专利名称：一种番泻苷的提取方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种番泻苷的提取方法。
背景技术：
番泻叶为豆科植物狭叶番泻或尖叶番泻的小叶，具有泻热行滞，通便，利水作用， 临床用于治疗消化系统疾病，如治疗便秘、肠梗阻。以及外科手术前的灌肠和术后肠功能的 恢复，服用少量可以通便减肥。是世界上使用最广泛的导泻剂，安全性高于西药，许多国家 都在开了了番泻叶制剂。番泻苷是番泻叶，是主要功能性成分，属于蒽醌苷类，主要是番泻苷A、B。番泻苷具有很强的泻下，但口服毒副作用却很小，番泻苷是经过肠菌酶缓慢水解 成苷元，产生缓泻作用。番泻苷浅黄色结晶粉末，不溶于水、乙醚、氯仿，微溶于甲醇、乙醇、丙酮，溶于碱性 水溶液。番泻苷A分子量739 ；番泻苷B分子量862. 739。现有提取番泻苷的方法主要是经典蒽醌类萃取结晶法和柱色谱法。如专利“治疗便秘的番泻总苷提取物”，该专利公开的方法是取番泻叶药材，加入 溶剂，采用加热回流或保温浸泡提取，上大孔吸附树脂柱，用水洗脱杂质，再用低醇去杂，乙 醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，然后浓缩洗脱液、干燥，得棕黄色粉末提取物。萃取法有机溶剂使用量较多，试剂残留不好控制，成本较高，树脂柱法在富集纯化 比萃取法有很大的优势，成本低，由于番泻苷易氧化分解，浓缩方法选择不当，也会导致收 率较低。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种收率高、能耗低的番泻苷的提取方法。为解决上述问题，本发明采取以下技术方案一种番泻苷的提取方法，其特征在于包含以下步骤1)提取把番泻叶粉碎，加6-15倍量碱性水浸泡提取2-3次，调节中性，加沉降剂 沉淀，离心得提取液；2)大孔树脂吸附上述提取液加入大孔树脂吸附，水洗糖反应阴性，40-70%乙醇 溶液洗脱，得洗脱液；3)膜分离上述洗脱液加入超滤膜系统超滤，收集透过液调节PH8-9，再用纳滤膜 浓缩，得浓缩液；4)结晶将浓缩液调节pH3-5沉淀，滤出沉淀物用PH9-10的80_95%乙醇饱和溶解，调节中性放置结晶，无水乙醇洗涤真空干燥即得产品。所述步骤1)中碱水为1-3%的碳酸钠或碳酸氢钠溶液，沉降剂为CTS中药澄清剂， 用量为液体的0. 5-2%。所述步骤2)中的大孔树脂型号可选HZ818、LSA-33和ADS-21中的一种，反向上柱，洗脱剂用量为树脂柱的5-8BV。所述步骤幻中超滤膜可选截留分子量3000-20000的复合管式膜，纳滤膜为截留 分子量400-500的复合管式膜，进口压力0. 5-0. 8mpa。所述步骤中调节pH的酸为硫酸或盐酸溶液，碱为碳酸钠或碳酸氢钠溶液综上所述本发明的优点是1)采用沉降剂沉淀杂质，可以提高树脂吸附量，延长树脂使用寿命。2)超滤膜过滤、纳滤膜浓缩都是在常温下进行，避免了高温浓缩过程中的番泻苷 的损失，也降低能耗。3)本发明所用试剂无毒害，产品品质好。
具体实施例方式实施例1 将番泻叶粉碎，称取500g，放入小锈钢桶中，加3%的碳酸氢钠溶液5L浸泡3个 小时，过滤，滤渣加入4L3%的碳酸氢钠浸泡提取2个小时，过滤，滤渣加入3L3%的碳酸氢 钠浸泡提取1个小时，过滤，合并滤液，滤液中加入10%盐酸调节至中性，再加入0. 12L的 CTS中药澄清剂，静置，以20000r/s的转速离心，离心液反向上柱通过柱高为60cm，柱径4cm 的400g的LSA-33型大孔树脂柱，以水洗至糖反应为阴性，再用2. 4L 50%的乙醇液洗脱， 洗脱液加入截留分子量3000的复合管式膜系统进行超滤，进口压力控制在0. 5-0. 6mpa, 透过液再用3%的碳酸氢钠溶液调节pH9，截留分子量400的纳滤膜进行浓缩，进口压力为 0. 7-0. 8mpa，得浓缩液，将浓缩液用10%的盐酸溶液调节至pH3_5析出沉淀，滤出沉淀物 llg，用PH9的90%乙醇饱和溶解，调节中性放置得结晶物，用无水乙醇洗涤结晶3次，真空 干燥即得产品5. 5g，含量98. 3%。实施例2 将番泻叶粉碎，称取lKg，放入不锈钢桶，加3%的碳酸钠溶液IOL浸泡3小时，过 滤，滤渣加入8L3%的碳酸钠浸泡提取2小时，过滤，滤渣加入6L3%的碳酸钠浸泡提取2小 时，过滤，合并滤液，滤液中加入10%硫酸调节至中性，再加入0. 4L的CTS中药澄清剂，静 置，离心，离心液反向上柱通过柱高为50cm柱径6cm的800g ADS-21型大孔树脂柱，以水洗 至糖反应为阴性，再用5. 6L40%的乙醇液洗脱得洗脱液，洗脱液加入截留分子量10000的 复合管式膜进行超滤，进口压力控制在0. 4-0. 5mpa，透过液用的碳酸钠溶液调节pH8， 截留分子量500的纳滤膜进行浓缩，进口压力为0. 5-0. 7mpa，得浓缩液，将浓缩液用5%的 硫酸溶液调节至PH5析出沉淀，得沉淀物30g，用pH9的80%乙醇饱和溶解，调节中性放置 得结晶物，用无水乙醇洗涤结晶物3次，真空干燥即得产品13g，含量97. 5%。实施例3 将番泻叶粉碎，称取lKg，放入不锈钢桶，加1 %的碳酸钠溶液15L浸泡5小时， 过滤，滤渣加入15L1%的碳酸钠浸泡提取3小时，合并滤液，滤液中加入10%硫酸调节至 中性，再加入0. 3L的CTS中药澄清剂，静置，离心，离心液反向上柱通过柱高为IOOcm柱径 4cm的700gHZ818型大孔树脂柱，以水洗至糖反应为阴性，再用3. 5L70%的乙醇液洗脱得洗 脱液，洗脱液加入截留分子量6000的复合管式膜进行超滤，进口压力控制在0. 6-0. 7mpa, 透过液用1 %的碳酸钠溶液调节PH8，截留分子量500的纳滤膜进行浓缩，进口压力为40. 5-0. 7mpa，得浓缩液，将浓缩液用3%的硫酸溶液调节至pH4析出沉淀，得沉淀物27g，用 PH8的95%乙醇饱和溶解，调节中性放置得结晶物，用无水乙醇洗涤结晶物2次，真空干燥 即得产品llg，含量98%。实施例4 将番泻叶粉碎，称取lKg，放入不锈钢桶中，加的碳酸钠溶液IOL浸泡3小时， 过滤，滤渣加入8L1 %的碳酸钠浸泡提取2小时，过滤，滤渣加入6L1 %的碳酸钠浸泡提取2 小时，过滤，合并滤液，滤液中加入10%硫酸调节至中性，再加入0. 5L的CTS中药澄清剂，静 置，离心，离心液反向上柱通过柱高为IOOcm柱径km的700g LSA-33型大孔树脂柱，以水 洗至糖反应为阴性，再用5. 6L50%的乙醇液洗脱得洗脱液，洗脱液加入截留分子量6000的 复合管式膜进行超滤，进口压力控制在0. 5-0. 6mpa,透过液用1 %的碳酸钠溶液调节pH9， 截留分子量500的纳滤膜进行浓缩，进口压力为0. 5-0. 7mpa，得浓缩液，将浓缩液用10%硫 酸溶液调节至PH3析出沉淀，得沉淀物15g，用pH9的85%乙醇饱和溶解，调节中性放置得 结晶物，用无水乙醇洗涤结晶物3次，真空干燥即得产品10g，含量98. 1%。实施例5 将番泻叶粉碎，称取Ig，放入不锈钢桶，加1 %的碳酸钠溶液20L浸泡3个小时， 过滤，滤渣加入15L1 %的碳酸钠浸泡提取2个小时，过滤，滤渣加入15L1 %的碳酸钠浸泡 提取2个小时，过滤，合并滤液，滤液中加入10%盐酸调节至中性，再加入0. 6L的CTS中药 澄清剂，静置，离心，离心液反向上柱通过柱高为IOOcm柱径6cm的1400gHZ818型大孔树 脂柱，以水洗至糖反应为阴性，再用8L50%的乙醇液洗脱得洗脱液，洗脱液加入截留分子量 10000的复合管式膜进行超滤，进口压力控制在0. 6-0. 7mpa，透过液用的碳酸钠溶液调 节PH8，截留分子量500的纳滤膜进行浓缩，进口压力为0. 5-0. 7mpa，得浓缩液，将浓缩液用 5%的盐酸溶液调节至pH4析出沉淀，得沉淀物32g，用pH9的90%乙醇饱和溶解，调节中性 放置得结晶物，用尤水乙醇洗涤结晶物3次，真空干燥即得产品Mg，含量98%。
权利要求
1.一种番泻苷的提取方法，其特征在于包含以下步骤1)提取把番泻叶粉碎，加6-15倍量碱性水浸泡提取2-3次，调节中性，加沉降剂沉 淀，离心得提取液；2)大孔树脂吸附上述提取液加入大孔树脂吸附，水洗糖反应阴性，40-70%乙醇溶液 洗脱，得洗脱液；3)膜分离上述洗脱液加入超滤膜系统超滤，收集透过液调节PH8-9，再用纳滤膜浓 缩，得浓缩液；4)结晶将浓缩液调节pH3-5沉淀，滤出沉淀物用PH9-10的80-95%乙醇饱和溶解，调 节中性放置结晶，无水乙醇洗涤真空干燥即得产品。
2.如权利要求1所述番泻苷的提取方法，其特征在于所述步骤1)中碱水为1-3%的碳 酸钠或碳酸氢钠溶液，沉降剂为CTS中药澄清剂，用量为液体的0. 5-2%。
3.如权利要求1所述番泻苷的提取方法，其特征在于所述步骤幻中的大孔树脂型号可 选HZ818、LSA-33和ADS-21中的一种，反向上柱，洗脱剂用量为树脂柱的5-8BV。
4.如权利要求1所述番泻苷的提取方法，其特征在于所述步骤幻中超滤膜可选截留 分子量3000-20000的复合管式膜，纳滤膜为截留分子量400-500的复合管式膜，进口压力 0. 5-0. 8mpa。
5.如权利要求1所述番泻苷的提取方法，其特征在于所述步骤中调节PH的酸为硫酸或 盐酸溶液，碱为碳酸钠或碳酸氢钠溶液。
全文摘要
本发明涉及了一种番泻苷的提取方法，工艺方法是把番泻叶粉碎，加8-15倍量碱性水浸泡提取2-3次，调节中性，加沉降剂沉淀，离心，提取液加入大孔树脂吸附，40-70％乙醇溶液洗脱，洗脱液加入超滤膜系统超滤，收集透过液调节pH8-9，再用纳滤膜浓缩，浓缩液调节pH3-5沉淀，滤出沉淀物用pH9-10的80-95％乙醇饱和溶解，调节中性放置结晶，无水乙醇洗涤真空干燥即得产品。采用本发明生产，工艺操作简单，能耗低，产品收率高、品质高。本发明适合工业化生产。
文档编号C07H1/08GK102040637SQ20101029314
公开日2011年5月4日 申请日期2010年9月27日 优先权日2010年9月27日
发明者刘东锋, 吴艳波, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司