专利名称：食用菌提取核酸的方法
技术领域：
本发明涉及食用菌，是一种在食用菌中提取核酸的方法。
国际研究公认核酸具有抗肿瘤、降血压、降血脂、修复基因，改变基因位点及使基因重组等作用。目前，核酸的提取一般采用绵羊、牛胸腺等，提取这种具有生物活性的核酸，主要用于分子生物学研究。有报道商品名为“珍奥”的核酸，是在植物内提取，但由于其提取率很低，一般为1％左右，成本极高。本发明经检索，未发现采用食用菌提取核酸的公开文献。
本发明的目的是，提供一种采用食用菌提取核酸的方法，使其提取率可达8-30％左右，降低核酸的生产成本。
本发明为完成上述发明目的，提供一种在食用菌中提取核酸的方法，本方法采用的食用菌，可以是食用菌子实体，也可以是食用菌发酵液，采用食用菌发酵液的提取方法是，用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，再进行发酵培养，将发酵液的温度加热到60-100℃，终止发酵后，在发酵液中加入0.1-0.2N的NaOH，使其最终浓度为1％-2％，控制温度50-100℃，维持1-2小时，经泵压将发酵液放到料槽中，经板框压滤，滤渣用蒸馏水冲洗，滤液混合备用，然后将滤液减压浓缩，使之体积为原滤液体积的1/5-1/10，再加4倍体积的95％乙醇进行醇析，调整PH值，使其在2-3之间，再进行离心，得到沉淀物核酸。采用食用菌子实体粉碎，加入5-10倍蒸馏水，加热至60-100℃，过滤，将滤渣加入蒸馏水，加热至60-100℃，保持1-2小时后过滤，将滤液混合浓缩至原液的1/3-1/5，加入4-5倍的乙醇，调整PH值为1.5-3.5保持24-36小时，过滤后得到核酸。所述的斜面菌种组份是，淀粉150-250g，麦麸30-60g，蔗糖10-20g，葡萄糖3-10g，琼脂15-25g，水1000毫升。所述一级种子培养，二级种子培养及三级种子培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，蔗糖0.5-2％，葡萄糖0.5-2％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％。发酵培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％，豆油适量。一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养的发酵条件是，搅拌速度120-150r/min，通气量1∶0.5-v/v.min，培养温度25-30℃，培养时间，5-7天，接种量1-5％，罐压为0.3-0.5kg/cm2。发酵培养的发酵条件是搅拌速度150-220r/min，通气量1∶0.5-1∶1v/v.min，培养温度20-30℃，培养时间7-12天，接种量10-15％，罐压0.3-0.5kg/cm2。
本发明的贡献在于，提供了一种采用食用菌提取核酸的方法。采用本发明的方法在食用菌中提取核酸，其优点在于其提取率可达8-30％左右，采用发酵液提取可达到30％左右，采用子实体提取可达到8-10％，提取率比在已有植物中提取大幅度提高，大幅度降低了核酸的生产成本，为增强体质，增强免疫功能提供了核酸的可食用性。
本发明采用发酵液提取核酸的实施例将筛选后的菌种加入1000毫升水，并加入马铃薯液体200g，麦麸液体60g(也可以只采用马铃薯或麦麸)，蔗糖14g，葡萄糖3g(也可在此两种糖中任选一种)，琼脂22g，将PH值保持自然，然后进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，这三级种子培养的组份是，玉米淀粉0.8％，蛋白胨(也可采用硫酸0.1-0.3％铵)，KH2PO40.15％，MgSO40.1％，在培养罐中加入一定量的水，一般根据罐的容量决定，通常是罐容量的60％。上述三种种子培养的发酵条件是搅拌速度120r/min，通气量1∶1v/v.min，培养温度25℃，培养时间7天，接种量4％，罐压0.5kg/cm2。再进行发酵培养，其组份是，玉米淀粉1％，蛋白胨0.2％，硫酸铵0.1％，KH2PO40.1％，MgSO40.1％，再加入适量豆油(也可加入菜子油替代)，便于消沫，PH值保持自然。此时的发酵条件是，搅拌速度200r/min，通气量1∶0.5v/v.min，培养温度25℃，培养时间10天，接种量10％，罐压0.3kg/cm2，当发酵终止后，将发酵液加热到70℃，并加入0.2N的NaOH，使其最终浓度为2％，搅拌速度为750r/min，维持2小时，然后经泵压将发酵液放到料槽中经板框压滤，滤渣用蒸馏水冲洗，滤液混合备用，然后将滤液减压浓缩，使体积为原滤液的1/5，再加4倍体积的95％乙醇进行，用浓盐酸调整PH值为2，进行离心，得到沉淀物核酸。
本发明采用食用菌子实体提取核酸，实施例将食用菌干品粉碎成20目，加入8倍蒸馏水，加热至80℃，进行过滤，将滤渣加入2倍蒸馏水，加热至75℃，保持1小时后过滤，将滤液混合浓缩至原液的1/5，加入4倍的乙醇，调整PH值为2，保持24-36小时，过滤后得到核酸。用本发明方法提取的核酸，可用于制作口服液或胶囊等，供人们日常饮用。
权利要求
1.食用菌提取核酸的方法，其特征在于本方法采用的食用菌，可以是食用菌子实体，也可以是食用菌发酵液，采用食用菌发酵液的提取方法是，用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，再进行发酵培养，将发酵液的温度加热到60-100℃，终止发酵后，在发酵液中加入0.1-0.2N的NaOH，使其最终浓度为1％-2％，控制温度50-100℃，维持1-2小时，经泵压将发酵液放到料槽中，经板框压滤，滤渣用蒸馏水冲洗，滤液混合备用，然后将滤液减压浓缩，使之体积为原滤液体积的1/5-1/10，再加4倍体积的95％乙醇进行醇析，调整PH值，使其在2-3之间，再进行离心，得到沉淀物核酸。
2.根据权利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于采用食用菌子实体粉碎，加入5-10倍蒸馏水，加热至60-100℃，过滤，将滤渣加入蒸馏水，加热至60-100℃，保持1-2小时后过滤，将滤液混合浓缩至原液的1/3-1/5，加入4-5倍的乙醇，调整PH值为1.5-3.5，保持24-36小时，过滤后得到核酸。
3.根据权利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于所述的斜面菌种组份是，淀粉150-250g，麦麸30-60g，蔗糖10-20g，葡萄糖3-10g，琼脂15-25g，水1000毫升。
4.根据权利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于所述一级种子培养，二级种子培养及三级种子培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，蔗糖0.5-2％，葡萄糖0.5-2％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％。
5.根据权利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于发酵培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％，豆油适量。
6.根据权利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养的发酵条件是，搅拌速度120-150r/min，通气量1∶0.5-v/v.min，培养温度25-30℃，培养时间，5-7天，接种量1-5％，罐压为0.3-0.5kg/cm2。
7.根据权利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于发酵培养的发酵条件是搅拌速度150-220r/min，通气量1∶0.5-1∶1v/v.min，培养温度20-30℃，培养时间7-12天，接种量10-15％，罐压0.3-0.5kg/cm2。
全文摘要
本发明涉及食用菌,是一种在食用菌中提取核酸的方法。本方法采用的食用菌,可以是食用菌子实体,也可以是食用菌发酵液,其提取率可达8—30%左右,采用发酵液提取可达到30%左右,采用子实体提取可达到8—10%,提取率比在已有植物中提取大幅度提高,大幅度降低了核酸的生产成本,为增强体质,增强免疫功能提供了核酸的可食用性。
文档编号C07H21/00GK1297893SQ9911257
公开日2001年6月6日 申请日期1999年11月26日 优先权日1999年11月26日
发明者宋爱荣 申请人:莱阳农学院