一种灰树花液体发酵培养基及其制备方法与流程

文档序号:12571593阅读:481来源:国知局

本发明属于食用菌发酵培养技术领域,具体涉及一种灰树花液体发酵培养基及其制备方法。

技术背景

灰树花是一种药食两用的食用菌,属担子菌亚门,层菌纲,无隔担子菌亚纲,非褶菌目,多孔菌科,树花(亦称奇果菌)属。灰树花有多种名称,如贝叶多孔菌、千佛菌、栗子蘑、莲花菌、奇果菌、舞茸等。野生灰树花分布于日本、欧洲、北美和我国许多地区,如黑龙江、吉林、河北、四川、云南、广西、福建等省区。近年来,国内灰树花已在一些省份如河北、浙江、福建等省获得栽培,用于鲜食或提取功能成分。

灰树花野生量极少,几乎不能形成商品。1974年日本进行人工栽培获得成功,在1981年日本主要利用空调设备在室内进行周年栽培,生物学效率最高可达40%左右。我国最早是浙江庆元县在1983年从日本引进菌种进行栽培,生物学效率未突破40%。据记载在80-90年代国内许多单位和个人多次组织研究探索灰树花的人工驯化栽培,获得了纯菌种,但子实体分化不好,产量低,没有成功。90年代初国内一些单位利用固体菌种进行仿野生栽培法,虽然生物学效率达到80%,但普遍存在着生产周期长、污染机会多、转代次数多,菌种易退化等问题,这种生产技术远远不能适应激烈的市场竞争,无法同国际的同行业竞争。国内外多年研究证实,从灰树花深层发酵液和菌丝体中提取的多糖与子实体中提取的多糖具有同样的作用,因此,研究灰树花液体深层发酵培养,对于促进食品、医药工业的发展具有一定的现实意义。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种灰树花液体培养基,具有转化效率高、培养周期短、不易感染杂菌等特点。

本发明的另一目的是提供一种灰树花液体培养基的制备方法,该方法操作简单,适合工业化生产。

一种灰树花液体发酵培养基,每升所述培养基中含有麦麸10-15g、葡萄糖10-15g、KH2PO41.8-2.5g、MgSO4·7H2O1.8-2.2g、玉米粉4.8-5.5g、蛋白胨2.5-3.5g、CaCl20.8-1.2g、VB10.08-0.12、玉米须汁40-55mL,余量为蒸馏水;

其中玉米须汁是按照下述方法制备的:取干燥玉米须20-25g加入100ml蒸馏水煮沸30-45min,过滤,滤液定容至100ml即得。

优选地,每升所述培养基中含有麦麸12g、葡萄糖13g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O2g、玉米粉5g、蛋白胨3g、CaCl21g、VB10.1g、玉米须汁50mL。

所述的灰树花液体发酵培养基的制备方法采用以下步骤:

(1)将麦麸和玉米粉加入800mL蒸馏水中,煮沸20-30min,过滤,得滤液;

(2)在步骤(1)所述的滤液中加入葡萄糖、KH2PO4、MgSO4·7H2O、

蛋白胨、CaCl2、VB1、玉米须汁搅拌均匀,加蒸馏水至1000mL,121℃条件下灭菌20-40min,冷却,得灰树花液体发酵培养基。

玉米须为禾本科玉蜀植物玉米的花柱和柱头,含有多种化学成分,如黄酮及苷类、甾醇、生物碱、糖类、有机酸、矿物质、挥发油、微量元素及多种维生素等。大量研究表明,玉米须含有多种对人体有益的化学成分、成分复杂、药理及食疗兼备。玉米是我国各地广泛栽培的农作物,我国玉米种植面积为2350万公顷,玉米产量居世界第二位,估计玉米须得产量可达750万吨以上,作为玉米副产物的玉米须资源十分丰富,进行工业化开发利用前景相当可观。

本发明所述的灰树花菌种可以使用市场上能够购买得到的任何具有活性的菌种。

有益效果

本发明在灰树花液体培养基中加入了玉米须提取液,使培养基能够满足灰树花液体发酵的需求,而且原料来源丰富、价格低廉,采用本发明培养出的灰树花菌丝体生长快、活力强、菌丝含量高,接种后的菌种萌发率好、发酵周期短、成品率高、不易感染杂菌。本发明提供的培养基制备方法操作简单,适合工业化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明内容进一步地描述。

实施例1

灰树花液体培养基,每升培养基中含有麦麸15g、葡萄糖10g、KH2PO42.5g、MgSO4·7H2O1.8g、玉米粉5.5g、蛋白胨3.5g、CaCl20.8g、VB10.12g、玉米须汁40mL,余量为蒸馏水;

灰树花液体培养基的制备方法为:

(1)将15g麦麸和5.5g玉米粉加入800mL蒸馏水中,煮沸20-30min,过滤,得滤液;

(2)在滤液中加入葡萄糖10g、KH2PO42.5g、MgSO4·7H2O1.8g、蛋白胨3.5g、CaCl20.8g、VB10.12g、玉米须汁40ml搅拌均匀,使加入原料完全溶解,加蒸馏水至1000mL,121℃条件下灭菌20min,冷却,得灰树花液体发酵培养基。

其中玉米须汁的制备方法为:取干燥玉米须20g加入100ml蒸馏水煮沸30min,过滤,滤液定容至100ml即得。

实施例2

灰树花液体培养基:每升培养基中含有麦麸10g、葡萄糖15g、KH2PO41.8g、MgSO4·7H2O2.2g、玉米粉4.8g、蛋白胨2.5g、CaCl21.2g、VB10.08g、玉米须汁55mL,余量为蒸馏水;

(1)灰树花液体培养基的制备:将10g麦麸和4.8g玉米粉加入800mL蒸馏水中,煮沸20-30min,过滤,得滤液;

(2)在滤液中加入葡萄糖15g、KH2PO41.8g、MgSO4·7H2O 2.2g、蛋白胨2.5g、CaCl21.2g、VB10.08g、玉米须汁55ml搅拌均匀,使原料完全溶解,加蒸馏水至1000mL,121℃条件下灭菌30min,冷却,得灰树花液体发酵培养基。

其中玉米须汁的制备方法为:取干燥玉米须25g加入100ml蒸馏水煮沸30min,过滤,滤液定容至100ml即得;

实施例3

灰树花液体培养基:每升培养基中含有麦麸12g、葡萄糖13g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O 2g、玉米粉5g、蛋白胨3g、CaCl21g、VB10.1g、玉米须汁50mL,余量为蒸馏水;

(1)灰树花液体培养基的制备:将12g麦麸和5g玉米粉加入800mL蒸馏水中,煮沸30min,过滤,得滤液;

(2)在滤液中加入葡萄糖13g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O 2g、蛋白胨3g、CaCl21g、VB10.1g、玉米须汁50ml搅拌均匀,使原料完全溶解,加蒸馏水至1000mL,121℃条件下灭菌30min,冷却,得灰树花液体发酵培养基。

其中玉米须汁的制备方法为:取干燥玉米须25g加入100ml蒸馏水煮沸30min,过滤,滤液定容至100ml即得;

对比例

灰树花灰树花液体培养基:每升培养基中含有麦麸12g、葡萄糖13g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O 2g、玉米粉5g、蛋白胨3g、CaCl21g、VB10.1g、余量为蒸馏水;

(1)灰树花液体培养基的制备:将12g麦麸和5g玉米粉加入800mL蒸馏水中,煮沸30min,过滤,得滤液;

(2)在滤液中加入葡萄糖13g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O 2g、蛋白胨3g、CaCl21g、VB10.1g,使原料完全溶解,加蒸馏水至1000mL,121℃条件下灭菌30min,冷却,得灰树花液体发酵培养基。

将上述实施例1-3和对比例制备的灰树花发酵培养基进行灰树花液体发酵:按照7v/v%接种量在装有100mL液体培养基的500mL三角摇瓶中接种灰树花菌种,温度26℃,转速120r/min,恒温摇床培养6,得到灰树花菌丝球,用8层纱布过滤收集灰树花菌丝球,尽量去除其中培养液,装入冷冻收集管,-18℃冷冻结冰后置-70℃冷冻抽干,得灰树花菌丝干粉,-18℃密闭保存。上述实施例和对比例各培养三只摇瓶,液体发酵得到的灰树花菌丝体干质量为三只摇瓶的平均值,其数据见表1:

表1

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