一种天名精内酯酮的提纯方法
【专利摘要】本发明公开了一种天名精内酯酮的提纯方法，其包含下列步骤：步骤1）：无机强碱的水溶液中，0~100℃条件下，将北鹤虱在进行浸泡或者超声提取；然后过滤，滤液用无机强酸调节pH至1~7，产生沉淀；步骤2）：将步骤1）产生的沉淀除去后，将上清液用有机溶剂进行萃取，得萃取液；步骤3）：将步骤2）得到的萃取液进行硅胶柱层析，即可得天名精内酯酮。本发明的提纯方法操作简单，得到的天名精内酯酮纯度较高。
【专利说明】—种天名精内酯酮的提纯方法
【技术领域】
[0001]本发明具体的涉及一种天名精内酯酮的提纯方法。
【背景技术】
[0002]北鹤虱是菊科植物天名精的干燥成熟果实，具有杀虫消积的作用，常用于治疗蛔虫、蛲虫、绦虫病、虫积腹痛和小儿疳积等。该领域对于北鹤虱化学成分的研究比较少，目前的研究表明，北鹤虱含有特勒内酯(刘翠周，许婧，桂丽萍等.北鹤虱的化学成分研究[J].药物评价研究，2010，33(6):220-221)、天名精内酯酮、天名精内酯醇及各种脂肪酸。研究表明，天名精内酯酮属于倍半萜类化合物，具有杀菌和抑菌作用，为了实现其较好的抑菌效果，需要将其从北鹤虱中分离纯化。由于北鹤虱中含有很多相似的天名精内酯化合物，相互间极性差异很小，使得单体化合物的分离比较困难，如申请号为201010113236，名称为《一种天名精总内酯提取物》的中国发明专利，提供了从天名精中提取一种天名精总内酯化合物的方法。该发明得到的是天名精总内酯混合物，其中的天名精内酯酮、天名精内酯醇纯度不高，不能满足现实科研、生产的需求。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是为了克服现有的提纯天名精内酯酮的方法中，天名精内酯酮纯度不高的缺陷，而提供了一种天名精内酯酮提纯方法。本发明的提纯方法操作简单，得到的天名精内酯酮纯度较高。
[0004]本发明提供了一 种天名精内酯酮的提纯方法，其包含下列步骤:
[0005]步骤I):无机强碱的水溶液中，O~100°C条件下，将北鹤虱在进行浸泡或者超声提取；然后过滤，滤液用无机强酸调节PH至f 7，产生沉淀；
[0006]步骤2):将步骤I)产生的沉淀除去后，将上清液用有机溶剂进行萃取，得萃取液；
[0007]步骤3):将步骤2)得到的萃取液进行硅胶柱层析，即可得天名精内酯酮。
[0008]步骤I)中，所述的进行浸泡或者超声提取的温度较佳的为3(T70°C。所述的浸泡的时间较佳的为ltT24h。所述的超声提取的时间较佳的为5~60分钟，更佳的为10-15分钟。所述的超声提取的次数较佳的为广3次。超声提取的压力较佳的为0.f 10.0MPa。步骤I)中，采用超声处理，可缩短提取时间，提高提取效率。
[0009]步骤I)中，所述的pH较佳的为广3。所述的北鹤虱与无机强碱的水溶液的质量比较佳的为1:1~1:30，更佳的为1: l(Tl: 15。所述的无机强碱较佳的为NaOH和/或Κ0Η。所述的无机强碱的水溶液中无机强碱的质量浓度较佳的为0.1%~20%，优选0.1%~10%，进一步优选0.59Tl%。所述的无机强酸较佳的为盐酸、硫酸和硝酸中的一种或多种，更佳的为盐酸，盐酸较佳的以盐酸水溶液的形式存在(优选盐酸质量浓度为0.1%~?%的盐酸水溶液)。用无机强酸调节PH时，所调节的溶液的温度较佳的为室温，即(T40°C。本发明中，步骤I)采用碱-酸处理杂质，使得除杂方法简单、经济。
[0010]步骤2)中，除去沉淀的方法可为离心，或者通过静置和过滤。所述的将上清液用有机溶剂进行萃取中的有机溶剂可为常用的萃取用的，与水不互溶的有机溶剂，优选乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯化碳和四氯化碳中的一种或多种。
[0011]步骤3)中，所述的硅胶柱层析的方法和条件均可为本领域此类分离方法的常规方法和条件，本领域技术人员根据目标产物的极性(本发明中可以将现有的天名精内酯酮作为标准品，通过对照检测分离出的物质)，结合TLC检测等方法，可以选择出将本发明的目标产物天名精内酯酮提纯的条件。本发明特别优选下述方法和条件:所用的洗脱剂较佳的为乙醚-丙酮，或者二氯甲烷-甲醇；其中，洗脱条件为等梯度洗脱，所述的乙醚-丙酮中，乙醚和丙酮的体积比较佳的为10:0-0:10(优选4:1-6:1)。所述的二氯甲烷-甲醇中，二氯甲烷和甲醇的体积比较佳的为100:0-0:100 (优选95:5)。所用的硅胶柱层析中的硅胶，可以是大孔硅胶、粗孔硅胶、B型硅胶或细孔硅胶。较佳的，洗脱过程中，将洗脱液点薄层硅胶板(TLC)，展开剂可为乙醚-丙酮(2:1-4:1)，显色剂可为5%硫酸溶液，可在105°C加热5min显色，第一个圆点出现开始收集，合并第一个圆点的洗脱液，浓缩、挥去有机溶剂，即可得天名精内酯酮。
[0012]本发明中，较佳的，在步骤3)之后还可以包含下列步骤4):
[0013]步骤4):将步骤3)制得的天名精内酯酮溶于低极性溶剂与高极性溶剂的混合溶液中，浓缩至无色晶体析出，即可得到更高纯度的天名精内酯酮，其中低极性溶剂为乙醚、己烷、环己烷、二氯甲烷或戊烷，高极性溶剂为丙酮、乙酸乙酯、氯仿、甲醇或乙醇。
[0014]步骤4)中，较佳的，低极性溶剂与高极性溶剂的混合溶液为乙醚-丙酮混合溶液、环己烷-丙酮混合溶液，或者环己烷-乙酸乙酯混合溶液。所述的乙醚-丙酮混合溶液中，乙醚与丙酮的体积比较佳的为4: f 10:1 (更佳的为8:1)。所述的环己烷-丙酮混合溶液中，环己烷与丙酮的体积比较佳的为4: f 10:1 (更佳的为8:1)。所述的环己烷-乙酸乙酯混合溶液中，环己烷与乙酸乙酯的体积比较佳的为4: f 10:1 (更佳的为8:1)。
[0015]在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明。
[0016]本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0017]本发明的积极进步效果在于:本发明的提纯方法操作简单，得到的天名精内酯酮纯度较高。
【专利附图】
【附图说明】
[0018]图1为本发明的天名精内酯酮的提纯方法的较佳实例的流程示意图。
[0019]图2为实施例1制得的最终产物天名精内酯酮的1HNMR谱图。
【具体实施方式】
[0020]下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0021]实施例1
[0022]天名精内酯酮的制备工艺，即以北鹤虱为原料，0.5%Na0H溶液为萃取剂，提取分离天名精内酯酮的工艺，具体步骤如下:
[0023](1)取Ikg北鹤虱，用5L 0.5% (w/w)NaOH溶液，30°C超声处理30min，用200目的滤布将北鹤虱分离出来，再用4L 0.5% (w/w)NaOH溶液在30°C超声处理30min，用200目的滤布将北鹤虱分离出来；再用3L 0.5% (w/w) NaOH溶液在30°C超声处理30min，用200目滤布将北鹤虱分离出来；合并三次所提取的提取液。
[0024](2)向提取液中加入1% (w/w)盐酸溶液在室温(25°C)条件下进行中和，调pH至3左右，产生沉淀，静置。
[0025](3)将产生的沉底和上清液分离，沉淀沉重复(I)、(2)步；上清液加入IL乙酸乙酯进行萃取，萃取三次，合并三次的萃取液，浓缩。
[0026](4)将浓缩后的乙酸乙酯提取物上硅胶柱，用乙醚-丙酮混合液进行等梯度洗脱，其中，乙醚-丙酮体积比为4:1。在洗脱过程中，采用分段洗脱，用硅胶薄层板以乙醚-丙酮展开剂展开、进行定性测定，将含有相同化合物点得洗脱液进行合并。其中，将仅含第一个点得洗脱液浓缩、回收洗脱剂，获得天名精内酯酮3.75g，纯度90%以上。
[0027](5)将获得的天名精内酯酮溶于乙醚-丙酮(V/V，体积比8:1)，浓缩至出现白色浑浊，有无色结晶析出，干燥，获得3.65g纯度99.5%以上的天名精内酯酮。
[0028]产物天名精内酯酮的核磁谱图如图1,具体数据如下: [0029]1HNMR (CDCl3) δ H:6.23(lH，d，J=2.8Hz，H_13)，5.56(lH，d，J=2.4Hz，H_13’) ,4.79(1H, ddd, J=6, g, 11，11.4Hz, H_8)，3.15 (1H, ddddd, J=7，9，13Hz, H_7)，2.16 (3H, s’ H-15)，1.08 (3H, s’ H-l.4)，0.45 (1H, m, H_5)，0.37 (1H, m, H_l)。
[0030]实施例2
[0031](I)取5kg北鹤虱，用20L 1% (w/w) NaOH溶液，30°C超声处理30min，用200目的滤布将北鹤虱分离出来，再用15L 1% (?/?)似0!1溶液在301:超声处理301^11，用200目的滤布将北鹤虱分离出来；再用IOL 1% (w/w)NaOH溶液在30°C超声处理30min，用200目滤布将北鹤虱分离出来；合并三次所提取的提取液。
[0032](2)向提取液中加入3% (w/w)盐酸溶液在室温(25°C)条件下进行中和，调pH至2左右，产生沉淀，静置。
[0033](3)将产生的沉底和上清液分离，沉淀沉重复⑴，(2)步骤；上清液加入2.5L乙酸乙酯进行萃取，萃取三次，合并三次的萃取液，浓缩。
[0034](4)将浓缩后的乙酸乙酯提取物上硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇混合液进行等梯度洗脱，其中，二氯甲烷-甲醇体积比为95:5。在洗脱过程中，采用分段洗脱，用硅胶薄层板以乙醚-丙酮为展开剂展开、定性测定，将含有相同化合物的洗脱液合并。将仅含第一个化合物的洗脱液浓缩、回收洗脱剂，获得天名精内酯酮16.35g，纯度90%以上。
[0035](5)将获得的天名精内酯酮溶于环己烷-丙酮(V/V，体积比8:1)，浓缩至出现白色浑浊，静置，有结晶析出，干燥，获得15.95g纯度达99.5%以上的天名精内酯酮。
[0036]产物天名精内酯酮的核磁数据如下:
[0037]1HNMR (CDCl3) δ H:6.23(lH，d，J=2.8Hz，H_13)，5.56(lH，d，J=2.4Hz，H_13’) ,4.79(1H, ddd, J=6, g, 11，11.4Hz, H_8)，3.15 (1H, ddddd, J=7，9，13Hz, H_7)，2.16 (3H, s’ H-15)，1.08 (3H, s’ H-l.4)，0.45 (1H, m, H_5)，0.37 (1H, m, H-l)。
[0038]实施例3
[0039](I)取IOkg北鹤虱，用25L 2% (w/w)NaOH溶液，30°C超声处理30min，用200目的滤布将北鹤虱分离出来，再用20L 2% (?/?)似0!1溶液在301:超声处理301^11，用200目的滤布将北鹤虱分离出来；再用15L 2% (w/w)NaOH溶液在30°C超声处理30min，用200目滤布将北鹤虱分离出来；合并三次所提取的提取液。
[0040](2)向北鹤虱提取物滤液中加入6% (w/w)盐酸溶液在室温(25°C)条件下进行中和，调pH至I左右，产生沉淀，静置。
[0041](3)将产生的沉底和上清液分离，沉淀重复(I) (2)步；上清液加入4L乙酸乙酯进行萃取，萃取三次，合并三次的萃取液，浓缩。
[0042](4)将浓缩后的乙酸乙酯提取物上硅胶柱，用乙醚-丙酮混合液进行等梯度洗脱，其中，乙醚-丙酮体积比为4:1。在洗脱过程中，采用分段洗脱，用硅胶薄层板以乙醚-丙酮为展开剂展开、定性测定，将含有相同化合物的洗脱液合并。其中，将仅含第一个化合物的洗脱液浓缩、回收洗脱剂，获得天名精内酯酮29.6g，纯度90%以上。
[0043](5)将获得的天名精内酯酮溶于环己烷与乙酸乙酯(V/V，体积比4:1)，浓缩至出现白色浑浊，静置，有结晶析出，干燥所得结晶，获得28.56g纯度达99.5%以上的天名精内酯酮。
[0044]产物天名精内酯酮的核磁数据如下:
[0045]1HNMR (CDCl3) δ H:6.23(lH，d，J=2.8Hz，H_13)，5.56(lH，d，J=2.4Hz，H_13’) ,4.79(1H, ddd, J=6, g, 11，11.4Hz, H_8)，3.15 (1H, ddddd, J=7，9，13Hz, H_7)，2.16 (3H, s’ H-15)，
1.08 (3H, s’ H-l.4)，0.45 (1H`, m, H_5)，0.37 (1H, m, H-l)。
【权利要求】
1.一种天名精内酯酮的提纯方法，其特征在于包含下列步骤: 步骤I):无机强碱的水溶液中，(Tioo°c条件下，将北鹤虱在进行浸泡或者超声提取；然后过滤，滤液用无机强酸调节PH至f 7，产生沉淀； 步骤2):将步骤I)产生的沉淀除去后，将上清液用有机溶剂进行萃取，得萃取液； 步骤3):将步骤2)得到的萃取液进行硅胶柱层析，即可得天名精内酯酮。
2.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:步骤I)中，所述的进行浸泡或者超声提取的温度为30-70°C;所述的浸泡的时间为ltT24h ;所述的超声提取的时间为5-6O分钟；所述的超声提取的次数为1-3次。
3.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:步骤I)中，所述的pH为1-3。
4.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:步骤I)中，所述的北鹤虱与无机强碱的水溶液的质量比为1:1-1:30 ;所述的无机强碱为NaOH和/或KOH ;所述的无机强碱的水溶液中无机强碱的质量浓度为0.1%~20% ;所述的无机强酸为盐酸、硫酸和硝酸中的一种或多种。
5.如权利要求4所述的提纯方法，其特征在于:步骤I)中，所述的无机强碱的水溶液中无机强碱的质量浓度为0.1%~10%。
6.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:步骤I)中，用无机强酸调节PH时，所调节的溶液的温度为0-40°C。
7.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:步骤2)中，所述的将上清液用有机溶剂进行萃取中的有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯化碳和四氯化碳中的一种或多种。
8.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:步骤3)中，所述的硅胶柱层析中，所用的洗脱剂为乙醚-丙酮，或者二氯甲烷-甲醇；其中，洗脱条件为等梯度洗脱，所述的乙醚-丙酮中，乙醚和丙酮的体积比为10:0-0:10 ;所述的二氯甲烷-甲醇中，二氯甲烷和甲醇的体积比为100:0^0:1OOo
9.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于:在步骤3)之后还包含下列步骤4): 步骤4):将步骤3)制得的天名精内酯酮溶于低极性溶剂与高极性溶剂的混合溶液中，浓缩至无色晶体析出，即可；其中低极性溶剂为乙醚、己烷、环己烷、二氯甲烷或戊烷，高极性溶剂为丙酮、乙酸乙酯、氯仿、甲醇或乙醇。
10.如权利要求9所述的提纯方法，其特征在于:步骤4)中，低极性溶剂与高极性溶剂的混合溶液为乙醚-丙酮混合溶液、环己烷-丙酮混合溶液，或者环己烷-乙酸乙酯混合溶液，所述的乙醚-丙酮混合溶液中，乙醚与丙酮的体积比为4: f 10:1 ;所述的环己烷-丙酮混合溶液中，环己烷与丙酮的体积比为4: f 10:1 ;所述的环己烷-乙酸乙酯混合溶液中，环己烷与乙酸乙酯的体积比为4: f 10:1。
【文档编号】C07D307/93GK103788037SQ201210434466
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2012年11月2日 优先权日:2012年11月2日
【发明者】段金友, 崔国庭, 张阿敏, 张武霞, 母海钵, 张琳, 牛红, 王清洁, 董冬旗 申请人:西北农林科技大学