆QK多肽的壳聚糖凝胶溶液作为水相，将聚丙交酯共聚物作为油相溶液，采用单轴电纺的方式制备包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜，其制备过程简单易行。同时，该纤维膜中的壳聚糖凝胶可以实现对QK多肽的完善包覆，以保护QK多肽的活性，并且可以控制QK多肽的释放速率。本发明制备过程简单，具有良好的生物相容性和降解性。可用于组织工程及原位药物缓释领域。
【附图说明】
[0014]图1为实施例1所制得的负载QK多肽的PELCL纤维膜扫描电子显微镜照片；
[0015]图2为实施例1所制得的负载QK多肽的PELCL纤维膜透射电子显微镜照片。
【具体实施方式】
[0016]本发明的实施例采用如下步骤和条件，但并不是唯一的，任何替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，他们都被视为包括在本发明权利要求中。
[0017]包载QK多肽的聚丙交酯共聚物纤维膜的制备方法，步骤如下:
[0018](I)室温下使用磷酸盐缓冲液(PBS)配制水相溶液(W)，其中含有QK多肽(VEGF的模拟肽，吉尔生化(上海)有限公司合成)100?500 μ g/mL，巯基化壳聚糖O?6mg/mL，聚乙二醇二丙稀酸酯O?376 μ g/mL,牛血清蛋白I?4mg/mL ；
[0019](2)聚乙二醇-