专利名称：：旋光的反式－3－取代的缩水甘油酸酯的制备方法
技术领域：
：本发明涉及旋光的反式-3-取代的缩水甘油酸酯的制备方法。更具体地说，本发明涉及可用于药物化合物合成的中间体的反式-3-(取代的或未取代的苯基)缩水甘油酸酯的旋光异构体的制备方法以及所述旋光异构体的用途。硫氮酮盐酸盐，其化学名称是(2S，3S)-3-乙酸基-5-[2-(二甲氨基)乙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-1，5-苯并硫杂吖庚因-4(5H)-酮盐酸盐，是广泛用作用于治疗心绞痛，原发性高血压等的钙通道阻滞剂的药物化合物(MerkIndex，XIIEd.，P541)。为了制备硫氮酮，正如日本专利公告第46-16749，53-18038和61-52142号中所公开的，传统的已知方法是使用外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸酯作原料并在合成的较后阶段进行旋光拆分。在日本专利公开第60-13776号中也提出了制备硫氮酮的方法，该方法使用了通过外消旋的反式-缩水甘油酸酯的旋光拆分得到的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯。因此，现已对旋光的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸酯的不同制备方法进行了研究，例如，提出了如下所述的几种方法(a)一种方法，包括将外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯水解形成碱金属盐，使用例如(-)-α-甲苄基胺的光学拆分剂以形成其非对映异构体的盐，拆分该盐并重新酯化所得到的旋光的盐(日本专利公开第61-145174号和第2-231480号)，(b)一种方法，包括使具有不对称酯基如(-)基，(-)-2-苯基环己基或(-)-8-苯基基的氯乙酸酯与对-茴香醛进行达村斯反应(日本专利公开第61-268663，2-17170和2-17169号)，(c)一种方法，包括将消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯中的(2S，3R)-异构体进行酶催化不对称水解，并回收剩余的(2R，3S)-异构体(日本专利公开第2-109995和3-15398号以及WO90/04643号)，(d)一种用于不对称合成(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的方法，包括在不对称催化剂存在下，使反式-4-甲氧基肉桂酸甲酯进行锇氧化作用得到旋光的二醇，并使二醇进行分子内的闭环作用得到所要的化合物(WO89/02428和WO89/10350)，和(e)一种方法，包括用丁醇使外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯中的(2S，3R)-异构体进行酶催化不对称酯基转移作用得到(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯(日本专利公开第4-228095和6-78790号)。现亦知道，除硫氮酮外，一些1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物具有很好的药理活性。例如日本专利公开第60-202871号中公开了在2-和3-位上具有硫氮酮的反式绝对构型的苯并硫杂吖庚因衍生物具有血小板凝聚抑制活性等。现还知道，用于合成所述衍生物的(2S，3R)-3-(4-甲基苯基)缩水甘油酸甲酯可通过外消旋的反式-3-(4-甲基苯基)缩水甘油酸甲酯的酶催化不对称水解来制备(日本专利公开第3-175995号)。日本专利公开第8-259552号公开了由外消旋物以高旋光纯度得到反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的两种异构体的方法，该方法是通过将外消旋物中的(2S，3R)-异构体和丁醇进行酶催化的不对称酯基转移，回收未经酯基转移的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯，并将经酯基转移得到的产物即(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸丁酯进行化学酯基转移形成相应的甲酯。日本专利公开第4-217969公开了得到反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的(2R，3S)-异构体的结晶的方法，该方法通过在加热条件下将(2S，3R)-异构体和(2R，3S)-异构体的等摩尔混合物和(2R，3S)-异构体溶解在叔丁基甲基醚溶剂中，加入(2R，3S)-异构体晶种，结晶(2R，3S)-异构体，由此得到结晶的(2R，3S)-异构体，其量稍大于最初与等摩尔混合物一起溶解的(2R，3S)-异构体的量。日本专利公开第5-301864号中也公开了获得反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸的4-氯-3-甲基苯基酯的(2R，3S)-异构体的结晶的方法，该方法通过将(2R，3S)-异构体和(2S，3R)-异构体的等摩尔混合物和(2R，3S)-异构体在四氢呋喃中热溶解，加入(2R，3S)-异构体的晶种，在30℃下结晶(2R，3S)-异构体，从而得到(2R，3S)-异构体的结晶，其量稍大于最初与等摩尔混合物一起溶解的(2R，3S)-异构体的量。另外，日本专利公开第8-259552号中公开了从(2R，3S)-异构体和(2S-3R)-异构体的等摩尔混合物中得到反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的(2R，3S)-异构体的方法，该方法通过将等摩尔混合物中的(2S，3R)-异构体与丁醇进行酶催化不对称酯基转移直到(2S，3R)-丁酯/(2S，3R)-甲酯的摩尔比为7.8/1，并从其中结晶出(2R，3S)-异构体。然而，在该方法中，为了避免由于少量残余的未酯化的(2S，3R)-甲酯的结晶污染所需的(2R，3S)-甲酯，应将结晶作用停止在一定阶段，在该阶段中(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯以大于未进行酯基转移的(2S，3R)-异构体的量仍残留在母液中。这样，尽管在酯基转移反应中，(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯几乎不发生酯基转移，并且(2S，3R)-异构体的酯基转移作用的转化率是高的，但以结晶形式得到的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的收率仍并不令人满意。本发明的目的是提供一种用简单方法以高收率和高旋光纯度旋光拆分反式-3-(取代的或未取代的苯基)缩水甘油酸酯的方法。本发明的另一个目的是提供一种从含有反式-3-(取代的或未取代的苯基)缩水甘油酸酯的旋光异构体混合物的溶液中以高纯度和高收率结晶出所需的所述旋光异构体的方法，这是因为与已知方法相比，所需旋光异构体能被结晶直到母液中残留的所需旋光异构体浓度是极低的程度。本发明的又一个目的是提供一个从外消旋物的酶催化不对称酯基转移的反应混合物中以高纯度结晶所需的反式-3-(取代或未取代的苯基)缩水甘油酸酯的所需旋光异构体的方法，和已知方法相比，所需旋光异构体能被结晶直到其在母液中的残留浓度是极低的程度。本发明的上述和其它目的通过下文的描述是明显的。本发明的发明人发现，如果在溶液中含有外消旋的反式-3-(取代的或未取代的苯基)缩水甘油酸酯和一种酯化合物，该酯化合物和外消旋酯的一种异构体的区别仅在于酯基不同并且具有比反式-3-(取代的或未取代的苯基)缩水甘油酸酯的异构体更高的溶解度，那么具有与酯化合物相同的绝对构型的异构体的结晶作用将被阻止。因此，根据本发明，提供了制备式(I)所示的反式-3-取代的缩水甘油酸酯化合物的旋光异构体的方法式中，A环是取代的或未取代的苯环，R1是酯基，该方法包括制备含有酯化合物(I)的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位上不对称碳原子的存在，(A)和(B)都为旋光异构体，(B’)和异构体(B)的不同仅在于酯基R1，从溶液中结晶旋光异构体(A)，由于酯化合物(B’)的存在，达到旋光异构体(A)结晶而旋光异构体(B)不沉淀的程度，如果酯化合物(B’)不存在，则旋光异构体(B)会沉淀，并分离出旋光异构体(A)的结晶。可结晶出旋光异构体(A)的溶液还可含有少量酯化合物(A’)，其与旋光异构体(A)的区别仅在于酯基R1，并具有与酯化合物(B’)相同的酯基。可结晶出旋光异构体(A)的溶液可以是通过在具有立体选择性的酯基转移能力的酶存在下，使旋光异构体(A)和(B)与醇的溶液进行酯基转移作用，以使异构体(B)和醇发生酯基转移从而产生酯化合物(B’)而得到的溶液。这样，本发明还提供了制备具有式(I)的反式-3-取代的缩水甘油酸酯化合物的旋光异构体的方法式中，A环是取代的或未取代的苯环，R1是酯基，该方法包括在醇和具有立体选择性的酯基转移能力的酶存在下，使酯化合物(I)的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)的混合物，由于在2-和3-位上不对称碳的存在，二者都是旋光异构体，进行酯基转移，从而使旋光异构体(B)和醇进行酯基转移产生酯化合物(B’)直到酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比落到13/7-7.8/1的范围内，酯化合物(B)与异构体(B)的区别仅在于酯基R1，从所得到的含有异构体(A)，未酯基转移的异构体(B)和酯化合物(B’)的溶液中结晶出旋光异构体(A)，并分离出异构体(A)，其旋光纯度至少为99％，以旋光异构体(A)的初始量为基准，收率至少为75％。在分离出异构体(A)之后，通过使母液中的酯化合物(B’)进行化学酯基转移，将其转化为异构体(B)，结晶异构体(B)并随后分离，这样也能以高纯度和高收率获得另一个旋光异构体(B)。根据本发明，从含有酯(I)的两种旋光异构体和一种与该异构体之一的区别仅在于酯基的酯化合物的混合物的溶液中可以高纯度结晶得到反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的旋光异构体，与传统的方法相比，结晶能达到在母液中的所需旋光异构体的浓度是很低的程度。另外，从外消旋的反式-3-取代的缩水甘油酸酯中，通过进行外消旋酯的酶催化不对称酯基转移作用，并随后从所得的反应混合物中结晶出所需异构体，可以用简单的方式以高收率得到高纯度的所需异构体。图1通过使用温度和时间参数说明了从含有旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液(a)中结晶出旋光异构体(A)的条件，但是由于酯化合物(B’)的存在，旋光异构体(B)不会沉淀出来，尽管在没有酯化合物(B’)时，旋光异构体(B)将会沉淀出来。就此而论，假设在所述溶液(a)中旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的比率足以阻止旋光异构体(B)的结晶。在本发明中，一种溶液被用于结晶(下文称为“溶液ABB’”)，其中将具有式(I)的反式-3-取代的缩水甘油酸酯的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)与酯化合物(B’)溶解在溶剂中，式(I)中A环是取代的或未取代的苯环，R1是酯基，由于在酯化合物(I)的2-和3-位上的不对称碳的存在，(A)和(B)都是旋光异构体，酯化合物(B’)和旋光异构体(B)的区别仅在于酯基。含有异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液中还可含有少量的酯化合物(A’)(下文称为“溶液AA’BB’”)，其中酯化合物(A’)与异构体(A)的不同仅在于酯基R1并与酯化合物(B’)具有相同的酯基R1。本发明中使用的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)，即其旋光异构体(A)和(B)的混合物，是式(I)所示化合物，其中A环是取代的或未取代的苯环，并且R1是能使结晶所用的溶剂中的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)被结晶出来的酯基。所述的反式-3-取代的缩水甘油酸酯是例如结构式(I)所示的化合物，其中A环是可以被下列基团取代的苯基(a)直链或支链的低级烷基，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正己基，2-己基或3-己基；(b)直链或支链的低级烷氧基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，正己氧基，2-己氧基或3-己氧基；或(c)卤原子，例如，氟原子，氯原子，溴原子或碘原子，且R1是(a)直链或支链的低级烷基，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正己基，2-己基或3-己基；(b)被取代的环烷基，例如2-苯基-环烷基；或(c)取代的或未取代的芳基，例如，4-氯-3-甲苯基。反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的优选例子是例如结构式(I)的化合物，其中A环是甲苯基或甲氧苯基且R1是甲基，乙基，2-苯基环己基或4-氯-3-甲苯基。特别地，其中A环是4-甲苯基或4-甲氧苯基且R1是甲基或乙基的式(I)的化合物是更优选的化合物。任何酯基可以用作酯化合物(B’)的酯基，只要其能使酯化合物(B’)在结晶所用的溶剂中具有好的溶解度。酯化合物(B’)的酯基是，例如，(a)可具有取代基和具有比旋光异构体(B)的酯基R1更多的碳原子的直链或支链的烷基，例如，丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，2-戊基，3-戊基，正己基，2-己基，3-己基，正庚基，2-庚基，3-庚基，4-庚基，正辛基，2-辛基，3-辛基，4-辛基，正壬基，2-壬基，3-壬基，4-壬基，5-壬基，正癸基，2-癸基，3-癸基，4-癸基或5-癸基；(b)可具有取代基的烷氧基烷基，例如，甲氧基甲基，乙氧基甲基，丙氧基甲基，甲氧基乙基，甲氧基丙基，甲氧基丁基，乙氧基乙基或丙氧基丙基；和(c)可具有取代基的芳基烷基，例如，苄基，苯乙基，苯丙基或萘甲基。直链或支链的烷基(a)和烷氧基烷基(b)的取代基包括例如，卤原子如氟原子，氯原子，溴原子或碘原子。芳基烷基(c)的取代基包括例如，直链或支链的低级烷基如甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正己基，2-己基或3-己基；直链或支链低级烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，正己氧基，2-己氧基或3-己氧基；卤原子如氟原子，氯原子，溴原子或碘原子，等等。如果反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的酯基是甲基或乙基，那么酯化合物(B’)的酯基的优选例子是，例如，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，正己基，正辛基，正壬基，正癸基，苄基和苯乙基。另外，酯化合物(B’)的绝对构型可以是(2R，3S)和(2S，3R)之一。如果将(2R，3S)-酯化合物(B’)溶解在溶液中，则能结晶(2S，3R)-异构体(A)得到高纯度的晶体，和传统的方法相比，结晶能达到在母液中(2S，3R)-异构体(A)的浓度是很低的程度。另一方面，如果将(2S，3R)-酯化合物(B’)溶解在溶液中，则能结晶(2R，3S)-异构体(A)得到高纯度的晶体，和传统的方法相比，结晶能达到在母液中(2R，3S)-异构体(A)的浓度是很低的程度。因此，和传统的方法相比，在任何一种情况下都能以极高的收率得到所需产物。任何能用于重结晶反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的溶剂也可以用作本发明的结晶溶剂。这样的结晶溶剂的实例是，例如，醇溶剂如甲醇，乙醇，正丙醇，异丙醇或正丁醇；醚溶剂如乙醚，叔丁基甲基醚，二异丙醚，四氢呋喃或二氧杂环己烷；可被卤原子取代的芳烃溶剂如苯，甲苯，二甲苯，氯苯或二氯苯；可被卤原子取代的脂族烃溶剂如己烷，环己烷，正庚烷，正辛烷，二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷或四氯化碳；酯溶剂如乙酸甲酯或乙酸乙酯；等等。所述溶剂可单独或混合使用。根据反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)的酯基以及酯(I)的苯基上的取代基，可选择合适的溶剂。优选使用溶剂，其中反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的旋光异构体(A)的溶解度随温度而显著变化，并且酯化合物(B’)的溶解度远远大于旋光异构体(A)的溶解度。例如当反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯用作酯(I)并且将其正丁酯用作酯化合物(B’)时，优选使用甲醇，乙醇，二甲苯等作为溶解所述化合物的溶剂。溶剂的合适用量可以在旋光异构体(A)和(B)以及酯化合物(B’)能被一次溶解并且旋光异构体(A)能通过降低溶液的温度而结晶出来的范围内决定。这样，根据旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的种类，其比例，结晶温度等，可通过实验发现溶剂用量的适当范围。一般，当所用溶剂中旋光异构体(A)和(B)的溶解度大且溶解度随温度而显著变化时，有可能降低溶剂用量。例如，如果将下述反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸酯的混合物溶解在100ml的二甲苯中并且将所得溶剂冷却到-10℃，则即使是在溶液中(2R，3S)甲酯的浓度小于(2S，3R)甲酯的浓度的范围内，也仅有(2R，3S)甲酯能从溶液中有效结晶出来。溶解在100ml二甲苯中的缩水甘油酸酯混合物(2R，3S)甲酯49克(2S，3R)甲酯14克(2S，3R)正丁基酯39克结晶出(2R，3S)甲酯后残留在溶液中的缩水甘油酸酯的组成(2R，3S)甲酯9克(2S，3R)甲酯无变化(2S，3R)正丁基酯无变化在结晶之前，溶液中旋光异构体(A)的浓度随异构体(A)和溶剂的种类，结晶的温度等而变化，但是一般在0.5-4摩尔/升之间。在本发明方法的溶液中，需要旋光异构体(A)/旋光异构体(B)比率在一定范围内，在此范围内旋光异构体(A)比旋光异构体(B)更容易结晶，用酯化合物(B’)抑制旋光异构体(B)的结晶。即使是在如果酯化合物(B’)不存在时旋光异构体(B)将沉淀出来的(A)/(B)比率条件下，仍可用本发明的方法以晶体得到旋光异构体(A)。当然，在本发明的方法中可使用并优选使用含有大于旋光异构体(B)的量的旋光异构体(A)的溶液，这是因为除了通过由于酯化合物(B’)的存在来抑制异构体(B)的结晶从而得到的旋光异构体(A)的结晶之外，还能以晶体形式得到额外大量的旋光异构体(A)。因此可能由含有较异构体(B)更大量的异构体(A)的溶液开始实施本发明的方法。而且，酯化合物(B’)对于旋光异构体(B)的结晶的抑制作用随着酯化合物(B’)/旋光异构体(B)的比率的增加而增加，并可得到增加量的旋光异构体(A)。因此，酯化合物(B’)/旋光异构体(B)的比率越高，在本发明的方法中越被优选。在本发明用于结晶的初始溶液中的这些化合物的比率随着在结晶中使用的酯化合物(B’)的酯基和溶剂的种类而变化。一般，旋光异构体(A)/旋光异构体(B)的摩尔比是约4/6-约10/1，并且酯化合物(B’)/旋光异构体(B)的摩尔比是在约5/3-约10/1。异构体(A)/异构体(B)的摩尔比优选约1/1-约4/1，并且酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比优选约2/1-约7.8/1。在本发明的方法中，也能从含有除异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)以外的其他组分的溶液进行结晶。例如，除了所述的三个组分外，溶液还可以含有与旋光异构体(A)的区别仅在于酯基的旋光异构体(酯化合物(A’))。如果在溶液中含有酯化合物(A’)，则酯化合物(A’)/异构体(A)的摩尔比优选至多是酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比的9/35，这样酯化合物(A’)对异构体(A)的结晶的抑制作用能降低至最低程度，并且能以高纯度得到大量的异构体(A)。也就是说，虽然酯化合物(A’)的存在能抑制旋光异构体(A)的结晶，但是在用于本发明结晶的溶液中可存在酯化合物(A’)，只要因为酯化合物(B’)对旋光异构体(B)的结晶的抑制作用能仅结晶出旋光异构体(A)即可。当溶液中存在的酯化合物(B’)对异构体(B)的结晶的抑制作用大于酯化合物(A’)对异构体(A)的结晶的抑制作用时，异构体(A)比异构体(B)容易结晶出来，并且用本发明的方法可得到异构体(A)。在本发明的方法中，溶液中需要存在至少三种异构体，即旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)。在这方面，本发明的方法明显不同于从仅含有异构体(A)和(B)的溶液中选择性结晶的方法。本发明的方法还利用了酯化合物(B’)对异构体(B)的结晶的抑制作用，并且通过一个结晶-分离步骤实现了所需异构体(A)的分离。在这些方面，本发明的方法也不同于必须重复下述步骤(i)和(ii)的选择性结晶法(i)将旋光异构体(A)的晶种加入仅含有异构体(A)和(B)的溶液中以结晶和分离出旋光异构体(A)，和(ii)将旋光异构体(B)的晶种加入在步骤(i)中所得的溶液中以结晶和分离出旋光异构体(B)。而且，本发明的方法不同于选择性结晶法，其中后者的旋光异构体的结晶必须使用含有较大量的一种旋光异构体和较少量的另一种旋光异构体的溶液。与此相反，根据本发明的方法，旋光异构体(A)的结晶可以在从溶液中旋光异构体(A)＞＞旋光异构体(B)至溶液中旋光异构体(A)＜旋光异构体(B)的宽的范围内进行。本发明的方法相应地包括由还含有旋光异构体(A)的晶体的溶液进行结晶的实施方案。然而，本发明不包括从不含有至少旋光异构体(B)和酯化合物(B’)之一的溶液中结晶出旋光异构体(A)，这是因为不可能存在对旋光异构体(B)的结晶的抑制作用。按照本发明的方法的结晶必须在反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的旋光异构体(A)被结晶出来，但是旋光异构体(B)和酯化合物(B’)不被沉淀出来的温度下进行。仅在溶液被允许放置一定时间后开始旋光异构体(B)的结晶的温度包括在本发明的温度范围内。所述结晶温度随反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的种类，溶剂的种类和将要进行结晶作用的溶液的组成而变化。考虑到反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的环氧乙烷环的稳定性，不希望在较高的温度下通过溶解旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)来制备结晶溶液。优选在不超过70℃温度下进行溶解，并在不高于室温的温度下进行结晶。而且，一般当溶剂的量大时，不发生异构体(A)的结晶，除非溶液被冷却至低温，然而当溶剂的量少时，即使在相对高的温度下结晶也能发生。因此，当以工业规模实施本发明的方法时，从溶剂的量，设备和能量的观点看，优选降低溶剂的量并且在约室温时从浓缩溶液中进行结晶。另一方面，当从浓缩溶液中进行结晶时，产物常常会含有增加量的杂质量。因此，从纯度的观点出发，优选使用大量溶剂并在低温下进行结晶。为此，为了使旋光异构体(A)的结晶能有效进行，应该根据反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的种类，酯化合物(B’)的酯基，所用溶剂的种类和将要进行结晶作用的溶液的组成，用实验测定最佳温度范围。例如，当旋光异构体(A)和(B)是甲酯且酯化合物(B’)是正丁酯并从甲醇中进行结晶时，优选在-30至+15℃的温度下进行结晶。其它情况下可采用相似的温度范围。在本发明的方法中，由于旋光异构体(B)的结晶被酯化合物(B’)抑制，因而可在没有任何非常严格的温度控制条件下得到不受旋光异构体(B)的任何污染的旋光异构体(A)，而温度控制对于选择性结晶是必要的，选择性结晶是利用具有相同溶解度的旋光异构体间的沉淀速度的差别。因此，本发明允许的温度范围比选择性结晶法更宽。根据本发明的方法，旋光异构体(B)的结晶被酯化合物(B’)抑制。当发生旋光异构体(B)沉淀时，旋光异构体(B)和酯化合物(B’)一同以类似无定形状被沉淀出来。旋光异构体(A)的结晶在视觉上与所述沉淀不同。相应地，按照本发明的旋光异构体(A)的结晶可从含有旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液进行，该结果可进行到如果不存在酯化合物(B’)时旋光异构体(B)将会沉淀出来的程度。因为能否达到所述程度取决于旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶解度，所以即使在某温度下未达到所述程度，也可以在另一个温度下达到所述程度，反之亦然。在下文中，由通过使用温度和时间参数来说明按本发明的方法所能达到的程度的图1解释从含有旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液中结晶出旋光异构体(A)，但同时由于酯化合物(B’)的存在而不沉淀出异构体(B)的条件，尽管在此条件下如果没有酯化合物(B’)，旋光异构体(B)将会沉淀出来。就此而言，假设溶液中旋光异构体(A)的初始浓度大于旋光异构体(B)的浓度，并且溶液中酯化合物(B’)的量足以抑制旋光异构体(B)的结晶。溶液(a)是完全均相的溶液。如果冷却溶液(a)，则异构体(A)在(b)点开始结晶。如果进一步冷却溶液，在溶液中过量于异构体(B)的异构体(A)结晶达到(c)点，在该点异构体(A)/异构体(B)的摩尔比率为1/1。理论上讲，在溶液(a)的冷却过程中，例如，从(b)点至(c)点可能仅结晶出异构体(A)。然而，在日本专利公开第8-259552号所公开的方法中，异构体(A)被结晶仅能达到在结晶作用后的母液中异构体(A)/异构体(B)的摩尔比为约1.3/1的程度。这是因为根据一般的结晶技术的知识，如果将溶液(a)从(b)点冷却至(c)点，则溶液中旋光异构体(B)/旋光异构体(A)的比率通过旋光异构体(A)的结晶的沉淀而增加，并且降低了旋光异构体(B)的溶解度。因此，溶液的波动即溶液的温度，浓度等的部分不均匀性对异构体(B)的结晶产生影响。在(c)点的溶液含有等量的异构体(A)和(B)。因此，当从(c)点冷却溶液时，认为旋光异构体(A)和(B)以其等摩尔混合物的形式被结晶。然而，在本发明中，因为在溶液中存在酯化合物(B’)，因此抑制了异构体(B)的结晶。这样，即使从(c)点进一步冷却溶液，结晶出异构体(A)，但异构体(B)不会被结晶出来，所以可增加异构体(A)的收率。经过(c)点以后，如果进一步冷却溶液到更低温度，溶液最终达到(d)点，此时整个溶液变得浑浊，不仅异构体(A)被结晶出来，而且类似无定形状的异构体(B)和酯化合物(B’)被沉淀出来。因此，必须在高于(d)点的温度下实施本发明的方法。在经过(c)点后，如果进一步冷却溶液达到例如(e)点，并在该温度下将溶液保持一段时间，在经过t时间后，溶液到达(f)点，此时整个溶液变得浑浊并有和(d)点相同的现象产生。即被酯化合物(B’)抑制沉淀的形成的异构体(B)与酯化合物(B’)一同以类似无定形状沉淀出来。因此，本发明的方法需要在溶液变得浑浊的时间t之前完成旋光异构体(A)的结晶和分离。如上所释，用本发明的方法所要达到的结晶程度在如图1所示的“要用本发明的方法达到的程度”的范围内。该范围随各种因素如异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的种类和比率，溶剂的种类和量而变化。这样，根据这些因素可测定适当的范围。例如，当在如图1所示的溶液(a)中的异构体(A)的量小于异构体(B)的量的情况下，异构体(A)的结晶起点在(d)点和(c)点之间并且可能结晶和分离纯的异构体(A)达到(d)点。可以用通常的方法，如倾析和过滤进行结晶的异构体(A)的分离。如果大规模进行结晶，则需要长时间进行分离，尽管小规模的分离可以在短时间内完成。如进行实验规模的分离，甚至可能快速分离。正如在工业生产中分离需要长时间，此时优选在例如(e)点中断结晶，以便在到达t点的时间范围内可以没有任何污染地完成分离。根据本发明的方法，如果例如从含有外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯和(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸正丁酯的溶液中进行结晶，(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸正丁酯的量足以抑制甲酯的(2S，3R)-异构体的沉淀，(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯可结晶直到在结晶后的母液中(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的浓度至少是(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的浓度的两倍。而且还可能得到旋光纯度至少为99％的(2R，3S)-异构体结晶。这样，根据本发明，在没有异构体(B)的任何沉淀的情况下，进行异构体(A)的结晶直到在母液中异构体(A)的量等于异构体(B)的量之后，可以继续高纯度异构体(A)的结晶直到母液中异构体(A)的量小于异构体(B)的量。日本专利公开第8-259552号公开了在由粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)衍生的酯酶存在下，通过使外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯进行不对称酯基转移从而将7.8/8.8(约88.6％)的(2S，3R)-异构体转化为正丁酯，除去酶，减压蒸馏除去溶剂，然后从异丙醇中结晶，可以得到旋光纯度至少为99％的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的结晶。然而，当在结晶后的母液中所需的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的量是(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的量的大约1.3倍时应将结晶中断。这是因为为了避免不需要的(2S，3R)-异构体的结晶带来的污染，中断结晶是必要的。相反，根据本发明，可进行结晶直到在结晶后母液中的所要的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯的量大约为不需要的(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯量的一半。结晶异构体(A)的程度，即继续结晶所能达到的程度随着反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)/酯化合物(B’)的比率，结晶所用溶剂，结晶温度等而变化。然而，因为当类似无定形状的异构体(B)和酯化合物(B’)开始沉淀时，进行结晶的溶液变得浑浊，所以通过监测溶液中浑浊的现象可以判定异构体(A)的结晶终点。结晶的纯度一般受将要进行结晶的溶液浓度(或溶剂/旋光异构体的量的比率)，旋光异构体(A)/旋光异构体(B)的比率，温度，所得晶体的量等的影响。一般来说，如果结晶进行到异构体(A)和(B)难以结晶并且沉淀出的旋光异构体(A)的结晶量是少量的程度，那么旋光异构体(A)的结晶倾向于高纯度。例如，如果在结晶溶液中异构体(A)和(B)的浓度低，异构体(A)/异构体(A)和(B)的比率高，结晶温度高并且旋光异构体(A)的结晶量少，则结晶的异构体(A)的纯度高。与此相反，如果浓度低，则旋光异构体晶体收率低。然而，根据本发明，由于酯化合物(B’)的存在量抑制了旋光异构体(B)的沉淀，这样，可以以高收率获得纯度高于99％的旋光异构体(A)。因为结晶步骤仅包括从旋光异构体(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液中进行旋光异构体(A)的结晶，直至在酯化合物(B’)的存在下不沉淀出旋光异构体(B)的程度，尽管在没有酯化合物(B’)时将沉淀出旋光异构体(B)，并由此继续结晶直到在结晶的母液中旋光异构体(A)的量小于旋光异构体(B)的量的范围，所以结晶步骤很简单。在传统的结晶方法中，通过从含有旋光异构体(A)和(B)的溶液(AB)中结晶直到在母液中异构体(A)的量大于异构体(B)的量的程度从而得到旋光异构体(A)的结晶。在这样的结晶中，为了在没有旋光异构体(B)的任何结晶情况下以高纯度得到旋光异构体(A)，应分别仔细选择溶剂，温度和浓度，但旋光异构体(A)的收率在某种程度上被迫减少。然而，根据本发明的方法，在没有异构体(B)的沉淀情况下，旋光异构体(A)甚至能结晶到在传统的方法中旋光异构体(A)和(B)都将结晶的程度，在传统方法中结晶溶液中没有酯化合物(B’)。下文解释了进行结晶的溶液(ABB’)和溶液(AA’BB’)的制备。酯化合物(A’)可起到降低异构体(A)收率的作用，因此，将要进行结晶的溶液中优选不含有酯化合物(A’)。因为酯化合物(A’)不是一种要加入溶液中的组分，尽管在某些情况下这样的污染在制备溶液的过程中不可避免，所以溶液(ABB’)比溶液(AA’BB’)更优选。例如，通过向含有旋光异构体(A)和(B)的溶液(AB)中加入酯化合物(B’)或通过在具有立体选择性酯基转移能力的酶存在下使用醇(R3-OH，其中R3是可被取代的直链或支链的烷基，可被取代的烷氧基烷基或可被取代的芳烷基)将溶液(AB)中的旋光异构体(B)进行酯基转移形成酯化合物(B)，可以制得溶液(ABB’)。在酶催化的酯基转移情形中，只有当酶的立体选择性为100％时可得到溶液(ABB’)，而酶的立体选择性小于100％时得到溶液(AA’BB’)。因此优选使用具有好的立体选择性的酶。一般通过化学合成得到溶液(AB)，这是因为除了不对称合成之外，其产物都为旋光异构体的等摩尔混合物。酯化合物(B’)以高浓度保留在根据本发明结晶并分离出旋光异构体(A)的母液中，如果需要，可将其从母液中取出。通过将酯化合物(A’)和(B’)混合物中的酯化合物(A’)进行酶催化的选择性水解也能得到酯化合物(B’)。在制备溶液(ABB’)的情况下，一般将酯化合物(B’)加入到溶液(AB)中以使所得溶液(ABB’)满足在酯化合物(B’)存在下结晶出异构体(A)而不结晶出异构体(B)的条件。向其中加入酯化合物(B’)的溶液(AB)不局限于旋光异构体(A)和(B)的等摩尔混合物溶液，可以是含有不同量的异构体(A)和(B)的溶液。例如，通过如日本专利公开第61-268663号，第2-17170号和第2-17169号，WO89/02428和WO89/10350中所公开的不对称合成法可制备所述溶液(AB)。通过使外消旋的溶液进行如日本专利公开2-109995和3-15398和日本专利公告4-501360中所公开的酶催化不对称水解或通过使外消旋溶液进行如日本专利公开61-145174和2-231480号中公开的化学旋光拆分，也可以制备含有不同量的异构体(A)和(B)的溶液(AB)。如上所述，本发明的方法可以与已知方法，如不对称合成法，化学或酶催化旋光拆分法等联合进行。在这些情况中，即使已知方法中的不对称诱导或旋光拆分速度是不够好的，通过将所述不够好的方法与本发明的方法联合也能以好的收率回收高纯度的旋光异构体(A)。而且，本发明的方法可以应用于通过使溶液(AB)进行酶催化的酯基转移作用代替向溶液(AB)中加入酯化合物(B’)而制得的溶液。例如，本发明的方法可应用于按照在日本专利公开第4-228095，6-78790和8-259552号中公开的方法得到的溶液(ABB’)，其中通过使外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯与正丁醇进行酶催化的不对称酯基转移作用而使(2S，3R)-异构体转化，得到(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯。本发明的方法的不同应用和改进是可能的。例如，通过包括下述步骤的循环方法可以高纯度得到旋光异构体(A)和(B)(a)制备含有酯化合物(I)的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位上不对称碳原子存在，(A)和(B)都是旋光异构体，酯化合物(B’)与异构体(B)的不同仅在于酯基R1，(b)从溶液中结晶旋光异构体(A)，由于酯化合物(B’)的存在，直到旋光异构体(A)被结晶而不伴随有旋光异构体(B)被沉淀的程度，但是如果酯化合物(B’)不存在，则旋光异构体(B)将会沉淀，(c)分离旋光异构体(A)的晶体，(d)将与残余的旋光异构体(A)和(B)一起包含在所得母液中的酯化合物(B’)进行化学酯基转移，以使酯化合物(B’)转化为旋光异构体(B)，然后结晶和分离异构体(B)，(e)向所得母液中加入外消旋的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)，以提供进行步骤(b)的结晶的溶液，并(f)按顺序重复上述步骤(b)，(c)，(d)和(e)。在循环方法中，在步骤(d)中进行化学酯基转移的反应混合物中的异构体(B)的浓度高于异构体(A)的浓度，因而只有异构体(B)能通过进行传统的结晶和分离获得。如果在步骤(d)的异构体(B)结晶之前向化学酯基转移的反应混合物中加入酯化合物(A’)，则通过酯化合物(A’)对异构体(A)的结晶的抑制作用，能更有效地结晶异构体(B)。如果在步骤(d)中加入酯化合物(A’)，则包含在所得母液中的酯化合物(A’)在步骤(e)中进行化学酯基转移成异构体(A)。在步骤(d)中所加入的酯化合物(A’)的量优选与包含在步骤(a)的溶液中的酯化合物(B’)的量相应。酯化合物(A’)的量随异构体(A)和(B)的酯基以及酯化合物(A’)和用于结晶的溶剂而变化，但一般可调节酯化合物(A’)的量以使酯化合物(A’)/异构体(A)的摩尔比为约5/3-约10/1。通过向在步骤(c)中得到的母液中加入有机胺和与将要得到的旋光异构体的酯基相应的醇，并进行酯基转移，随后蒸出有机胺和醇来进行在循环方法中采用的化学酯基转移。以相同方法进行酯化合物(A’)的化学酯基转移。对于每摩尔将被酯基转移的酯，在化学酯基转移中醇的用量可优选是1-1000摩尔，特别是2-10摩尔。考虑到异构体(A)和(B)的循环，化学酯基转移可优选使用具有低沸点的醇如甲醇或乙醇。在化学酯基转移中所用胺是，例如，单烷基胺(如甲胺，乙胺，丙胺，丁胺)；二烷基胺(如二甲胺，二乙胺，二丙胺，二异丙胺)；三烷基胺(如三甲胺，三乙胺)；环胺(如吗啉)；和芳胺(如吡啶)。特别优选使用具有低沸点的二烷基胺如二甲胺，二丙胺或二异丙胺。对于每摩尔将被酯基转移的酯，有机胺的用量优选为0.01-1000摩尔，特别是0.1-10摩尔。当进行上述循环法时，可在一个循环中得到高纯度的异构体(A)和(B)。由于如果在化学酯基转移作用后能充分蒸馏除去有机胺和醇该方法实际上可无限制地进行，所以仅通过循环该方法而不需进行不对称化学反应就能有效获得高纯度的异构体(A)和(B)。而且，由于结晶溶液的波动(溶液的温度，浓度等的部分不均匀性)，由对映体的污染所导致的旋光纯度的降低能被抑制，并且在一个循环中得到的旋光异构体是大量的。因此，循环方法在工业上是有利的。下文解释了一种方法，其中通过酯基转移过程制备含有旋光异构体(A)和(B)及酯化合物(B’)的溶液，并随后将该溶液用于本发明的方法。优选通常将旋光异构体(A)和(B)的溶液中的异构体(B)进行酶催化酯基转移成酯化合物(B’)来制备用于旋光异构体(A)的结晶的溶液，这是因为有可能在一个单独的反应步骤中得到含有大量异构体(A)和少量异构体(B)以及能抑制异构体(B)结晶的酯化合物(B’)的溶液。在本发明的方法中，经酯基转移作用得到的反应混合物中异构体(A)/异构体(B)的比率优选尽可能大。换言之，优选在反应混合物中酯化合物(B’)是大量的。这样为了降低其中异构体(B)的量，例如，增加用于酯基转移作用的酶和醇的量并进行较长时间反应是必要的。然而所述步骤增加了费用并导致副反应。根据本发明的方法，即使酯基转移程度低，但与传统方法不同，所得溶液仍可成功用于旋光拆分。这是因为酯化合物(B’)抑制了异构体(B)的沉淀。只要异构体(A)/异构体(B)的摩尔比率为4/6-10/1，并且酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比为5/3-10/1，就能以高收率得到高纯度的异构体(A)。异构体(A)/异构体(B)的摩尔比特别优选为3/1-4/1，且酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比特别优选为2/1-7.8/1。酯基转移所用的醇是与上述酯化合物(B’)的酯基相一致的醇。在酯基转移中可使用任何具有使反式-3-取代的缩水甘油酸酯与醇进行立体选择性酯基转移的能力的酶。所述的能使反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的(2S，3R)-异构体发生选择性酯基转移的酶包括，例如，属于下列属的微生物衍生的酯酶沙雷氏菌属(Serratia)，假丝酵母属(Candida)，毛霉菌属(Mucor)，假单胞菌属(Pseudomonas)，曲霉属(Aspergillus)，产碱杆菌属(Alcaligenes)，犁头霉属(Absidia)，镰孢属(Fusarium)，赤霉属(Giberalla)，链孢霉属(Neurospora)，木霉属(Trichoderma)，根霉属(Rhizopus)、无色杆菌属(Achromobacter)，芽孢杆菌属(Bacillus)，短杆菌属(Brevibacterium)，棒状杆菌属(Corynebacterium)，普罗威登斯菌属(Providencia)，复膜孢糖酵母属(Saccharomycopsis)，诺卡氏菌属(Nocardia)和节杆菌属(Arthrobacter)；α-胰凝乳蛋白酶，Porcineheper酯酶，porcine胰酯酶，等等。具有代表性的上述酶的实施例是，例如，由下列微生物衍生的酯酶伞枝犁头酶(Absidiacorymbifera)IFO4009和IFO4010，赭曲霉(Aspergillusochraceus)IFO4346，土曲霉(Aspergillusterreus)IFO6123，尖孢镰孢(Fusariumoxysporum)IFO5942，尖孢镰孢(Fusariumoxysporum)ATCC659，茄病镰孢(Fusariumsolani)IFO5232，稻恶苗赤霉(Gibberellafujikuroi)IFO5368，MucorangulimacrosporusIAM6149，卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)IFO6746，黄色毛霉(Mocorflavus)IAM6143，易脆毛霉(Mucorfragilis)IFO6449，日内瓦毛霉(Mucorgenevensis)IAM6091，球形毛霉(Mucorglobosus)IFO6745，詹森氏毛霉(Mucorjanssenii)IFO5398，爪哇毛霉(Mucorjavanicus)，IFO4569，IFO4570，IFO4572和IFO5382，闪孢毛霉(Mucorlamprosporus)IFO6337，碎囊毛霉(Mucorpetrinsularis)IFO6751，密丛毛霉(Mucorplumbeus)IAM6117，布莱氏毛霉(Mucorpraini)IAM6120，微小毛霉(Mucorpusillus)IAM6122，总状毛霉(Mucorracemosus)IFO4581，拉莫氏毛霉(Mucorramannianus)IAM6128，下弯毛霉(Mucorrecurvus)IAM6129，林生毛霉(Mucorsilvaticus)IFO6753，MucorspinescensIAM6071，细胞毛霉(Mucorsubtilissimus)IFO6338，粗糙链孢霉(Neurosporacrassa)IFO6068，无根根霉(Rhizopusarrhizus)IFO5780，德列马根霉(Rhizopusdelemar)ATCC34612，日本根霉(Rhizopusjaponicus)IFO4758，绿色木霉(Trichodermaviride)IFO4847，裂环无色杆菌(Achromobactercycloclastes)IAM1013，球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus)IFO3525，酮式二酸短杆菌(Brevibacteriumketoglutamicum)ATCC15588，CorynebacteriumalkanolyticumATCC21511，裂烃棒状杆菌(Corynebacteriumhydrocarboclastum)ATCC15592，CorynebacteriumprimorioxydansATCC31015，产碱普罗威登斯菌(Providenciaalcalifaciens)JCM1673，可变假单胞菌(Pseudomonasmutabilis)ATCC31014，恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)ATCC17426，ATCC17453和ATCC33015，解凝沙雷氏菌(Serratialiquefaciens)ATCC27592，粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)ATCC13800，ATCC14764，ATCC19180，ATCC21074，ATCC27117和ATCC21212，粘质沙雷氏菌Sr41FERMBP-487，近平滑假丝酵母(Candidaparapsilosis)IFO0585，SaccharomycopsislipolyticaIFO0717，IFO0746，IFO1195，IFO1209和IFO1548，星状诺卡氏菌(Nocardiaasteroides)IFO3384，IFO3424和IFO3423，加德那诺卡氏菌(Nocardiagardneri)ATCC9604，Arthrobacterureafaciensnov.var.，球形节杆菌(Arthrobacterglobiformis)和Candidacylindracea。市场上可以买到的酶也可以使用，例如，碱性脂肪酶(Achromobacter，WakoPureChemicalIndustries，Ltd.)，脂肪酶B(Pseudomonasfragi22-39B，WakoPureChemicalIndustries，Ltd.)，脂肪酶MAMANO”10(Mucorjavanicum，AmanoSeiyakuKabushikiKaisha)，脂肪酶XI(Rhizopusarrhizus，SigmaChemicalCo.，Ltd.)，Talipase(Rhizopusdelemar，TanabeSeiyakuCo.，Ltd.)，脂肪酶NK-116(Rhizopusjaponicus，NagaseSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶N(Rhizopusniveus，AmanoSeiyakuKabushikiKaisha)，脂肪酶SP435和535(Candidaantarctica，Novo)，Alcalase(Bacilluslicheniformis，Novo)，脂肪酶VII(Candidacylindracea，SigmaChemicalCo.Ltd.)，脂肪酶(porcinepancreas，WakoPureChemicalIndustries，Ltd.)，酯酶(porcineheper，SigmaChemicalCo.，Ltd.)，胆固醇酯酶(Candidarugosa，NagaseSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶OF(Candidacylindracea，MeitoSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶QL(Alcaligenessp.，MeitoSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶AL(Achromobactersp.，MeitoSangyoKabushikiKaisha)和脂肪酶PL(Alcaligenessp.，MeitoSangyoKabushikiKaisha)。在这些酶中，优选属于下列属的微生物产生的酯酶沙雷氏菌属(Serratia)、假丝酵母菌属(Candida)、产碱杆菌属(Alcaligenes)和无色杆菌属(Achromobacter)，特别是由诸如粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)和Candidacylindracea的微生物产生的酯酶。另一方面，可以使反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的(2R，3S)-异构体选择性地酯基转移的酶包括，例如，由属于下列属的微生物产生的酯酶微球菌属(Micrococcus)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、微杆菌属(Microbacterium)、根瘤菌属(Rhizobium)、柠檬杆菌属(Citrobacter)、德巴利氏酵母属(Debaryomyces)、有孢汉逊氏酵母属(Hanseniaspora)、汉逊氏酵母属(Hansenula)、毕赤氏酵母属(Pichia)、红冬孢属(Rhodosporidium)、裂殖糖酵母属(Schizosaccharomyces)、掷孢酵母属(Sporobolomyces)、克雷克氏酵母属(Kloeckera)、有孢圆酵母属(Torulaspora)、链霉菌属(Streptomyces)，等等。可以使(2R，3S)-异构体选择性地酯基转移的上述微生物酶的有代表性的实例是，例如，由下列菌种产生的酯酶尿素微球菌(Micrococcusureae)IAM1010(FERMBP-2996)、放射形土壤杆菌(Agrobacteriumradiobacter)IAM1526和IFO13259、微杆菌(Microbacteriumsp.)ATCC21376、苜蓿根瘤菌(Rhizobiummelioti)IFO13336、带劳地氏柠檬杆菌(Citrobacterfreundii)ATCC8090、Debaryomyceshanseniivar.fabryiIFO0015、DevaryomycesnepalensisIFO0039，法尔皮氏有孢汉逊氏酵母(Hanseniasporavalbyens)IFO0115、多形汉逊氏酵母(Hansenulapolymorpha)IFO1024、土星汉逊氏酵母(Hansenulasaturnus)HUT7087、粉状毕赤氏酵母(Pichiafarinosa)IFO0607、巴斯德毕赤氏酵母(Pichiapastoris)IFO0948，IFO1013和IAM12267、威克曼氏毕赤氏酵母(Pichiawickerhamii)IFO1278、类酵母红冬孢(Rhodosporidiumtoruloides)IFO0559、粟酒裂殖糖酵母(Schizosaccharomycespombe)IFO0358、纤细掷孢酵母(Sporobolomycesgracillis)IFO1033、皮质克雷克氏酵母(Kloeckeracorticis)IFO0633、戴尔凯氏有孢圆酵母(Torulasporadelbrueckii)IFO0422、灰色链霉菌灰色亚种(Streptomycesgriseussubsp.griseus)IFO3430和IFO3355，和淡紫灰链霉菌淡紫灰亚种(Streptomyceslavendulaesubsp.lavendulae)IFO3361、IFO3415和IFO3146。本发明中使用的酶可以是市场上可以买到的或从微生物细胞的培养液得到的酶。也可以是从野生菌株或突变体得到的酶，或从通过生物工程技术如基因重组或细胞融合得到的微生物产生的酶。上述微生物酶可以用下述方法得到以一般的方法，例如，在含有通常的碳源、氮源和无机盐的培养基中在室温或高温下在有氧条件下在pH5-8培养微生物，用一般方法如离心或过滤从培养液中分离细胞，和任选用树脂吸附剂除去杂质。上述微生物培养液可以直接用作酶。这样得到的溶液可以直接用作酶或可以冷冻干燥。也可以用已知方法，例如，聚丙烯酰胺法，含硫的多糖凝胶法(例如角叉菜胶法)、琼脂胶法、光交联树脂法、聚乙二醇法、硅藻土法或膜吸附法，固定所述酶。固定化酶可以装在柱中和用于酯基转移。同时，有高E-值的酶具有高立体选择性。用上述酶，旋光异构体(A)被酯基转移成少量酯化合物(A’)，而异光异构体(B)被酯基转移成大量酯化合物(B’)。由于抑制希望的异构体(A)的沉淀的酯化合物(A’)的量必须减少，以便增加结晶的异构体(A)的量，同时异构体(B)的沉淀受酯化合物(B’)抑制，所以，在上述酶中优选具有高E-值的酶。E-值是表示酶的立体选择性的常规指标之一，是每单位浓度的各个立体异构体的酶反应速度比(例如，(2R，3S)-异构体与(2S，3R)-异构体酯基转移的速度比)。一般，在反应显著进行时，E-值受酶失活、副反应、测定误差等很大影响。因此，本发明中使用的E-值是在转化率10％时(即在10％反式-dl-式被酯基转移时)测定的值，这时阶段副反应，逆反应和测定误差很小。E-值由下面公式表示，它是每种酶特有的值。其中因此，如果测定出E-值和酯基转移的转化率，则可以测定酯基转移后的旋光异构体的比例，而与酶的种类无关，由此可以预期得到旋光纯度和收率。对于制备根据本发明进行结晶的溶液，优选的E-值是至少20，特别是至少50。上述的具有优选的E-值的酶可用实验方法合适地选择。酶的量根据使用的酶种类、使用形式等而变化。但是，对每克异构体(B)，最好使用具有橄榄油水解活性1×10-1×105U，特别是1×102-1×104U的量的酶。根据在IyakuhinKenkyu，Vol.11，No.3，505-506(1980)中报道的脂肪消化能力试验，通过测定用酯酶解离橄榄油中的酯键产生的脂肪酸量来估计橄榄油水解活性。酯基转移反应可以在合适的溶剂中或无溶剂存在下进行。溶剂的例子是芳族有机溶剂，例如苯、甲苯或二甲苯；卤代芳族有机溶剂，例如氯苯或二氯苯；脂族有机溶剂，例如己烷、庚烷或环己烷；卤代脂族有机溶剂，例如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳或三氯乙烷；酮溶剂，例如丙酮、甲基乙基酮或甲基异丁基酮；醚溶剂，例如二甲基醚、二乙基醚、二异丙基醚、叔丁基甲基醚、四氢呋喃或1，4-二噁烷；酯溶剂，例如乙酸乙酯或乙酸丁酯；等等。特别优选甲苯、二甲苯、己烷、四氯化碳、叔丁基甲基醚和二异丙基醚，因为酶的失活少，因而反应以高速度进行。底物，即异构体(A)和(B)的浓度优选约0.02-约3摩尔/升，特别约0.02-约2摩尔/升，因为反应速度高从而使得酯基转移反应的设备小型化。用于酯基转移的醇量优选每摩尔异构体(B)用0.6-10摩尔，特别是0.8-5摩尔的醇，以便可以防止酶失活，和反应速度可以提高。在酯基转移的同时反应体系被水污染会引起水解，在将得到的溶液用于本发明的方法中时导致收率降低。因此，优选在尽可能避免超过显示酯基转移活性的酶所需的过量水存在的条件下进行反应。此外，水解产物不溶于某些溶剂，这导致由于这些副产物的污染而引起希望产物的纯度降低。酯基转移反应在室温或高温下，优选在温度10-50℃，特别是20-40℃下进行。酯基转移反应的转化率根据酶的立体选择性、旋光异构体(A)的收率等可以适当选择。根据底物，反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)的酯基，通过改变酶活性、反应温度、反应时间等可以随意调节所述转化率。为了用常规方法以高收率得到高纯度的旋光异构体(A)，一般需要提高酯基转移反应的转化率和使用具有很高选择性的酶。但是，为了提高转化率，在反应进行到很大程度的阶段时，在反应混合物中剩余的少量异构体(B)必须进一步酯基转移。因此，鉴于必需大量的昂贵的酶，在长时间反应中酶容易失活，在长时间反应中不稳定的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)容易分解，由于酶的选择性不够一些异构体(A)的酶催化酯基转移是不可避免的，所以，工业上不可能将转化率提高到高水平。例如，日本专利公开8-259552公开了用由粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)产生的酯酶进行外消旋的反式-3-(4-甲氧基苯基)缩水甘油酸甲酯的不对称酯基转移，将外消旋的甲基酯的(2S，3R)-异构体转化为(2S，3R)-正丁基酯，直到(2S，3R)-正丁基酯/(2S，3R)-甲基酯的摩尔比是7.8/1[(2S，3R)-甲基酯10.8g和(2S，3R)-正丁基酯101.85g]。该酯基转移反应用下述方式进行首先用每摩尔底物5×105U酯酶进行反应24小时，在减压下蒸发出溶剂直到反应混合物的体积成为1/3后，加入5×105U酯酶，反应再进行16小时。但是，该方法实际上不可能用于工业生产，因为反应时间太长，生产过程太复杂，并且昂贵的酶的用量太大。与此对比，根据本发明，即使酯基转移的转化率不提高至高水平，也可以高收率得到高纯度的旋光异构体(A)。例如，从通过用粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)Sr41FERMBP-487产生的酯酶(1×105U，24小时)进行外消旋的反式-3-(4-甲氧基苯基)缩水甘油酸甲酯的酯基转移得到的反应混合物，以至少80％的收率得到纯度99％或更高的(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯基)缩水甘油酸甲酯，其中只有70％(2S，3R)-异构体转化为正丁酯(酯化合物B’/旋光异构体B＝7/3)。本发明包括一个实施方案，其中因为底物在某溶剂中的溶解度低，在酯基转移反应中底物的结晶保留在反应混合物中。在该情况下，在酯基转移反应后，其中不需要的异构体转化为可溶的酯化合物，需要的产物可以从反应混合物中用下述方法得到过滤酶和需要的结晶异构体的混合物，除去需要的异构体中沾污的酶，同时冷却滤液，通过过滤得到产生的结晶；或者直接冷却反应混合物，过滤酶和需要的结晶异构体的混合物，除去其中的酶。本发明还包括一个实施方案，其中当用一般方法进行反应时，在酯基转移中无结晶的沉淀，但是在反应过程中通过主动地蒸发出溶剂则结晶沉淀。通过蒸出溶剂而沉淀出的结晶的分离可以用与上述相同的方法进行。在蒸出大量溶剂和将不同的溶剂加入反应混合物中的情况下，结晶的分离也可以用上述相同的方法进行。在上述情况下，在蒸出溶剂的同时，由酯基转移得到的醇也可以排除到反应体系的外面，因此，随后的酯基转移容易进行。如上所述，本发明的方法的优点是反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的旋光异构体(A)优选以工业规模生产。这是因为即使外消旋物的酯基转移停止在低转化率的阶段，异构体(A)也可以通过将结晶和酯基转移联合以高收率和高纯度得到，而单独的结晶被认为在工业上是不可应用的。关于下述方法作了上述说明，其中可通过结晶异构体A直到由于酯化合物(B’)的存在而不结晶出异构体(B)的程度来分离旋光异构体(A)，不过酯化合物(B’)不存在时旋光异构体B会沉淀。但是，根据本发明的方法，也可以得到与常规的方法比较较大量的旋光异构体(A)的结晶，常规方法中异构体(A)在异构体(A)结晶的条件下从溶液(AB)中结晶，但是异构体B不结晶。这是因为在溶液(AA’BB’)或(ABB’)中酯化合物(B’)抑制旋光异构体(B)从其中沉淀。此外，与常规的方法比较，即使从由低转化率的酯基转移得到的溶液(ABB’)或溶液(AA’BB’)，也能以高收率高纯度得到旋光异构体(A)。例如，反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的异构体(A)用下述方法以旋光纯度大于99％的结晶形式和收率大于75％(特别是大于80％)得到用与酯化合物(B’)相应的醇和用具有使异构体(B)立体选择性地酯基转移成酯化合物(B’)的能力的酶(特别是E-值大于20的酶，例如由粘质沙雷氏菌Sr41FERMBP-487产生的酯酶)，酯基转移异构体(A)和(B)的混合物，直到酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比是13/7-7.8/1(特别是2/1-8/2)，和从得到的反应溶液(其中溶剂可以更换)中结晶异构体(A)。更换了溶剂的上述反应溶液包括，例如，通过部分或全部更换反应溶液的溶剂以致除去了在酯基转移中生成的醇得到的反应溶液，或通过在酯基转移后部分或全部更换溶剂以便酯基转移在合适的溶剂中进行且结晶在合适的溶剂中完成得到的反应溶液。由酯基转移得到的溶液也可以是用常规方法如过滤或倾析由反应混合物中除去酶得到的溶液，所述反应混合物是由酯基转移得到的。由上面得到的旋光异构体(A)，即反式-3-取代的缩水甘油酸酯的(2R，3S)-异构体，用各种方法可以制备(2S，3S)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或可药用的盐，所述方法是例如在下列文献中公开的方法日本专利公告46-16749、63-13994、日本专利公开5-201865、2-289558和日本专利公告2-28594、ChemPharm.Bull.，18(10)，2028-2037(1970)、日本专利公开2-17168、4-234866、5-222016、4-221376、5-202013、2-17170、2-286672、6-279398、58-99471、8-269026、61-118377、6-228117和2-78673、欧洲专利公开796853和荷兰专利公开1006293。换句话说，(2S，3S)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或可药用的盐可用下述方法制备将(2R，3S)-异构体与式(IV)的氨基苯硫酚衍生物反应式中B环如同上述定义，R4是氢原子、2-(二甲基氨基)乙基或下式的基式(IV)化合物是例如2-氨基苯硫酚、2-氨基-5-氯苯硫酚、2-氨基-5-苄基苯硫酚、2-(二甲基氨基乙基氨基)苯硫酚或下式的化合物式中B环如上述定义；或将(2R，3S)-异构体与式(V)的硝基苯硫酚衍生物反应式中B环如上述定义，式(V)化合物是例如2-硝基苯硫酚、2-硝基-5-氯苯硫酚或2-硝基-5-苄基苯硫酚，接着还原硝基，得到式(VI)的(2S，3S)-3-(2-氨基苯硫基)-3-苯基-2-羟基丙酸酯式中A和B环、R1和R4如同上述定义，使得到的化合物(VI)直接或进行水解后进行分子内闭环，得到式(VII)的(2S，3S)-2-苯基-3-羟基-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物式A和B环和R4如上述定义，和将得到的化合物(VII)以任选顺序在5-位氮原子上进行二甲基氨基乙基化和在3-位上取代的羟基上进行乙酰化，得到式(II)的(2S，3S)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或其可药用的盐式中A和B环和R2如同上述定义。上述转化的全反应图解如下所示。(2S，3S)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物(II)和其可药用盐的例子是，例如，(2S，3S)-2-(4-甲氧基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，3-二氢-1，5-苯并硫杂吖庚因-4(5H)-酮(硫氮酮)、(2S，3S)-2-(4-甲氧基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲氨基)乙基]-8-氯-2，3-二氢-1，5-苯并硫杂吖庚因-4(5H)-酮、(2S，3S)-3-乙酰氧基-5-[3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧基苯基)-8-氯-1，5-苯并硫杂吖庚因-4(5H)-酮、(2S、3S)-3-乙酰氧基-8-苄基-2，3-二氢-5-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-(4-甲氧基苯基)-1，5-苯并硫杂吖庚因-4(5H)-酮，和它们的可药用的盐。同时用与上述已知方法相似的方法，从上面得到的反式-3-取代的缩水甘油酸酯的(2S，3R)-异构体，即从旋光异构体(A)可以制备(2R，3R)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或可药用的盐。换句话说，(2R，3R)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或可药用的盐可用下述方法制备用与上述的从(2R，3S)-异构体制备(2S，3S)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物(II)的相同方法，将(2S，3R)-异构体与氨基苯硫酚衍生物(IV)反应，或与硝基苯硫酚衍生物(V)反应然后还原硝基，得到式(VIII)的(2R，3R)-3-(2-氨基苯硫基)-3-苯基-2-羟基丙酸酯式中A环、B环和R1如同上述定义，使得到的化合物(VIII)直接或在其进行水解后进行分子内闭环，得到式(IX)的(2R，3R)-2-苯基-3-羟基-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物式中A环和B环如同上述定义，和将得到的化合物(IX)以任何顺序在5-位的氮原子上进行二甲基氨基乙基化和在3-位上取代的羟基上乙酰化，得到式(III)的(2R，3R)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或其可药用的盐式中A环和B环如同上述定义。上述转化的总反应图解如下所示。(2R，3R)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物(III)和其可药用的盐的例子是，例如，(2R，3R)-顺式-2-(4-甲基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲基氨基)乙基]-8-甲基-2，3-二氢-1，5-苯并硫杂吖庚因-4(5H)-酮和其可药用的盐。另外，由用本发明的方法得到的反式-3-取代的缩水甘油酸酯的旋光异构体(A)可以制备用作旋光拆分试剂的下式的旋光的苏-硝基羧酸化合物式中A环和B环如同上述定义，*代表不对称碳原子。在上述的旋光的苏-硝基羧酸化合物的制备中，A环和B环是，例如，与上述1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物的制备中记述的A环和B环相同的环。优选A环是4-低级烷氧基苯基和B环是下式的取代的苯环式中Hal是卤原子。更优选，A环是4-甲氧基苯基和B环是上式所示的取代的苯环，式中Hal是氯原子。苏-硝基羧酸化合物的制备方法可以实施，例如，通过用日本专利公告61-18549中公开的方法将反式-3-取代的缩水甘油酸酯的旋光异构体(A)与下式的硝基苯硫酚化合物反应，式中环B如同上述定义，然后根据Chem.Pharm.Bull.，18(10)，2028-2037(1970)中公开的方法水解得到的产物。根据上述方法，如果使用反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的(2R，3S)-异构体，则可以得到苏-硝基羧酸化合物的(2S，3S)-异构体；如果使用反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的(2S，3R)-异构体，则可以得到苏-硝基羧酸化合物的(2R，3R)-异构体。顺便地说，本发明中使用的术语“直链或支链低级烷基”表示含有1-6个碳原子的直链或支链烷基，“直链或支链低级烷氧基”表示含有1-6个碳原子支链或支链烷氧基。另外，本发明中使用的术语“环烷基”表示含有3-6个碳原子的环烷基，术语“芳基”表示含有6-10个碳原子的芳基。本发明中使用的术语“直链或支链烷基”表示含有1-12个碳原子的直链或支链烷基，术语“烷氧基烷基”表示其中烷氧基含有1-6个碳原子和烷基含有1-6个碳原子的烷氧基烷基，术语“芳烷基”表示其中芳基含有6-10个碳原子和烷基含有1-6个碳原子的芳烷基。本发明用下列实施例更具体的描述和说明。当然，本发明不限于这些实施例。实施例1向300ml茄形烧瓶中加入表1所示量的(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯基)缩水甘油酸甲酯(下文中称为“MPGM”)，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGR3[(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯基)缩水甘油酸R3酯，即(2S，3R)-MPGM的甲基变为R3基的化合物；R3＝正丙基、正丁基、正辛基、正癸基、苄基、环己基或2-辛基]和30ml甲醇。在高温下这些化合物溶于甲醇中。在用磁性搅拌器搅拌下将溶液冷却至-15℃，在-15℃放置5分钟。得到的上清液中各组分的浓度用HPLC*测定。*HPLC条件柱，CHIRALCELOD(DaicelChemicalCo.)；检测，UV，在237；温度，40℃；流速，1.0ml/min；展开溶剂，己烷/异丙醇＝20/1。由浓度估算上清液中包含的各组分的量。另外，根据下面公式估算结晶的量(结晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)结晶在表1中显示。用过滤得到少量结晶，用等量甲醇(-15℃)洗涤，真空干燥，结晶的纯度用HPLC测定。发现在各种情况下结晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。表1实施例2向300ml茄形烧瓶中加入表2-7所示量的(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu[(2S，3R)-3-(4-甲氧基苯基)缩水甘油酸正丁基酯]和30ml甲醇。用2.5cm磁性搅拌器以300r.p.m.搅拌混合物使这些化合物溶解。将溶液冷却至表2-7所示的温度，在经过预定时间(0，0.5或1小时)后停止搅拌。取出少量上清液，用HPLC测定上清液中各个组分的浓度。由浓度估算上清液中包含的各组分的量。另外，根据下列公式估算结晶的量(结晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(在上清液中(2R，3S)-MPGM的量)。浑浊时间表示在达到结晶温度后直到溶液变浑浊的时间。关于出现浑浊前取出的试样上清液中各个异构体的量用HPLC测定。表2(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝1.7(摩尔)</tables>表3(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.0(摩尔)</tables>表4(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.2(摩尔)表5(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.4(摩尔)表6(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.7(摩尔)表7(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝3.8(摩尔)</tables>实施例3向1,000ml茄形烧瓶中加入表8所示量的(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu和表8所示量的溶剂。用2.5cm磁性搅拌器以300r.p.m.搅拌混合物使这些化合物溶于溶剂中。将溶液冷却至表8所示温度，并立即停止搅拌。取出少量上清液，用HLPC测定上清液中各个组分的浓度。由浓度估算上清液中包含的各个组分的量。另外，根据下面公式估算结晶的量(结晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)。结果在表8中显示。用过滤得到少量结晶，用等量甲醇(-10℃)洗涤，真空干燥，用HPLC测定结晶的纯度。发现在各种情况下结晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。表8</tables>实施例4向300ml茄形烧瓶中加入表9所示量的(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu和表9所示量的甲醇。用2.5cm磁性搅拌器以300r.p.m.搅拌混合物使这些化合物溶于甲醇中。将溶液冷却至-10℃。在该温度下搅拌1小时后，马上停止搅拌。取出少量上清液，用HLPC测定上清液中各个组分的浓度。由浓度估算上清液中包含的各个组分的量。此外，用过滤得到少量结晶，用等量甲醇(-10℃)洗涤，真空干燥，用HPLC测定结晶的组成。结果在表9中显示。表9</tables>实施例5向300ml茄形烧瓶中加入表10所示量的(2R，3S)-MPGM、(2S，3R)-MPGM、(2R，3S)-MPGnBu和(2S，3R)-MPGnBu和30ml甲醇。用2.5cm磁性搅拌器以300r.p.m.搅拌混合物使这些化合物溶解在甲醇中。经30分钟将溶液冷却至-15℃。在该温度下再搅拌2小时后停止搅拌，取出少量上清液，用HPLC测定上清液中各个组分的浓度。由浓度估算上清液中包含的各个组分的量。另外，根据下面公式估算结晶的量(结晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)另外，用过滤得到结晶，用等量甲醇(-15℃)洗涤，真空干燥，用HPLC测定结晶的组成。结果在表10中显示。表10实施例6将10.4g(2R，3S)-MPGM，10.4g(2S，3R)-MPGM和40.5g(2S，3R)-MPGnBu在150ml甲醇中的溶液加入500ml茄形烧瓶中，用2.5cm磁性搅拌器以300r.p.m.搅拌。经30分钟将溶液冷却至-10℃，再搅拌10分钟。用过滤得到结晶，用10ml甲醇(-10℃)洗涤，真空干燥。用HPLC测定结晶的组成。发现在4.5g结晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大(以结晶前(2R，3S)-MPGM的量为基准计算收率为43％)。在得到结晶后，蒸出在滤液和洗涤液混合物中与洗涤液相应的10ml甲醇。将浓缩的混合物冷却到-10℃，向其中加入(2S，3R)-MPGM晶种。当在上述温度下搅拌混合物30分钟时，其变为浑浊且类似非晶形的物质沉淀。用过滤得到类似非晶形的物质，用HPLC测定其组成。已发现类似非晶形的物质是固体，其中含有与晶种相同构型的最大量的(2S，3R)-MPGM，以及几乎相同量的(2R，3S)-MPGM和约三分之二量的(2S，3R)-MPGnBu。实施例7将104g(0.5mol)(2RS，3SR)-MPGM[52g(2R，3S)-MPGM和52g(2S，3R)-MPGM]溶于500ml二甲苯，80ml正丁醇和0.25ml水的混合溶剂中。将200mg由粘质沙雷氏菌得到的酯酶(橄榄油水解活性4×104U)悬浮于得到的溶液中，上述菌种在下述参考实施例1-(2-b)中得到。溶液在30℃搅拌24小时，反应混合物用HPLC分析。发现产物由50g(2R，3S)-MPGM，13.5g(2S，3R)-MPGM和44g(2S，3R)-MPGnBu组成。用过滤从反应混合物中除去酶，在减压下从滤液中蒸发出全部溶剂，得到油状剩余物。向该剩余物中加入150ml甲醇，搅拌以进行结晶。为了进一步提高收率，将混合物冷却至-15℃，在相同温度下搅拌30分钟。用过滤得到结晶，用40ml甲醇(-15℃)洗涤，真空干燥，得到44.2g(2R，3S)-MPGM。从当时得到的滤液的分析中还发现母液含有6g(2R，3S)-MPGM，13.5g(2S，3R)-MPGM和44g(2S，3R)-MPGnBu。结晶收率是85.0％(以加入的外消旋化合物中的(2R，3S)-MPGM是100％为基准计算的百分数)。发现结晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。实施例8将20.8g(2RS，3SR)-MPGM[10.4g(2R，3S)-MPGM和10.4g(2S，3R)-MPGM]，100ml二甲苯，16ml正丁醇，25μl水和10mg从下述的参考实施例1-(2-b)中得到的由粘质沙雷氏菌产生的酯酶(橄榄油水解活性2×103U)混合。混合物在30℃进行酶催化酯基转移反应直至达到表11中所示的酯基转移的转化率。用过滤从反应混合物中除去酶，在减压下在温度60-70℃从滤液中蒸发出全部溶剂，得到油状剩余物。向剩余物中加入30ml甲醇，在茄形烧瓶中用2.5cm磁性搅拌器以300r.p.m.搅拌。冷却混合物至-10℃后停止搅拌。取出少量上清液，用HLPC测定上清液中各组分的浓度。由浓度估算上清液中包含的化合物的量。另外，根据下面公式估算结晶的量(结晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)结果在表11中显示。用过滤得到少量结晶，用等量甲醇(-10℃)洗涤，真空干燥，用HPLC分析。发现在所有情况下结晶中(2R，3S)-MPGM含量是99％或更大。表11</tables>实施例9将104g(0.5mol)(2RS，3SR)-MPGM[52g(2R，3S)-MPGM和52g(2S，3R)-MPGM]溶于500ml二甲苯和80ml正丁醇的混合溶剂中。将3.0g在下述的参考实施例1-(2-a)中得到的固定在硅藻土上的酯酶(橄榄油水解活性2.5×104U)悬浮于得到的溶液中。溶液在30℃搅拌24小时，用HPLC分析反应混合物。发现产物由51g(2R，3S)-MPGM，14.7(2S，3R)-MPGM和38g(2S，3R)-MPGnBu组成。用过滤从反应混合物中除去固定在硅藻土上的酯酶，在减压下在温度60-70℃从滤液中蒸出全部溶剂，得到油状剩余物。向剩余物中加入150ml甲醇，搅拌以进行结晶。为了进一步提高收率，将混合物冷却至-10℃，在相同温度下搅拌30分钟。用过滤得到结晶，用40ml-10℃甲醇洗涤，真空干燥，得到43.1g(2R，3S)-MPGM。从当时得到的滤液分析还发现母液含有7g(2R，3S)-MPGM，14.7g(2S，3R)-MPGM和38g(2S，3R)-MPGnBu。结晶收率是82.9％(以加入的外消旋化合物中的(2R，3S)-MPGM是100％为基准计算的百分数)。发现结晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。实施例10(1)在温度30-40℃将20g(2RS，3SR)-MPGM和41g(2S，3R)-MPGnBu溶于150ml甲醇中。在搅拌下将溶液冷却，在0℃将10mg(2R，3S)-MPGM的晶种加入溶液中。溶液经30分钟继续冷却至-10℃，在该温度下搅拌10分钟。用玻璃过滤器过滤得到结晶，用20ml-10℃甲醇洗涤，真空干燥，得到(2R，3S)-MPGM。将滤液和洗涤液合并，得到含有(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu的甲醇溶液。(2)向上述甲醇溶液中加入100ml甲醇和10ml二异丙基胺。溶液在30℃搅拌16小时，使(2S，3R)-MPGnBu转化为(2S，3R)-MPGM。(3)步骤(2)中得到的反应混合物在0℃放置30分钟。用过滤得到(2S，3R)-MPGM结晶，用40ml5℃甲醇洗涤。滤液在减压下浓缩，得到含有约等量的(2S，3R)-MPGM和(2R，3S)-MPGM的剩余物。(4)向剩余物中加入(2RS，3SR)-MPGM以使(2RS，3SR)-MPGM的总量为约20g。向其中再加入(2S，3R)-MPGnBu和甲醇。得到的溶液用于上述步骤(1)。重复由步骤(1)-(4)组成的方法三次，其结果在表12中显示。表12(甲醇溶液中各组分组成的变化)*酯基转移时的损失**洗涤结晶时的损失***由洗涤等引起的损失用上述三个循环方法得到总计16.2g(2R，3S)-MPGM。在每个循环中得到的(2R，3S)-MPGM的纯度和旋光纯度分别是98％或更大和97％或更大。由于(2S，3R)-MPGM可以比使用的酯化合物(2S，3R)-MPGnBu更大的摩尔量以结晶形式得到，如果这样得到的(2S，3R)-MPGM被化学酯基转移为仅在下一循环中需要量的(2S，3R)-MPGnBu，则还可能得到高纯度的(2S，3R)-MPGM。实施例11在2升装有搅拌器的反应器中，将187g(0.9mol)(2RS，3SR)-MPGM(93.5g(2R，3S)-MPGM和93.5g(2S，3R)-MPGM]溶于720ml二甲苯和57.6ml(0.9mol)正丁醇的混合溶剂中。将3.0g在下述的参考实施例1-(2-a)中得到的硅藻土固定的酯酶(向其中预先加入0.81ml纯化水，其橄榄油水解活性为2.5×104U)悬浮于得到的溶液中。在15mmHg的减压下在30℃搅拌溶液4小时。反应混合物用HPLC分析。发现产物由91.6g(2R，3S)-MPGM，24.3g(2S，3R)-MPGM和83.2g(2S，3R)-MPGnBu组成。用过滤从反应混合物中除去硅藻土固定的酯酶，滤液在减压下在温度60-70℃下浓缩，得到油状剩余物。向剩余物中加入150ml甲醇，在搅拌下冷却到-10℃，在该温度下再搅拌30分钟。用过滤得到结晶，用-10℃甲醇洗涤，真空干燥，得到82.3g(2R，3S)-MPGM。合并母液和洗涤液，用HPLC分析。发现混合物含有9.1g(2R，3S)-MPGM，24.1g(2S，3R)-MPGM和83.0g(2S，3R)-MPGnBu。参考实施例1(1)将18升pH7.0的液体培养基加入30升的发酵缸中，所述培养基含有1％糊精，0.2％硫酸铵，2％MeastS(AsahiBreweries，Ltd.制造)，0.2％磷酸二氢钾，0.05％硫酸镁，0.001％硫酸铁，1.5％(w/v)脱水山梨糖醇三油酸酯表面活性剂(RheodolSP-030，KaoCorporation制造)和0.2％(v/v)聚亚烷基二醇衍生物表面活性剂(商标Kararin102，SanyoChemicalIndustries，Ltd.制造)。在培养基灭菌后，将通过在与上述相同的培养基中在27.5℃用往复震荡器预先培养20小时得到的200ml粘质沙雷氏菌Sr41FERMBP-487的预培养液接种在灭菌的培养基中。当在0.33vvm，0.5kg/cm2·G和300r.p.m.条件下向培养基中连续加入1.5％L-脯氨酸时混合物在25℃培养28小时。离心分离10升培养液以除去细胞，用吸附树脂SP207(MitsubishiChemicalCorporation制造)从上清液中除去杂质。用超滤膜(SLPl053，AsahiChemicalIndustryCo.，Ltd制造)将得到的上清液浓缩至1升，得到具有橄榄油水解活性1.0×104U/ml的酯酶浓缩液1080ml。(2-a)在将30ml在(1)中得到的浓缩酶液体注入500ml茄形烧瓶中的30g硅藻土(美国加利福尼亚CeliteCorporation制造)中后，均匀混合，在外部温度30℃和减压下用旋转蒸发器干燥，得到36.5g活性为8.2U/mg的硅藻土固定的酯酶。(2-b)将1,000ml(1)中得到的浓缩的酶液体冻干，得到54g具有橄榄油水解活性为1.96×l05U/g的酯酶。参考实施例2将225ml2％聚乙烯醇(商标Poval117，KurarayCo.，Ltd.制造)水溶液和75ml橄榄油的混合物在温度5-10℃以14,500r.p.m.搅拌10分钟，形成乳状液。然后，将5.0ml得到的橄榄油乳状液和4.0ml0.25Mtris-HCl缓冲液(pH8.0，含有2.5mM氯化钙)在37℃预热10分钟，向其中加入1ml酶液体。在37℃进行反应20分钟，向反应混合物中加入20ml丙酮-乙醇(1∶1)混合溶剂以终止反应。反应混合物用0.05NNaOH溶液滴定，用酚酞作指示剂。用上述方法每分钟释放1μmol脂肪酸的酶量定义为1单位(U)。如上所述，根据本发明，从含有反式-3-取代的缩水甘油酸酯的旋光异构体混合物的溶液中可以结晶出高纯度的所需的旋光异构体，直到母液中所需的旋光异构体的浓度与常规方法比较是很低的程度。另外，在不对称和酶催化酯基转移外消旋的反式-3-取代的缩水甘油酸酯后，从反应混合物中可以结晶出所需的高纯度的旋光异构体，直到母液中所需的旋光异构体的浓度与常规方法比较是很低的程度。权利要求1.制备式(I)的旋光的反式-3-取代的缩水甘油酸酯化合物的方法，式中，A环是取代的或未取代的苯环，R1是酯基，该方法包括制备酯化合物(I)的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位置上不对称碳原子存在，(A)和(B)都为旋光异构体，(B’)和异构体(B)的不同仅在于酯基R1，从溶液中结晶旋光异构体(A)，由于酯化合物(B’)的存在，能达到旋光异构体(A)结晶而旋光异构体(B)不沉淀的程度，但是如果酯化合物(B’)不存在，则旋光异构体(B)将会沉淀，并分离出旋光异构体(A)的结晶。2.根据权利要求1的方法，其中溶液还含有少量酯化合物(A’)，其与异构体(A)的不同仅在于酯基R1，并具有与酯化合物(B’)相同的酯基。3.根据权利要求1或2的方法，其中异构体(B)的酯基是甲基或乙基，而酯化合物(B’)的酯基是选自下列的基(a)含有比异构体(B)的酯基R1的碳原子更多碳原子和可以被卤原子取代的直链或支链烷基，(b)可以被卤原子取代的烷氧基烷基，和(c)可以被直链或支链低级烷基，直链或支链低级烷氧基或卤原子取代的芳烷基。4.根据权利要求1的方法，其中在溶液中异构体(A)/异构体(B)的摩尔比是4/6-10/1，而溶液中酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比是5/3-10/1。5.根据权利要求2的方法，其中酯化合物(A’)/异构体(A)的摩尔比最多是酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比的9/35。6.根据权利要求1-5中任一的方法，其中溶液的溶剂是选自下列的一种溶剂醇溶剂、醚溶剂、可被卤原子取代的芳族烃溶剂，可被卤原子取代的脂族烃溶剂和酯溶剂。7.根据权利要求1-6中任一的方法，其中在结晶前溶液中异构体(A)的浓度是0.5-4摩尔/升，结晶在温度-30至+15℃下进行。8.根据权利要求1-7中任一的方法，其中进行结晶的溶液是通过在具有立体选择性酯基转移能力的酶存在下用醇将异构体(A)和(B)溶液中的旋光异构体(B)酯基转移成酯化合物(B’)得到的溶液。9.根据权利要求8的方法，其中在酯基转移反应的转化率是10％时测定的酶的E-值至少为20。10.根据权利要求8的方法，其中酯基转移进行到酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比是5/3-10/1。11.根据权利要求1-10中任一的方法，其中异构体(A)具有(2R，3S)的绝对构型，异构体(B)具有(2S，3R)的绝对构型。12.根据权利要求1-11中任一的方法，其中A环是4-甲氧基苯基，异构体(B)的酯基是甲基，酯化合物(B’)的酯基是正丁基。13.制备式(I)的反式-3-取代的缩水甘油酸酯化合物的旋光异构体的方法，式中，A环是取代的或未取代的苯环，R1是酯基，该方法包括在醇和具有立体选择性的酯基转移能力的酶存在下，使酯化合物(I)的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)的混合物，由于在2-和3-位上不对称碳的存在，二者都是旋光异构体，进行酯基转移，从而用醇使旋光异构体(B)酯基转移产生酯化合物(B’)直到酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比落到13/7-7.8/1的范围内，酯化合物(B’)与异构体(B)的区别仅在于酯基R1，从所得到的含有异构体(A)，未酯基转移的异构体(B)和酯化合物(B’)的溶液中结晶出旋光异构体(A)，并分离出异构体(A)，其旋光纯度至少为99％，以异构体(A)的初始量为基准，收率至少为75％。14.根据权利要求13的方法，其中在酯基转移反应的转化率是10％时测定的酶的E-值至少为20。15.根据权利要求13或14的方法，其中异构体(A)具有(2R，3S)的绝对构型，异构体(B)具有(2S，3R)的绝对构型。16.根据权利要求13的方法，其中酶是由粘质沙雷氏菌产生的酯酶，酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比是2/1-8/2，异构体(A)的收率至少是80％。17.根据权利要求13-16中任一的方法，其中A环是4-甲氧基苯基，异构体(B)的酯基是甲基，酯化合物(B’)的酯基是正丁基。18.分离式(I)的反式-3-取代的缩水甘油酸酯化合物的各种旋光异构体的方法，式中A环是取代的或未取代的苯环，R1是酯基，该方法包括(a)制备含有酯化合物(I)的一种旋光异构体(A)和另一种旋光异构体(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位上不对称碳原子存在，(A)和(B)都是旋光异构体，酯化合物(B’)与异构体(B)的不同仅在于酯基R1，(b)由于酯化合物(B’)的存在，从溶液中结晶旋光异构体(A)直到旋光异构体(A)被结晶而旋光异构体(B)不沉淀的程度，但是如果酯化合物(B’)不存在，则旋光异构体(B)将会沉淀，(c)分离旋光异构体(A)的结晶，(d)将与残余的旋光异构体(A)和(B)一起包含在所得母液中的酯化合物(B’)进行化学酯基转移，以使酯化合物(B’)转化为旋光异构体(B)，然后结晶和分离异构体(B)，(e)向所得母液中加入外消旋的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)，以提供进行步骤(b)的结晶的溶液，并(f)按顺序重复上述步骤(b)，(c)，(d)和(e)。19.根据权利要求18的方法，其中在步骤(d)中，将酯化合物(A’)加入得到的母液中，酯化合物(A’)与异构体(A)的区别仅在于酯基R1并具有与异构体(B’)相同的酯基，在步骤(e)中，将加入的酯化合物(A’)化学酯基转移，得到旋光异构体(A)。20.根据权利要求18或19的方法，其中步骤(a)中的溶液还含有少量酯化合物(A’)，酯化合物(A’)与异构体(A)的区别仅在于酯基R1并具有与酯化合物(B’)相同的酯基。21.根据权利要求18，19或20的方法，其中异构体(B)的酯基是甲基或乙基，酯化合物(B’)的酯基是选自下列的基含有比异构体B的酯基的碳原子更多碳原子且可以被卤原子取代的直链或支链烷基，可以被卤原子取代的烷氧基烷基，和可以被直链或支链低级烷基，直链或支链低级烷氧基或卤原子取代的芳烷基。22.根据权利要求18的方法，其中在步骤(a)中的溶液中，异构体(A)/异构体(B)的摩尔比是4/6-10/1，酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比是5/3-10/1。23.根据权利要求19的方法，其中在步骤(a)中的溶液中，异构体(A)/异构体(B)的摩尔比是4/6-10/1，酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比是5/3-10/1，步骤(d)中加入的酯化合物(A’)的量应使得到的溶液中异构体(A’)/异构体(A)的摩尔比是5/3-10/1。24.根据权利要求20的方法，其中在步骤(a)中的溶液中，酯化合物(A’)/异构体(A)的摩尔比最多是酯化合物(B’)/异构体(B)的摩尔比的9/35。25.根据权利要求18-24中任一的方法，其中使用的溶剂是选自下列的一种溶剂醇溶剂、醚溶剂、可以被卤原子取代的芳族烃溶剂、可以被卤原子取代的脂族烃溶剂，和酯溶剂。26.根据权利要求18-25中任一的方法，其中在步骤(a)中在结晶异构体(A)之前的溶液含有的异构体(A)的浓度是0.5-4摩尔/升，异构体(A)的结晶在温度-30至+15℃进行。27.制备式(II)的(2S，3S)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或其可药用盐的方法，式中A环和B环独立地是取代的或未取代的苯环，R2是2-(二甲基氨基)乙基或下式的基其改进包括用在权利要求1-26中任一方法中得到的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的(2R，3S)-异构体，即旋光异构体A，作为起始物料。28.根据权利要求27的方法，其中A环是4-甲氧基苯基，B环是未取代的苯环，R2是2-(二甲基氨基)乙基。29.制备式(III)的(2R，3R)-1，5-苯并硫杂吖庚因衍生物或其可药用的盐的方法，式中A环和B环独立地是取代的或未取代的苯环，其改进包括用在权利要求1-26中任一方法中得到的反式-3-取代的缩水甘油酸酯(I)的(2S，3R)-异构体，即旋光异构体(A)，作为起始物料。30.制备下式的旋光的苏-硝基羧酸化合物的方法，式中A环和B环独立地是取代的或未取代的苯环，*表示不对称碳原子，其改进包括用在权利要求1-26中任一方法中得到的旋光异构体(A)作为起始物料。全文摘要制备式(Ⅰ)的旋光的反式－3－取代的缩水甘油酸酯化合物的方法,式中,A环是取代或未取代苯环,R文档编号C07C319/14GK1199733SQ98108069公开日1998年11月25日申请日期1998年2月26日优先权日1997年2月27日发明者古井正胜,古谷敏行申请人:田边制药株式会社