的软材料混合物中，分别制得支气管上皮细胞生物复合材料和软骨细胞生物复合材料。
[0033]上述步骤七中构建的贴合的三层矩形片状结构模型中，所述上皮细胞层和软骨细胞层厚度为0.2毫米，所述硬材料层为0.6毫米。
[0034]上述步骤5中的三聚磷酸钠水溶液我8 %三聚磷酸钠水溶液。
[0035]上述步骤6中的三聚磷酸钠水溶液我8 %三聚磷酸钠水溶液。
[0036]本实用新型采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果:
[0037]本实用新型的生物材料配方生物相容性好，用于打印气管补片，避免了对于供体气管的依赖；本实用新型所用材料同时具备柔韧性和一定机械强度，补片的内部结构设计亦有所改进，使之可以根据临床需要进行弯折和修剪；细胞的层级结构按照组织学规律分布(上皮朝向管腔，软骨朝向纵膈)加速了修复过程；立体结构的设计(如C型软管型)符合人体支气管的情况，便于进行手术；植入的补片可在体内降解，减少了异物残留体内所带来的并发症，避免了二次手术取出的风险。
【附图说明】
[0038]图1为本实用新型的生物性复合气管补片的结构示意图。
【具体实施方式】
[0039]图1为本实用新型的结构示意图，其中的附图标记为:上皮细胞复合材料层1、软骨细胞复合材料层2、硬材料层3。
[0040]本实用新型提供了一种生物性复合气管补片，包括上皮细胞复合材料层1、软骨细胞复合材料层2及硬材料层3，所述软骨细胞复合材料层2置于所述上皮细胞复合材料层1和硬材料层3之间。
[0041]本实用新型的可选实施例中，生物性复合气管补片平面结构可以为矩形、圆形或任意多边形。
[0042]本实用新型的可选实施例中，生物性复合气管补片立体结构可以为圆管型、C型圆管型或半圆管型。
[0043]下面通过具体实施例对本实用新型进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本实用新型，但是下述实施例并不限制本实用新型范围。
[0044]实施例一
[0045]利用支气管镜，无菌刷取接受手术的患者自体支气管上皮细胞，体外培养扩增备用；然后利用手术提取患者耳廓软骨，消化分散软骨细胞，体外培养扩增备用。
[0046]配制软材料:将10%胶原和5%透明质酸按照质体积比与去离子水混合，经滤菌器过滤除菌。将壳聚糖经乙醇熏蒸后，于紫外灯下照射24小时彻底灭菌，以8%质量体积比分散于培养液中。将上述两种溶液1:1混合，制成用于重悬细胞的软材料混合物。
[0047]将体外扩增的两种细胞分别消化、重悬、计数后离心，弃去上清液，按照100万/毫升的细胞浓度重悬于前述混合物中，制成支气管上皮细胞生物复合材料和软骨细胞生物复合材料。
[0048]将支气管上皮细胞生物复合材料和软骨细胞生物复合材料别置于两只低温墨仓内，安装直径为0.2毫米的打印针头，加载于打印机上备用。
[0049]将聚乳酸-羟基乙酸共聚物与聚乙二醇按照19:1溶于二氯甲烷中，超声搅拌使分散均匀后，置于通风处内使二氯甲烷自然挥发，得到硬材料混合物。将硬材料混合物置于高温墨仓内，安装直径为0.1毫米的打印机针头，加载于打印机上备用。
[0050]使用建模软件构建如图1所示的贴合的三层矩形片状结构，分别为上皮细胞层1、软骨细胞层2、硬材料层3，上皮细胞层1和软骨细胞层2厚度均为0.2毫米，硬材料层3的厚度为0.6毫米。
[0051]将模型导入打印机驱动程序，分层解析，硬材料拆解为三层打印，两种细胞软材料分别拆解为一层打印。
[0052]将一片无菌载玻片置于打印机作业平台上，校准定位打印针头。设置打印机运行参数:硬材料加热温度为185°C，内部结构间隙为0.35毫米，墨仓内驱动气压为0.3Bar，针头运行速度为7毫米/秒；软材料温度为室温，内部结构间隙为0.30毫米，墨仓内驱动气压为0.1Bar，针头运行速度为10毫米/秒。启动打印流程，按照上述参数打印硬材料层。
[0053]打印富含软骨细胞的软骨细胞层2，完成后暂停打印作业，用超声雾化机将8%三聚磷酸钠均匀喷于软骨细胞层2上。经过大约20分钟，使之充分交联后，用滤纸吸去多余液体。
[0054]继续打印作业，使上抬打印头0.4毫米，打印富含上皮细胞的上皮细胞层1，完成后用超声雾化机将8%三聚磷酸钠水溶液均匀喷于软材料上。经过大约20分钟，使之充分交联。
[0055]用镊子小心将制作完成的补片材料从载玻片上揭下。无菌条件下修剪成受体所需求的形状。手术植入患者体内，修补气管壁缺损。
[0056]本实用新型的生物性复合气管补片，生物材料配方生物相容性好，用于打印气管补片，避免了对于供体气管的依赖；本实用新型所用材料同时具备柔韧性和一定机械强度，补片的内部结构设计亦有所改进，使之可以根据临床需要进行弯折和修剪；分层结构按照组织学规律分布(上皮朝向管腔，软骨朝向纵膈)加速了修复过程；植入的补片可在体内降解，减少了异物残留体内所带来的并发症，避免了二次手术取出的风险。
[0057]以上对本实用新型的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本实用新型并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本实用新型进行的等同修改和替代也都在本实用新型的范畴之中。因此，在不脱离本实用新型的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本实用新型的范围内。
【主权项】
1.一种生物性复合气管补片，其特征在于，包括上皮细胞复合材料层(1)、软骨细胞复合材料层(2)及硬材料层(3)，所述软骨细胞复合材料层(2)置于所述上皮细胞复合材料层(1)和硬材料层(3)之间。2.根据权利要求1所述的生物性复合气管补片，其特征在于，所述生物性复合气管补片平面结构可以为矩形、圆形或任意多边形。3.根据权利要求1所述的生物性复合气管补片，其特征在于，所述生物性复合气管补片立体结构可以为圆管型、C型圆管型或半圆管型。
【专利摘要】本实用新型提供了一种生物性复合气管补片，本实用新型的生物材料配方生物相容性好，用于打印气管补片，避免了对于供体气管的依赖；本实用新型所用材料同时具备柔韧性和一定机械强度，补片的内部结构设计亦有所改进，使之可以根据临床需要进行弯折和修剪；细胞的层级结构按照组织学规律分布(上皮朝向管腔，软骨朝向纵膈)加速了修复过程；立体结构的设计(如C型软管型)符合人体支气管的情况，便于进行手术；植入的补片可在体内降解，减少了异物残留体内所带来的并发症，避免了二次手术取出的风险。
【IPC分类】A61L27/18, A61L27/38, B33Y70/00, A61L27/58, A61L27/24, A61L27/50, A61L27/26, A61L27/20, A61F2/00
【公开号】CN204971700
【申请号】CN201520616108
【发明人】李牧, 张洪波, 陈昶, 殷瑞雪, 郑卉, 邢天龙, 王龙
【申请人】上海市肺科医院
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年8月14日