一种肿瘤耐药的靶点及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于分子生物学和肿瘤防治领域，更具体而言，本发明设及预测、诊断和治 疗肿瘤耐药性领域。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是危害人类健康的一类疾病，化疗是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之 一。然而，肿瘤对化疗药物产生耐药性已成为影响肿瘤治疗效果的一大障碍。对肿瘤耐药发 生机制的研究和寻找开发逆转耐药的药物是当前肿瘤防治研究领域的重点和难点。
[0003] 818作02家族基因臟〇：1基因编码细胞转录因子魁(：1(肌(316113 3(3州油6邮-1，伏隔 核1)的表达，其定位于人染色体区化19pl3.2"NACl在多种肿瘤中（例如卵巢癌、宫颈癌、子 宫内膜癌、乳腺癌和结肠癌等)过表达NACUBTB结构域(也称为POZ结构域)是介导蛋白相互 作用的重要结构域，NACl的BZB结构域（1-129氨基酸序列）是形成NACl二聚体复合物所必需 的，形成的NACl二聚体复合物可W参与多种生物功能调控:例如基因转录调控、泛素途径的 蛋白降解、细胞形态、增殖和调亡等等。
[0004] 为了逆转肿瘤耐药，提高化疗疗效，本领域迫切需要通过多种方式研究肿瘤耐药 发生的机制、肿瘤耐药的关键基因祀点，并根据运些祀点设计治疗肿瘤耐药的新药，从而引 导肿瘤耐药祀向性治疗。
【发明内容】
[0005] 本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面W及简要介绍一些较佳实施 例。在本部分W及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略W避免使本部 分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而运种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
[0006] 鉴于上述和/或现有肿瘤药物及其应用中存在的问题，提出了本发明。
[0007] 因此，本发明的一个目的是提供一种肿瘤耐药的关键基因祀点及蛋白祀点，为逆 转肿瘤耐药、提高化疗疗效提供更为有效的工具。
[000引为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案:一种肿瘤耐药的祀点，其所述 祀点为核转录因子伏隔核1和/或其参与的自隧途径。
[0009] 本发明的另一个目的是提供一种伏隔核1抑制剂在降低和/或消除肿瘤治疗中的 耐药性的药物中的应用。
[0010] 作为本发明所述伏隔核1抑制剂在降低和/或消除肿瘤治疗中的耐药性的药物中 的应用的一种优选方案，其中：所述伏隔核1抑制剂包括:抗伏隔核1的抗体、针对伏隔核1编 码序列的RNA干扰分子或反义寡核巧酸、伏隔核1介导的自隧途径抑制剂。
[0011] 作为本发明所述伏隔核1抑制剂在降低和/或消除肿瘤治疗中的耐药性的药物中 的应用的一种优选方案，其中：所述抗伏隔核1的抗体包括:对抗伏隔核1或其活性片段具有 特异性的多克隆抗体和单克隆抗体。
[0012] 作为本发明所述伏隔核1抑制剂在降低和/或消除肿瘤治疗中的耐药性的药物中 的应用的一种优选方案，其中：所述抗伏隔核I的抗体还包括具有免疫活性的抗体片段。
[0013] 作为本发明所述伏隔核1抑制剂在降低和/或消除肿瘤治疗中的耐药性的药物中 的应用的一种优选方案，其中：所述具有免疫活性的抗体片段包括:Fab'或(Fab)2片段、抗 体重链、抗体轻链、遗传工程改造的单链Fv分子或嵌合抗体。
[0014] 本发明的还一个目的是提供一种药物组合物，其包括:如权利要求2所述的伏隔核 1抑制剂W及药学上能够接受的载体。
[0015] 作为本发明所述药物组合物的一种优选方案，其中：所述药学上能够接受的载体 包括:盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇中的一种或几种。
[0016] 本发明的再一个目的是提供一种筛选抗耐药的肿瘤治疗药物的方法，其包括:提 供表达伏隔核1的肿瘤细胞系、肿瘤培养物或荷瘤动物;将候选药物与提供的所述肿瘤细胞 系、肿瘤培养物或荷瘤动物接触，作为给药组;检测给药组中伏隔核1的表达水平，并与未给 予候选药物的对照肿瘤细胞系、肿瘤培养物或荷瘤动物的NACl表达水平进行比较，如果检 测结果显示，给药组伏隔核1的表达水平显著低于对照组，则表明该候选药物是抗耐药的肿 瘤治疗药物。
[0017] 本发明的有益效果：
[0018] (1)掲示了 NACl与肿瘤耐药性之间的关系，为设计和筛选耐药肿瘤药物提供了新 的途径和祀点；
[0019] (2)提供了通过抑制NACl及其相关信号传导途径来提高肿瘤对肿瘤治疗的敏感性 的新方法，从而起到了提高肿瘤治疗效果、减少肿瘤治疗剂用量、缓解患者痛苦的积极作 用，具有临床的实用性。
【具体实施方式】
[0020] 为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合【具体实施方式】 对本发明的【具体实施方式】做详细的说明。
[0021] 在下面的描述中阐述了很多具体细节W便于充分理解本发明，但是本发明还可W 采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可W在不违背本发明内涵的 情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
[0022] 其次，此处所称的"一个实施例"或"实施例"是指可包含于本发明至少一个实现方 式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的"在一个实施例中"并非均指 同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
[0023] 本发明中提供了一种新的肿瘤耐药标志物:在肿瘤组织中高表达并导致肿瘤耐药 的核转录因子伏隔核Unucleus accumbens-1 ,NACl )，将该蛋白作为祀点，可设计出针对该 蛋白及其相关分子的预测、诊断肿瘤耐药试剂盒、筛选针对该蛋白及其相关分子的治疗肿 瘤耐药的药物。
[0024] 本发明的主要目的之一就是为了提供一种肿瘤耐药的关键基因祀点及蛋白祀点， 为逆转肿瘤耐药、提高化疗疗效提供更为有效的工具。本发明的另一个主要目的是根据运 些祀点设计预测、诊断肿瘤耐药试剂盒、筛选针对该蛋白及其相关分子信号通路的治疗肿 瘤耐药的药物。本发明的目的之一是提供一种逆转肿瘤耐药的关键祀点NACl，针对该祀点 及其相关信号通路，如自隧激活抑制剂，设计药物和治疗方案，下调肿瘤中NACl表达或抑制 其功能，能够有效治疗耐药肿瘤。
[0025] 在本发明的一个实施方式中，所述NACl来自人或其它真核生物，例如小鼠、大鼠、 牛或猴等，且它们之间具有高度的保守性。
[0026] 在本发明的一个实施方式中，所述抑制剂选自：抗NACl的抗体、针对NACl编码序列 的RNA干扰分子或反义寡核巧酸。
[0027] 在另一个优选例中，所述NACl相关信号通路抑制剂选自：自隧抑制剂氯哇。
[0028] 在本发明的另一个实施方式中，所述抑制剂是选自下组的RNA干扰分子:shRNA、 siRNA、miRNA或dsRNA，更优选运些RNA干扰分子是针对NACl序列的干扰分子，更优选所述 ShRNA 的序列为:GAGGAAGAACUCGGUGCCCUUCUCCAU。
[0029] 在本发明的另一个实施方式中，所述肿瘤选自：卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、乳 腺癌、、乳腺癌、结肠癌、优选卵巢癌。
[0030] 在本发明的另一个实施方式中，所述肿瘤治疗所采用的治疗剂选自：烧化剂、抗代 谢药、抗肿瘤抗生素、植物类抗癌药或免疫制剂。
[0031] 在一个优选例中，所述治疗剂选自：顺销、卡销、环憐酷胺、氮締咪胺、异环憐酷胺、 盐酸氮芥/苯丙氨酸氮芥、5-氣脈喀晚、甲氨蝶岭、阿糖胞巧、环胞巧、博来霉素、更生霉素、 红必霉素、阿霉素、黄胆素、长春碱、长春新碱、=尖杉醋碱、足叶乙武、n冬酷胺酶、维甲酸。
[0032] 在另一个优选例中，所述治疗剂优选为销类药物:顺销或卡销。
[0033] 在本发明的第二方面中，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含：
[0034] (i)NACl 抑制剂；
[0035] (ii)肿瘤治疗剂；
[0036] (iii)药学上可接受的载体或赋形剂。
[0037] 在一个优选例中，所述肿瘤治疗剂是化疗剂。
[0038] 在本发明的第=方面中，提供了一种药盒，所述药盒包含：
[0039] (A)容纳有NACl抑制剂的容器；
[0040] (B)容纳肿瘤治疗剂的容器和(C)使用说明书。
[0041] 在一个优选例中，本发明的药物组合物或药盒中所包含的抑制剂选自：抗NACl的 抗体、针对NACl编码序列的RNA干扰分子或反义寡核巧酸、自隧抑制剂氯哇。
[0042] 在另一个优选例中，本发明的药物组合物或药盒中所包含的抑制剂为选自下组的 RNA干扰分子:shRNA、siRNA、miRNA或dsRNA，优选为ShRNA或siRNA，更优选序列为针对NACl 的 26 个碱基序列:GAGGAAGAACUCGGUGCCCUUCUCCAU。
[0043] 在另一个优选例中，所述的自隧抑制剂氯哇作用于NACl介导的自隧激活信号通路
[0044] 在另一个优选例中，所述肿瘤选自卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、乳腺癌、结肠 癌，更优选卵巢癌。