，雌雄各半，由上海医学实验动物中 心提供，实验设施合格证号30乂1((沪）2015-0013、沪监证字20154018，动物质量合格证号 NQ0037518。本实验饲养环境为SPF级动物实验室，设施使用许可证号SYXK(沪）2015-0052。
[0091] 受试药物
[0092] 1、本发明药物：实施例1所制的口服液：3次/日，以去离子水配制成高浓度药液， 量筒计量，为592. 5mL，计算生药浓度为0. 7324g/ml。
[0093] 2、空白对照组：灌胃去离子水，其余条件同本发明药物组。
[0094] 实验方法
[0095] 取SPF级NIH小鼠60只，雌雄各半，于实验环境下适应性饲养3d，随机分为2组， 分别为对照组24只、本发明口服液组36只，雌雄各半，雌雄分笼饲养。实验前，各组小鼠禁 食不禁水8h，禁食后称量体重，对照组以3次/日灌胃蒸馏水40mL/kg，本发明口服液组小 鼠3次/日灌胃本发明口服液0. 7324g/ml，给药间隔4h。给药后恢复小鼠自由饮食，同时 观察记录小鼠反应情况。给药24h后每天上、下午各观察1次，连续观察14d，并于给药后第 7d、第14d称各组小鼠体重1次。观察期间，如有小鼠死亡，则立即进行剖检，给药第14d，未 死亡小鼠全部处死剖检
[0096] 试验结果
[0097] (1) -般状态观察
[0098] 对照组小鼠3次/日，灌胃给予蒸熘水40mL/kg，24只小鼠行为学观察均正常，14d 观察期间，小鼠均活动正常，行为活泼，毛发光润，排泄物无异常，摄食饮水均正常，小鼠无 死亡。
[0099] 本发明口服液组小鼠3次/日，灌胃本发明口服液0. 7324g/ml，按体重40mL/kg给 药，11只小鼠活动减少（一级），安静。给药24h后，小鼠行为活动恢复正常，无死亡。连续 观察14d，小鼠行为活动无明显异常现象，各天然孔腔无异常分泌物，摄食饮水均正常，尿液 粪便正常，小鼠无死亡。
[0100] ⑵体重
[0101] 与对照组同性别小鼠体重相比，给药前两组同性别小鼠体重均基本一致，无明显 差异（P>0.05);给药7d后两组同性别小鼠体重，无明显差异（P>0.05);给药14d后两 组同性别小鼠体重数值，无显著性差异（P > 0. 05)。
[0102] ⑶剖检
[0103] 观察期间无小鼠死亡，因此按实验要求，观察14d时，处死所有小鼠，进行剖检。肉 眼观察可见两组小鼠的外观体征、主要脏器等主要观察指标基本一致，各动物天然孔腔、被 毛及外观体征未见异常。天然孔腔无异常分泌物。主要脏器排列正常，无积液，无粘连，无 异常分泌物，未见明显异常。各组织脏器肉眼观察表面光滑，色质正常，无明显异常变化。
[0104] 结论
[0105] -般认为最大耐受量相当于人临床日用剂量100倍以上而动物无死亡，无明显毒 性反应情况出现时，该药是安全的。本发明口服液临床拟用量为15. 624g生药/日，根据小 鼠最大耐受量87. 888g生药/kg计算，折算成临床人的日摄入量为676. 062g/kg，此耐受量 是本发明胶囊临床拟用量的337. 51倍。因此，可以肯定，本药品临床应用是安全的。
[0106] 本发明大鼠长期毒性试验
[0107] 1、实验材料
[0108] 受试药物与配药
[0109] 本发明实施所制的口服液，灌胃，3次/日，配置成生药浓度为1. 302g/ml，4°C保存 备用，每日摄入总量相当于15. 624g/ml，药品由上海中医药大学制剂室制备。
[0110] (二）实验动物
[0111] SPF级SD大鼠，6~7周龄，雌雄各半，由上海医学实验动物中心提供，实验设施 合格证号SCXK (沪）2015-0013、沪监证字2015A018,实验动物质量合格证号N20100055 ;动 物实验环境：SPF级动物实验室，本实验饲养环境为SPF级动物实验室，设施使用许可证号 SYXK (沪）2015-0052。
[0112] (三）实验方法
[0113] (1)分组与给药途径
[0114] 6~7周龄SPF级SD大鼠80只，雌雄各半，按体重随机分为对照组、本发明口服 液高剂量组、本发明口服液中剂量组、本发明口服液低剂量组，相应剂量为15. 624g/kg/d， 7.812g/kg/d，3. 906g/kg/d，
[0115] 各给药组按剂量灌胃给药20mL/kg，对照组同法灌胃给予蒸馏水20mL/kg，试验采 用灌胃给药，给药途径与临床口服用药途径一致。
[0116] (2)给药方法
[0117] 本发明口服液各剂量组给药1次/日，上午8时按实验要求分别灌胃给药，按体积 20mL/kg，空白对照组灌胃去离子水，按20mL/kg灌胃。每周称1次体重，并根据体重调整给 药量，连续给药6周后停药（临床用药1个疗程为7~14天），恢复观察期为停药后2周。
[0118] (四）实验结果
[0119] 大鼠灌胃给予本发明口服液高剂量15. 624g/kg/d，（临床成人拟用剂量60. 00 倍）、本发明口服液中剂量7. 812g/kg/d，（临床成人拟用剂量30. 00倍）、本发明口服液低 剂量3. 906g/kg/d，（临床成人拟用剂量15. 00倍），1次/日，连续给药6周后与对照组比 较各项检测指标如一般状态、体重、进食量、饮水量、尿液、血液学、血液生化学、脏器系数和 组织病理学等，未见明显的毒性敏感指标和毒性靶器官；停药恢复2周后，本发明口服液 高、中、低剂量组大鼠各项检测指标均属正常，未见本发明口服液产生迟发性毒性反应和蓄 积性毒性反应。试验结果说明本发明口服液长期应用对大鼠无明显毒副作用，临床成人拟 用剂量和疗程处于安全范围。
[0120] 实施例6本发明口服液对腹泻型肠易激综合征大鼠模型的影响
[0121] 1.造模与分组
[0122] 本实验肠易激综合征大鼠模型以醋酸-球囊扩张法造模基础上改造而成。取SD 大鼠70只，雌雄各半，体重180~220g :空白对照组10只、模型组60只。造模方法：1次/ 日，上午9点，大鼠直肠注射0. 5%醋酸1. 0ml，连续注射14d，造成醋酸性炎性损伤。恢复 7d，第28d开始进行球囊扩张，球囊扩张前禁食8h。在大鼠清醒状态下，用自制的球囊经肛 门插入3-4cm，向球囊内注水使之扩张，注水量0. 5ml，每次刺激持续lmin，每天刺激2次，间 隔30min，连续刺激14d。出现连续稳定的稀便为造模成功。随机分组，模型对照组10只， 盐酸小檗碱组10只，复方谷氨酸组10只，本发明口服液高剂量组10只，本发明口服液中剂 量组10只，本发明口服液低剂量组10只。
[0123] 2.给药及剂量
[0124] 各给药组按剂量灌胃给药，盐酸小檗碱组剂量为81. OOmg药粉/kg，复方谷氨酰胺 胶囊组剂量为0. 81粒/kg，本发明口服液高、中、低剂量分别为2. 812g生药/kg、1. 406g生 药/kg、0. 703g生药/kg。给药体积为10mL/kg，1次/日，连续14d，空白对照组、模型对照 组相同方式灌胃给予蒸馏水10mL/kg，同时，除正常对照组外其余各造模组同前述持续球囊 扩张造丰吴。
[0125] (1)与正常对照组相比，模型对照组大鼠（雄性、雌性）体重均显著减轻（P < 〇. 01);与模型对照组比较，本发明口服液高中低3个剂量组雄性大鼠、雌性大鼠体重均 显著增加（P< 0.05);与盐酸小檗碱组、复方谷氨酰胺胶囊组比较，给药后本发明口服液各 剂量组雄性、雌性大鼠体重数值与阳性对照组无差异，但均值均高于两对照组（P > 0. 05)。
[0126] 表2本发明对雄性大鼠体重影响（g) ( ，: η = 5)
[0128] 注：1.盐酸小檗碱组剂量单位为g药粉.kg \复方谷氨酰胺组剂量单位为 粒.kg \治疗组剂量单位为g生药.kg \与正常对照组相比，< 0. 01，与模型对照组相 比，#P < 0· 05, ##P < 0· 01
[0129] 表3本发明对雌性大鼠体重影响（g) ( η = 5)
[0131] 注：1.盐酸小檗碱组剂量单位为g药粉.kg \复方谷氨酰胺组剂量单位为 粒.kg \治疗组剂量单位为g生药.kg \与正常对照组相比，< 0. 01，与模型对照组相 比，#P < 0· 05, ##P < 0· 01
[0132] (2)与正常对照组相比，模型对照组大鼠类便湿重明显增加 （P < 0. 01)，类便含水 量显著升高（P < 0. 01)。与模型对照组比较，本发明胶囊高中低3个剂量组大鼠粪便湿重 显著减小（P < 〇. 01)，粪便含水量显著降低（P < 〇. 01);与两阳性对照组相比较，本发明胶 囊各剂量组大鼠幾便