大肠菌群及大肠杆菌检测培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，由蛋白胨20g、乳糖5g、胆汁酸盐2g、磷酸二氢钾1.5g、磷酸二氢钾4g、氯化钠5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.1g、4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.1g、天冬氨酸1g、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物1g和琼脂20g溶于1000ml去离子水中组成。本发明不但作为平皿培养基，亦可作为试剂片形式，并且成本低，利于普及使用。
【专利说明】大肠菌群及大肠杆菌检测培养基
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种培养基，具体涉及的是一种大肠菌群及大肠杆菌检测培养基。
【背景技术】
[0002]大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中，而大肠杆菌更是评价食品卫生的重要指标。目前同时检测大肠菌群和大肠杆菌的试剂主要使用5-溴-4-氯-3-引哚半乳糖苷(X-Gal)和5-溴-4-氯-3-引哚-β -D-葡萄糖苷酸(X-Gluc)两种酶底物，成本过高，不利于普及使用。
【发明内容】
[0003]为解决上述问题，本发明提出了一种大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，本发明不但作为平皿培养基，亦可作为试剂片形式，并且成本低，利于普及使用。
[0004]为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现:
大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，由蛋白胨20g、乳糖5g、胆汁酸盐2g、磷酸二氢钾
1.5g、磷酸二氢钾4g、氯化钠5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4_甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物Ig和琼脂20g溶于1000ml去离子水中组成。
[0005]进一步的，所述5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷为β -半乳糖苷酶底物。
[0006]进一步的，所述4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸为β -D-半乳糖苷酶底物。
[0007]与现有技术相比，本发明的有益效果是:
本发明不但作为平板培养基，亦可作为试剂片形式，并且成本低，利于普及使用。
【具体实施方式】
[0008]大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，由蛋白胨20g、乳糖5g、胆汁酸盐2g、磷酸二氢钾1.5g、磷酸二氢钾4g、氯化钠5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4_甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物Ig和琼脂20g溶于1000ml去离子水中组成。
[0009]进一步的，所述5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷为β -半乳糖苷酶底物。
[0010]进一步的，所述4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸为β-D-半乳糖苷酶底物。
`[0011]本发明的原理是:
1、由蛋白胨、乳糖、胆汁酸盐等大肠菌群所需的基础营养以及大肠菌群选择性物质组成，并添加β -半乳糖苷酶底物5-溴-4-氯-3- Π引哚基半乳糖苷(X-GAL)使大肠菌群显色，同时添加β -D-半乳糖苷酶底物4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸(MUG)使大肠杆菌菌落在紫外线照射下显示蓝色荧光的选择性显色培养基。
[0012]2、具体实施方法:蛋白胨20g、乳糖5g、胆汁酸盐2g、磷酸二氢钾1.5g、磷酸二氢钾4g、氯化钠5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物lg、琼脂20g溶于1000ml去离子，高温高压灭菌后制作大肠菌群及大肠杆菌选择性显色培养基。
[0013]3、取临床分离大肠杆菌菌株7株、大肠杆菌标准菌株ATCC25922、临床分离克雷伯氏菌3株、阴沟肠杆菌2株、金黄色葡萄球菌2株、草绿色链球菌3株、表皮葡萄球菌I株、头皮葡萄球菌2株接种，37°C培养24小时。包括8株大肠杆菌的大肠菌群显示淡青色菌落，照射伪币鉴别用紫外线灯8株大肠杆菌均显示蓝色荧光，革兰氏阳性菌生长不佳，菌落无色透明未显色。[0014]4、该培养基不但作为平皿培养基，亦可作为试剂片形式。
【权利要求】
1.大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，其特征在于:由蛋白胨20g、乳糖5g、胆汁酸盐2g、磷酸二氢钾1.5g、磷酸二氢钾4g、氯化钠5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4_甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物Ig和琼脂20g溶于1000ml去离子水中组成。
2.根据权利要求1所述的大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，其特征在于:所述5-溴-4-氯-3- Π引哚基半乳糖苷为β -半乳糖苷酶底物。
3.根据权利要求1所述的大肠菌群及大肠杆菌检测培养基，其特征在于:所述4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸 为β-D-半乳糖苷酶底物。
【文档编号】C12Q1/04GK103725746SQ201210380855
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2012年10月10日 优先权日:2012年10月10日
【发明者】金京勋, 肖香, 吴小微 申请人:苏州四同医药科技有限公司