专利名称：一种大肠杆菌高密度培养的培养基的制作方法
技术领域：
本发明:一种大肠杆菌高密度培养的培养基属于生物领域，特别是涉及一种培养基。
背景技术：
随着生物制药的发展，利用重组DNA技术克隆大肠杆菌制得的工程菌，生产生物药数量越来越多，为生物技术获得生物药物产品的主要途径。一般情况下，生物药物的产率与大肠杆菌发酵密度密切相关，大肠杆菌的收率直接关系到生物药物的产率。所以在菌体表达蛋白效率相当的情况下，大肠杆菌的发酵密度直接影响到生物药物的生产成本。特别是在同样的纯化技术条件下。不断有学者进行这方面的研究，如根据化学计量模式(stoichiometric model)的方法重新对培养基配方进行设计和优化。在发酵策略方面，为了提高细菌发酵密度，发酵工艺普遍采用补料-分批发酵(fed-batch)的方式提高菌体生长密度和目标产物的表达总量。有必要开发出一种适用于工程菌高密度发酵培养的培养基。对于不同生物工程菌有不同的高密度发酵配方。我们开发了一种新的大肠杆菌高密度发酵配方。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工程菌高密度发酵培养的培养基。本发明的目的是通过以下措施来达到的，本发明的培养基每升包含有下列配比组分:
表一:批培养基:__
权利要求
1.一种大肠杆菌高密度培养的培养基，特征:每升批培养基包含下列配比组分: 酵母提取物5.00 g/L 甘油7.75 ml/L 硫酸铵 3.0g/L 磷酸氢二钠6.0 g/L 磷酸二氢钾3.0 g/L 朽1檬酸1.7 g/L 硫酸镁1.2 g/L 培养基用I Mol/L NaOH等碱性溶液调pH值至6.8 每升补料培养基包含有下列配比组分: 酵母提取物(Yeast extract)40 g/1 甘油(Glycerol 100%)631 g/1 = 513 ml/1 二水钥酸钠(Na2MoO4.2H20)0.02 g/1 七水硫酸镁(MgSO4.7H20)2.0 g/1 五水硫酸铜(CuSO4.5H20)0.007 g/1 二水氯化钙(CaCl2.2H20)0.665 g/1 六水氯化钴(CoCl2.6H20)0.007 g/1 六水氯化铁(FeCl3.6H20)0.20 g/1 硼酸(H3BO3)0.002 g/1 七水硫酸锌(ZnSO4.7H20)0.05 g/1 生物素(Biotine)0.002 g/1 一水硫酸锰(MnSO4.H2O)0.04 g/1 盐酸(HCl 37%)1.25 ml/1 谷氨酸钠(Glutamate de Na)5.0 g/1。
2.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌高密度培养的培养基，其特征是在分批发酵模式下单独用于大肠杆菌工程菌的高密度发酵培养。
3.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌高密度培养的培养基，其特征是在补料-分批发酵模式下，与补料培养基联用，可用大肠杆菌工程菌高密度发酵培养。
全文摘要
本发明一种大肠杆菌高密度培养的培养基属于生物领域，本发明的批培养基每升包含有下列配比组分酵母提取物5.00g/L，甘油7.75ml/L，硫酸铵3.0g/L，磷酸氢二钠6.0g/L，磷酸二氢钾3.0g/L，柠檬酸1.7g/L，硫酸镁1.2g/L，培养基用1Mol/LNaOH等碱性溶液调pH值至6.8。补料培养基每升包含有下列配比组分酵母提取物40g/l；甘油631g/l；二水钼酸钠0.02g/l；七水硫酸镁2.0g/l；五水硫酸铜0.007g/l；二水氯化钙0.665g/l；六水氯化钴0.007g/l；六水氯化铁0.20g/l；硼酸0.002g/l；七水硫酸锌0.05g/l；生物素 0.002g/l；一水硫酸锰0.04g/l；盐酸1.25ml/l；谷氨酸钠5.0g/l。本发明的培养基能显著提高大肠杆菌工程菌发酵密度，同时不降低每单位菌体蛋白表达量。提高目的蛋白表达总量，可减少试剂的消耗，节约成本。
文档编号C12R1/19GK103184172SQ201110454300
公开日2013年7月3日 申请日期2011年12月30日 优先权日2011年12月30日
发明者韦剑, 丘力功, 王灿顶, 孙希海, 蔡小杰 申请人:广州拜迪生物医药有限公司