一种止血生肌药物及其制备方法_2

文档序号:9773347阅读:来源:国知局
成份W W下重量份组成:白及多糖4 ~10份、壳聚糖1~3份、乳酸0.4~1.5份、紫珠草提取物1~2份混合后冷冻至干,其中所述 紫珠草提取物由紫珠草3~6份、屯叶一枝花2~5份、仙鹤草2~5份,其余为90%乙醇水溶 液,冷浸提90~1 SOmin,经0.22皿陶瓷膜过滤1次,将滤液减压浓缩至干。
[0028] 在一个具体实施方案中,其中各原料成分W W下重量份组成:白及多糖4~8份、壳 聚糖1~2份、乳酸0.5~0.7份、紫珠草提取物1~2份混合后冷冻至干,其中所述紫珠草提取 物由紫珠草3~5份、屯叶一枝花2~4份、仙鹤草2~4份,其余为90%乙醇水溶液,冷浸提90 ~1 SOmin,经0.22皿陶瓷膜过滤1次,将滤液减压浓缩至干。
[0029] 在另一个具体实施方案中,其中各原料成分W W下重量份组成:白及多糖5份、壳 聚糖1份、乳酸0.6份、紫珠草提取物1份混合后冷冻至干,其中所述紫珠草提取物由紫珠草4 份、屯叶一枝花3份、仙鹤草3份,其余为90 %乙醇水溶液,冷浸提90~ISOmin,经0.22um陶瓷 膜过滤1次,将滤液减压浓缩至干。
[0030] 在另一个具体实施方案中,其中所述壳聚糖,直接从市场购买,要求其脱乙酷度> 95 %,粘度> 2000MPa. S,从嘉兴爱德医药科技有限公司购买,该产品的脱乙酷度为96 %,粘 度为 2300MPa.S。
[0031] 本发明第二个目的是提供一种白及多糖的制备方法,并将它用于止血生肌药物 中,步骤包括:
[0032] (1)白及多糖提取:粉碎干燥白及,加入淀粉酶水溶液,使淀粉酶终浓度为2U W上, 40°C保溫处理3~7小时,加热至60~80°C进行回流提取90~ISOmin,经0.22um陶瓷膜过滤1 次,得滤液I和滤渣I;
[0033] (2)白及多I糖纯化:将滤液I在50~60°C减压浓缩至一定体积,再加入乙醇至终浓 度达到80% W上,醇沉10~2〇h,进行过滤,得滤液n和滤渣n,滤液n进行浓缩结晶得葡萄 糖,向滤渣n中加入中性蛋白酶,水解10~40min后,80~90°C保溫lOmin,用0.22皿陶瓷膜 过滤1次,得滤液虹,再将滤液虹上SEPHADEX G-15柱分离收集洗脱液,并浓缩洗脱液至原有 体积的1/15~1/25,再上硅胶柱分离收集白及水溶性多糖成分浓缩至干,获得白及多糖。
[0034] 在一个实施方案中,步骤(1)中所述淀粉酶水溶液的体积化)与白及重量化g)比为 8~20:1;淀粉酶由津市市新型发酵有限责任公司提供,也可W从市场上购买,淀粉酶使用 终浓度为2UW上(其中U是指国际酶活力单位)。
[0035] 在一个实施方案中,步骤(2)中所述一定体积是指原有体积的1/10~1/20。
[0036] 在一个实施方案中,步骤(2)中所述中性蛋白酶溶液的体积化)与滤渣n重量化g) 比为1~3:1;南宁东恒华道生物科技有限责任公司提供,也可W从市场上购买,中性蛋白酶 使用终浓度为抓W上化是指国际酶活力单位)。所用淀粉酶只能水解葡萄糖与葡萄糖连接 的糖巧键。
[0037] 在一个实施方案中,步骤(2)中所述过滤:膜孔径为0.22皿的陶瓷膜过滤一次。
[0038] 在一个实施方案中,步骤(2)中用水作为洗脱液,分别进行洗脱SEPHADEX G-IO柱 和硅胶柱;用3BV~5BV的水进行洗脱柱子,BV是指柱体积。
[0039] 本发明第=个目的是提供通过上述方法所制备的止血生肌药物产品,并应用于小 鼠止血实验,在各个时期检测小鼠伤口止血情况变化。
[0040] 在另一个实施方案中,在小鼠止血生肌药物实验时,所制得的产品每天用量为 0.25~3. Og/小鼠重量化邑)。
[0041] 上述制备的产品可W直接用于各种伤口的表面止血材料中,也可W添加到其它止 血辅料中,还可直接用于化妆品中保水材料和除皱方面的应用。
[0042] 技术效果
[0043] 1、本发明所述的白及多糖水溶性好,易吸收,具有多方面的调理作用,副作用小, 止血效果快。
[0044] 2、本发明的止血活肤药物中皂巧和壳聚糖在伤口部位能显著起着抑制病菌生长, 促进伤口快速愈合作用,同时壳聚糖能有效防止白及多糖的流失,降低其产品的止血生肌 效果。
[0045] 3、由于淀粉酶只能水解葡萄糖之间形成的糖巧键,利用淀粉酶可对白及中淀粉进 行水解,防止淀粉在高溫水溶液中转变成糊精,不利于白及水溶性多糖快速释放到水相中, 也利于后期提取分离,有效地提高白及多糖的产量。
[0046] 4、本发明方法中所用的原料、设备均为常见的普通原料、设备,避免了工业化生产 过程中对于昂贵原材料、仪器的依赖,大大地降低了生产成本。
【具体实施方式】
[0047] 下面,本发明将用实施例进行进一步的说明,但是它并不限于运些实施例的任一 个或类似实例。
[0048] 实施例1:白及水溶性多糖的制备方法
[0049 ]粉碎干燥白及1 OOkg,加入1OOOL的淀粉酶水溶液,使淀粉酶的终浓度为2U W上,40 °0保溫处理地,得水解混合液;再加热至60~80°C进行回流提取ieOmin,经0.22皿陶瓷膜过 滤1次,得滤液I和滤渣I;将滤液I在50~60°C减压浓缩至原有体积的1/15,再加入95 %乙醇 至终浓度达到80 % W上,醇沉10~2〇h,进行过滤,得滤液n和滤渣n,滤液n进行浓缩结晶 得葡萄糖;向滤渣n中加入中性蛋白酶溶液,使中性蛋白酶的终浓度为抓W上,水解30min 后,80~90°C保溫IOmin,用0.22皿陶瓷膜过滤1次,得滤液虹,再将滤液虹上沈PHADEX G-15 柱分离,用3BV~5BV的水作为洗脱液,收集含多糖成分的洗脱液,并浓缩洗脱液至原有体积 的1/20,再上硅胶柱分离,用3BV~5BV的水作为洗脱液,收集白及水溶性多糖成分浓缩至 干,获得白及多糖。经蔥酬一浓硫酸法测定,其中白及水溶性多糖含量在99.5%。取所获得 的白及多糖Ikg加入SOOmL水溶液,加入100克的淀粉酶,使淀粉酶的终浓度为2U W上,40°C 保溫处理3小时,80°CW上灭酶处理lOmin,离屯、去除沉淀,加入95%乙醇至终浓度达到65% W上,醇沉10~20h,5000~8000巧m离屯、10~30min得沉淀,干燥沉淀得976g,经蔥酬一浓硫 酸法测定多糖含量为99.88%。
[0050] 对照实施例1
[0051] 按公开号为CN101906169A所介绍的白及多糖制备工艺方法:用预装1.2mm筛网的 万能粉碎机将白及饮片IOkg粉碎,使全部通过二号筛,得白及粗粉。将白及粗粉与500kg的 一级反渗透水共置揽拌混合罐中,揽拌15分钟,使混合均匀成白及混悬液。将白及混悬液输 入高压压均质机,调节高压均质机累体压力45~55MPa。高压均质的匀浆经S足离屯、机离 屯、,收集离屯、液。在离屯、液中加入滑石粉和娃藻上各化g,混合均匀,经娃藻上过滤器循环过 滤至滤液几无色澄清时,收集滤液。将介质滤液经串联500nm和200nm陶瓷膜的微滤过滤器 过滤至保留液量45kg,得胶状白及多糖浓缩液。浓缩液中加入乙醇,使含醇量达55%,静置6 小时,沉降离屯、,收集白色的沉淀;沉淀用乙醇洗涂2~3次,沉降离屯、,收集沉淀。将乙醇洗 涂后的沉淀均匀的薄铺在烘盘内,-〇.〇9MPa、65°CW下干燥至水分7%,粉碎,得白色白及多 糖3.34kg。收率33.4%,经蔥酬一浓硫酸法测定多糖含量为96.2%。取所获得的白及多糖 Ikg加入SOOmL水溶
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