专利名称：一种快速高效提取芍药苷和芍药内酯苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种快速高效提取芍药苷和芍药内酯苷的方法。背景技术：
芍药的有效成分为芍药总苷，包括芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷的三十多种单萜苷类。随着对中药的研究深入，也越来越注重中药中有效成分、有效部位的提取分离纯化。其中，芍药苷作为芍药中的主要成分之一，其在药材中含量高，纯品较易获得，一直以来作为芍药及相关制品的质量控制指标，其研究报道相对较多。
近年来，研究表明，芍药内酯苷作为芍药中的另一种有效成分，具有镇痛、镇静、抗惊厥、抗炎、抗病原微生物等多种药理作用，在临床上被用于抗癫痫、镇痛、治疗类风湿性关节炎等，因而，对芍药内酯苷的研究日益增多，其高纯度单体的制备需求日益增大。
目前，对芍药内酯苷和芍药苷的制备已有很多报道，例如申请号为 201110410067. 9的发明申请专利公开了 “一种芍药苷和白芍苷的制备方法”以牡丹科植物为原料提取后，以大孔树脂对粗提液进行吸附，以3(Γ75%乙醇水洗脱液浓缩干燥后得精制提取物，再以加压色谱柱对其进行分离纯化，可获得纯度大于90%的芍药苷和白芍苷成品。申请号为201010249421. X的发明专利公开了“一种同时制备芍药内酯苷和芍药苷的方法”，即以芍药药材或提取物为原料，采用柱层析方法进行芍药苷和芍药内酯苷的纯化，优选后的方法制备芍药苷和芍药内酯苷的纯度可达91% 97%。申请号为200910100680. 3的发明专利申请公开了 “一种模拟移动床色谱法分离制备芍药内酯苷的方法”，即采用白芍总苷提取物为原料，应用模拟移动床色谱法分离制备芍药内酯苷，模拟移动床的固定相采用C18硅胶，流动相采用甲醇或乙腈与水、甲酸、异丙醇的混合溶液，最终可制备纯度达90% 以上的芍药内酯苷，再如申请号为02133298. 3的发明专利公开了一种“芍药苷和芍药内酯苷的组合物及其制备方法”以芍药为原料，通过吸附树脂精制、氧化铝柱层析和硅胶柱层析值得芍药苷和芍药内酯苷的组合物，其中芍药苷和芍药内酯苷在该组合物中的比例为 7:3 9:1。
通过长期研究，对白 芍总苷的提取纯化工艺已较为成熟，但对芍药苷和芍药内酯苷单体的制备报道较少。文献中有以反相硅胶模拟移动床色谱、硅胶柱层析及加压柱层析对二者进行分离制备，但均存在制备工艺流程复杂，柱效低、制备周期长、检测操作复杂等各种弊端，均难以实现工业化生产。
迄今为止，尚未有一种适合工业化大生产同时快速高效制备高纯度芍药苷和芍药内酯苷的工艺路线报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种纯度大于89%、易于实现产业化的芍药苷和芍药内酯苷的提取工艺。
本发明采用的技术方案是
一种快速高效提取芍药苷和芍药内酯苷的方法，所述方法如下
(I)选取含芍药苷和芍药内酯苷的植物原料，以2(Γ70% (ν/ν)乙醇溶液提取广3 次，提取液合并，浓缩，干燥，得粗提物；
(2)步骤(I)粗提物上大孔吸附树脂，上样结束后先以清水清洗除杂，再以 109Γ40% (ν/ν)乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，得大孔树脂富集物；所述大孔吸附树脂为常规非极性或弱极性大孔吸附树脂；
(3)步骤(2)大孔树脂富集物采用高速逆流色谱，以正丁醇-乙酸乙酯-水为溶剂体系进行分离，分别收集含有芍药苷或芍药内酯苷的流份，浓缩，干燥，分别得到芍药苷成品和芍药内酯苷成品，所得成品中芍药苷或芍药内酯苷纯度为89°/Γ98%);所述溶剂体系中正丁醇乙酸乙酯水的体积比为广4 Γ4 :5。
所述植物原料为白芍、赤芍或牡丹的根，以粉末形式进行提取为好。
步骤(I)所述提取为回流提取、超声提取、索氏提取或微波辅助提取，优选为超声提取。
所述大孔吸附树脂优选为下列之一 D101、AB-8、DM130、HPD-450、HPD-620、 HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2，更优选为 DlOl 或 AB-8。
步骤(3)所述溶剂体系中正丁醇乙酸乙酯水的体积比优选为4 :1 :5或2 :3 :5。
本发明方法可同时制备芍药苷和芍药内酯苷，制备工艺简单，为工业生产放大提供参考依据。
本发明的有益效果主要体现咋
1.应用本发明方法，可以在同一工艺流程中，制备得到芍药苷和芍药内酯苷，充分利用药材资源；
2.应用本发明方法，可以在同一工艺流程中获得芍药苷和芍药内酯苷的富集物， 有效地简化了后续纯化工艺负担；
3.应用本发明方法，创新性地以高速逆流色谱分离芍药苷和芍药内酯苷的富集物，实现了单体纯化工艺的自动化和可操作性，可一次性获得纯度大于89%的单体成品；
4.本发明制备工艺方法简单，精制效率高，耗能低，环保，操作工艺条件易于控制。
图1为实施例4的高速逆流色谱图；峰I为芍药内酯苷，峰2为芍药苷；
图2为实施例4的芍药苷纯度图3为实施例4的芍药内酯苷 纯度图4为实施例9方法I的高速逆流色谱图；峰I为芍药内酯苷，峰2为芍药苷。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此
实施例1 :大孔树脂静态吸附性能考察
称取200g白芍药材(根部)粉末，用2L 50%乙醇循环超声提取2次，每次O. 5h， 所用仪器为“弘祥隆”CTXNW-2B超声循环提取机，超声频率59kHz，横波间隙3秒，搅拌速度950rpm。提取液滤过,合并滤液,减压浓缩至无醇味，冻干，备用。
称取各型号分别精密称取已处理好(将实验的9种大孔吸附树脂分别置于三角瓶中，以无水乙醇浸泡3次，每次24h，除去浸液上层漂浮的杂质后，用蒸馏水冲洗至无醇味， 湿态保存备用。)的8种型号大孔吸附树脂各lg，置100ml锥形瓶中。精密称取粗提物粉末各0. 3g，分别用30ml去离子水溶解，加入锥形瓶中，放入恒温摇床振摇24h，温度20°C，转速 200rpm。将吸附后的白芍提取液真空抽滤，滤液适当稀释，用HPLC法测定芍药苷和芍药内酯苷的含量，并计算各型号大孔吸附树脂的比吸附量。吸附好的树脂用水洗3次，真空干燥后,加入10 ml 95%乙醇,放入恒温摇床振摇24h,温度20°C,转速200rpm,进行解吸附。解吸液经适当稀释后用HPLC法测定芍药苷和芍药内酯苷的含量，并计算各型号大孔吸附树脂的解吸率。公式为
权利要求
1.一种快速高效提取芍药苷和芍药内酯苷的方法，所述方法如下(1)选取含芍药苷和芍药内酯苷的植物原料，以2(Γ70%乙醇溶液提取f3次，提取液合并，浓缩，干燥，得粗提物；(2)步骤(I)粗提物上大孔吸附树脂，上样结束后先以清水清洗除杂，再以109Γ40%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，得大孔树脂富集物；所述大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂；(3)步骤(2)大孔树脂富集物采用高速逆流色谱，以正丁醇-乙酸乙酯-水为溶剂体系进行分离，分别收集含有芍药苷或芍药内酯苷的流份，浓缩，干燥，即得芍药苷和芍药内酯苷成品；所述溶剂体系中正丁醇乙酸乙酯水的体积比为广4 Γ4 :5。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述植物原料为白芍、赤芍或牡丹的根。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(I)所述提取为回流提取、超声提取、索氏提取或微波辅助提取。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂为下列之一D101、AB-8、 DMl30、HPD-450、HPD-620、HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂为DlOl或AB-8。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(3)所述溶剂体系中正丁醇乙酸乙酯 水的体积比为4 :1 :5或2 :3 :5。
全文摘要
本发明提供了一种芍药苷和芍药内酯苷的高效同时制备方法，其特征在于该方法为以含有芍药苷和芍药内酯苷的药材为原料，采用醇水混合溶剂进行提取，提取液浓缩；所得提取液用大孔树脂柱富集，以乙醇水混合溶剂进行洗脱，收集乙醇水洗脱液，浓缩；大孔树脂富集液采用高速逆流色谱进行分离纯化，分别收集含有芍药苷或芍药内酯苷的流分，浓缩，干燥，即可获得纯度89%-98%的芍药苷和芍药内酯苷。本发明工艺简单、纯化效率高、制备周期短，可在同一工艺流程中低成本、低能耗得到高纯度的芍药苷和芍药内酯苷，所用溶剂毒性低、环保，制备效率高。
文档编号C07H1/08GK103044503SQ20121056994
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月24日 优先权日2012年12月24日
发明者颜继忠, 楚楚, 李行诺, 童胜强, 陈岑 申请人:浙江工业大学