薄膜上均匀地施加压力。
[0069] 随后将该纤维蛋白密封剂混合物按压到软化聚合物薄膜的表面中。该按压可通过 本领域任何熟悉的方法来完成。在本发明的优选实施例中，使用编程压缩程序，其中在压缩 过程中，压缩力增大至最大50N。可根据使用的具体薄膜的厚度和组成调节实际的压缩力； 所需要的力仅足以将粉末添加到软化聚合物薄膜表面内。
[0070] 在按压之后，该薄膜(仍然在两个平滑平坦表面之间）从加热设备处被去除，并允 许以足够慢的速度冷却到室温，使其基本回到其原有的形态，因此大致保持了如原来形成 的薄膜的机械、物理、以及化学性质。一旦薄膜回到室温，其可选择地被放置在冷冻器中（一 般的冷冻器温度在-15到-25 ° C)约15分钟，以便更容易地将薄膜从其所处的表面之间 移除。在水平支撑表面以及上部覆盖表面由柔性材料制成的实施例中，由于薄膜可在没有 损害风险的情况下从背衬表面处去除，冷冻一般并非是必要的。
[0071] 如果有过多的粉末，从薄膜处去除(例如通过抖落或轻轻地吹)，且薄膜从制备的 平坦表面处被去除。得到的贴片可被使用，并可直接用于组织。该薄膜可稳定于2 - 25 ° C温度的干燥环境的长期存储，该长期存储一般通过将薄膜放置在干燥冷藏环境的密封 塑料封套中，其温度一般在4 - 8 ° C。
[0072] 在此公开的发明通过以下非限制性实施例来限制，其有助于普通的本领域技术人 员来制造并使用所要保护的本发明。
[0073] 实施例1 制备4. 3% w/v的THF中的干PECALA，并将其倒入玻璃培养皿。该培养皿用穿孔的铝 箱所覆盖，并在室温下的通风柜中放置过夜。所得到的薄膜具有大致200 μm的厚度。
[0074] 摘除2平方厘米的薄膜，并被置于载玻片上。该样品被随后放置在58 ° C的热板 上，直到聚合物得到软化。将包含纤维蛋白原、凝血酶以及CaCl2的粉末纤维蛋白密封剂喷 洒到软化的聚合物薄膜的表面上，且薄膜覆盖有第二载玻片。该纤维蛋白密封剂混合物随 后利用英斯特朗万能试验机（Instron Universal Testing Machine)被压到软化聚合物薄 膜的表面中，这种试验机被编程来施加增加的压缩力直到最大的50N。在这种压缩之后，该 载玻片慢慢地冷却至室温。该载玻片随后放置于-22 ° C的冷冻器中长达15分钟，以便帮 助薄膜从该载玻片中松下来。通过振动将过多的粉末从表面上去除掉，且利用手术刀从该 载玻片中去除贴片。请参考附图5,其展示了所获得的准备使用的贴片的图片。
[0075] 实施例2 制备根据本发明一个实施例的组织粘合剂贴片，并使其粘附至一块生肉，并随后通过 水流大量冲洗。如图6所示，在冲洗60分钟之后该贴片仍保持牢固的粘附。
[0076] 实施例3 进行本发明所公开的组织粘合剂贴片的粘附性测量。制备该贴片，并通过手动按压2 分钟来将其施加至一块生肉上。利用拉力和压力计来测量分离该2cm X 2cm的贴片的力。 图7展示了典型力测量的图片。现发现需要5-7牛顿的力来分离该薄膜。
[0077] 实施例4 在将粘合剂贴片腹膜内（IP)的植入大鼠的肝脏和肠（盲肠）表面之后，进行体内生物 降解性评估。该植入对动物并没有可见效果，其看起来在植入的14天期间是健康以及体重 增长的。
[0078] 在植入该贴片的14天之后，处死动物并进行大体尸检，在该期间打开腹腔，并进 行贴片状态的宏观评估。这些贴片可从粘附的植入目标处脱离。
[0079] 图8A展示了在0天时，在肝脏上植入的粘合剂贴片100的植入位置，图8B展示了 植入后第14天时在肝脏上植入的粘合剂贴片100的植入位置。图8C以及8D分别展示了 在0和14天时的在盲肠上植入的植入位置。
[0080] 如上述图中所示，该粘合剂贴片在植入之后14天仍明显粘附至植入位置。
[0081] 实施例5 制备上述的示例1中所述的贴片，除了替代的包含纤维蛋白原、凝血酶以及CaCl2的密 封剂混合物之外，只有粉末纤维蛋白原喷雾到软化的聚合物薄膜的表面上。凝血酶溶液喷 洒到一块生肉上，且贴片被按压到肉上达2分钟。以这种方式制备的贴片的粘附性与实施 例3中所使用的贴片的粘附性相同。
[0082] 实施例6 进行体内研究，以证明本发明贴片在密封损伤组织中的功效。利用大鼠 （η = 6)作为测 试动物。利用活检穿孔而每个测试动物的盲肠中制造2-3 mm的孔。在实验组（η = 3)中， 该孔随后被本发明的由PECALA制成以及包含2 mg/cm的纤维蛋白密封剂的直径为I. 4cm 的贴片所覆盖。现参考附图9,其展示了穿孔的盲肠的区域，并随后用本发明的贴片来覆盖 (圆形和箭头表示的区域)。在对照组（η = 3)的该动物的盲肠为穿孔的，但不再进行进一 步的处理。在穿孔之后(如果是测试组，则由贴片进行密封)，该盲肠回到腹腔中。手术后， 对这些动物追踪了两周，然后将其处死。
[0083] 在实验组中的所有动物增长体重，并展示了没有副作用。剖检数据展示了治疗动 物的盲肠完全康复了，该贴片完全被吸收到组织当中，没有检测到局部反应。相反，三个对 照(未治疗）动物的其中两个在经历了腹部严重的炎症之后死亡。
[0084] 该研究的结果展示了本发明的贴片在大鼠盲肠模型中的肠道渗漏的密封性中是 有效的。
[0085] 实施例7 进行第二体内研究，以证明本发明的贴片在停止严重流血时的功效。使用大鼠 （η = 6) 作为测试动物。在该研究中，利用活检穿孔在测试动物的肝脏的左叶制造了 6mm的孔，导致 了严重流血。该孔随后通过本发明的，由PECALA制成并具有2 mg/cm纤维蛋白密封剂的直 径为1.4 cm贴片所覆盖。该装置与组织粘合得很好，密封孔并立刻停止流血。参照图10， 其展示了实验动物在穿孔并施加贴片之后的肝脏情况(该穿孔可见于透明贴片之下)。在止 血明显之后，该肝脏回到腹腔中。动物在治疗之后继续生存了两周，之后被处死。
[0086] 所有的实验动物体重增长并展示了没有副作用的正常行为。剖检数据展示了肝脏 完全恢复且贴片已经被降解和吸收，并在受伤位置没有反应。
[0087] 这些实验结果证明本发明的贴片没有副作用地有效用于停止严重流血。
【主权项】
1. 纤维蛋白原基组织粘合剂贴片，包括： 背衬，其由可生物相容的聚合物的制成的薄膜制成；以及 纤维蛋白原密封剂； 其中所述蛋白原密封剂添加至可生物相容的聚合物的所述背衬当中。2. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于：所述纤维蛋白原密封剂包括 纤维蛋白原、凝血酶以及CaCl2。3. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于：所述纤维蛋白原密封剂包括 纤维蛋白原，但并不包括凝血酶。4. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述纤维蛋白原密封剂主要 由纤维蛋白原、凝血酶和CaCl2组成。5. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述纤维蛋白原密封剂主要 由纤维蛋白原构成。6. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述组织粘合剂贴片不包括 任何织物或无纺织物成分。7. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述组织粘合剂贴片不包括 以自由粉末形式存在的任何止血剂。8. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述可生物相容的聚合物为 不可渗透的。9. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述可生物相容的聚合物选 自：聚乙二醇-聚己内酯共聚物、聚乙二醇-DL-丙交酯共聚物、和聚乙二醇-聚己内酯-DL-丙交酯共聚物。10. 根据权利要求1所述的粘合剂贴片，其特征在于，所述背衬具有约200 μ m的厚度。11. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述贴片在每平方厘米的薄 膜中包括〇· 5 mg至8 mg之间的纤维蛋白原，以及20 IU至1000 IU之间的凝血酶。12. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述纤维蛋白原密封剂包括 重量比为：425 : 5 : 11的纤维蛋白原、凝血酶以及CaCl2。13. 根据权利要求1所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述纤维蛋白原密封剂额外 地包括至少一种添加剂。14. 根据权利要求13所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述添加剂选自：用于延长 所述薄膜的粘附性半衰期的添加剂、药物活性试剂以及止痛剂。15. 根据权利要求14所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述添加剂为用于延长所 述薄膜的粘附性半衰期的血浆抑制剂。16. 根据权利要求14所述的组织粘合剂贴片，其特征在于，所述添加剂为用于目标或 控制释放的药物活性试剂。17. -种用于制造纤维蛋白原基组织粘合剂贴片的方法，所述方法包括： 从可生物相容的聚合物浇注聚合物薄膜； 软化所述聚合物薄膜； 将纤维蛋白原密封剂置于所述聚合物薄膜的至少一个表面上；并 按压所述聚合物薄膜，直到至少一部分所述纤维蛋白原添加至所述聚合物薄膜的表面 内。18. 根据权利要求17所述的方法，其特征在于，所述将纤维蛋白原密封剂置于所述聚 合物薄膜的至少一个表面上的步骤包括将包括纤维蛋白原、凝血酶以及CaCl 2的纤维蛋白 原密封剂置于所述聚合物薄膜的至少一个表面上。19. 根据权利要求17所述的方法，其特征在于，所述将纤维蛋白原密封剂置于所述聚 合物薄膜的至少一个表面上的步骤包括将包括纤维蛋白原，但不包括凝血酶的纤维蛋白原 密封剂置于所述聚合物薄膜的至少一个表面上。20