鱗茎中草药，原药材用沸 水提取，硫酸-苯酪法检测提取液的糖含量，直至糖反应不明显。在本发明的一个实施方式 中，所述步骤b)包括合并提取液，浓缩，用流动水透析，透析内液浓缩后加入30% (w/v)的 H氣己酸水溶液脱蛋白，然后碱中和至抑值7. 0-8. 0。在本发明的一个实施方式中，所述步 骤C)包括用流动水透析，透析内液浓缩后，加入2-5倍体积的95%有机溶剂进行沉淀。在 一个优选的实施方式中，所述步骤C)中使用的有机溶剂是己醇。在本发明的一个实施方式 中，所述步骤d)包括收集沉淀，用无水己醇和丙丽洗涂，干燥后得到干燥的肉巧蓉鱗茎水 提多糖。在本发明的一个实施方式中，所述步骤e)包括在0. 1~4M的强酸溶液中，70~ 20(TC的温度下加热降解反应1~4小时，获得包含寡糖混合物的肉巧蓉鱗茎提取物。在一 个优选的实施方式中，所述步骤e)中的强酸为H氣己酸或盐酸。在本发明的一个实施方式 中，所述步骤f)包括用透析或蒸傭手段去除酸性成分，离必后取上清液，通过活性炭娃藻 ±混合柱（w/w = 1:1)进行分离，用0-100%己醇洗脱。装柱方法；W适量水混合挪壳活性 炭（承德兴华活性炭有限责任公司）和娃藻± (国药），成泥浆状后均匀轻缓地倒入玻璃柱 中，静置沉降后用去离子水平衡至柱体积不变，便可用于样品分离。在本发明的一个实施方 式中，采用苯酪-硫酸法绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线收集合并洗脱液，蒸傭去己醇后用蒸 傭水溶解获得浅黄色澄清溶液。
[0026] 在本发明一个优选的实施方式中，所述步骤b)中的脱蛋白的操作采用30% (w/v) 的H氣己酸水溶液。
[0027] 在本发明一个优选的实施方式中，所述步骤C)中使用的有机溶剂选自：己醇，丙 丽，氯仿。
[0028] 在本发明一个优选的实施方式中，所述步骤e)中使用的强酸选自；H氣己酸、盐 酸。
[0029] 在本发明一个优选的实施方式中，所述步骤f)中使用的活性炭娃藻±层析柱是 通过将活性炭与娃藻±按照I ;1的重量比在水中混合形成泥浆状，然后将所得泥浆状混合 物均匀倒入层析柱制备得到。
[0030] 在本发明一个优选的实施方式中，所述步骤f)中采用0-100%的己醇洗脱。
[0031] 在本发明的另一方面，提供了通过本发明方法制备得到的包含寡糖混合物的肉巧 蓉鱗茎提取物。
[0032] 在本发明的另一方面，提供了通过本发明方法制备得到的包含寡糖混合物的肉巧 蓉鱗茎提取物可W使用的除去多糖的提纯方法。
[0033] 在本发明的另一方面，提供了按照本发明方法制备得到的肉巧蓉鱗茎提取物在具 有延缓皮肤衰老作用的化妆品中的应用。
[0034] 在本发明的另一方面，提供了一种具有延缓皮肤衰老作用的化妆品，所述化妆品 包含按照本发明方法制备得到的肉巧蓉鱗茎提取物W及化妆品领域可接受的赋形剂。在本 发明一个优选的实施方式中，所述化妆品还包含另一种具有延缓皮肤衰老作用的添加剂。 在一个实施方式中，所述化妆品选自：洁面乳、化妆水、乳液、膏霜、睹囑、面膜。在一个优选 的实施方式中，所述肉巧蓉鱗茎提取物的使用量为0. 0001% -80% (w/w)。优选的浓度范围 为0. 001% -10% (w/w)。更优选的浓度范围为0. 005% -5% (w/w)。最优选的是肉巧蓉鱗 茎提取物在0. 1% -1% (w/w)的浓度范围。
【附图说明】
[0035] 图1是本发明肉巧蓉鱗茎提取物的提取工艺流程图。
[0036] 图2为角质细胞处理后细胞活性（综合细胞新陈代谢能力与增殖能力之和）的结 果。图中纵坐标为450nm处样品的吸光度（OD值）平均值除W对照组OD平均值所得的百 分比，此数值体现的是W对照组为基准，各种处理条件下96孔板内所有角质细胞线粒体活 性的总和，由XTT法测得。横坐标显示的是不同的实验条件，从左到右使用的依次是，普通 培养基，含0. lmg/ml、lmg/ml肉巧蓉鱗茎提取多糖的培养基，W及含0. lmg/ml、lmg/ml肉巧 蓉鱗茎制备混合寡糖的培养基。星号代表的是该条件下的实验值与对照组有显著性差异。
[0037] 图3为细胞培养基中居脯氨酸含量检测结果。图中纵坐标为550nm处样品的吸 光度（OD值）平均值除W对照组OD平均值所得的百分比，此数值体现的是W对照组为基 准，各种处理条件下成纤维细胞培养基中居脯氨酸的含量。横坐标显示的是不同的实验条 件，从左到右使用的依次是，普通培养基，含0. 3mg/ml肉巧蓉鱗茎提取多糖的培养基，含 0.05mg/ml肉巧蓉鱗茎制备寡糖的培养基W及含O.Olmg/ml肉巧蓉鱗茎制备寡糖的培养 基。星号代表的是该条件下的实验值与对照组有显著性差异。
[0038] 图4为细胞分泌I型前胶原免疫英光图片。图为共聚焦显微镜拍摄的I型前胶原 英光照片。藍色英光代表的是成纤维细胞核，绿色英光则是I型前胶原。绿色英光的强弱 即对应细胞分泌I型前胶原数量的多少。培养条件从左到右使用的依次是，普通培养基， 含0. 3mg/ml肉巧蓉鱗茎提取多糖的培养基，W及含0. 05mg/ml肉巧蓉鱗茎制备寡糖的培养 基。
【具体实施方式】
[0039] 下面结合具体的实施例进一步阐述本发明。但是，应该明白，送些实施例仅用于说 明本发明而不构成对本发明范围的限制。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常 按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另有说明，所有的百分比和份数按重量 计。
[0040] 本发明实施例中使用的仪器设备如下：
[0041] S皿-III循环水式多用真空泉：郑州长城科工贸易有限公司。
[0042] 85-2型恒温磁力揽拌器；上海思乐仪器有限公司。
[0043] DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱；上海一恒科技有限公司。
[0044] N-IIOOD-WD真空旋转蒸发仪；日本EYELA公司。
[0045] UV260可见分光光度计；日本化ima化U。
[0046] 化-21M低温高速离必机：上海离必机研究所有限公司。
[0047] L油conco大型冷冻干燥机；美国L油conco公司。
[0048] Edwards小型冷冻干燥机；英国Edwards公司。
[0049] 全波长双板多功能仪（酶标仪）；美国BMG L油tech公司Novostar
[0050] 细胞培养箱；美国Thermo serial II
[0051] W下实施例1-5例举本发明涉及的肉巧蓉鱗茎提取物制备方法及可能的纯化方 法，所述肉巧蓉产自甘肃或新疆。
[0052] 实施例1
[0053] 取肉巧蓉鱗茎化g，己醇浸泡脱脂，室温自然干燥，干燥后的肉巧蓉鱗茎原药材用 3化沸水提取，直至水提液中糖含量值较低，低温浓缩至化，加入化30% (w/v) H氯己酸溶 液，脱蛋白之后用碱中和至抑为7. 0,对流动水透析H天，内液浓缩，离必去沉淀，上清液加 入3倍己醇沉淀，静置，离必保留沉淀，分别用无水己醇，丙丽洗涂，真空干燥后得到干燥肉 巧蓉鱗茎水提多糖200g,为踪褐色粉末。
[0054] 水提粗多糖IOg W适量水溶解，离必除去不溶物。在终浓度为0. 2M H氣己酸溶液 中，W及7(TC加热4小时获得混合寡糖。蒸傭除去H氣己酸，离必后取上清液。获得深踪色 水溶液，包含寡糖的肉巧蓉鱗茎提取物，固含量77mg/ml。
[00巧]SOg挪壳活性炭混合50g娃藻±于500ml去离子水中，揽拌均匀后缓慢倒入直径 6cm高80cm的玻璃柱中，装柱后用蠕动泉压纯水平衡2天至柱体积不变，吸出上层清水，加 入降解除酸后的混合寡糖溶液。W纯水洗脱，苯酪-硫酸法绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线收 集合并洗脱液，蒸傭去己醇后用蒸傭水溶解获得浅黄色澄清溶液，固体含量15mg/ml。
[005引 实施例2
[0057] 取肉巧蓉鱗茎化g，丙丽浸泡脱脂，通风楓内室温自然干燥，干燥后的肉巧蓉鱗茎 原药材用4化沸水提取，直至水提液中糖含量