治疗和预防癌症药物抗性的方法

治疗和预防癌症药物抗性的方法
【专利说明】治疗和预防癌症药物抗性的方法
[0001] 对相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2013年3月6日提交的美国专利申请No. 61/773,720的优先权，通过 提述将其完整收录。 发明领域
[0003] 本文中提供使用FGFR信号传导的拮抗剂治疗病理疾患（诸如癌症）的组合疗法。
[0004] 发明背景
[0005] 相对快速获得对癌症药物的抗性仍然是成功癌症疗法的一项关键障碍。阐明此类 药物抗性的分子基础的巨大努力已揭示了多种机制，包括药物外流、靶物的药物结合缺陷 突变体的获得、备选存活途径的卷入、后生改变。用EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗包含活化 性EGFR突变的NSCLC患者导致对疗法的抗肿瘤应答，然而患者最终由于获得药物抗性而在 治疗的情况下进展。已知的抗性机制包括EGFR基因中的继发突变（EGFR??)或MET基因 扩增，然而在约40-45%的案例中根本的抗性机制仍然有待阐明。需要新的治疗方法来成功 解决癌症细胞群体内的异质性和癌细胞对药物治疗的抗性的出现。
[0006] 发明概述
[0007] 本文中提供使用FGFR信号传导的拮抗剂和EGFR拮抗剂的组合疗法。
[0008] 特别地，本文中提供在个体中治疗癌症的方法，其包括对该个体伴随施用（a)FGFR 信号传导的拮抗剂和（b)EGFR拮抗剂。在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂和 所述EGFR拮抗剂各自的量有效延长癌症敏感性的时段和/或延迟癌症形成对所述EGFR拮 抗剂的抗性。在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂和所述EGFR拮抗剂各自的 量有效提高包含EGFR拮抗剂的癌症治疗的功效。例如，在一些实施方案中，与包括在没有 所述FGFR信号传导的拮抗剂的情况下（在所述FGFR信号传导的拮抗剂缺失下）施用有效 量的所述EGFR拮抗剂的标准治疗相比，所述FGFR信号传导的拮抗剂和所述EGFR拮抗剂各 自的量有效提高功效。在一些实施方案中，与包括在没有所述FGFR信号传导的拮抗剂的情 况下（在所述FGFR信号传导的拮抗剂缺失下）施用有效量的所述EGFR拮抗剂的标准治疗 相比，所述FGFR信号传导的拮抗剂和所述EGFR拮抗剂各自的量有效提高响应（例如完全 响应）。在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂和所述EGFR拮抗剂各自的量有效 提高和/或恢复癌症对所述EGFR拮抗剂的敏感性。
[0009] 本文中还提供在个体中治疗对EGFR拮抗剂治疗有抗性的癌细胞的方法，其包括 对该个体施用有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和有效量的所述EGFR拮抗剂。另外，本文 中提供在个体中治疗对EGFR拮抗剂有抗性的癌症的方法，其包括对该个体施用有效量的 FGFR信号传导的拮抗剂和有效量的所述EGFR拮抗剂。
[0010] 本文中提供提高和/或恢复对EGFR拮抗剂的敏感性的方法，其包括对该个体施用 有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和有效量的所述EGFR拮抗剂。
[0011] 本文中还提供在个体中提高包含EGFR拮抗剂的癌症治疗的功效的方法，其包括 对该个体伴随施用（a)有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的所述EGFR拮抗剂。
[0012] 本文中提供在个体中治疗癌症的方法，其包括对该个体伴随施用（a)有效量的 FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的EGFR拮抗剂，其中所述癌症治疗具有与包含在没有 所述FGFR信号传导的拮抗剂的情况下（在所述FGFR信号传导的拮抗剂缺失下）施用有效 量的所述EGFR诘抗剂的标准治疗相比升高的功效。
[0013] 另外，本文中提供在个体中延迟和/或阻止癌症形成对EGFR拮抗剂的抗性，其包 括对该个体伴随施用（a)有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的所述EGFR。
[0014] 本文中提供治疗形成对EGFR拮抗剂的抗性的可能性升高的具有癌症的个体的方 法，其包括对该个体伴随施用（a)有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的所述 EGFR拮抗剂。
[0015] 本文中进一步提供在具有癌症的个体中提高对EGFR拮抗剂的敏感性的方法，其 包括对该个体伴随施用（a)有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的所述EGFR拮 抗剂。
[0016] 本文中还提供在具有癌症的个体中延长EGFR拮抗剂敏感性的时段的方法，其包 括对该个体伴随施用（a)有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的所述EGFR拮抗 剂。
[0017] 本文中提供在具有癌症的个体中延长对EGFR拮抗剂的响应的持续时间的方法， 其包括对该个体伴随施用（a)有效量的FGFR信号传导的拮抗剂和（b)有效量的所述EGFR 拮抗剂。
[0018] 在任何所述方法的一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂是抗体抑制剂、 小分子抑制剂、结合多肽抑制剂、和/或多核苷酸拮抗剂。在一些实施方案中，所述FGFR信 号传导的拮抗剂是结合多肽抑制剂。在一些实施方案中，所述结合多肽抑制剂包含与Fc域 连接的FGFR胞外域的一个区域（例如与免疫球蛋白铰链和Fc域连接的FGFR胞外域的一 个区域）。在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂是FGFR1信号传导的拮抗剂。 在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂是FGFR2信号传导的拮抗剂。在一些实施 方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂是FGFR3信号传导的拮抗剂。在一些实施方案中，所 述FGFR信号传导的拮抗剂是FGFR4信号传导的拮抗剂。在一些实施方案中，所述FGFR信 号传导的拮抗剂是小分子。在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂是抗体。
[0019] 在一些实施方案中，所述FGFR1信号传导的拮抗剂结合和/或抑制FGFRlb、 FGFRlc、FGF1、FGF2、FGF3、FGF4、FGF5、FGF6、和 FGF10 中一项或多项。在一些实施方案 中，所述小分子是^[2-[[4-(二乙基氨基）丁基]氨基]-6-(3,5-二甲氧基苯基）吡啶 并[2, 3_d]啼啶-7-基]-Ν'-(1，1-二甲基乙基）-脲（N-[2-[[4_(diethylamino)butyl] amino]-6-(3, 5-dimethoxyphenyl)pyrido[2, 3-d]pyrimidin-7-yl]-N' -(1, 1-dimethyle thyl)-urea)或其药学可接受盐。在一些实施方案中，所述小分子是BGJ398 (Novartis)、 AZD4547 (AstraZeneca)、和 / 或 FF284 (Chugai/Debiopharm (Debio 1347))。在一些实施 方案中，所述FGFR1信号传导的拮抗剂是抗FGF2抗体。在一些实施方案中，所述FGFR1信 号传导的拮抗剂是抗FGFR1抗体。在一些实施方案中，所述FGFR1信号传导的拮抗剂是抗 FGFRl-IIIb抗体。在一些实施方案中，所述FGFR1信号传导的拮抗剂是抗FGFRl-IIIc抗 体。在一些实施方案中，所述FGFR信号传导的拮抗剂是能够结合超过一种FGFR多肽的抗 FGFR抗体。
[0020] 在任何所述方法的一些实施方案中，所述EGFR拮抗剂是N-(3-乙炔基苯 基）-6, 7_ 二（2_ 甲氧基乙氧基）_4_ 喹唑啉胺（N-(3-ethynylphenyl) _6, 7_bis (2-methoxy ethoxy)-4_quinazolinamine)和/或其药学可接受盐。在一些实施方案中，所述EGFR诘抗 剂是N-(3-乙炔基苯基）-6, 7-二（2-甲氧基乙氧基）-4-喹唑啉胺。在任何所述方法的一 些实施方案中，所述EGFR拮抗剂是N- (3-氯-4-氟-苯基）-7-甲氧基-6- (3-吗啉-4-基 丙氧基）喹唑啉 _4_ 胺（N-(3-chlor〇-4-fluor〇-phenyl)-7-methoxy-6-(3-morpholin-4- ylpropoxy)quinazolin-4-amine)和/或其药学可接受盐。在一些实施方案中，所述EGFR 拮抗剂是N- (3-氯-4-氟-苯基）-7-甲氧基-6- (3-吗啉-4-基丙氧基）喹唑啉-4-胺。
[0021] 在任何所述方法的一些实施方案中，所述癌症是肺癌。在一些实施方案中，所述肺 癌是NSCLC。在一些实施方案中，所述癌症已经经历上皮-间充质转变。
[0022] 附图简述
[0023] 图1A-C。|HCC4006-ER细胞对厄洛替尼有抗性。A，在所示浓度的厄洛替尼存在 下72小时时测定亲本（HCC4006)和厄洛替尼选择的HCC4006细胞（HCC4006-ER)的细胞存 活力。B，将HCC4006和HCC4006-ER细胞用或不用ΙμΜ厄洛替尼处理72小时，用碘化丙 啶（ΡΙ)和膜联蛋白V染色，并通过FACS分析以定量膜联蛋白阳性细胞。C，将HCC4006和 HCC4006-ER细胞用所示浓度的厄洛替尼处理8小时，并用所示抗体对细胞裂解物进行免疫 印迹。
[0024] 图2A-D。| HCC4006-ER细胞展现EMT的特征。A，将亲本和厄洛替尼抗性HCC4006 细胞裂解物对上皮相关蛋白质和间充质相关蛋白质（分别是E-钙粘着蛋白和波形蛋 白）进行免疫印迹。B，在抓伤测定法中测量HCC4006和HCC4006-ER细胞的迀移率，并通 过Imaginon Incucyte监测伤口闭合。C，在1%或10%胎牛血清$133)存在下在透孔 (transwell)测定法中测量细胞侵入。D，在所示时间点测量HCC4006和HCC4006-ER细胞的 细胞存活力。
[0025] 图3A-C。|在HCC4006-ER细胞中AXL抑制不能克服对厄洛替尼的抗性。A，在所 示浓度的AXL激酶抑制剂R428和/或厄洛替尼存在下培养72小时后，测量亲本和厄洛替 尼抗性HCC4006细胞的细胞存活力。B，在siRNA介导的AXL敲低或对照siRNA之后，在所 示浓度的厄洛替尼存在下测量厄洛替尼抗性HCC4006-ER细胞的细胞存活力。C，免疫印迹 对照，演示靶向AXL的siRNA对AXL表达水平的影响。
[0026] 图4A-C。| FGFR1和特定FGF配体在HCC4006-ER细胞中显著升高。A，与HCC4006 细胞相比，HCC4006-ER中FGF家族受体和配体的基因表达的倍数变化（log)，基于微阵列序 型分析。B，qRT-PCR对选定基因的确认。C，FGF2蛋白质水平在HCC4006-ER细胞的上清液 和裂解物中均升高，通过ELISA检测。
[0027] 图5A-C。|在HCC4006-ER细胞中对配体依赖性FGFR信号传导的特异性抑制 克服对厄洛替尼的抗性。A，在所示浓度的厄洛替尼或TO173074存在下72小时时测定 HCC4006 (左）和HCC4006-ER (右）细胞中的细胞存活力。B，将HCC4006和HCC4006-ER细 胞用所示药物处理2小时，并用所示抗体对细胞裂解物进行免疫印迹。用外源FGF2+肝素 刺激细胞充当FGFR激活的阳性对照。C，在重组可溶性FGFR-Fc (用于中和FGF配体）和对 照存在下处理72小时后HCC4006和HCC4006-ER细胞中的细胞存活力。
[0028] 图6。|在HCC4006细胞中FGFR抑制阻抑形成对厄洛替尼的抗性。用厄洛替尼 (1 yM)、PD173074(0. 5 μΜ)或组合连续处理细胞（lxio5个），之后固定并用结晶紫染色。未 处理的和HH73074处理的培养物在4周时染色，而厄洛替尼和组合处理的培养物在6周时 染色。
[0029] 图7A-B。|FGFR而非AXL抑制使另一种与EMT有关的厄洛替尼抗性模型HCC827-ER 对EGFR抑制的存活效应部分再敏化。A，在所示浓度的厄洛替尼、R428、或TO173074存在下 72小时时测定HCC827-ER细胞中的细胞存活力。B，在重组可溶性FGFR-Fc (用于中和FGF 配体）和对照存在下处理72小时后HCC827和HCC827-ER细胞中的细胞存活力。
[0030] 图8。|在厄洛替尼存在或缺失下在HCC4006-ER细胞中对一组小分子抑制剂的筛 选揭示了 FGFR抑制剂HH73074能逆转对厄洛替尼的抗性。显示了生长抑制剂IC5。。
[0031] 发明详述
[0032] I.定义
[0033] 感兴趣多肽的"拮抗剂"（可互换称作"抑制剂"）是干扰感兴趣多肽的活化或功 能，例如部分或完全阻断、抑制、或中和由感兴趣多肽介导的生物学活性的药剂。例如，多 肽X的拮抗剂可以指部分或完全阻断、抑制、或中和由多肽X介导的生物学活性的任何分 子。抑制剂的例子包括抗体；配体抗体；小分子诘抗剂；反义和抑制性RNA (例如shRNA)分 子。优选地，抑制剂是结合感兴趣多肽的抗体或小分子。在一个特定实施方案中，抑制剂具 有约1，000ηΜ或更少的对感兴趣多肽的结合亲和力（解离常数）。在另一个实施方案中， 抑制剂具有约1〇〇ηΜ或更少的对感兴趣多肽的结合亲和力。在另一个实施方案中，抑制剂 具有约50nM或更少的对感兴趣多肽的结合亲和力。在一个特定实施方案中，抑制剂共价结 合至感兴趣多肽。在一个特定实施方案中，抑制剂以1，〇〇〇ηΜ或更少的IC5。抑制感兴趣多 肽的信号传导。在另一个实施方案中，抑制剂以500nM或更少的IC5。抑制感兴趣多肽的信 号传导。在另一个实施方案中，抑制剂以50nM或更少的IC5。抑制感兴趣多肽的信号传导。 在某些实施方案中，拮抗剂将感兴趣多肽的表达水平或生物学活性降低或抑制至少10%、 20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多。在一些实施方案中，感兴趣多肽是 FGFR(例如 FGFR1、FGFR2、FGFR3、和 / 或 FGFR4)或 FGF(例如 FGF1-23)。在一些实施方案 中，感兴趣多肽是EGFR。
[0034] 除非另有说明，如本文中使用的，术语"多肽"指来自任何脊椎动物来源（包括哺 乳类动物，诸如灵长类动物（例如人）和啮齿类动物（例如小鼠和大鼠））的任何天然感兴 趣多肽。该术语涵盖"全长"、未加工多肽以及源自细胞中加工的任何形式的多肽。该术语 还涵盖多肽的天然发生变体，例如剪接变体或等位变体。
[0035] "多核苷酸"或"核酸"在本文中可互换使用，指任何长度的核苷酸聚合物，包括DNA 和RNA。核苷酸可以是脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、经过修饰的核苷酸或碱基、和/或其 类似物，或者是可通过DNA或RNA聚合酶，或者通过合成反应掺入聚合物中的任何底物。多 核苷酸可包含经过修饰的核苷酸，诸如甲基化核苷酸及其类似物。若存在的话，对核苷酸结 构的修饰可以在装配聚合物之前或之后进行。核苷酸序列可以由非核苷酸组分中断。多核 苷酸可以在合成后进一步修饰，诸如通过与标记物缀合。其它类型的修饰包括例如"帽"， 将一个或多个天然存在的核苷酸用类似物替代，核苷酸间修饰诸如例如具有不带电荷连接 (例如甲基膦酸酯、磷酸三酯、磷酰胺酯（phosphoamidate)、氨基甲酸酯等）和具有带电荷 连接（例如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等）的修饰，含有悬垂模块（pendant moiety)诸如 例如蛋白质（例如核酸酶、毒素、抗体、信号肽、聚L-赖氨酸等）的修饰，具有嵌入剂（例如 吖啶、补骨脂素等）的修饰，含有螯合剂（例如金属、放射性金属、硼、氧化性金属等）的修 饰，含有烧化剂的修饰，具有经修饰连接（例如α端基异构核酸（anomeric nucleic acid) 等）的修饰，以及未修饰形式的多核苷酸。另外，通常存在于糖类中的任何羟基基团可以 用例如膦酸（phosphonate)基团、磷酸（phosphate)基团替换，用标准保护基团保护，或活 化以制备与别的核苷酸的别的连接，或者可缀合至固体或半固体支持物。可磷酸化或者用 胺或1-20个碳原子的有机加帽基团模块取代5'和3'末端0H。其它羟基也可衍生成标 准保护基团。多核苷酸也可含有本领域普遍知道的核糖或脱氧核糖糖类的类似物形式，包 括例如2' -氧-甲基_、2' -氧-烯丙基_、2' -氟-或2' -叠氮-核糖，碳环糖类似物， 端基异构糖，差向异构糖诸如阿拉伯糖、木糖或来苏糖、吡喃糖、呋喃糖、景天庚酮糖，无 环类似物及脱碱基核苷类似物诸如甲基核糖核苷。可用备选连接基团替换一个或多个磷酸 二酯连接。这些备选连接基团包括但不限于以下实施方案，其中磷酸酯用P(〇)S( "硫代酸 酯"（thioate))、P ⑶ S ( "二硫代酸酯"（dithioate))、（0) NR2 ( "酰胺酯"（amidate))、P (0) 尺、卩(0)01?'、0)或012("甲缩醛"&〇^&〇6七&1))替代，其中1?或1?'各自独立为!1或者取代 或未取代的烃基（1-20个C)，任选含有醚（-0-)连接、芳基、烯基、环烃基、环烯基或芳烃基 (araldyl)。并非多核苷酸中的所有连接都必需是相同的。前述描述适用于本文中提及的 所有多核苷酸，包括RNA和DNA。
[0036] 术语"小分子"指具有约2000道尔顿或更小，优选约500道尔顿或更小的分子量 的任何分子。
[0037] "分离的"抗体指已经与其天然环境的组分分开的抗体。在一些实施方案中，抗体 纯化至大于95%或99%的纯度，如通过例如电泳（例如SDS-PAGE、等电聚焦（IEF)、毛细管 电泳）或层析（例如离子交换或反相HPLC)测定的。关于用于评估抗体纯度的方法的综述， 见例如 Flatman 等人，J. Chromatogr. B 848 :79-87 (2007) 〇
[0038] 本文中的术语"抗体"以最广义使用，并且涵盖各种抗体结构，包括但不限于单克 隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体（例如双特异性抗体）、和抗体片段，只要它们展现出期 望的抗原结合活性。
[0039] 术语"抗感兴趣多肽抗体"和"结合感兴趣多肽的抗体"指能够以足够亲和力结合 感兴趣多肽，使得该抗体可作为诊断剂和/或治疗剂用于靶向感兴趣多肽的抗体。在一个 实施方案中，根据例如通过放射免疫测定法（RIA)的测量，抗感兴趣多肽抗体结合无关的、 非感兴趣多肽的蛋白质的程度小于该抗体对感兴趣多肽的结合的约10%。在某些实施方案 中，结合感兴趣多肽的抗体具有彡1 μ M、彡100nM、彡10nM、彡InM、彡0.1 nM、彡0.0 lnM、或 彡0· OOlnM(例如10 SM或更少、例如10 SM至10 13M、例如10 9M至10 13M)的解离常数（Kd)。 在某些实施方案中，抗感兴趣多肽抗体结合在来自不同物种的感兴趣多肽中保守的感兴 趣多肽表位。在一些实施方案中，感兴趣多肽是FGFR(例如FGFR1、FGFR2、FGFR3、和/或 FGFR4)和/或FGF (例如FGF1-23)。在一些实施方案中，感兴趣多肽是EGFR。
[0040] "阻断性"抗体或"拮抗性"抗体是抑制或降低其结合的抗原的生物学活性的抗体。 优选的阻断性抗体或拮抗性抗体实质性或完全抑制抗原的生物学活性。
[0041] "亲和力"指分子（例如抗体）的单一结合位点与其结合配偶（例如抗原）之间全 部非共价相互作用总和的强度。除非另有指示，如本文中使用的，"结合亲和力"指反映结 合对的成员（例如抗体和抗原）之间1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶Y 的亲和力通常可以用解离常数（Kd)来表述。亲和力可以通过本领域知道的常用方法来测 量，包括本文中所描述的方法。下文描述了用于测量结合亲和力的具体的说明性和例示性 的实施方案。
[0042] "抗体片段"指与完整抗体不同的分子，其包含完整抗体中结合完整抗体结合的抗 原的部分。抗体片段的例子包括但不限于？1?&13、？&13'、？&13'-5!^( &13'）2;双抗体；线性 抗体；单链抗体分子（例如scFv);和由抗体片段形成的多特异性抗体。
[0043] 与参照抗体"结合相同表位的抗体"指在竞争测定法中将参照抗体对其抗原的结 合阻断50%或更多的抗体，且相反，参照抗体在竞争测定法中将该抗体对其抗原的结合阻 断50%或更多。
[0044] 术语"嵌合"抗体指其中的重和/或轻链的一部分自特定的来源或物种衍生，而重 和/或轻链的剩余部分自不同来源或物种衍生的抗体。
[0045] 术语"全长抗体"、"完整抗体"、和"全抗体"在本文中可互换使用，指与天然抗体结 构具有基本上类似的结构或者具有含有Fc区的重链的抗体。
[0046] 如本文中使用的，术语"单克隆抗体"指从一群基本上同质的抗体获得的抗体，即 构成群体的各个抗体是相同的和/或结合相同表位，除了例如含有天然存在的突变或在单 克隆抗体制备物的生成期间发生的可能的变体抗体外，此类变体一般以极小量存在。与通 常包含针对不同决定簇（表位）的不同抗体的多克隆抗体制备物不同，单克隆抗体制备物 的每个单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。如此，修饰语"单克隆"指示抗体自一群基本 上同质的抗体获得的特性，而不应解释为要求通过任何特定方法来生成抗体。例如，可以 通过多种技术来生成要依照本发明使用的单克隆抗体，包括但不限于杂交瘤方法、重组DNA 方法、噬菌体展示方法、和利用含有所有或部分人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法， 用于生成单克隆抗体的此类方法和其它例示性方法。
[0047] "人抗体"指拥有与由人或人细胞生成的或利用人抗体全集或其它人抗体编码序 列自非人来源衍生的抗体的氨基酸序列对应的氨基酸序列的抗体。人抗体的此定义明确排 除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。
[0048] "人源化"抗体指包含来自非人HVR的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌 合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体会包含至少一个，通常两个基本上整个可变域，其 中所有或基本上所有HVR(例如CDR)对应于非人抗体的那些，且所有或基本上所有FR对应 于人抗体的那些。任选地，人源化抗体可以至少包含自人抗体衍生的抗体恒定区的一部分。 抗体，例如非人抗体的"人源化形式"指已经经历人源化的抗体。
[0049] "免疫缀合物"指与一种或多种异源分子，包括但不限于细胞毒剂缀合的抗体。
[0050] "个体响应"或"响应"可使用指示对个体益处的任何终点评估，包括但不限于：（1) 一定程度地抑制疾病进展（例如癌症进展），包括减缓和完全阻滞；（2)缩小肿瘤尺寸；（3) 抑制（即减轻、减缓或完全终止）癌细胞浸润入临近周围器官和/或组织；(4)抑制（即减 轻、减缓或完全终止）转移；（5) -定程度地减轻与疾病或病症（例如癌症）有关的一种或 多种症状；(6)无进展存活的长度延长；和/或（8)治疗后给定时间点的死亡率降低。
[0051] 术语"基本上相同"在用于本文时表示两个数值之间足够高的相似程度，以致本领 域技术人员将认为在用所述数值（例如Kd值或表达）所测量的生物学特性背景内两个数 值之间的差异具有很小的或没有生物学和/或统计学显著性。作为参照/比较值的函数， 所述两个数值之间的差异例如小于约50 %，小于约40 %，小于约30 %，小于约20 %，和/或 小于约10%。
[0052] 短语"实质性不同"