用于培养金针菇菌丝体的液体培养基及培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种菌种培养领域，且特别设及一种用于培养金针茹的液体培养基及 液体深层发酵培养方法。
【背景技术】
[0002] 食用菌作为一种重要的生物资源，不仅味道鲜美、低脂肪、低能量，还富含膳食纤 维、维生素和蛋白质等营养素，正发展成为继动物性食品、植物性食品之外的第=类食品， 即菌物性食品。此外，食用菌还可W提高人体免疫功能、防治多种慢性病，在抗衰老等方面 也具有显著的功效。在众多食用菌中，金针茹因其美味的口感，较高的营养价值，简单的种 植条件而被广泛食用。金针茹是由子实体和菌丝组成的，在适宜的条件下，菌丝发育到一定 阶段便会分化形成子实体，子实体成熟后又散出大量的担抱子，担抱子萌发形成分生抱子， 分生抱子再萌发生成菌丝。
[0003] 随着金针茹日益受到广大消费者的喜爱，市场需求量越来越大。W前小作坊式的 固体培养方式已经远远不能满足金针茹产业快速发展的趋势，大规模机械化的生产已是必 然，因此采用现代生物工程技术的液体深层发酵培养越来越受到重视。液体深层发酵培养 是采用生物发酵培养设备，通过液体深层培养(发酵的方式)生产食用菌菌球，作为食用菌 栽培的种子或作为有效成分提取分离及深加工的原料。相较于固体培养方式，液体深层发 酵培养具有不可比拟的优势:生产周期短，营养利用率高，产品种性稳定，产物污染小。
[0004] 虽然液体深层发酵培养的优势很大，但是目前的液体培养基对于液体深层发酵培 养金针茹菌丝体的培养效果不佳，而且液体培养基的成本较高，不适合大规模工业生产。同 时液体深层发酵培养金针茹菌丝体的工艺还处于小规模的摇瓶阶段，鲜有在较大规模发酵 罐中进行。而对于大规模的液体深层发酵培养，培养过程中的各种参数的控制对整个发酵 的质量起着相当重要的作用，但是目前还没有能适用于大规模的液体深层发酵培养金针茹 的工艺。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种用于培养金针茹菌丝体的液体培养基，此液体培养基 对金针茹菌丝体的培养效果好，成本低，适用于大规模的液体深层发酵培养金针茹菌丝体。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种液体深层发酵培养金针茹菌丝体的方法，适用于 大规模的液体深层发酵培养金针茹菌丝体。
[0007] 本发明解决其技术问题是采用W下技术方案来实现的。
[0008] 本发明提出一种用于培养金针茹菌丝体的液体培养基，其由固体原料与水配制而 成，固体原料按占液体培养基的重量百分数计包括：
[0009] 2%-4% 碳源；
[0010] 3.5%-6.5% 氮源；
[0011] 0.035%-0.065%无机盐；W及
[0012] 0.005%-0.01% 维生素；
[0013] 其中，碳源包括葡萄糖、可溶性淀粉和薦糖中的至少一种;氮源包括硫酸锭、蛋白 腺和黄豆粉中的至少一种;无机盐包括KCl、K出P〇4和K2HP化中的至少一种;维生素包括VBi， VB2和VBs中的至少一种。
[0014] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述固体原料按占液体培养基的重量百分数 计包括：
[0015] 2.5%-3.5% 碳源；
[0016] 4 %-6 % 氮源；
[0017] 0.04%-0.06% 无机盐；W 及 [001 引 0.0065 %-0.0085 % 维生素。
[0019] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述碳源为可溶性淀粉;氮源为黄豆粉。
[0020] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述无机盐为K出K)4;维生素为VB2。
[0021] -种液体深层发酵培养金针茹菌丝体的方法，其包括：
[0022] 准备液体培养基，将金针茹菌种接种于液体培养基，振荡发酵培养，得到金针茹菌 丝体，金针茹菌种的加入量为液体培养基的质量的8%-15%，液体培养基由固体原料与水 配制而成，固体原料按占液体培养基的重量百分数计包括：
[0023] 2%-4% 碳源；
[0024] 3.5%-6.5% 氮源；
[0025] 0.035%-0.065%无机盐；W及
[0026] 0.005 %-0.01 % 维生素；
[0027] 其中，碳源包括葡萄糖、可溶性淀粉和薦糖中的至少一种;氮源包括硫酸锭、蛋白 腺和黄豆粉中的至少一种;无机盐包括KCl、K出P〇4和K2HP化中的至少一种;维生素包括VBi， VB2和VBs中的至少一种。
[0028] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述液体培养基发酵培养的抑为5.0-7.0。
[0029] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述振荡发酵培养的振荡速度为120-18化/ min,溫度为18-26°C，培养时间为4-12天。
[0030] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述金针茹菌种的培养方法包括：
[0031 ]准备斜面培养基，将金针茹母种接种于斜面培养基进行培养，得到初活化菌种，金 针茹母种的加入量为斜面培养基的质量的3%-5%，斜面培养基包括:150-250g/L的去皮马 铃馨，15-25g/L的琼脂粉，15-25g/L的薦糖，余量的水；
[0032] 准备活化培养基，将初活化菌种接种于活化培养基进行培养，得到金针茹菌种，初 活化菌种的加入量为活化培养基的3-6g/L，活化培养基包括：150-250g/L的去皮马铃馨， 15-25g/L的薦糖，余量的水。
[0033] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述初活化菌种的培养方法包括：
[0034] 按重量份数计，称取150-250份去皮马铃馨，加水煮沸18-22min，用3-5层纱布过滤 得滤液，在滤液中加入15-25份琼脂粉，15-25份薦糖，补加水至琼脂粉的质量浓度为15-25g/L，薦糖的质量浓度为15-25g/L，混匀、融化、分装，于120-122°C灭菌18-22min，恒溫培 养2-3d，得到斜面培养基；
[0035] 将金针茹母种接种于斜面培养基，将接种后的斜面培养基放置于26-3(TC恒溫培 养3-5d。
[0036] 进一步地，在本发明较佳实施例中，上述金针茹菌种的培养方法包括：
[0037] 按重量份数计，称取150-250份去皮马铃馨，加水煮沸18-22min，用3-5层纱布过滤 得滤液，在滤液中加入15-25份薦糖，补加水至薦糖的质量浓度为15-25g/L，混匀、融化、分 装，于120-122°C灭菌18-22min，恒溫培养2-3d，得到活化培养基；
[0038] 将初活化菌种接种于活化培养基，将接种的活化培养基在27-28°C，120-130r/min 条件下摇床培养4-5d。
[0039] 本发明实施例的用于培养金针茹菌丝体的液体培养基及培养方法的有益效果是： 液体培养基按重量百分数计包括2 %-4%碳源，3.5 % -6.5 %氮源，0.035 %-0.065 %无机 盐;0.005%-0.01%维生素和水，液体培养基选用合适的碳源、氮源、无机盐和维生素和配 比，液体培养基的各原料协同作用，对金针茹菌丝体的培养效果好，且成本低，适用于大规 模的液体深层发酵培养金针茹菌丝体。液体深层发酵培养金针茹菌丝体的方法利用液体培 养基对金针茹原母种进行多次活化扩大发酵培养，适用于大规模的液体深层发酵培养金针 茹菌丝体。
【具体实施方式】
[0040] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中 的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建 议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可W通过市售购买获得的常规产 品。
[0041] 下面对本发明实施例的用于培养金针茹菌丝体的液体培养基及培养方法进行具 体说明。
[0042] 本发明实施例提供一种用于培养金针茹菌丝体的液体培养基，其由固体原料与水 配制而成，固体原料按占液体培养基的重量百分数计包括：
[0043] 2%-4% 碳源；3.5%-6.5% 氮源；0.035%-0.065%无机盐；^及0.005%-0.01% 维生素。优选的，固体原料包括2.5%-3.5%碳源;4%-6%氮源;0.04%-0.06%无机盐；W 及0.0065 % -0.0085 % 维生素。
[0044] 其中，碳源包括葡萄糖、可溶性淀粉和薦糖中的至少一种，碳源优选为可溶性淀 粉。氮源包括硫酸锭、蛋白腺和黄豆粉中的至少一种，氮源优选为黄豆粉。无机盐包括KC1、 K此P化和K2册化中的至少一种，无机盐优选为K此P〇4。维生素包括VBi，VB2和VBs