专利名称：地乌皂苷W<sub>3</sub>的合成方法
技术领域：
本发明涉及一种中药活性成分地乌皂苷w3的化学合成方法。
背景技术：
地乌系毛茛科银莲花属植物林荫银莲花""emo"e; flcc/c/a ^V^c/mn^)的干燥根茎， 在《贵州民间药物》、《浙江天目山药植志》等书中均有记载，其性温，味辛微苦，具有祛 风湿、强筋骨、消肿止痛之功效，善治风湿疼痛、跌打损伤(中药大辞典，上海上海科 学技术出版社，2002: 802)。本所(湖北中医学院中药研究所)由地乌中得到地乌提取物， 制成地乌风湿安胶囊，用于治疗类风湿性关节炎(RA)，于2004年9月2日获国家5类中 药新药的临床研究批件，现处于临床实验阶段。
3-0-a-L-吡喃鼠李糖(1— 2)-/ -D-吡喃木糖-齐墩果酸-28-0-a-L-吡喃鼠李糖(1— 4)-/S-D-吡喃葡萄糖(1—6)-0-D-吡喃葡萄糖苷(flaccidosides II )首先是由赵丽等从地乌中分离得到 的(参见WaMtoMeAca, 1991,57, 572)，暂定名地乌皂苷W3。目前该化合物仅在植物林 荫银莲花中发现。本研究表明地乌皂苷W3是地乌提取物中的主要活性成分，可作为标准 品来控制地乌药材、地乌提取物及其制剂的质量标准；另外，拟将其作为风湿安中药制剂 的原料药，应用于风湿类疾病的治疗，己获授权证书的专利有"从林荫银莲花提取的地乌皂 苷W3标准品及制备工艺"(专利号CN 200510018363.9)和"风湿安中药制剂及制备和应 用"(专利号CN 200510018364.3)。地乌皂苷W3的制备方法、化学名称、结构、分子式、 图谱鉴定等在授权专利中已予以说明(参见CN 200510018363.9)。
地乌风湿安胶囊通过实验投入生产后，可预见其临床需求量会不断增加。由于地乌原 植物林荫银莲花生长周期长、分布海拔高，人工栽培困难，通过化学合成其药用活性成分 地乌皇苷W3是解决林荫银莲花植物资源匮乏的重要策略之一。与从植物中分离地乌皂苷 W3相比较，人工合成地乌皂苷W3具有方法简便、成本低廉、耗时短、不受资源限制、适 于工业化生产的优势。
发明内容
本发明的目的是提供一种化学合成地乌皂苷W3的方法。
本发明涉及的起始原料化合物l (2,3-二-0-乙酰基-4，6-0-节叉-(3--D-葡萄糖乙硫苷)， 化合物4(2，3,4-三-0-苯甲酰基-a-L-鼠李吡喃糖三氯乙酰亚胺酯)，化合物6 (2,3,4,6-四-0-乙酰基-(3-I>葡萄糖对甲氧基苯酚氧苷) ，化合物ll (3,4-二-0-乙酰基-1,2-0-原甲酸酯-0;-0-吡喃木糖)，化合物17 (齐墩果酸三苯基甲基酯)均为已知化合物，可参照文献(参见 CaAo/zy^ 1992, 225, 229-246; Car6o/ y^ i es.，2001, 330, 319-324;分wfett.， 2000,
1423-1426;1990, 16, 854-857; v4m. CAew. Soc., 1999, 121, 12196-12197) 由天然产物制得。
本发明所述的合成地乌皂苷W3的方法，以化合物l、 4、 6、 11和17为原料，采用如 下汇聚式路线，包括以下四步反应<formula>formula see original document page 8</formula>~~ 地乌皂苷W3。 上述反应1)包括
将化合物1溶解在溶剂I中，加热回流4 6小时，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得
到化合物2;将化合物2溶于溶剂I1，冰水浴下搅拌；取苯甲酰氯溶于溶剂II，滴入上述
化合物2的溶剂II的溶液中，滴加完后撤去冰水浴，室温下反应3 8小时，减压浓縮， 用柱色谱分离，得到化合物3;
氮气保护下将化合物3和化合物4溶于溶剂m， (TC下搅拌，并加入三氟甲基磺酸三 甲基硅酯，反应10 50分钟后薄层色谱检测表明反应完全，加入三乙胺中和反应体系，减
压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物5;
反应中所述的溶剂I为醋酸、盐酸、硫酸或者它们的混合物；溶剂II为吡啶或者三乙 胺；溶剂in为二氯甲垸、乙腈、甲苯或者它们的混合物。 上述反应2)包括
将化合物6溶于溶剂IV中，室温下搅拌，加入甲醇钠，使pH值在9 ll之间，室温 下反应，薄层色谱检测反应完全后，用酸性树脂IR-120(H+)中和反应液至中性，滤去树脂， 浓缩滤液，减压抽干溶剂后溶于溶剂II，加入叔丁基二甲基氯硅垸，室温搅拌2 5小时， 然后加入醋酸酐，2 5小时后减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物7;将化合物7 溶于溶剂III，并加入三氟化硼乙醚，室温下搅拌30 50分钟，薄层色谱检测反应完全， 稀释、中和、洗涤，收集有机相，干燥、过滤、浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物8;
氮气保护下将化合物5和化合物8溶于溶剂in， (TC下搅拌，加入三氟甲基磺酸三甲 基硅酯和N-碘代丁二酰亚胺，搅拌10 30分钟后，薄层色谱检测表明反应完全，加入三 乙胺中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物9;将化合物9溶于溶剂 III中，室温下搅拌，加入硝酸铈铵，反应20 50分钟，薄层色谱检测表明反应完全，以 乙酸乙酯萃取，水洗、干燥、浓縮，用柱色谱纯化分离，得到固体溶于溶剂ni，加入三氯
乙腈和1,5-二氮杂二环[5.4.0]十一烯-5，室温搅拌1.0 2.5小时然后减压浓縮，用柱色谱纯 化分离，得到化合物10;
反应中所述的溶剂II为吡啶或者三乙胺；溶剂III为二氯甲烷、乙腈、甲苯或者它们 的混合物；溶剂IV为甲醇或者乙醇。
上述反应3)包括
将化合物11溶于溶剂IV中，室温下搅拌，加入甲醇钠的甲醇溶液，使pH值在9到 ll之间，室温反应2 4小时，薄层色谱检测反应完全后，浓縮，柱色谱纯化分离，得到
油状物溶于溶剂II，冰水浴下搅拌，取苯甲酰氯溶于溶剂II，滴入上述溶液中，室温下搅 拌3 6小时，薄层色谱检测表明反应完全，减压浓縮，柱色谱纯化分离，得到化合物12;
将化合物12溶于溶剂I ， 30 4(TC下搅拌3 6小时后减压浓縮，用柱色谱纯化分离， 得到化合物13;将化合物13溶于溶剂III，加入三氯乙腈和1,5-二氮杂二环[5.4.0]H"^—烯-5， 室温下搅拌过夜，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物14;
氮气保护下将化合物14溶于溶剂III，冰水浴搅拌，加入异丙硫醇和三氟甲基磺酸三 甲基硅酯，反应10 30分钟后薄层色谱检测表明反应完全，加入三乙胺中和反应体系，减 压浓縮得含化合物15的浓縮物，将该浓縮物溶于溶剂II中，冰水浴下搅拌，滴入乙酰氯， 室温下反应10 20小时后，室温减压旋蒸5分钟，然后35 65'C浓縮，用柱色谱纯化分 离，得到化合物16;
反应中所述的溶剂I为醋酸、盐酸、硫酸或者它们的混合物；溶剂II为吡啶或者三乙 胺；溶剂III为二氯甲烷、乙腈、甲苯或者它们的混合物；溶剂IV为甲醇或者乙醇。 上述反应4)包括
氮气保护下将化合物16和化合物17溶于溶剂III，室温搅拌下加入N-碘代丁二酰亚 胺，降温至-35'C -45。C，加入三氟甲基磺酸三甲基硅酯，搅袢1.4 2.0小时后，用薄层 色谱检测反应完全后，加入三乙胺中和反应体系，稀释、洗涤、干燥、减压浓縮，用柱色 谱纯化分离，得到化合物18;
氮气保护下将化合物18和化合物4溶于溶剂HI，在-40°C -5(TC下搅拌，加入三氟 甲基磺酸三甲基硅酯，在该条件下搅拌30 60分钟后，用薄层色谱检测反应完全后，加入 三乙胺中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物19;将化合物19溶于 溶剂I， 6(TC 8(TC下搅拌1 1.5小时后减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物20;
氮气保护下将化合物20和化合物10溶于溶剂HI， (TC下搅拌，加入三氟甲基磺酸三 甲基硅酯，搅拌20 50分钟后，加入三乙胺中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离， 得到化合物21;将化合物21溶于甲醇钠的甲醇溶液中，室温下搅拌，室温反应5 10小 时，薄层色谱检测反应完全，以酸性离子交换树脂中和反应体系至中性，滤去树脂，减压 浓缩，用淋洗液为去离子水的Bio-gelP2凝胶色谱柱纯化得到化合物22，即地乌皂苷W3。
反应中所述的溶剂I为醋酸、盐酸、硫酸或者它们的混合物；溶剂m为二氯甲垸、乙
腈、甲苯或者它们的混合物；
上述反应l) 反应4)中检测分离的条件薄层色谱的展开剂为石油醚/乙酸乙酯或 者正丁醇/乙醇/水，其石油醚/乙酸乙酯体积比为1/1 5/1，正丁醇/乙醇/水体积比为4/2/1， 由HF2M硅胶板上30% (体积)的硫酸甲醇溶液或紫外检测器检测；柱色谱采用100-200 目的硅胶，以石油醚/乙酸乙酯或者甲醇/乙酸乙酯为淋洗液；其油醚/乙酸乙酯体积比为 1/1 10/1 ，甲醇/乙酸乙酯体积比为1/1 5/1; ^核磁和13C核磁用Bruker ARX-400在CDC13 中测得；化学位移以Me4Si为内标，以ppm为单位表示；Mass在JEOL JMS-700质谱仪上 检测。
本发明的方法是以己知化合物l、 4、 6、 11和17为原料，通过汇聚式方法有效的完成
了天然产物地乌皂苷W3的全合成，纯度可达96%。
本发明克服的主要难点有反应以2位羟基的木糖硫苷与齐墩果酸偶连选择性得到P 构型的产物，再连接另一个糖到木糖的2位，实现了 1,2连接的二糖选择性的以p构型的方 式与齐墩果酸3位羟基连接；反应在温度摄氏零度以下、氮气保护的条件下得到偶连产物，
实现了糖与羧羟基偶连的可行性，在脱保护基时以合适的碱性和浓度保证了酯基产物的稳 定性。
本发明的有益效果是，此合成方法具有方法简便、成本低廉、耗时短、不受资源限制、 适于工业化生产的优势，有助于对地乌药材、地乌提取物及其制剂的质量标准的控制以及 风湿安中药制剂的进一步研发。此方法的实现有利于解决林荫银莲花植物资源匮乏的问题。
图1是地乌皂苷W3 (化合物22)结构式 图2是地乌皂苷W3合成路线图
具体实施例方式
通过以下具体实施方法将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
实施例1 化合物5的合成
将化合物l (10.0克，25.2毫摩尔)溶解在100毫升乙酸水溶液中，加热回流4 6小 时，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物2 (7.38克，95%);将2溶于42毫升吡 啶中，冰水浴下搅拌，取苯甲酰氯(BzCl， 3.1毫升，26.3毫摩尔)溶于10毫升吡啶中， 滴入上述2的溶液中，撤去冰水浴，室温下反应3 8小时，减压浓縮，用柱色谱分离，得 到化合物3 (8.88克，90%);氮气保护下将化合物3 (610毫克，1.48毫摩尔)和4 (1.10 克，1.77毫摩尔)溶于12毫升二氯甲垸，0'C下搅拌，并加入三氟甲基磺酸三甲基硅酯 (TMSOTf)，反应10 50分钟后薄层色谱检测表明反应完全，加入碱中和反应体系，减 压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物5 (1.19克，92%)。
实施例2化合物10的合成
将化合物6(8.0克，17.6毫摩尔)溶于80毫升甲醇中，室温下搅拌，逐滴加入甲醇 钠(NaOMe)，使pH值在9到ll之间，室温下反应，薄层色谱检测反应完全后，用酸性 树脂中和反应液至中性，滤去树脂，浓縮滤液，减压抽干溶剂后溶于50毫升吡啶，加入叔 丁基二甲基氯硅垸(TBSC1)，室温搅拌2 5小时，然后加入醋酸酐(Ac20)， 2 5小时 后减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到白色固体7 (8.81克，95%);将7溶于80毫升二 氯甲烷，并加入三氟化硼乙醚(BF3'Et20)，室温下搅拌30 50分钟，薄层色谱检测反应 完全，稀释，中和，洗涤，收集有机相，干燥，滤过，浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化 合物8 (6.48克，94%);氮气保护下将化合物5 (1.10克，1.26毫摩尔)和8 (474毫
克，1.15毫摩尔)溶于12毫升二氯甲垸中，0'C下搅拌，并加入TMSOTf和N-碘代丁二酰 亚胺(NIS)，搅拌10 30分钟后，薄层色谱检测反应完全，加入碱中和反应体系，减压 浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物9 (1.20克，86%);将9 (I.IO克，0.90毫摩尔) 溶于20毫升乙腈中，室温下搅拌，加入硝酸铈铵(CAN)，反应20 50分钟，薄层色谱 检测表明反应完全，萃取，水洗，干燥、浓縮，用柱色谱纯化分离，得到固体溶于8毫升 二氯甲垸中，加入三氯乙腈(CCNC13)和DBU，搅拌1.0 2.5小时然后减压浓縮，柱色 谱纯化分离，得到化合物IO (0.91克，80%)。
实施例3化合物22的合成
将化合物ll (10.0克，34.5毫摩尔)溶于80毫升甲醇中，室温下搅拌，逐滴加入甲 醇钠的甲醇溶液，使pH值在9到ll之间，室温反应2 4小时，薄层色谱检测反应完全 后，浓縮，柱色谱纯化分离，得到油状物溶于40毫升吡P定，冰水浴下搅拌，取苯甲酰氯(BzCl) 溶于15毫升吡啶，滴入上述溶液中，室温下搅拌3 6小时，薄层色谱检测表明反应完全， 减压浓縮，柱色谱纯化分离，得到化合物12 (12.8克，90%);将12 (12.0克，30.0毫摩 尔)溶于120毫升醋酸溶液，30 4(TC下搅拌3 6小时后减压浓縮，用柱色谱纯化分离， 得到化合物13 (10.20克，85%);将13 (10.10克，25.2毫摩尔)溶于60毫升二氯甲垸， 加入CCNC13和DBU，室温下搅拌过夜，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物14
(13.0克，95%);氮气保护下将化合物14 (5.0克，9.18毫摩尔)溶于25毫升二氯甲烷， 冰水浴搅拌，加入异丙硫醇[(CH3)2CHSH]和TMSOTf，反应10 30分钟后薄层色谱检测 表明反应完全，加入碱中和反应体系，减压浓縮，浓缩物(含化合物15)溶于50毫升二 氯甲垸/甲醇(1/1)中，冰水浴下搅拌，滴入乙酰氯(AcCl)，室温下反应10 20小时后， 减压旋蒸，浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物16 (3.14， 82%);氮气保护下将化合 物16 (800毫克，1.92毫摩尔)和17 (1.10克，1.57毫摩尔)溶于30毫升二氯甲烷，室 温搅拌下加入N-碘代丁二酰亚胺(NIS)，降温至-35°C -45°C，加入TMSOTf，搅拌1.4 2.0小时后，用薄层色谱检测反应完全后，加入碱中和反应体系，稀释，洗涤，干燥、减 压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物18 (1.14毫克，70%);氮气保护下将化合物18
(800毫克，0.77毫摩尔)和4 (574毫克，0.92毫摩尔)溶于12毫升二氯甲垸，在—40°C -5(TC下搅拌，加入TMSOTf，搅拌30 60分钟后，检测反应完全，加入碱中和反应体系， 减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物19 (865毫克，75%);将19 (800毫克，0.53 毫摩尔)溶于IO毫升醋酸水溶液，60~ 8(TC下搅拌1 1.5小时后减压浓縮，用柱色谱纯 化分离，得到化合物20 (612毫克，92%);氮气保护下将化合物20 (600毫克，0.48毫 摩尔)和10 (730毫克，0.58毫摩尔)溶于12毫升二氯甲烷，O'C下搅拌，加入TMSOTf， 搅拌，加入碱中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物21 (880毫克， 78%);将21 (400毫克，0.17毫摩尔)溶于0.01N甲醇钠的甲醇溶液中，室温下搅拌， 室温反应5 10小时，检测反应完全，以酸性离子换树脂中和反应体系至中性，滤去树脂， 减压浓縮，用淋洗液为去离子水的Bio-gel P2凝胶色谱柱纯化得到化合物22( 196 mg, 96%)。
实施例4本发明合成的地乌皂苷W3 (化合物22)的数据 [a]D25 = -2.64。(c5，MeOH);
'H NMR (400 MHz, C6D5N): 6 0.87 (m, 9 H, 3 C乐)，1.08 (s， 3 H, C私)，1.18 (s， 3 H， C刷， 1.22 (s, 3 H, Cflj)， 1.23 (s, 3 H， C坊)，1.69 (d, 3 H, >/4.8 Hz, C-5-C仏of Rha), 1.70 (d, 3 H, /5.37 Hz， H-l of Rha), 3.20 (m, 1 H, H-3 of oleanolic acid), 4.82 (d， 1 H, J7.3 Hz, H-l of Xyl), 4.98 (d, 1 H, /7.8 Hz, H-l of Glc), 5.85 (br.s, 1 H, H-l of Rha), 6.23 (d,l H, J7.8 Hz, H-l of Glc'), 6.53 (br.s， 1 H, H-l of Rha、)；
3CNMR(400 MHz, C6D5N): S176.4, 144.0， 122.8, 106.0, 104.8, 102.6, 101.8， 95.6, 88.4， 79.5， 78.6, 78.1， 78.0, 77.8, 77.1， 76.4, 75.3， 75.3, 74.0, 73.9, 72.7, 72.5, 72.3, 71.4, 70.7, 69.7， 69.1, 66.9, 61.2, 38.9, 26.8, 39.5, 56.0, 18.5, 18.6， 33.0, 39.8, 48.0， 36.9, 23.7, 42.0, 28.2, 23.3， 46.9, 41.6, 46.1， 30.7， 33.9， 32.4， 27.9, 17.0, 15.6， 17.4， 26.0， 23.6;
MALDITOF-MS: Calcd for C59H96025: 1204.6 [M]+;
Found 1227.6 [M + Na]+
权利要求
1、一种合成地乌皂苷W3的方法，其特征是以式1、4、6、11和17表示的已知化合物为原料，采用如下汇聚式路线，包括以下四步反应1)、
2、 一种如权利要求1所述的地乌皂苷W3的合成方法，其特征是所述反应1)包括将化合物1溶解在溶剂I中，加热回流4 6小时，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物2;将化合物2溶于溶剂I1，冰水浴下搅拌；取苯甲酰氯溶于 溶剂II，滴入上述化合物2的溶剂II的溶液中，滴加完后撤去冰水浴，室温下反应3 8小时，减压浓缩，用柱色谱分离，得到化合物3;氮气保护下将化合物3和化合物4溶于溶剂III， (TC下搅拌，并加入三氟甲 基磺酸三甲基硅酯，反应10 50分钟后薄层色谱检测表明反应完全，加入三乙胺中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物5;上述反应中所述的溶剂I为醋酸、盐酸、硫酸或者它们的混合物；溶剂II为 吡啶或者三乙胺；溶剂III为二氯甲垸、乙腈、甲苯或者它们的混合物。
3、 一种如权利要求1所述的地乌皂苷W3的合成方法，其特征是所述反应2) 包括将化合物6溶于溶剂IV中，室温下搅拌，加入甲醇钠，使pH值在9 ll之 间，室温下反应，薄层色谱检测反应完全后，用酸性树脂IR-120 (H+)中和反应液 至中性，滤去树脂，浓縮滤液，减压抽干溶剂后溶于溶剂II,加入叔丁基二甲基 氯硅烷，室温搅拌2 5小时，然后加入醋酸酐，2 5小时后减压浓縮，用柱色 谱纯化分离，得到化合物7;将化合物7溶于溶剂ni，并加入三氟化硼乙醚，室 温下搅拌30 50分钟，薄层色谱检测反应完全，稀释、中和、洗涤，收集有机相， 干燥、过滤、浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物8;氮气保护下将化合物5和化合物8溶于溶剂III， (TC下搅拌，加入三氟甲基 磺酸三甲基硅酯和N-碘代丁二酰亚胺，搅拌10 30分钟后，薄层色谱检测表明 反应完全，加入三乙胺中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合 物9;将化合物9溶于溶剂III中，室温下搅拌，加入硝酸铈铵，反应20 50分 钟，薄层色谱检测表明反应完全，以乙酸乙酯萃取，水洗、干燥、浓縮，用柱色 谱纯化分离，得到固体溶于溶剂III，加入三氯乙腈和1,5-二氮杂二环[5.4.0]十一 烯-5，室温搅拌1.0 2.5小时然后减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物10;上述反应中所述的溶剂II为吡啶或者三乙胺；溶剂III为二氯甲烷、乙腈、 甲苯或者它们的混合物；溶剂IV为甲醇或者乙醇。
4、 一种如权利要求1所述的地乌皂苷W3的合成方法，其特征是所述反应3) 包括将化合物11溶于溶剂IV中，室温下搅拌，加入甲醇钠的甲醇溶液，使pH 值在9到11之间，室温反应2 4小时，薄层色谱检测反应完全后，浓縮，柱色 谱纯化分离，得到油状物溶于溶剂II，冰水浴下搅拌，取苯甲酰氯溶于溶剂II， 滴入上述溶液中，室温下搅拌3 6小时，薄层色谱检测表明反应完全，减压浓缩， 柱色谱纯化分离，得到化合物12;将化合物12溶于溶剂I， 30 40'C下搅拌3 6小时后减压浓縮，用柱色谱 纯化分离，得到化合物13;将化合物13溶于溶剂III，加入三氯乙腈和1,5-二氮 杂二环[5.4.0]十一烯-5,室温下搅拌过夜，减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到 化合物14;氮气保护下将化合物14溶于溶剂III,冰水浴搅拌，加入异丙硫醇和三氟甲 基磺酸三甲基硅酯，反应10 30分钟后薄层色谱检测表明反应完全，加入三乙胺 中和反应体系，减压浓縮得含化合物15的浓缩物，将该浓縮物溶于溶剂II中， 冰水浴下搅拌，滴入乙酰氯，室温下反应10 20小时后，室温减压旋蒸5分钟， 然后35 65'C浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物16;上述反应中所述的溶剂I为醋酸、盐酸、硫酸或者它们的混合物；溶剂n为吡啶或者三乙胺；溶剂III为二氯甲烷、乙腈、甲苯或者它们的混合物；溶剂IV 为甲醇或者乙醇。
5、 一种如权利要求1所述的地乌皂苷W3的合成方法，其特征是所述反应4) 包括氮气保护下将化合物16和化合物17溶于溶剂III，室温搅拌下加入N-碘代丁 二酰亚胺，降温至-35。C -45。C，加入三氟甲基磺酸三甲基硅酯，搅拌1.4 2.0 小时后，用薄层色谱检测反应完全后，加入三乙胺中和反应体系，稀释、洗涤、 干燥、减压浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物18;氮气保护下将化合物18和化合物4溶于溶剂III，在-4(TC -5(TC下搅拌， 加入三氟甲基磺酸三甲基硅酯，反应体系在该条件下搅拌30 60分钟后，用薄层 色谱检测反应完全后，加入三乙胺中和反应体系，减压浓縮，用柱色谱纯化分离， 得到化合物19;将化合物19溶于溶剂I， 60°C~ 8(TC下搅拌1 1.5小时后减压 浓縮，用柱色谱纯化分离，得到化合物20;氮气保护下将化合物20和化合物10溶于溶剂III， (TC下搅拌，加入三氟甲 基磺酸三甲基硅酯，搅拌20 50分钟后，加入三乙胺中和反应体系，减压浓縮， 用柱色谱纯化分离，得到化合物21;将化合物21溶于甲醇钠的甲醇溶液中，室 温下搅拌，室温反应5 10小时，薄层色谱检测反应完全，以酸性离子交换树脂 中和反应体系至中性，滤去树脂，减压浓縮，用淋洗液为去离子水的Bio-gel P2凝胶色谱柱纯化得到化合物22,即地乌皂苷W3;上述反应中所述的溶剂I为醋酸、盐酸、硫酸或者它们的混合物；溶剂III 为二氯甲垸、乙腈、甲苯或者它们的混合物。
6、 如权利要求2、 3、 4、 5所述的地乌皂苷W3的合成方法，其特征是反应 中检测分离的薄层色谱条件薄层色谱的展开剂为石油醚/乙酸乙酯或者正丁醇/ 乙醇/水，其石油醚/乙酸乙酯体积比为1/1 5/1，正丁醇/乙醇/水体积比为4/2/1， 由HF254硅胶板上30% (体积)的硫酸甲醇溶液或紫外检测器检测。
7、 如权利要求2、 3、 4、 5所述的地乌皂苷W3的合成方法，其特征是反应 中检测分离的柱色谱条件柱色谱采用100-200目的硅胶，以石油醚/乙酸乙酯或 者甲醇/乙酸乙酯为淋洗液，其石油醚/乙酸乙酯体积比为1/1 10/1，甲醇/乙酸乙 酯体积比为1/1 5/1。
全文摘要
本发明涉及一种化学合成地乌皂苷W<sub>3</sub>的方法。地乌皂苷W<sub>3</sub>是中药林荫银莲花药用活性成分。本发明通过汇聚式方法成功得到了地乌皂苷W<sub>3</sub>单体，纯度可达96％，并克服了两个主要难点一是1，2连接的二糖如何选择性的以β构型的方式与齐墩果酸3位羟基连接；二是如何保证糖与羧羟基偶连的可行性以及产物的稳定性。本发明提供的合成方法具有方法简便、成本低廉、耗时短、不受资源限制、适于工业化生产的优势，有助于对地乌药材、地乌提取物及其相关制剂的质量标准的控制以及风湿安中药制剂的进一步研发。
文档编号C07J63/00GK101100482SQ200710052739
公开日2008年1月9日 申请日期2007年7月16日 优先权日2007年7月16日
发明者张国斌, 杜宇国, 程水红, 邴飞虹 申请人:湖北中医学院