专利名称：刺叶素的提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种刺叶素的提取エ艺，属于天然植物领域。
背景技术：
刺叶素(Stizophyllin)，无定形固体，mpl94 197°C, [a ]25/D+60. 5。(c=0. 54，氯仿)。分子式=C21H28O4,分子量344. 45,来源于紫葳科(Bignoniaceae)溪岸刺叶StizophyI Ium riparium (H. B. K.) Sandw.全植物。分子结构式如下
OH药理研究表明，刺叶素具有细胞毒活性，对培养的P388有细胞毒性，其ED5tl为O. 07微克/毫升。经检索尚未发现有采用硅胶柱分离纯化刺叶素的方法。
发明内容
本发明的目的就是针对上述背景技术的状况而提供一种エ艺简单且能够大批量制备、可行的刺叶素的提取エ艺。本发明方法采用的技术方案如下
(1)取溪岸刺叶全植物，粉碎，用低碳醇提取1-4小吋，醇用量为药材的4-12倍，提取液减压回收醇，得醇流浸膏；
(2)将醇流浸膏加水分散，以大孔树脂吸附，先用水洗至洗脱液无颜色，再用含醇液洗脱至洗脱液无色，最后采用丙酮液洗脱，收集丙酮洗脱液；
(3)将丙酮洗脱液经脱色柱色谱，4^6BV高醇液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩；
(4)将浓缩液上样至硅胶层析柱分离，用石油醚-ニ氯甲烷(6:1-1:1)、ニ氯甲烷-丙酮(6:1-1:1)的体积比的混合洗脱剂进行洗脱，薄层监测，收集洗脱液，回收试剂，得刺叶素
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)PR ο步骤(I)所述低碳醇为体积百分比80-100%的こ醇或甲醇，提取方法为冷浸、渗漉或回流提取。步骤(2)所述大孔树脂为DlOl树脂，含醇洗脱液为1(Γ30%こ醇溶液，丙酮体积百分比为80-95%，用量是6 10BV。步骤(3)所述脱色柱为D941树脂柱，高醇为90 100%こ醇溶液。步骤(4)所述硅胶柱层析条件为硅胶200-300目，柱径高比为1:13_1:20，柱径为20_80mm。
本发明不仅エ艺简单、可大規模生产，而且提取制备得到的刺叶素质量好，纯度相对高，成本低。
具体实施例方式以下通过具体实施例来进ー步阐述本发明。实施例I :
取溪岸刺叶全植物1kg，粉碎，用4L80%的甲醇回流提取4小时，提取液减压回收醇，得醇流浸膏，加水分散，以DlOl大孔树脂吸附， 先用水洗至洗脱液无颜色，再用10%こ醇溶液洗脱至洗脱液无色，最后采用80%丙酮液洗脱，收集丙酮洗脱液上D941树脂柱脱色，4BV90%こ醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液上样至填料为200目硅胶的层析柱，柱径高比为1:13，柱径为80mm，依次用石油醚-ニ氯甲烷(6:1)、ニ氯甲烷-丙酮(I: I)洗脱，薄层监测，收集洗脱液，浓缩干燥，得刺叶素产品I. 23g。实施例2:
取溪岸刺叶全植物1kg，粉碎，用12Lこ醇冷浸提取I小时，提取液减压回收醇，得醇流浸膏，加水分散，以DlOl大孔树脂吸附，先用水洗至洗脱液无颜色，再用30%こ醇溶液洗脱至洗脱液无色，最后采用95%丙酮液洗脱，收集丙酮洗脱液上D941树脂柱脱色，6BVこ醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液上样至填料为300目硅胶的层析柱，柱径高比为1:20，柱径为20_，依次用石油醚-ニ氯甲烷(I: I)、ニ氯甲烷-丙酮(6:1)洗脱，薄层监测，收集洗脱液，浓缩干燥，得刺叶素产品l.Olg。实施例3
取溪岸刺叶全植物1kg，粉碎，10L90%的こ醇渗漉提取3小时，提取液减压回收醇，得醇流浸膏，加水分散，以DlOl大孔树脂吸附，先用水洗至洗脱液无颜色，再用20%こ醇溶液洗脱至洗脱液无色，最后采用85%丙酮液洗脱，收集丙酮洗脱液上D941树脂柱脱色，5BV95%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液上样至填料为200目硅胶的层析柱，柱径高比为1:15，柱径为60mm，依次用石油醚-ニ氯甲烷(4:1)、ニ氯甲烷-丙酮(3:1)洗脱，薄层监测，收集洗脱液，浓缩干燥，得刺叶素产品I. 33g。实施例4:
取溪岸刺叶全植物10kg，粉碎，用80L85%的こ醇回流提取2小时，合并醇提液，滤过，减压回收醇，得醇流浸膏，加水分散，以DlOl大孔树脂吸附，先用水洗至洗脱液无颜色，再用25%こ醇溶液洗脱至洗脱液无色，最后采用90%丙酮液洗脱，收集丙酮洗脱液上D941树脂柱脱色，5BV95%こ醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液上样至填料为300目硅胶的层析柱，柱径高比为1:16，柱径为80mm，依次用石油醚-ニ氯甲烷(3:1)、ニ氯甲烷-丙酮(2:1)洗脱，薄层监测，收集洗脱液，浓缩干燥，得刺叶素产品9. 72g。
权利要求
1.刺叶素的提取工艺，其特征在于包括以下步骤 (1)取溪岸刺叶全植物，粉碎，用低碳醇提取1-4小时，醇用量为药材的4-12倍，提取液减压回收醇，得醇流浸膏； (2)将醇流浸膏加水分散，以大孔树脂吸附，先用水洗至洗脱液无颜色，再用含醇液洗脱至洗脱液无色，最后采用丙酮液洗脱，收集丙酮洗脱液； (3)将丙酮洗脱液经脱色柱色谱，4飞BV高醇液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩； (4)将浓缩液上样至硅胶层析柱分离，用石油醚-二氯甲烷(6:1-1:1)、二氯甲烷-丙酮(6:1-1:1)的体积比的混合洗脱剂进行洗脱，薄层监测，收集洗脱液，回收试剂，得刺叶素女口广叩o
2.根据权利要求I所述的提取工艺，其特征是步骤(I)所述低碳醇为体积百分比80-100%的乙醇或甲醇，提取方法为冷浸、渗漉或回流提取。
3.根据权利要求I所述的提取工艺，其特征是步骤(2)所述大孔树脂为DlOl树脂，含醇洗脱液为10 30%乙醇溶液，丙酮体积百分比为80-95%，用量是6 10BV。
4.根据权利要求I所述的提取工艺，其特征是步骤(3)所述脱色柱为D941树脂柱，高醇为9(Tl00%乙醇溶液。
5.根据权利要求I所述的提取工艺，其特征是步骤(4)所述硅胶柱层析条件为硅胶200-300目，柱径高比为1:13-1:20，柱径为20-80臟。
全文摘要
本发明提供一种刺叶素的提取工艺，采用大孔树脂富集，脱色柱脱色，高压硅胶柱层析分离纯化后得到刺叶素产品，该工艺方法简易，所得化合物含量相对较高，有利于对其进行进一步的药理研究。本发明适用于中小规模化生产。
文档编号C07J13/00GK102659892SQ20121011552
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月19日 优先权日2012年4月19日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司