一种治疗哮喘的药物组合物及其制备方法与质量检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种治疗哮喘的中药组合物、制备工艺、检测 方法及其制药用途。
【背景技术】
[0002] 哮喘及过敏性哮喘是一种常见病、多发病，属于中医的"喘证"范畴。中医认为，本 病的发生是肺脾肾虚、痰饮内伏、痰阻气道、宣降失常所致。哮喘是一种以嗜酸性粒细胞 (EOS)、肥大细胞反应为主，淋巴细胞和巨噬细胞浸润为辅的气道炎症性疾病。往往在人的 体质下降，免疫功能低下时发病。其发病率高居不下，严重危害人类的身体健康。
[0003] 西医治疗哮喘的药物只能起到一时缓解作用，疗效仍不能令病人满意，很多药物 治疗哮喘可使疼痛缓解，但停药以后又会反复发作，哮喘的治疗往往具有持久性和反复性。 感染是肺气肿病因中最值得注意的因素之一，病毒、细菌和支原体是本病急性加重的重要 因素;职业性粉尘及化学物质，如烟雾、过敏原、工业废气及室内空气污染等，浓度过大或接 触时间过长，均可能产生与吸烟无关的肺气肿;大气中的有害气体如二氧化硫、二氧化氮、 氯气等损伤气道粘膜，使纤毛清除功能下降，粘液分泌增加，为细菌感染增加条件;吸烟是 引起肺气肿原因中最重要的，吸烟者肺气肿的患病率比不吸烟者高2~8倍，烟龄越长，吸烟 量越大，肺气肿患病率越高。目前，各大医院迫切需要一种治疗哮喘期限短、疗效高、反复率 低的药物。
[0004] 本发明所述的药物的基源如下：
[0005] 龙舌草为水鳖科水车前属植物龙舌草Otteliaalismoides(L. )Pers. [Statiotes alismoidesL.]的全草。
[0006] 羊七莲为水龙骨科线蕨属植物线蕨Colysise lliptica(Thunb . )Ching [Polypodium lliptucum Thunb ·]的全草。
[0007] 太白鹿角为石蕊科石蕊属植物细石蕊Cladoniagracilis(L. )Willd.的枝状体。 [0008] 白透骨消为唇形科活血丹属植物白透骨消Glechoma Mondiana(Diels)C.Y.Wu et C.Chen的全草。
[0009] 上述药物均购于哈药集团人民同泰连锁药店。
【发明内容】
[0010] 本发明所要解决的技术问题是，提供一种治疗哮喘、过敏性哮喘期限短、疗效高、 复发率低的中药组合物;进一步地，本发明提供一种治疗哮喘的中药组合物的制备方法，该 法活性成分提取效率高、含量高;更进一步地，本发明提供一种治疗哮喘的中药组合物的醇 溶性成分检测方法;更进一步地，本发明提供一种治疗哮喘的中药组合物的挥发性成分检 测方法，更进一步地，本发明提供一种治疗哮喘的中药组合物在哮喘制剂和过敏性哮喘制 剂中的应用。
[0011] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
[0012] -种治疗哮喘的中药组合物，包括以下重量份的原料:龙舌草1~3份、羊七莲1~3 份，太白鹿角1~3份，白透骨消1~3份。
[0013] 所述的一种治疗哮喘的中药组合物，包括以下重量份的原料:龙舌草1份、羊七莲1 份，太白鹿角1份，白透骨消1份。
[0014] 所述的一种治疗哮喘的中药组合物，包括以下重量份的原料:龙舌草1份、羊七莲3 份，太白鹿角1份，白透骨消3份。
[0015] 所述的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0016] SI:取上述重量份的干燥的龙舌草、羊七莲，加6~10倍量的80~85%乙醇回流提 取2~3次，每次2~3h，提取液合并，滤过，滤液浓缩至原料重量的1/5~1/3,得到醇提混合 浸膏；
[0017] S2:取上述重量份的干燥的太白鹿角、白透骨消，加10~15倍量的水回流提取2~3 次，每次2~3h，提取液合并，滤过，滤液浓缩至原料重量的1/5~1/3,得到水提混合浸膏；
[0018] S3:取上述醇提混合浸膏、水提混合浸膏混合均匀，干燥后粉碎，得本发明中药组 合物。
[0019] 所述的一种治疗哮喘的中药组合物的检测方法，该中药组合物的含量测定方法 为：
[0020]该中药组合物的含量测定方法为:采用高效液相色谱法进行松萝酸和4-亚甲基环 己烯酮的含量测定：
[0021] Sl:供试品溶液的制备:精密称取本发明中药组合物，至量瓶中，加入95 %乙醇超 声溶解后定容；
[0022] S2:对照品溶液的制备：分别精密取松萝酸对照品和4-亚甲基环己烯酮对照品至 量瓶中，氯仿溶解后定容得混合对照品溶液；
[0023] S3:液相色谱条件:色谱柱为ODS柱;流动相：乙腈-缓冲混合溶液，所述缓冲混合溶 液的配制方法为0.0 lmol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液，再用10 %磷 酸调节pH值2 ·0;梯度洗脱:0-5min，乙腈0~20% ;5-15min，乙腈20~25% ; 15-40min，乙 腈25~60 % ; 40-50min，乙腈60~100 % ;检测波长:260nm和350nm;进样量：IOyL;检测器为 DAD检测器；
[0024] S4:含量测定:分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各2~20yL，注入高效液 相色谱仪，进行检测。
[0025]优选采用如下方法测定：
[0026] Sl:供试品溶液的制备：精密称取本发明中药组合物200mg，至50ml量瓶中，加入 95%乙醇超声溶解后定容；
[0027] S2:对照品溶液的制备:分别精密取松萝酸对照品和4-亚甲基环己烯酮对照品5mg 至50ml量瓶中，氯仿溶解后定容得混合对照品溶液；
[0028] S3:液相色谱条件:色谱柱为ODS柱;流动相：乙腈-缓冲混合溶液，所述缓冲混合溶 液的配制方法为0.0 lmol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液，再用10 %磷 酸调节pH值2 ·0;梯度洗脱:0-5min，乙腈0~20% ;5-15min，乙腈20~25% ; 15-40min，乙 腈25~60 % ; 40-50min，乙腈60~100 % ;检测波长:260nm和350nm;进样量：IOyL;检测器为 DAD检测器；
[0029] S4:含量测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10yL，注入高效液相 色谱仪，进行检测。
[0030] 该中药组合物的含量测定方法为:采用气相色谱法对过氧麦角留醇、豆留醇和7β-羟基谷留醇进行检测；
[0031] Sl:供试品溶液的制备:精密称取本发明中药组合物200mg，置25mL量瓶中，加入石 油醚IOmL，在50~60°C水浴上加热3~5分钟使融化，取出放冷，加石油醚稀释至刻度，摇匀， 离心，取上清液，即得；
[0032] S2:对照品溶液的制备:精密称取成分过氧麦角留醇、豆留醇和7β-羟基谷留醇对 照品适量，精密称定，加石油醚制成每mL含过氧麦角甾醇1.4mg、豆甾醇1.4mg和7β-羟基谷 甾醇0.2mg的混合对照品溶液，即得；
[0033] S3:气相色谱条件:安捷伦的7890A型气相色谱仪;HP-INN0WAX毛细管柱;氢火焰离 子化检测器;检测器温度280°C;进样口温度250°C;程序升温，初始温度90°C，10°C/min升至 250°C，保持IOmin;进样方式为分流进样，分流比20:1;
[0034] S4:含量测定:分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各lyL，注入气相色谱仪，记 录峰面积，按外标法分别计算过氧麦角留醇、豆留醇和7β-羟基谷留醇的含量。
[0035] 所述的一种治疗哮喘的中药组合物在制备治疗哮喘和过敏性哮喘药物制剂中的 应用。
[0036] 所述的一种治疗哮喘的中药组合物在制备治疗过敏性鼻炎药物制剂中的应用。
[0037] -种治疗哮喘的中药组合物在哮喘制剂和过敏性哮喘制剂中的应用。
[0038] 本发明提供的一种治疗哮喘的中药组合物、制备工艺、检测方法及其应用，中药组 合物用于治疗哮喘、过敏性哮喘、见效快、治愈率高、标本兼治、不易复发；中药组合物的制 备方法，包括水提、醇提，水溶性成分及醇溶性成分提取率均较高，制备方法简单易操作；中 药组合物的检测方法，包括气相检测法和液相检测法，可监测醇溶性指标成分及挥发性指 标成分，该检测方法重现性好，可严格监控中药组合物的质量。
【具体实施方式】
[0039] 为使本发明实现的技术手段、技术特征、达成目的与功效易于明白了解，下面进一 步阐述本发明。
[0040] 实施例1:
[0041] 一种治疗哮喘的中药组合物，包括以下重量份的原料:龙舌草250g、羊七莲250g， 太白鹿角250g，白透骨消250g。
[0042]上述中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0043] SI:取上述重量份的干燥的龙舌草、羊七莲，加6倍量的80 %乙醇回流提取2次，每 次2h，提取液合并，滤过，滤液浓缩至原料重量的1/5，得到醇提混合浸膏；
[0044] S2:取上述重量份的干燥的太白鹿角、白透骨消，加10倍量的水回流提取2次，每次 2h，提取液合并，滤过，滤液浓缩至原料重量的1/5，得到水提混合浸膏；
[0045] S3:取上述醇提混合浸膏、水提混合浸膏混合均匀，干燥后粉碎，得本发明中药组 合物。
[0046] -种治疗哮喘的中药组合物的检测方法，该中药组合物的含量测定方法为:采用 高效液相色谱法进行松萝酸和4-亚甲基环己烯酮的含量测定：
[0047] Sl:供试品溶液的制备：精密称取本发明中药组合物200mg，至50ml量瓶中，加入 95%乙醇超声溶解后定容；
[0048] S2:对照品溶液的制备:分别精密取松萝酸对照品和4-亚甲基环己烯酮对照品5mg 至50ml量瓶中，氯仿溶解后定容得混合对照品溶液；
[0049] S3:液相色谱条件:液相为安捷伦1200;色谱柱为ODS柱(5μπι，4.6mm X 150mm);流动 相：乙腈-缓冲混合溶液，所述缓冲混合溶液的配制方法为0.01m〇l/L庚烷磺酸钠与 0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液，再用10%磷酸调节pH值2.0;梯度洗脱:0-5min，乙腈 0~20% ;5-15min，乙腈20~25% ;15-40min，乙腈25~60% ;40-50min，乙腈60~100% ; 检测波长:260nm和350nm;进样量：IOyL;检测器为DAD检测器；
[0050] 液相的方法学考察：
[0051 ] 线性关系考察:精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的松萝酸5. Hmg和4-亚甲基环 己稀酮5.02mg于IOmL量瓶中，加氯仿配成0.514mg/mL和0.502mg/mL的对照品储备液。分别 制备得松萝酸51 · 4yg/mL，