一种菌陈中绿原酸的提取方法
【专利摘要】本发明涉及一种菌陈中绿原酸的提取方法，具体包括：将菌陈放置于恒温炉中干燥，用小型粉碎机将其粉碎筛分置于三角瓶中，向内加入蒸馏水于水浴中，再加入冰水，待温度冷却震荡，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；向粗提液中加入乙醇L，置于水浴上加热并回流，冷却用硅藻土过滤并用旋转蒸发仪中蒸干，残渣用乙醇溶液溶解至容量瓶中，加入乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；用二氯甲烷萃取，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱再减压浓缩，得到的即是绿原酸。
【专利说明】一种菌陈中绿原酸的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取方法，特别是一种菌陈中绿原酸的提取方法。
【背景技术】
[0002]菌陈为菊科多年生草木植物滨蒿或菌陈蒿的干燥地上部分。我国的大部分地区均有分布，主产于陕西、山西、安徽等地，春季采收的习称“绵菌陈”，秋季采割的称“菌陈蒿”，绵菌陈是临床常压的中药之一，本品味苦、辛、微寒、胃、肝胆经具清利湿热保肝利胆之功效，可用于治疗湿仓瘙痒等炎症，含有黄酮、绿原酸及挥发性油等多种活性成分。绿原酸作为绵菌陈中一种重要的生物活性成分，是若干植物的植保素，还具有广泛且显著地药理活性，如抗菌、消炎、抗氧化、清除自由基等，是许多中药及茶叶质量控制的指标。
[0003]绿原酸的提取方法主要有水提法、有机溶剂提取法，再利用纸层析、柱层析、萃取高效液相等方法对绿原酸进行纯化，水溶液提取的优点是经济、安全、使用，不足之处是增加了其它水溶性成分如蛋白质、多糖等质量，使过滤、纯化等后续工艺的难度加大，有机溶剂如乙醇溶液提取杂质含量低、提取效率高，且乙醇可以回收利用，利于后续的纯化工作，但工业上提取要防爆等安全措施，对设备成本相对要求较高。
【发明内容】
[0004]本发明针对传统的后续工艺的难度大、杂质含量高等问题，提出了一种菌陈中绿原酸提取方法，该方法有后续工艺难度小、杂质含量低等效果。
[0005]为了达成上述目的，采用的具体技术方案是:
[0006](I)将新鲜的菌陈放置于40°C恒温炉中干燥lh，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40-50 目；
[0007](2)准确称取1g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80°C水浴15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40°C时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；
[0008](3)向粗提液中加入80%乙醇10mL,置于水浴上加热至80_90°C时回流lh，冷却至30-40 °C时用40g的100目的娃藻土过滤；
[0009](4)将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80%乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80 %的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；
[0010](5)用150mL的二氯甲烷萃取2_3次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；
[0011](6)将洗脱后的溶液于70°C下进行减压浓缩，将浓缩后的液体用紫外分光光度计测定并计算其成本含量。
具体实施方案
[0012](I)将新鲜的菌陈放置于40°C恒温炉中干燥lh，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40-50 目；
[0013](2)准确称取1g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80°C水浴中15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40°C时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；
[0014](3)向粗提液中加入80%乙醇10mL,置于水浴上加热至80_90°C时回流lh，冷却至30-40 °C时用40g的100目的娃藻土过滤；
[0015](4)将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80%乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80 %的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；
[0016](5)用150mL的二氯甲烷萃取2_3次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；
[0017](6)将洗脱后的溶液于70°C下进行减压浓缩，将浓缩后的液体用紫外分光光度计测定并计算其成本含量。
[0018]实例I
[0019]将新鲜的菌陈放置于40°C恒温炉中干燥lh，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40目；准确称取1g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80°C水浴15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40°C时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；向粗提液中加入80%乙醇10mL,置于水浴上加热至80°C时回流lh，冷却至30°C时用40g的100目的硅藻土过滤；将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80 %乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80 %的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；用150mL的二氯甲烷萃取2次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；将洗脱后的溶液于70 V下进行减压浓缩，得到的即是绿原酸。
[0020]实例2
[0021]将新鲜的菌陈放置于40°C恒温炉中干燥lh，用小型粉碎机将其粉碎筛分成45目；准确称取1g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80°C水浴15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40°C时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；向粗提液中加入80%乙醇10mL,置于水浴上加热至80-90°C时回流lh，冷却至35°C时用40g的100目的硅藻土过滤；将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80 %乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80 %的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；用150mL的二氯甲烷萃取2次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；将洗脱后的溶液于70 V下进行减压浓缩，得到的即是绿原酸。
[0022]实例3
[0023]将新鲜的菌陈放置于40°C恒温炉中干燥lh，用小型粉碎机将其粉碎筛分成50目；准确称取1g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80°C水浴15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40°C时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；向粗提液中加入80%乙醇10mL,置于水浴上加热至90°C时回流lh，冷却至40°C时用40g的100目的硅藻土过滤；将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80 %乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80 %的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；用150mL的二氯甲烷萃取3次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；将洗脱后的溶液于70 V下进行减压浓缩，得到的即是绿原酸。
【权利要求】
1.一种菌陈中绿原酸的提取方法，其特征在于: (1)将新鲜的菌陈放置于40°c恒温炉中干燥lh，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40-50目； (2)准确称取1g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80°C水浴中15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40°C时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液； (3)向粗提液中加入80%乙醇10mL,置于水浴上加热至80-90°C时回流lh，冷却至30-40 °C时用40g的100目的娃藻土过滤； (4)将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80%乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80 %的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液； (5)用150mL的二氯甲烷萃取2-3次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱； (6)将洗脱后的溶液于70°C下进行减压浓缩，将浓缩后的液体用紫外分光光度计测定并计算其成本含量。
【文档编号】C07C67/48GK104447331SQ201410630938
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年11月11日 优先权日:2014年11月11日
【发明者】董燕敏 申请人:常州大学