的人类 及动物肝微粒体在37°C下将CFMQ温育30或60分钟。另外的参照化合物作为对照温育。 在温育之后，通过HPLC-MS/MS分析样品。
[0324] CFMQ(HGT3711)在啮齿类动物物种中具有可变的稳定性，其中在较高级的物种中 稳定性通常增加，在人类肝制剂中具有显著更高的稳定性。在猴中的低代谢稳定性对应于 低生物利用度，并且可以指示独特的代谢途径。参见表12。
[0325] 表12 CFMQ(HGT3711)的体外微粒体稳定性的总结
[0326]
[0327]4干细朐代谢 ' '
' '
[0328] 在冷冻保存的雄性和雌性大鼠和迷你猪肝细胞中、以及在雄性和雌性小鼠肝细胞 中评估CFMQ(HGT3711)的氚标记形式的体外代谢。也检查人类肝细胞（男女混合）。
[0329] 采用1X 106个细胞（肝细胞）/mL的肝细胞将3H-CFMQ1 (5 y M或10 y M的的浓度； 约1. OmCi/mL)温育为多达四个小时。通过采用阳性对照（14C-7-乙氧基香豆素和14C-睾 酮）温育将来自所有物种的肝细胞表征为I期代谢能力和II期代谢能力。在〇? 5、1、L 5、 2和4小时的时间点，温育样品通过加入乙腈提取并通过液体闪烁（LSC)计数、然后通过 HPLC (高性能液相色谱）放射性检测分析。通过LC-MS/MS (液相色谱质谱）对选定的样品 (4小时）进行进一步分析，以鉴定表示>5%的样品放射性的那些代谢物。
[0330] 在这两项研究中，在采用冷冻保存的肝细胞的3H_CFMQ的温育中检测到共16个感 兴趣的主要放射性区域。这些组分中的一部分是天然多组分的。观察到的主要代谢物的总 结列在表13中。
[0331]
[0332] 显示母体3H_CFMQ在不存在肝细胞下是稳定的，并且3H_CFMQ的代谢速率与小鼠、 雌性大鼠、迷你猪和人类中的类似（图10)。5 yM的3H-CFMQ的体外代谢在雄性大鼠肝细 胞中是最广泛的，其中4小时代谢了母体的约95%。代谢速率在雌性大鼠（约32%)以及 其他物种的两个性别（微型猪52-57%且人类25-35%)中是明显较低的。在更高的浓度 (10uM)下，雄性和雌性小鼠和人类中的4小时代谢分别为22%和21%。
[0333] CFMQ(HGT3711)在人类肝细胞中的温育产生一种主要的代谢物MET1，并且是单氧 化结构，其以母体的10-11 %或7-8%的水平形成。MET1也是在采用小鼠（2. 0-3. 7% )和 微型猪（18-20. 56% )肝细胞温育中观察到的主要代谢物，并在用大鼠的温育中观察到。其 他次要代谢物在人类肝细胞以及在动物物种中检测到。在一些物种中还检测到多个次要代 谢物片段，然而这些都以低于认为的正确的定量限（〈1 %的样品放射性）的水平产生，并因 此没有进一步详细说明。不存在关于人类特异性代谢物的证据。
[0334] 采用3H_CFMQ(5和10 y M)温育4小时的样品进一步通过LC-MS/MS分析，以鉴定 代谢物。这些研究表明I期代谢物和II期代谢物两者都在所有物种中被观察到，包括单和 二羟基化代谢物（MET1)、酸代谢物、葡糖醛酸和CFMQ的I期代谢物的硫酸盐缀合物。此外， 仅在小鼠肝细胞中观察到脱氯且单羟基、脱氯的谷胱甘肽缀合物和谷胱甘肽缀合物。
[0335] 从每个物种（包括迷你猪）鉴定的主要代谢物为单氧化产物，具有少量的二氧化 产物。通过人类肝细胞的代谢比大鼠和迷你猪中所看到的更不广泛，正如基于先前代谢稳 定性测定预期的那样。
[0336] 存在三种主要的人类代谢物M1、M2和M3 (图11)。Ml以母体的10%所见，而M2和 M3分别分别以母体的5%和3%形成。
[0337] 这两项研究的结果表明，3H_CFMQ的主要人类肝代谢物是在所有检查的其他动物 物种中很重要地产生的单羟基和二氧化分子。有可能在CFMQ的代谢物中存在显著的性别 差异，这在大鼠的血液药代动力学曲线中也可看到。通常，在非临床物种中形成的代谢物的 量更大，可能由于肝制剂中的较低稳定性导致。总体而言，这些研究表明相比于人类在不同 物种中类似的代谢。重要的是，在人类肝细胞中形成的这些代谢物中的每个也可以在小鼠 和迷你猪温育中观察到，这使它们有资格作为用于安全性研究的相关非临床物种。
[0338] MM
[0339] 制备CFMQ的不同制剂。
[0340] 将CFMQ的脂质制剂制备成含有10 % N-甲基吡咯烷酮（NMP)、10 % TRANSCUT0L HP(高度纯化的2-(2_乙氧基乙氧基）乙醇）、30%聚乙二醇（PEG400)和50%GELUCIRE 44/14(月桂酰聚氧甘油酯）。发现制剂提供将允许动物给药实验的溶解度、稳定性和暴露 参数。此外，在展示出多达5mL/kg的制剂耐受性的尤卡坦迷你猪中实施体内研究。就食物 消耗、体重和临床观察而言，该研究的结果表明在迷你猪中制剂被较好地耐受。
[0341] 除了脂质制剂之外，还采用了若干种方法来配制。分别制备CFMQ的三种盐： 1，2-乙烷二磺酸（半）盐、1，5-萘二磺酸盐和1，2-乙烷二磺酸（单）盐。1，2-乙烷二磺 酸（单）盐大幅增加了 CFMQ的溶解度。
[0342] 此外，将CFMQ研磨至具有纳米级粒度。
[0343] 还评估了其中CFMQ与聚合物复合的喷雾干燥的分散体的方法。当CFMQ在醋酸羟 丙基甲基纤维素琥珀酸酯（HPMCAS)上被喷雾干燥时，该发现组合具有优异的溶解度。喷雾 干燥过程由3个步骤组成：浆料制备、喷雾干燥和二次干燥。通过使HPMCAS聚合物溶解在 甲醇/水溶剂混合物（90v/10v)中制备浆料，然后将当量量的CFMQ悬浮于聚合物溶剂混合 物中。然后将该浆料加热并在喷雾干燥器中通过闪蒸喷嘴喷雾干燥成氮气氛围。喷雾干燥 器的粉剂输出保留了少量的水/甲醇，在二次干燥步骤中将其除去，其在对流托盘干燥器 中于40°C /15%的相对湿度（RH)下发生。HPMCAS中的活性成分的50:50的固体分散体被 用在本文所述的动物研究中。
[0344] 实施例34通讨物种间和药代动力学樽拟的CFMQ 口服剂量的椎筧
[0345] 对于人类口服剂量的药代动力学推算使用清除和分布体积的异速生长实施。人类 药代动力学值由体内小鼠、大鼠、犬和猴药代动力学研究推算。由于跨临床前物种的生物利 用度的可变性，对25%至50%的一系列生物利用度值建模。此药代动力学模型预测为在 0. 8mg/kg的人类当量剂量下，当生物利用度是25%、50%或75%时，对于介于大于5、10和 12小时而言血浆水平将保持在预测的有效水平以上。模型以人类中的所有清除途径被捕获 在临床前物种中的假设为基础。
[0346] 尽管已经关于一种或多种实现说明了本教导，在不偏离所附权利要求的精神和范 围下，可以对所公开的实施方案作出改变和/或修饰。此外，此外，尽管仅关于多种实现之 一公开了本发明的特定特征，这种特征可如所需地与其它实现的一种或多种其它特征联 合，如对于任何给定或特定应用可能是期望和有利的。
[0347] 在术语"包含"、"包括（including) "、"包括（includes) "、"具有（having) "、"具有 (has) "、"具有（with) "或其变型用于详细描述和权利要求中的情况下，这样的术语旨在以 类似于术语"包含"的方式为包容性。如本文所使用的，关于一系列项目的术语"中的一个 或多个"，例如，A和B，意味着单独的A、单独的B或A和B。术语"中的至少一个"用于指可 以选择所列项目中的一个或多个。
[0348] 尽管阐明本发明广泛范围的数字范围和参数是近似值，但具体实例中阐述的数值 应尽可能予以精确报道。然而，任何数值固有地包含由发现于它们各自的测试测量中的标 准偏差必然导致的某些误差。此外，本文公开的所有范围应被理解为涵盖包含在其中的任 何及所有子范围。例如，"小于10"的范围可以包括在零的最小值和10的最大值之间（和 包括）的任何和所有子范围，即，具有等于或大于零的最小值和等于或小于10的最大值的 任何和所有子范围，例如1至5。在某些情况下，表述的参数的数值可以取负值。在这种情 况下，表述为"小于10"的范围的示例值可以假设如前文定义的值加负值，例如，-1、-1.2、_ 1. 89、-2、-2. 5、-3、-10、-20 和-30 等。
【主权项】
1. 一种治疗受试者中B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的方法，所述方法包括： 向有需要的受试者施用治疗有效量的包含具有式（I)的化合物或其药学上可接受的 盐、立体异构体、水合物或溶剂化物的组合物其中Ri是其中私是其中私是Cl或CN; 其中R4是其中R5选自由H、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基组成的组，并且 其中在施用所述化合物或或其药学上可接受的盐、立体异构体、水合物或溶剂化物后， 所述受试者中的血浆外渗减少。2. 如权利要求1所述的方法，其中所述B2_缓激肽受体介导的血管性水肿是遗传性血 管性水肿（HAE)。3. 如权利要求1所述的方法，其中将所述组合物口服或舌下施用至所述受试者。4. 如权利要求1所述的方法，其中所述组合物还包含药用载体物质、赋形剂和/或佐 剂。5. 如权利要求1所述的方法，其中按每剂量约3.Omg的所述具有式⑴的化合物/kg 至约35mg的所述具有式（I)的化合物/kg将所述组合物施用至所述受试者，并且在初始剂 量后的约5小时至约12小时内重复所述剂量。6. 如权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括将艾替班特、艾卡拉肽、新鲜冷冻血 浆、Cl-抑制剂或激肽释放酶抑制剂施用至所述受试者。7. 如权利要求1所述的方法，其中所述具有式（I)的化合物具有小于约50纳摩尔的针 对与标记的缓激肽结合人类B2-缓激肽受体的竞争的半最大抑制浓度（IC5。）。8. 如权利要求1所述的方法，其中组合物还包含表面活性剂、张度剂、缓冲液、盐、防腐 剂、共溶剂和粘度构建剂中的一种或多种。9. 如权利要求1所述的方法，其中组合物呈气溶胶、霜剂、凝胶、丸剂、胶囊、糖浆、溶液 或经皮贴剂形式。10. 如权利要求1所述的方法，其中所述组合物具有小于约5的pH。11. 如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有小于约650的分子量。12. -种治疗受试者中B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的方法，所述方法包括： 向有需要的受试者施用治疗有效量的包含具有式（II)的化合物或其药学上可接受的 盐、立体异构体、水合物或溶剂化物的组合物从而减少所述受试者中的血浆外渗。13. 如权利要求12所述的方法，其中所述B2-缓激肽受体介导的血管性水肿是遗传性 血管性水肿（HAE)。14. 如权利要求12所述的方法，其中将所述组合物口服或舌下施用至所述受试者。15. 如权利要求12所述的方法，其中按每剂量约3.Omg的所述具有式（II)的化合物/ kg至约35mg的所述具有式（II)的化合物/kg将所述组合物施用至所述受试者，并且在初 始剂量后的约5小时至约12小时内重复所述剂量。16. 如权利要求12所述的方法，其中所述方法还包括将艾替班特、艾卡拉肽、新鲜冷冻 血浆、Cl-抑制剂或激肽释放酶抑制剂施用至所述受试者。17. -种治疗受试者中B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的方法，所述方法包括： 向有需要的受试者施用治疗有效量的组合物，从而减少所述受试者中的血浆外渗，所 述组合物包含： 11-((4-氯-3-(((4-(4-氟-IH-吡唑-1-基）-2-甲基喹啉-8-基）氧基）甲基）-6-甲 基吡啶-2-基）甲基）-2-氧代-1，2-二羟基吡啶-3-甲腈； (2E) -3- [6-(乙酰基氨基）吡啶-3-基]-N- {2- [ (2, 4-二氯-3- {[ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基]甲基}苯基）（甲基）氨基]-2-氧代乙基}丙-2-烯酰胺； (2E) -3- [6-(乙酰基氨基）吡啶-3-基]-N- {2- [ (2, 4-二氯-3- {[ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基]甲基}苯基）氨基]-2-氧代乙基}丙-2-稀酰胺； (2E)-N-{2-[(4-氯-2-氰基-3-{[(2-甲基喹啉-8-基）氧基]甲基}苯基）（甲基） 氨基]-2-氧代乙基}-3-[4-(三氟甲基）苯基]丙-2-烯酰胺； N- [4-氯-2-氰基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-2-(乙基氨基甲酰基 氨基）-N-甲基乙酰胺； 2_ (4-氨基丁基氨基甲酰基氨基）-N- [4-氯-2-氰基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基 甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 4_ [ [2- [4-氯-2-氰基-N-甲基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺基]-2-氧 代乙基]氨基甲酰基氨基]丁酸； (E)-N-[2-[4-氯-2-氰基-N-甲基-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺 基]-2-氧代乙基]-3- (3-甲氧基苯基）丙-2-烯酰胺； (E)-N-[2-[4-氯-2-氰基-N-甲基-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺 基]-2-氧代乙基]-3-[4-(三氟甲基）苯基]丙-2-烯酰胺； N-[2,4-二氯-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-2-[5-(2,2-二甲基丙酰 基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-甲基乙酰胺； 4_ [ (E) -3- [[ (Z) -3- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]丙-2-烯 基]氨基]-3-氧代丙-1-烯基]-N-甲基苯甲酰胺； (E) -N- [2- [2, 4-二氯-N-甲基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺基]-2-氧 代乙基]-3-苯基丙_2_稀酰胺盐酸盐； 2-(5-苯甲酰基-1-甲基吡咯-2-基）-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基 甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； (E) -3- (6-乙酰氨基吡啶-3-基）-N- [2- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲 基]苯胺基]_2_氧代乙基]丙-2-稀酰胺； N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-2- [ 1-甲基-5-(噻 吩_2_羰基）吡略-2-基]乙酰胺； 2-[5-(环己烷羰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 2_[5-(4-氰基苯甲酰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]乙酰胺； 2_ [5- (4-氰基苯甲酰基）-IH-吡咯-2-基]-N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； N-[2,4-二氯-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-2-[l-甲 基-5-(2-苯基乙酰基）吡略_2_基]乙酰胺； 2_[5-(4-氨基苯甲酰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-3- [ 1-甲基-5-(吡 啶_3_羰基）啦略-2-基]丙酰胺； 4-[(E)-3-[[2-[2,4-二氯-N-甲基-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺 基]-2-氧代乙基]氨基]-3-氧代丙-1-烯基]-N-甲基苯甲酰胺； (E) -3- (6-乙酰氨基吡啶-3-基）-N- [2- [2, 4-二氯-N-甲基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基甲基]苯胺基]-2-氧代乙基]丙-2-烯酰胺； N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-3- [ 1-甲基-5-(噻 吩_2_羰基）啦略-2-基]丙酰胺； 2_[5-(4-氰基苯甲酰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 2_ [5- (6-氰基吡啶-3-羰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 或其药学上可接受的盐、立体异构体、水合物或溶剂化物。18. 如权利要求17所述的方法，其中将所述组合物口服或舌下施用至所述受试者。19. 一种口服制剂，其包含治疗有效量的具有式（I)的化合物或其药学上可接受的盐、 立体异构体、水合物或溶剂化物以及药学上可接受的载体，其中所述治疗有效量介于所述 口服制剂的约〇.OOl重量％和约60重量％之间并且式（I)是如下：其中Ri是其中私是其中私是Cl或CN; 其中R4是其中R5选自由H、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基组成的组。20.如权利要求19所述的口服制剂，其还包含醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯。21. 如权利要求19所述的口服制剂，其中所述口服制剂呈喷雾干燥的分散体形式。22. 包含具有式（I)的化合物、或其盐、立体异构体、水合物或溶剂化物的组合物用于 制造用于治疗和/或预防B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的药剂的用途，其中式（I)是 如下： C⑴， 其中Ri是其中私是其中私是Cl或CN; 其中R4是其中R5选自由H、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基组成的组。23. -种口服制剂，其包含治疗有效量的具有式（II)的化合物或其药学上可接受的 盐、立体异构体、水合物或溶剂化物以及药学上可接受的载体，其中所述治疗有效量介于所 述口服制剂的约〇.OOl重量％和约60重量％之间并且式（II)是如下：24. 如权利要求23所述的口服制剂，其还包含醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯。25. 如权利要求23所述的口服制剂，其中所述口服制剂呈喷雾干燥的分散体形式。
【专利摘要】通过施用包含8-(杂芳基甲氧基)喹诺酮化合物、8-(芳基甲氧基)喹啉化合物、或其盐、立体异构体、水合物或溶剂化物的组合物治疗受试者中B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的方法。用于治疗B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的包含8-(杂芳基甲氧基)喹诺酮化合物、8-(芳基甲氧基)喹啉化合物、或其盐、立体异构体、水合物或溶剂化物的口服制剂。包含8-(杂芳基甲氧基)喹诺酮化合物、8-(芳基甲氧基)喹啉化合物、或其盐、立体异构体、水合物或溶剂化物的组合物用于制造用于治疗和/或预防B2-缓激肽受体介导的血管性水肿的药剂的用途。
【IPC分类】A61P17/00, C07D413/00, A61K31/47
【公开号】CN105228623
【申请号】CN201480027533
【发明人】K·利奇, T·莱特, B·菲利斯, R·菲佛, P·加莱斯, T·麦考利
【申请人】夏尔人类遗传性治疗公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2014年3月12日
【公告号】CA2904052A1, EP2968308A1, US20160030416, WO2014159637A1