一种温敏型江蓠琼脂配合物凝胶的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种温敏型江蓠琼脂配合物凝胶的制备方法，属于凝胶制备技术领域。
【背景技术】
[0002]温敏型凝胶用聚合物具有随贮藏条件和用药部位的温度变化而发生自溶液向凝胶相转变的特性。温敏型含药凝胶具有流动性好、使用方便、滞留时间长、生物利用度高、有良好的控制释药性能等优点，在药剂学中应用广泛，可制成埋值型药物控制释放系统，经注射注入体内免除植入手术给患者带来的痛苦，另外，温敏型凝胶还可转载生物大分子药物，保持生物大分子的活性，因此，温敏型凝胶载药系统已经成为药剂学研究中的一个亮点。
[0003]目前大多数温敏型凝胶制备采用的泊洛沙姆，其是由亲水段聚氧乙烯(PEO)和疏水段聚氧丙烯(PPO)按照ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0的结构形成的，具有较好的生物相容性和较低的毒性。另外，一定浓度的泊洛沙姆还具有反向热敏胶凝性质，即在低温时为液体，室温和体温时转变为半固体凝胶状，温度降低后，复又转变为可流动液体状。目前已经被广泛的用于静脉乳剂、难溶性药物的增溶剂、药物的吸收促进剂和缓控释材料。然而，泊洛沙姆的包封率和载药量低，临界胶束浓度高，稳定性低，从而使其的应用受到限制。
【发明内容】
[0004]本发明主要解决的技术问题:针对目前利用泊洛沙姆制备的凝胶稳定性差，药物的有效利用率低，包封率低的问题，提供了一种主要以新鲜江蓠的为原材料，分别经过与三次无菌水在特定条件下，制备成江蓠琼胶，并将其与乙醇等物质混合成江蓠琼脂乙醇溶液，再在特定条件下，与氯乙酸等物质混合，并经过滤，浓缩，干燥制得凝胶。本发明制备的温敏型江蓠琼脂配合物凝胶具有载药能力强，缓释时间长，具有较强的稳定性的特点。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案:
(1)选取新鲜江蓠，用清水洗净并置于阳光下晾干，随后将其置于55?60°C烘箱中干燥2?3h，制备得干燥江蓠，随后按固液质量比1:10，将干燥江蓠与无菌水搅拌溶胀，随后将其密封并置于20?30°C下发酵处理2?3天；
(2)待发酵完成后，对其过滤并收集滤渣，用无菌水洗涤3?5次，再按固液质量比1:10将其与无菌水搅拌混合，随后按无菌水和氢氧化钠溶液质量比1:1，将质量浓度为20%的氢氧化钠溶液添加至上述溶液中，搅拌混合10?15min后，在65?70°C下恒温水浴加热2?3h;
(3)待水浴加热完成后，对其减压抽滤收集滤饼，并用蒸馏水洗涤3?5次，待洗涤完成后，再用0.lmol/L的盐酸溶液冲洗使其pH至6.5，随后用去离子水洗涤3?5次后，将其置于烧杯中，按固液质量比1:50，将无菌水添加至烧杯中；
(4)待添加完成后，将其密封并置于120?125°C油浴加热2?3h，待其加热完成后，使其自然冷却至20?30°C，并对其再次抽滤，收集滤液和滤渣，按固液质量比1:25，将滤渣与无菌水搅拌混合置于烧杯中，在120?130°C下继续油浴加热I?2h，待其自然冷却后过滤并收集滤液，合并两次滤液并对其真空冷冻干燥6?8h，制备得江蓠琼胶；
(5)将上述制备的江蓠琼胶和氢氧化钠溶液按质量比1:10，将江蓠琼胶和质量分数为40%的氢氧化钠溶液搅拌混合，随后在20?25°C下碱化12?14h，待碱化完成后，继续添加和氢氧化钠溶液质量相同的无水乙醇，搅拌混合5?8h，制备得江蓠琼脂乙醇溶液；
(6)按固液质量比1:1.5，将氯乙酸和无水乙醇搅拌混合并使其完全溶解，再按质量比1:4，将上述混合液按2mL/min的速度滴加至上述制备的江蓠琼脂乙醇溶液中，在20?30°C下反应2?4h后，升温加热至66?70°C反应2?3h，待反应完成后，静置冷却并用去呙子水稀释pH至7.0，随后减压过滤，用无水乙醇洗涤3?5次后，将其置于40?45°C下真空冷冻干燥6?Sh，制备得改性江蓠琼脂；
(7)取上述制备的10?15g改性江蓠琼脂，将其添加至450?500mL的0.lmol/L的盐酸溶液中，搅拌混合使其完全溶解，随后用G3漏斗进行过滤，收集琼脂滤液，随后按质量比1:10，将上述制备的改性江蓠琼脂溶解至蒸馏水中，制备得改性琼脂液，再按改性琼脂液与琼脂滤液质量比1:10，将改性琼脂液缓慢滴加至滤液中，随后缓慢搅拌并旋转蒸发至原有体积的1/5，再将其置于50?70°C下干燥2?3h，即可制备得一种温敏型江蓠琼脂配合物凝胶。
[0006]本发明的应用:将上述制备的温敏型江蓠琼脂配合物凝胶多用于局部注射给药，可在体温下形成凝胶，能够缓慢释放药物，释放药物时间可延长10?12h;或者将上述制备的温敏型江蓠琼脂配合物凝胶作为眼部给药，可以有效缓减眼部疲劳。
[0007]本发明的有益效果是:
(1)具有载药能力强，缓释时间长，具有较强的稳定性的特点；
(2)药物利用率高，提高了10?15%;
(3)制备步骤简单，成本低。
【具体实施方式】
[0008]首先选取新鲜江蓠，用清水洗净并置于阳光下晾干，随后将其置于55?60°C烘箱中干燥2?3h，制备得干燥江蓠，随后按固液质量比1:10，将干燥江蓠与无菌水搅拌溶胀，随后将其密封并置于20?30°C下发酵处理2?3天;待发酵完成后，对其过滤并收集滤渣，用无菌水洗涤3?5次，再按固液质量比1:10将其与无菌水搅拌混合，随后按无菌水和氢氧化钠溶液质量比1:1，将质量浓度为20%的氢氧化钠溶液添加至上述溶液中，搅拌混合10?15min后，在65?70°C下恒温水浴加热2?3h ；待水浴加热完成后，对其减压抽滤收集滤饼，并用蒸馏水洗涤3?5次，待洗涤完成后，再用0.lmol/L的盐酸溶液冲洗使其pH至6.5，随后用去离子水洗涤3?5次后，将其置于烧杯中，按固液质量比1:50，将无菌水添加至烧杯中；待添加完成后，将其密封并置于120?125°C油浴加热2?3h，待其加热完成后，使其自然冷却至20?30°C，并对其再次抽滤，收集滤液和滤渣，按固液质量比1: 25，将滤渣与无菌水搅拌混合置于烧杯中，在120?130°C下继续油浴加热I?2h，待其自然冷却后过滤并收集滤液，合并两次滤液并对其真空冷冻干燥6?Sh，制备得江蓠琼胶;再将上述制备的江蓠琼胶和氢氧化钠溶液按质量比1:10，将江蓠琼胶和质量分数为40%的氢氧化钠溶液搅拌混合，随后在20?25°C下碱化12?14h，待碱化完成后，继续添加和氢氧化钠溶液质量相同的无水乙醇，搅拌混合5?8h，制备得江蓠琼脂乙醇溶液;按固液质量比1:1.5，将氯乙酸和无水乙醇搅拌混合并使其完全溶解，再按质量比1:4，将上述混合液按2mL/min的速度滴加至上述制备的江蓠琼脂乙醇溶液中，在20?30°C下反应2?4h后，升温加热至66?70°C反应2?3h，待反应完成后，静置冷却并用去离子水稀释PH至7.0，随后减压过滤，用无水乙醇洗涤3?5次后，将其置于40?45°C下真空冷冻干燥6?8h，制备得改性江蓠琼脂；取上述制备的10?15g改性江蓠琼脂，将其添加至450?500mL的0.lmol/L的盐酸溶液中，搅拌混合使其完全溶解，随后用G3漏斗进行过滤，收集琼脂滤液，随后按质量比1:10，将上述制备的改性江蓠琼脂溶解至蒸馏水中，制备得改性琼脂液，再按改性琼脂液与琼脂滤液质量比1:10，将改性琼脂液缓慢滴加至滤液中，随后缓慢搅拌并旋转蒸发至原有体积的1/5，再将其置于50?70°C下干燥2?3h，即可制备得一种温敏型江蓠琼脂配合物凝胶。
[0009]实例I首先选取新鲜江蓠，用清水洗净并置于阳光下晾干，随后将其置于60°C烘箱中干燥3h，制备得干燥江蓠，随后按固液质量比1:10，将干燥江蓠与无菌水搅拌溶胀，随后将其密封并置于30°C下发酵处理3天;待发酵完成后，对其过滤并收集滤渣，用无菌水洗涤5次，再按固液质量比1:10将其与无菌水搅拌混合，随后按无菌水和氢氧化钠溶液质量比1:1，将质量浓度为20%的氢氧化钠溶液添加至上述溶液中，搅拌混合15min后，在70°C下恒温水浴加热3h ；待水浴加热完成后，对其减压抽滤收集滤饼，并用蒸馏水洗涤5次，待洗涤完成后，再用0.lmol/L的盐酸溶液冲洗使其pH至6.5，随后用去离子水洗涤5次后，将其置于烧杯中，按固液质量比1:50，将无菌水添加至烧杯中；待添加完成后，将其密封并置于125°C油浴加热3h，待其加热完成后，使其自然冷却至30°C，并对其再次抽滤，收集滤液和滤渣，按固液质量比1:25，将滤渣与无菌水搅拌混合置于烧杯中，在130°C下继续油浴加热2h，待其自然冷却后过滤并收集滤液，合并两次滤液并对其真空冷冻干燥Sh，制备得江蓠琼胶;再将上述制备的江蓠琼胶和氢氧化钠溶液按质量比1:10，将江蓠琼胶和质量分数为40%的氢氧化钠溶液搅拌混合，随后在25°C下碱化14h，待碱化完成后，继续添加和氢氧化钠溶液质量相同的无水乙醇，搅拌混合8h，制备得江蓠琼脂乙醇溶液;按固液质量比1:1.5，将氯乙酸和无水乙醇搅拌混合并使其完全溶解，再按质量比1:4，将上述混合液按2mL/min的速度滴加至上述制备的江蓠琼脂乙醇溶液中，在30°C下反应4h后，升温加热至70°C反应3h，待反应完成后，静