药理学上可接受的盐的一种或多种的α 羟酸， (D) 选自琥珀酸、马来酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的二羧酸，和 (E) 甲硫氨酸。
[0034] 第 21 项·第 19 或 20 项的方法，其中（B)为 Phe-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr- Leu (FMFPNAPYL) (SEQ ID NO: 3)^Arg-Met-Met-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (RMMPNAPYL) (SEQ ID NO: 4)、Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Val (RMFPNAPYV) (SEQ ID NO: 5)、 Tyr-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (YMFPNAPYL) (SEQ ID NO: 6)或Ala-Arg-Met-P he-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (ARMFPNAPYL) (SEQ ID NO: 7)〇
[0035] 第22项.第19或20项的方法，其中所述肽由（A) Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-P r〇-Tyr-Leu (SEQ ID NO: 1)所示氨基酸序列组成。
[0036] 第23项.第19-22项中任一项的方法，其中所述赋形剂包含（C)和（E)两者。
[0037] 第24项.第19-23项中任一项的方法，其中（C)和（E)两者作为赋形剂加入，且 (C)是选自乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的α羟 酸。
[0038] 第25项.第19-22项中任一项的方法，其中⑶和（E)两者作为赋形剂加入。
[0039] 第26项.第19、20、21、22或25项的方法，其中⑶和（E)两者作为赋形剂加入， 且（D)是选自琥珀酸、马来酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的二羧酸。
[0040] 第27项.第19-22项中任一项的方法，其中所述赋形剂包含（C)、⑶和（E)的 全部。
[0041] 第28项.第19、20、21、22或27项的方法，其中所述赋形剂包含（C)、⑶和（E) 的全部，（C)是选自乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的 α羟酸，且（D)是选自琥珀酸、马来酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的二羧酸。
[0042] 发明效果 使用本发明的水性液体组合物，可产生稳定包含具有细胞毒性T细胞诱导活性的本发 明的肽的水性液体组合物，并且可配制具有优异稳定性的癌症疫苗。
[0043] 附图简述 图1显示实验实施例5中测量的CTL诱导活性的试验结果。 具体实施方案
[0044] 下面详细解释了本发明的实施方案。
[0045] 在本说明书中，各实例的优选实施方案可与其它实例的优选实施方案组合，或可 并入前述第1项-第28项中所述的相应实例中。
[0046] 本发明的"水性液体组合物"是用于制备癌症疫苗的液体，其含有水作为主要溶 剂，并可与不同的佐剂混合。虽然水一般用作溶剂，但是药理学上可接受的溶剂（例如乙 醇、丙二醇、聚乙二醇等）可与水部分混合，只要本发明的效果不受影响。优选仅水用作溶 剂。
[0047] 本发明的"肽"是用于制备癌症疫苗的癌抗原肽，并意指选自以下的肽：(A) "由Ar g-Met-Phe-Pr〇-Asn-Ala-Pr〇-Tyr-Leu (SEQ ID NO: 1)的序列所示氨基酸序列组成的肽" 和⑶"在SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列中缺失、取代和/或添加1-3个氨基酸并具有细胞 毒性 T 细胞诱导能力的肽"。优选为由（A) Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (SEQ ID NO: 1)所示氨基酸序列组成的肽。
[0048] "由 Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (SEQ ID NO: 1)所不氨基酸序列组 成的肽"是作为维尔姆斯瘤（Wilms' tumor)的抑癌基因 WTl的基因产物的蛋白质，其具体 来讲是由由 Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (SEQ ID NO: I) (WTl126 134肽）的 9个氨基酸组成的氨基酸序列组成的肽，所述肽来自由来源于人WTl蛋白的449个氨基酸 (SEQ ID NO: 2)组成的部分肽。该肽被呈递为MHC I类抗原并由CTL进行抗原识别。该肽 可通过已知方法产生（参见专利文件1、2、3等）。
[0049] 作为"由缺失、取代和/或添加1-3个氨基酸的SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列组 成并具有细胞毒性T细胞诱导能力的肽"，可提及这样的修饰肽，其是由缺失、取代和/或添 加1-3个氨基酸的氨基酸序列组成且与HLA结合诱导CTL的前述部分肽。被取代的氨基酸 的数目优选为1或2个，更优选1个。优选的取代位置为1位、3位或9位。待添加（还包 括插入）的氨基酸的数目优选为1或2个，更优选1个。优选的添加位置为1位。待缺失 的氨基酸的数目优选为1个。在变化中，待添加的氨基酸或待取代的氨基酸可以是除20种 由基因编码的氨基酸以外的非天然的氨基酸。
[0050] 当修饰肽含有至少一个半胱氨酸残基时，2个肽（单体）可通过二硫键彼此结合形 成二聚体。
[0051] 修饰肽可通过一般常用于本技术领域的方法制备。例如，它可通过描述于以 下文献的肽合成方法合成：Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966 ;The Proteins, 第 2 卷，Academic Press Inc. , New York, 1976 ；peptide synthesis, Maruzen Co. , 1975 ；Basics and Experiment of Peptide Synthesis, Maruzen Co. 1985 ；Development of Pharmaceutical Product sequel 第 14 卷-Peptide Synthesis, Hirokawa-Shoten Ltd. , 1991 等。
[0052] 修饰肽的实例包括下列修饰形式。
[0053] Phe-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (FMFPNAPYL) (SEQ ID NO: 3)?Arg-Met-Met-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (RMMPNAPYL) (SEQ ID NO: 4)?Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Val (RMFPNAPYV) (SEQ ID NO: 5)?Tyr-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (YMFPNAPYL) (SEQ ID NO: 6)，和 Ala-Arg-Met-Phe-Pro-Asn-Ala-Pro-Tyr-Leu (ARMFPNAPYL) (SEQ ID NO: 7)〇
[0054] 这些修饰形式明确地为与HLA结合诱导CTL的修饰肽，并可通过已知方法制备 (参见专利文件1-3和非专利文件1)。
[0055] 作为是本发明中活性成分的肽，也可使用SEQ ID NO: 1所示WTl126 134肽的衍生物 或其修饰肽。例如，可提及各种物质与其氨基酸序列的N端和/或C端结合的各肽等。例 如，可结合氨基酸、肽、其类似物等。当所述物质结合至由SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列组 成的肽或其修饰肽时，该物质通过例如体内的酶等或胞内加工等过程处理等，以最终制备 具有细胞毒性T细胞诱导能力的肽，并诱导WTl特异性CTL反应。
[0056] 在本发明的水性液体组合物中，每体积"肽"的含量没有特别限定，可以是相对于 从药理学或性质方面来看可接受的体积的含量。在"肽"中，例如，在水性液体组合物中，SEQ ID NO: 1 所示 WTl126 134肽（RMFPNAPYL)的优选含量为 0.01 mg/mL-200 mg/mL，更优选 0.1 mg/mL-100 mg/mL，可根据使用目的选择。
[0057] 在本说明书中，上述肽在左侧具有N端，各个氨基酸符号意指下列氨基酸残基： Ala或A :丙氨酸残基 Arg或R :精氨酸残基 Asn或N :天冬酰胺残基 Asp或D :天冬氨酸残基 Cys或C :半胱氨酸残基 Gln或Q :谷氨酰胺残基 Glu或E :谷氨酸残基 Gly或G :甘氨酸残基 His或H :组氨酸残基 Ile或I :异亮氨酸残基 Leu或L :亮氨酸残基 Lys或K :赖氨酸残基 Met或M :甲硫氨酸残基 Phe或F :苯丙氨酸残基 Pro或P :脯氨酸残基 Ser或S :丝氨酸残基 Thr或T :苏氨酸残基 Trp或W :色氨酸残基 Tyr或Y :酪氨酸残基 Val或V :缬氨酸残基 Abu :2_氨基丁酸残基（亦称为α -氨基丁酸残基） Orn :鸟氨酸残基 Cit :瓜氨酸残基。
[0058] -般来讲，"赋形剂"意指活性成分以外的用于制剂的组分。本发明中"赋形剂"的 实例（下文有时方便地称为"本发明的赋形剂"）包括：选自乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、 柠檬酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的α羟酸，选自丙二酸、琥珀酸、戊二酸、马 来酸、富马酸及其药理学上可接受的盐的一种或多种的二羧酸，和甲硫氨酸。
[0059] -般来讲，"α羟酸"是其中羟基也与羧基所键合的碳键合的羧酸。本发明中"α 羟酸"的实例包括乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸及其药理学上可接受的盐。药理学 上可接受的盐的实例包括