具有改进的弹性的组织粘合剂的制作方法

专利名称：：具有改进的弹性的组织粘合剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及医学粘合剂领域。更明确的，本发明涉及一种具有改进弹性的聚合物组织粘合剂，其是通过将氧化多糖与可水溶的、扩链多臂聚醚胺反应来形成的。
背景技术：
：组织粘合剂具有多个潜在的医学用途，包括局部伤口闭合、在体内手术搡作中作为缝合线或钉合钉的补充或者替代、合成高嵌体或者镶嵌物与角膜的粘合、药物释放装置、和作为抗粘障碍物来防止术后粘连。常规的组织粘合剂通常不适于广泛的粘合应用中。例如，氰基丙烯酸酯基粘合剂已经被用于局部的伤口闭合，但是有毒降解产物的释放限制了它们用于体内应用。纤维蛋白基粘合剂是緩慢固化的，具有差的机械强度，并且具有病毒感染的危险。此外，纤维蛋白基粘合剂不能与体内组织共价结合。已经发展了几种类型的水凝胶组织粘合剂，其具有提高的粘合性和结合性，并且是无毒的。这些水凝胶通常是通过将具有亲核基团的成分与具有亲电子基团的成分(该成分能够与第一个成分的亲核基团进行反应)进行反应，通过共价键合形成交联的网状物而形成的。但是，这些水凝胶典型的是过快的溶胀或者溶解掉，或者缺少足够的粘接性或者机械强度，由此降低了它们作为手术粘合剂的效力。水凝胶组织粘合剂的例子由Sehl等人描述在美国专利申请公开No.2003/0119985中。该粘合剂是通过将亲水聚合物例如胶原质与具有亲核基团的可交联的成分和具有亲电子基团的可交联成分进行反应而形成的。该可交联的成分包括不同的聚乙二醇活化型。Goldmann等人在WO03/035122中描述了一种水凝胶组织粘合剂，其通过将壳聚糖或者改性的带有氨基基团的聚乙烯醇与氧化多糖例如氧化的右旋糖苷进行反应而形成。这些公开的内容都没有描述通过将氧化多糖与可水溶的、多臂聚醚胺反应而形成的聚合物粘合剂。因此，要解决的问题是提供一种具有提高性能的组织粘合剂材料，其用于手术操作以及其它的医学应用中。本申请人已经通过发现了一种聚合物组织粘合剂而解决了所述的问题，该粘合剂是通过将氧化多糖与可水溶的、多臂聚醚胺反应来形成的，该多臂聚醚胺公开于美国专利申请No.ll/244756(申请日2005年10月6日并作为US2006/0078536A1而公开)中。本申请人在此进一步通过发现一种具有改进的弹性和提高的稳定性的组织粘合剂而解决了所述的问题，该粘合剂衍生自氧化多糖与本发明的扩链聚胺产物的反应。发明概述本发明的一种实施方案是一种通过下面的方法制得的物质合成物(compositionofmatter),所述的方法包含任选在第一反应溶剂中，将至少一种具有至少三个臂的多臂聚醚胺与至少一种下式的双官能交联剂进行反应X、R-X2该多臂聚醚胺与该双官能交联剂的摩尔比是大约4:l-大约50:1，由此形成扩链聚胺产物；并且在其中(i)该多臂聚醚胺的至少三个臂是用伯胺基团封端的；(ii)该多臂聚醚胺具有大约450-大约200000道尔顿的重均分子量；(iii)X、R-XZ是一种聚合物，其具有大约2000-大约20000道尔顿的重均分子量；(iv)R是二价聚合物基团；(v)X1和X2是能够与伯胺基团反应形成碳-氮键的基团；条件是该扩链聚胺产物的特征在于2(TC时其在水中的溶解度至少是20wt%。本发明另外一种实施方案是一种通过下面的方法制得的物质合成物，所述的方法包含步骤6a)任选的在第二反应溶剂中，将至少一种具有至少三个臂和具有至少三个亲电子端基的多臂聚醚，与下式的伯二胺交联剂进行反应NH2-R2-NH2该多臂聚醚与该伯二胺交联剂的摩尔比是大约4:l-大约50:1,由此形成具有残留亲电子端基的扩链聚合物；和，b)任选的在第三反应溶剂中处理所述的扩链聚合物，目的是将残留的亲电子端基转化为胺端基来提供扩链聚胺产物；其中(i)所述的多臂聚醚至少三个臂是用亲电子端基封端的，该亲电子端基能够与伯胺反应形成碳-氮键；(ii)该多臂聚醚具有大约450-大约200000道尔顿的重均分子量；(111)W是二价聚合物基团；(iv)NH2-R、NH2是一种聚合物，其具有大约2000-大约20000道尔顿的重均分子量；条件是该扩链聚胺产物的特征在于20。C时其在水中的溶解度至少是20wt%。衍生自氧化多糖与本发明的扩链聚胺产物反应的组织粘合剂表现出在下面的一种或多种属性中的提高粘合性和结合性，在体温时易于交联性；保持初始尺的稳定性，在水性环境中的稳定性，对细胞的无毒性和不引起组织发炎。这些提高通常在此通过增加弹性来实现，其提供与基础组织更大的相容性和稳定性。图1表示在本发明中有用的双官能交联剂的合成路线。图2表示在本发明中有用的具有亲电子端基的多臂聚醚的合成路线。发明详述本发明涉及一种在提供改进的组织粘合剂中有用的扩链聚胺产物，该粘合剂通过将氧化多糖与可水溶的含有多臂聚醚胺的扩链聚胺产物反应来形成，其中多臂聚醚胺的至少三个臂是通过伯胺基团封端的。该聚合物粘合剂作为医学和兽医应用中的粘合剂是有用的，包括但不限于局部伤口闭合，和手术操作例如肠内吻合、脉管吻合、组织修复、止血和眼科操作。此外，该聚合物粘合剂可以用于给药、抗粘连应用和作为膨胀剂(bulkingagent)来治疗小便失禁。下面的定义用于此处，并且作为参考来解释权利要求和说明书。术语"氧化多糖"和"多糖二醛"在此交替使用来表示一种多糖，其已经与氧化剂反应来将醛基？1入到分子中。术语"当量/酪基，，指的是氧化多糖的分子量除以引入到该分子中的醛基数。此处术语聚环氧乙烷(PEO)和聚乙二醇(PEG)是同义的。此处术语聚环氧丙烷(PPO)和聚丙二醇(PPG)是同义的。作为此处使用的，术语"包含"、"包含着"、"包括"、"包括着"、"具有"、"具有着"或者其任何的其它变化，目的是覆盖非排除的内容。例如，一种包含一列要素的加工、方法、制品或者设备不必仅仅局限于这些要素，而是可以包括其它没有明确列出的要素或者这样加工、方法、制品或者设备所固有的要素。此外，除非有明确的相反指示，否则"或者"指的是一种包含的"或者"并且不是排除的"或者"。例如，条件A或者B满足下面的任何一个A是真的(或者存在)和B是假的(或者不存在)，A是假的(或者不存在)和B是真的(或者存在)，和A和B二者都是真的(或者存在)。本发明的第一种实施方案是一种通过下面的方法制得的物质合成物，所述的方法包含任选在第一反应溶剂中，将至少一种具有至少三个臂的多臂聚醚胺与至少一种下式的双官能交联剂进行反应X、R-X2该至少一种多臂聚醚胺与该双官能交联剂的摩尔比是大约4:l-大约50:1，由此形成扩《连聚胺产物；在其中(i)该多臂聚醚胺的至少三个臂是用伯胺基团封端的；(ii)该多臂聚醚胺具有大约450-大约200000道尔顿的重均分子量；(111)X)-R-XZ是一种聚合物，其具有大约2000-大约20000道尔顿的重均分子量；(iv)R是二价聚合物基团；(v)X1和X2是能够与伯胺基团反应形成碳-氮键的基团；条件是该扩链聚胺产物的特征在于2(TC时其在水中的溶解度至少是20wt%。术语"多臂聚醚胺"指的是接枝的聚醚，其具有通过伯胺基团封端的至少三个臂，其是可水溶的并且能够在水溶液中与第二反应物发生反应。多臂聚醚胺是具有重复单元[-0-113]-的聚醚，其中W是具有2-5个碳原子的亚烃基基团。术语"亚烃基基团"指的是一种二价基团，其是通过从经中除去两个氬原子而形成的，每一个氬原子来自两个不同的碳原子的每一个。在本发明中有用的多臂聚醚胺包括树枝状的、梳状的和星型支化的和超支化的聚醚，其中至少三个臂是通过伯胺基团封端的。该多臂聚醚胺具有大约450-大约200000道尔顿，优选大约2000-大约40000道尔顿的重均分子量(Mw)。可水溶的多臂聚醚胺的合适的例子包括但不限于氨基封端的星型、树枝状的、梳状的聚环氧乙烷；氨基封端的星型、树枝状的、梳状的聚环氧丙烷；氨基封端的星型、树枝状的、梳状的聚环氧乙烷-聚环氧丙烷共聚物;和在商标名Jeffamine三胺下由HuntsmanLLC.(休斯敦，得克萨斯州)销售的聚氧乙烯三胺。星型聚环氧乙烷胺的例子包括但不限于不同的多臂聚乙二醇胺，获自NektarTransformingTherapeutics(Huntsville，AL),和用伯胺封端的具有3、4、6或者8个臂的星型聚乙二醇(此处分别称作3、4、6或者8个臂的PEG胺)。一种8臂PEG胺(Mwl0000)获自NektarTransformingTherapeutics。合适的Jeffamine⑧三胺的例子包括但不限于JeffamineT-403(CASNo.39423-51-3),JeffamineT-3000(CASNo.64852-22-8)和JeffamineT-5000(CASNo.64852-22-8)。在一种优选的实施方案中，可水溶的多臂聚醚胺是一种八臂PEG,其具有八个由伯胺基团封端的臂并且具有大约9000-大约11000道尔顿的重均分子量。这些多臂聚醚胺是上述市售的，或者可以使用本领域已知的方法来制备。例如Larkin等人(美国专利No.4766245)描述了通过在氬气和阮内镍/铝催化剂存在下将三臂和八臂聚(丙二醇)与氨反应而转化为相应的聚胺。Nho等人(美国专利申请公开No.2004/0225097)描述了通过将多臂PEG多元醇进行曱苯石黄酰化，随后与氨水反应10天而转化为它们相应的多臂PEG胺。此外，B加krnann等人(Makromol.Chem.l82:1379-1384(1981))描述了经由两个步骤反应将线性PEG转化为相应的二胺，所述的反应包含将PEG与亚石危酰溴反应来形成溴衍生物，随后与乙醇氨反应。一种优选的广泛用来制备多臂聚醚胺的方法公开在美国申请系列No.ll/732952(申请日2007年04月05曰)中，该方法具有端基到胺的高转化率。所述的方法包含将亚硫酰氯与至少一种具有3-大约10个臂的多臂PEG多元醇反应来形成多臂PEG氯化物，多臂PEG多醇的至少大约95%的端羟基被转化为氯端基；从未反应的亚硫酰氯中分离该多臂PEG氯化物，并将该多臂PEG氯化物与氨水或者无水氨反应来形成一种反应产物，在其中至少大约95%的多臂PEG氯化物的氯端基被转化为胺端基。其它可用来制备多臂聚醚胺的方法由Merrill等人在美国专利No.5830986中和由Chang等人在WO97/30103中进行了描述。应当承认上述的多臂聚醚胺和多臂聚醚通常是具有臂长分布的，并且在某些情况中，具有不同数目臂的物种分布的多少异质的混合物。当多臂聚醚或者多臂聚醚胺具有带着不同数目臂的物种分布时，它可以以所述分布的平均臂数来称呼。例如，在一种实施方案中，多臂聚醚胺是一种8臂星型PEG胺，其包含了多臂星型PEG胺的混合物，一些具有小于8个的臂，而一些具有大于8个的臂；但是，混合物中的多臂星型PEG胺具有平均8个的臂。因此，此处用来称呼多臂聚醚和多臂聚醚胺的术语"8臂，，、"6臂"、"4臂"和"3臂"应当被解释为是一种具有臂长分布的，并且在某些情况中，是具有不同数目臂的物种分布的异质混合物，在该情况中，所述的臂数指的是混合物中的平均臂数。在本发明中有用的双官能交联剂是下式X'-R-X2并且是一种重均分子量为大约2000-大约20000道尔顿的聚合物。官能团X1和X2可以是任何的能够与伯胺基团反应来形成碳-氮键的基团。优选X1和乂2在任何具体的双官能交联剂中是相同的。优选X1和乂2选自-CHO,-C02H,-CC^R1,-NCO,-NCS,-COC1,-COBr,-COF,-OMs(其中Ms是曱烷磺酰基)，-OTs(其中，Ts是曱苯磺酰基)和-OTf(其中Tf是三氟曱烷磺酰基)，三氟乙磺酸酯(tresylate)(2,2，2-三氟乙烷石黄酸酯)，Cl,Br,I和缩水甘油醚；其中11是N-琥珀酰亚胺基，4-硝基苯基，2,4-二硝基苯基或者五氟苯基基团。特别优选的X'和X2基团是在亲核取代反应中已知的好的离去基团，包括选自-OMs，-OTs,-OTf,三氟乙磺酸酯，Cl,Br和I的这些基团。其它优选的X^口XS基团包括羧酸和反应性羧酸酯，其可以与伯胺基团偶合来形成酰胺联接；异氰酸酯，其可以与伯胺基团偶合来形成脲联接；醛，其可以与伯胺缩合来提供亚胺，并可以任选的转换为仲胺；和反应性环氧基团，例如缩水甘油醚，其可以与伯胺基团偶合来形成仲胺。R基团可以任何的二价聚合物基团，其当与X'和X^吉合时，落入所规定的双官能交联剂的分子量范围内。优选R是一种特征在于高亲水性的二价聚合物基团，目的是如果X'和XZ是羟基基团时，则相应的二醇HO-R-OH在20。C和38。C具有在水中至少lwtQ/。的溶解度。该二价聚合物基团R可以处于均聚物或者嵌段或无规共聚物的形式。这里共聚物指的是衍生自两种或多种重复单元的聚合物。优选R是衍生自一种或多种单体的重复单元的二价聚合物基团，所述的单体选自环氧乙烷，环氧丙烷，乙酸乙烯酯，乙烯醇，N-乙烯吡咯烷酮和氧杂环丁烷。用于本发明的优选的双官能交联剂X1-R-X2包含选自下面的二价聚合物基团R:环氧乙烷的二价均聚物；和环氧乙烷与环氧丙烷的二价嵌段和无规共聚物。在制备这些双官能交联剂中有用的羟端基聚合物是市售的。例如，名义分子量为2000、4000、6000和8000的聚乙二醇获自AldrichChemicalCo.。名义分子量为1850-14600的聚环氧乙烷和聚环氧丙烷三嵌段共聚物(PEG-PPG-PEG)在商标名PLURONIC⑧下获自BASF,MountOlive,NJ。用于本发明的双官能交联剂X、R-X2是通过公知的合成路线来获得的。例如，其中x'和x是曱磺酸酯、曱苯磺酸酯、三氟乙磺酸酯或者三氟曱磺酸酯的双官能交联剂可以通过在非质子溶剂例如二氯曱烷中，在碱例如三乙胺或者吡咬存在下，分别用甲烷磺酰基氯、甲苯磺酰基氯、2，2,2-三氟乙烷磺酰基氯和三氟甲烷磺酰基氯来处理相应的羟端基聚合物而制得。其中X!和XZ是氯化物或者溴化物的双官能交联剂可以通过在非质子溶剂例如曱苯中，分别用亚硫酰氯和亚硫酰溴来处理相应的羟端基聚合物而制得。可以在极性非质子溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中用碘化钾进一步处理所述的氯化物或者溴化物来提供相应的碘化物。本发明其它优选的双官能交联剂包括羧端基聚合物，其具有羧酸、羧酰卣或者反应性酯端基，选自环氧乙烷的均聚物和嵌段和环氧乙烷与环氧丙烷的无规共聚物。这些材料是通过按照图1描述的路线和Biickmann,A.F.等人,MakromolekulareChemie，182,1379-1384,(1981)中所述的方法来合成获得的。例如，轻端基PEG的羧甲基化可以通过下述进行在四氢呋喃(THF)中用萘基钠处理，随后用2-溴乙酸乙酯进行烷基化并水解该酯来提供式(Ia)的羧曱基封端的PEG。在另外一种路线中，羟端基PEG可以用碱和丙烯腈处理来提供迈克尔加成产物，随后通过腈的酸性水解来提供式(Ib)的羧乙基封端的PEG。在另外一种路线中，用甲磺酸酯，甲苯磺酸酯，三氟乙磺酸酯，三氟甲磺酸酯，氯化物，溴化物或者碘化物封端的PEG可以用氨在密封容器中处理来产生胺封端的PEG。作为示例，该胺封端的PEG可以用琥珀酸酐处理来转化为羧基封端的PEG,以产生羧基封端的PEG(IIa)。在这个次序中有用的其它优选的酸酐包括戊二酸酸酐，己二酸酸酐，己酸酸酐，马来酸酸酐和氧双乙酸酸酐。在另外一种^^线中，轻基封端的PEG和胺封端的PEG可以使用类似于由Zalipsky等人在Reac.Polym.(1994)22,243-258中所述的这些程序，分别用2-异氰酸根合乙酸乙酯来处理，随后通过酯水解来得到氨基甲酸酯联接的二酸(Ic)和酰亚胺联接的二酸(Id)。表1列出了几种在本发明中有用的羧基封端的PEG双官能交联剂。表l.No.式结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>式(Ia-d)和(Ila-e)的羧基衍生物可以进一步分别用亚硫酰氯或者亚硫酰溴处理来转化为酰基氯或者酰基溴。作为示例，羧基封端的PEG可以通过用二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基琥珀酰亚胺处理(Ila)来转化为反应性酯，以提供图1的式(Illa)的N-氧琥珀酰亚胺酯。许多其它的PEG封端的活化酯，包括4-硝基苯基，2,4-二硝基苯基或者五氟苯基可以以类似的方式，分别使用DCC和4-硝基苯酚、2,4-二硝基苯酚和五氟苯酚来制得。表2列出了几种在本发明中有用的活化的酯封端的PEG双官能交联剂。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>PEG二羧酸二酯是在商标名SUNBRIGHT下从NOF美国公司，WhitePlains,NY获得的，其分子量为3400-20000。这些作为N-羟基琥珀酰亚胺基(NHS)酯活化的市售产物包括PEG-二羧曱基NHS，PEG-琥珀酸NHS酯(IIIa),PEG-戊二酸氢NHS酯(IIIb),和PEG-己二酸氢NHS酯(IIId)。还可以获得PEG-二(对硝基苯基)碳酸酯。本发明的其他优选的双官能交联剂包括醛封端的聚合物，选自环氧乙烷的均聚物和环氧乙烷与环氧丙烷的嵌段和无规共聚物。例如，羟基封端的PEG可以在四氬呋喃(THF)中用萘基钠进行处理，随后用2-溴乙醛缩二乙醇进行烷基化并水解该缩醛来提供来提供乙醛封端的PEG。以类似的方式，3-溴丙醛缩二乙醇可以用来提供丙醛封端的PEG(A-PEG)。A-PEG的一种市售来源是SUNBRIGHTDE-050AL(MW=5000)。本发明其它优选的双官能交联剂包括异氰酸酯或者硫代异氰酸酯封端的聚合物，选自环氧乙烷的均聚物和环氧乙烷与环氧丙烷的嵌段和无规共聚物。例如，胺封端的PEG可以根据Greenwald等人(J.Med.Chem.(1999)42，3657-3667),用三光气进行处理。羟基封端的PEG可以根据下面的方案用过量的六亚甲基二异氰酸酯处理来提供异氰酸酯封端的PEG:HO-PEG-OH->^0:C:N-(CH2)6_No—PEG~0g—(CH2)rN:C:O0:C:N-(CH2)6—N:C:0过量过量的二异氰酸酯可以通过不同的方法除去，包括减压蒸发，或者使用非溶剂将该PEG聚合物从溶液中分级沉淀。其它可以用来以类似的方式改性羟基封端的PEG的二异氰酸酯包括但不限于亚乙基二异氰酸酯，四亚甲基二异氰酸酯和曱基五亚曱基二异氰酸酯。本发明其它优选的双官能交联剂包括用包括缩水甘油醚的反应性14环氧基团封端的聚合物，并选自环氧乙烷与环氧丙烷的均聚物和嵌段以及无规共聚物。在制备这些环氧双官能交联剂中有用的羟基封端的聚合物是上面公开的市售品。环氧双官能交联剂的合成可以根据下面的方案来艽成NaOHHO-PEG-OH綠醇-^>^^0-peg-0nv^<J其中X^口xa是不同官能团的杂双官能PEG作为本发明的双官能交联剂是有用的。含有杂双官能PEG的聚合物的制备描述于下面的几个论文中"Poly(ethyleneglycol)ChemistryandBiologicalApplications",丄MiltonHarris禾口SamuelZalipskyeds.,ACSSymposiumSeries.680,AmericanChemicalSociety,华盛顿DC(1997)。几种有用的杂双官能交联剂包括通过下面的方法所提供的那些交联剂根据下面的方案，使用类似于由Zalipsky等人，React.Polym.(1994),22，243-258所述的那些方法，从PEG单氯来合成的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>通过离子交换色谱法将中间体一元酸从同官能杂质中分离来提供纯净的杂双官能化合物(IVa-b)和(Va-b)。其它有用的杂双官能交联剂是通过由PEG丙醛(A-PEG-OH)合成来提供的，该PEG丙醛是在当3,3-二乙氧基丙基醇盐被用作环氧乙烷(EO)聚合引发剂时而获得的，所述的环氧乙烷(EO)的聚合是根据Nagasaki等人(BioconjugateChem.,(1995)6,231)所述的方法来进行的。A-PEG-OH是由NOF公司市售的，并且名义Mw为500-3000。醛杂双官能交联剂(其可以衍生自A-PEG-OH)包括但不限于通过下面的方案所合成的这些<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中A二3-丙醛本发明的衍生自双官能交联剂的扩链聚胺产物进一步的特征在于通过尺寸排阻色语法(SEC)所测定的Mw比用来制造该扩链聚胺产物的多臂聚醚胺(一种或多种)的Mw高出至少大约10%。本发明另外一种实施方案是一种通过下面的方法制得的物质合成物，所述的方法包含步骤a)任选的在第二反应溶剂中，将至少一种具有至少三个臂和具有至少三个亲电子端基的多臂聚醚，与下式的伯二胺交联剂进行反应NH2-R2-NH2该至少一种多臂聚醚与该伯二胺交联剂的摩尔比是大约4:l-大约50:1,由此形成具有残留亲电子端基的扩链聚合物；和b)任选的在第三反应溶剂中处理所述的扩链聚合物，目的是将残留的亲电子端基转化为胺端基来提供扩链聚胺产物；和其中(i)所述的多臂聚醚至少三个臂是用亲电子端基封端的，该亲电子端基能够与伯胺反应形成碳-氮键；(ii)该多臂聚醚具有大约450-大约200000道尔顿的重均分子量；(lii)W是二价聚合物基团；(iv)NH2-R2-NH2是一种聚合物，其具有大约2000-大约20000道尔顿的重均分子量；条件是该扩链聚胺产物的特征在于20。C时其在水中的溶解度至少是20wt%。在本发明的第二实施方案中有用的伯二胺交联剂是一种胺封端的聚合物，其具有大约2000-大约20000道尔顿的重均分子量。优选W是一种特征在于高亲水性的二价聚合物基团，目的是相应的二醇HO-R、OH在20。C和38。C具有在水中至少lwt。/。，优选至少3wt。/。的溶解度。该二价聚合物基团R2可以处于均聚物或者嵌段或无规共聚物的形式。优选W是衍生自一种或多种单体的重复单元的二价聚合物基团，所述的单体选自环氧乙烷，环氧丙烷，乙酸乙烯酯，乙烯醇，N-乙烯吡咯烷酮和氧杂环丁烷。用于本发明的优选的伯二胺交联剂包含选自下面的二价聚合物基团R:环氧乙烷的二价均聚物；和环氧乙烷与环氧丙烷的二价嵌段和无规共聚物。在制备伯二胺交联剂中有用的羟端基聚合物是如果上面所公开的市售品。该伯二胺交联剂可以使用图1中用于胺封端的PEG所示的路线来合成。例如，用亚硫酰溴处理PEG提供了溴封端的PEG,其可以进一步用氨处理来提供期望的伯二胺交联剂。包含了封端的氨丙基团，合适作为伯二胺交联剂的胺封端的PEG还可获自NOF公司，其M、.是3400-大约20000。术语"具有至少三个臂和具有至少三个亲电子端基的多臂聚醚"指的是支化的聚醚，具有至少三个用亲电子端基封端的臂，其可水溶的，并且能够与伯二胺交联剂进行反应。多臂聚醚是具有重复单元的[-0-R的聚醚，其中W是具有2-5个碳原子的亚烃基基团。术语"亚烃基基团"指的是一种二价基团，其是通过从烃中除去两个氢原子而形成的，每一个氬原子来自两个不同的碳原子的每一个。在本发明中有用的多臂聚醚包括树枝状的、梳状的和星型支化的和超支化的聚醚，其中至少三个臂是通过亲电子端基封端的。该多臂聚醚具有大约450-大约200000道尔顿，优选大约2000-大约40000道尔顿的重均分子量。具有至少三个臂和具有至少三个亲电子端基的多臂聚醚是如下所述市售的，或者可以使用本领域已知的方法来制备。例如，其中至少三个臂是用羟基基团封端的多臂聚乙二醇(PEG)是通过根据Merrill在J.B腿ater.Sci.PolymerEdn,5,第1-11页(1993)中的方法合成的。3、4、6和8臂星型PEG还可以/人7>司例如NektarTransformingTherapeutics;SunBio,Inc.,AnyangCity,韩国；NOFCorp.,日本东京；和JenKemTechnology美国，Allen,得克萨斯州来获得。多臂PEG可以使用亚硫酰溴和由Biickmann等人(Makromol.Chem.l82:1379-1384,1981)所述的方法来转化为具有亲电子端基的多臂聚醚。在另外一种优选的方法中，多臂PEG可以如上面所公开的，使用亚硫酰氯来转化为反应性氯化物。多臂PEG可以通过在非质子溶剂例如二氯甲烷中，在碱例如三乙胺或者吡啶存在下，分别用曱烷磺酰基氯、曱苯磺酰基氯、2,2,2-三氟乙烷磺酰基氯和三氟甲烷磺酰基氯来处理而转化为甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、三氟乙磺酸酯或者三氟甲磺酸酯。基封:的多臂PEG，其具有羧酸、羧酰卣或者反应:生羧酸酯々:基。这些材料是通过按照图2中所示的路线合成来获得的，其中多臂PEG-OH表示具有至少三个臂，优选4-8个的臂的多臂PEG,所述的臂是羟基基团封端的。在该路线中，基本上全部的端鞋基基团转化为所示的不同的衍生物。对于制备羧端基多臂PEG聚合物有用的不同的路线类似于图1中所述的用于双官能交联剂的那些路线。例如，作为示例，胺封端的多臂PEG可以用琥珀酸酐处理来转化为羧基封端的PEG,以提供羧基封端的多臂PEG(XIIa)。戊二酸酸肝、己酸酸酐、己二酸酸酐、马来酸酸酐和氧联双乙酸酸酐可以用以代替琥珀酸酐来产生多种羧基封端的多臂PEG。表3列出了几种在本发明中有用的羧基封端的多臂PEG。表3No.式结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>式(Xa-d)和(XIIa-e)的羧基封端的多臂PEG可以进一步分别用亚硫酰氯或者亚硫酰溴处理来转化为酰基氯或者酰基溴化物。作为示例，羧基封端的多臂PEG可以通过用二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基琥珀酰亚胺处理(XIIa)来进一步转化为反应性酯，以提供图2的式(XIIIa)的N-氧琥珀酰亚胺酯。许多其它的PEG封端的活化酯，包括4-硝基苯基，2，4-二硝基苯基或者五氟苯基可以以类似的方式，分别使用DCC和4-硝基苯酚、2，4-二硝基苯酚和五氟苯酚来制得。表4列出了作为本发明的双官能交联剂有用的几种活化的酯封端的多臂PEG。表4No.式结构(xme)多臂PEG-NH^^5j^C02—N^/卿g)(xnih〉(XIHi)多臂PEG-O多臂PEG-O'o多臂PEG-0~4r,co2oN〉o一些具有亲电子端基的多臂聚醚是市售的。例如，在SUNBRIGHT商标名下，NOF美国公司提供四臂PEG-四戊二酰基NHS活化酯，四臂PEG-四己酸NHS酯，四臂PEG四-(4-硝基苯基)碳酸酯，8臂PEG-八戊二酰基NHS和8-臂PEG-八(4-硝基苯基)碳酸酯。在本发明中有用的其他优选的具有亲电子端基的多臂聚醚包括醛封端的多臂PEG。例如，多臂PEG-OH可以在THF中用萘基钠进行处理，随后用2-溴乙醛缩二乙醇进行烷基化并水解该缩醛来提供来提供乙醛封端的多臂PEG。以类似的方式，3-溴丙醛缩二乙醇可以用来提供丙搭封端的多臂PEG。在一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基选自-OMs，-OTs,-OTf，三氟乙磺酸酯，CI,Br和I;并且步骤(b)包含将扩链聚合物与足够的氨反应来提供扩链聚胺产物。用于这种实施方案的一种优选的第三反应溶剂选自Ci-C6脂肪族醇，并且最优选的溶剂是乙醇。在这种实施方案以及此处讨论的全部其它实施方案中，所述的扩链聚胺产物包括用碱完全中和的产物、用碱部分中和的产物、或者被完全质子化形成铵盐。该扩链聚胺产物的中和程度是衍生它的溶液的pH的函数，并且无论是否通过渗析或者其它清洗手段除去盐，其全部都落入本发明的范围内。例如，如果期望这样，则扩链聚胺产物可以有过量很多的氨存在，并且通过渗析的进一步的处理会基本上除去全部的铵盐副产物。在另外一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基选自-OMs，-OTs，-OTf,三氟乙磺酸酯，CI，Br和I;并且步骤(b)包含步骤(i)将扩链聚合物与碱金属叠氮化物反应来提供扩链的叠氮基聚合物；和(ii)将该扩链叠氮基聚合物用还原剂还原来提供扩链聚胺产物。还原剂可以是任何的一种或多种已知的在将有机叠氮化物转化为伯胺中有用的还原剂，包括选自下面的这些氢和选自Pt,Pd，Pt02,PdCl2,和阮内镍的金属催化剂；三苯基膦；氢化铝锂；硼氢化物，其选自硼氢化钠，硼氢化锌和氨基硼氢化锂，其中所述的胺选自二乙胺，二异丙胺，吡咯烷，哌啶和吗啉；金属和金属盐，其选自锌和锡(II)的氯化物；和甲酸铵。用于步骤(i)的优选的第三反应溶剂是极性非质子溶剂例如N,N-二曱基曱酰胺或者N，N-二曱基乙酰胺。碱金属叠氮化物优选是叠氮化钠。如果使用金属催化剂，则其优选是分散于木炭或者硅石中。金属催化剂或者其它残留的还原剂理想的是在还原步骤完成后除去。该实施方案能够提供基本上不含铵盐的扩链聚胺产物。在另外一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基是羧酸；步骤(a)进一步包含二酰亚胺脱水剂；并且步骤(b)包含霍夫曼(Hofmann)型重排，其包含下面的步骤(i)将扩链聚合物与足量的酰基卣试剂进行反应来提供扩链的酰基囟聚合物；(ii)将该扩链的酰基卣聚合物与足够的氨反应来提供扩链的伯酰胺聚合物；和(iii)将该扩链伯酰胺聚合物与足够的活性卣素源和碱金属氢氧化物反应来提供扩链聚胺产物；如下面的方案所示o(XHa)多臂PEG-NHo1.SOCl2V2.NH3O'多臂PEG-NH^v^v^A^,uO1.NaOCLNaOH多臂PEG-NHNH2O21在这种实施方案中，步骤(a)所用的二酰亚胺脱水剂优选是二环己基碳二亚胺。在步骤(l)中，酰基卣试剂是任何的酰基氯，其典型的用于将羧酸转化为狻酰氯，并且优选选自亚好u酰氯，亚石危酰溴，草酰氯和三氯氧化磷；并且步骤(i)典型的是在非质子溶剂例如曱苯、THF或者二氯曱烷中进行的。在步骤(iii)中，活性卤素源是任何的亲电子氯和溴源，并优选选自氯、溴、次氯酸钠、次溴酸钠、次氯酸钾、次溴酸钾、N-氯琥珀酰亚胺，和N-溴琥珀酰亚胺。其它亲电子氯和溴源例如(二乙酸基碘代)苯和[双(三氟乙酸基)碘代]苯同样是有用的。碱金属氢氧化物优选选自氢氧化钠、氬氧化钾和氢氧化锂。优选步骤(iii)是在溶剂中进行的。一种优选的溶剂是水。在另外一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基是羧酸；步骤(a)进一步包含二酰亚胺脱水剂；并且步骤(b)包含库尔提斯(Curtius)型重排，其包含下面的步骤(i)将扩链聚合物与足量的酰基闺试剂进行反应来提供扩链的酰基卣聚合物；(ii)将该扩链的酰基卣聚合物与足够的碱金属叠氮化物反应来提供扩链的酰基叠氮聚合物；和(iii)加热该扩链的酰基叠氮聚合物(优选在质子性溶剂例如水中)来引起重排，以提供扩链聚胺产物；如下面的方案所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>在步骤(11)中碱金属叠氮化物优选是叠氮化钠；并优选所用的极性非质子溶剂是例如THF或者乙腈。在步骤(iii)中优选使用质子性溶剂例如水，并且优选加热到大约70-100°C。在另外一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基是活化的羧酸酯或者羧酰氯；并且步骤(b)包含霍夫曼型重排，其包含下面的步骤(i)将扩链聚合物与足够的氨反应来提供扩链的伯酰胺聚合物；和(ii)将该扩链伯酰胺聚合物与足够的活性卣素源和碱金属氢氧化物反应来提供扩链聚胺产物。在另外一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基是活化的羧酸酯或者羧酰卣；并且步骤(b)包含库尔提斯型重排，其包含下面的步骤(i)将扩链聚合物与足够的碱金属叠氮化物反应来提供扩链的酰基叠氮聚合物；和(ii)加热该扩链的酰基叠氮聚合物(优选在质子性溶剂例如水中)来引起重排，以提供扩链聚胺产物。合适的羧酰面包括羧酰氟、氯、溴和碘。优选的羧酰卣是羧酰氯。在另外一种优选的实施方案中，在具有亲电子端基的多臂聚醚中，该亲电子端基是醛，并且步骤(b)包含下面的步骤(i)将扩链聚合物与足够的氨反应来提供扩链的亚胺聚合物；和(ii)还原该扩链的亚胺聚合物来提供扩链聚胺产物；如下面的方案所示多臂PEG-O"-^*CHONH3NaCNBH3多臂PEG-ONH2步骤(i)优选是在质子性溶剂例如乙醇中进行；并且如果期望，则一种酸性催化剂例如盐酸可以存在。步骤(ii)可以用氬化物还原剂例如三乙酸基硼氩化钠、氰基硼氬化钠等来进行。可选择的，步骤(ii)可以用金属催化剂和氢气来进行。金属催化剂可以是贵金属，包括Pt，PtCl4,Pt02,Pd等，优选是在载体例如炭黑或硅石上。金属催化剂还可以是阮内镍或者其它已知的将碳氮双键还原成伯胺的过渡金属催化剂。步骤(ii)优选是在质子性溶剂例如乙醇、曱醇、水等中进行。本发明衍生自伯二胺交联剂的扩链聚胺产物进一步的特征在于通23过尺寸排阻色谱法(SEC)所测定的Mw比用于制造该扩链聚胺产物的多臂聚醚的Mw高出至少大约10%。本发明的扩链聚胺产物在配制聚合物组织粘合剂中是有用的。聚合物组织粘合剂是通过将氧化多糖与本发明的扩链聚胺产物反应而形成的，所述的反应是以类似于Kodokian等人在US2006/0078536Al中所述的方式进行的，通过引用并入本文。如同表5和7分别所证实的那样，与没有所述的扩链聚胺产物的配方相比，衍生自本发明的扩链聚胺的组织粘合剂通常表现成提高的弹'性和在水性环境中改进的稳定性。实施例本发明进一步在下面的实施例中说明。应当理解所给出的这些实施例虽然用于表示本发明优选的实施方案，但是它们的目的仅仅是为了说明。从上面的讨论和这些实施例，本领域技术人员能够明白本发明的本质特性，并且不脱离其主旨和范围，本领域技术人员能够对本发明进行不同的变化和改变来使其适应不同的用途和条件。所用的缩写词的含义如下"min，，表示分钟，"h"表示小时，"mL"表示毫升，"L"表示升，"juL"表示微升，"mol"表示摩尔，"mmol"表示毫摩尔，"g"表示克，"mg"表示毫克，"mm"表示毫米，"Pa"表示帕斯卡，"kPa，，表示千帕斯卡，"psig"表示磅每平方英寸(表压)，"wt%"表示重量百分比，"PEG"表示聚(乙二醇)，"MW"表示名义分子量，"Mw"表示重均分子量，"Mn，，表示数均分子量，"Mz"表示z均分子量，"dn/dc"表示比折光指数增值(即，每浓度变化的折射率变化)，"IV"表示特性粘度，"MHz"表示兆赫，"SEC"表示尺寸排阻色语法，"PBS"表示磷酸盐緩沖盐水，"HNMR"表示质子核磁共振波语法，"DMSO-d6"表示氘化的二曱基亚砜，"Ac"表示乙酸根基团，和"RT"表示室温。一般方法试剂右旋糖苷(MW40000)购自Sigma-Aldrich(StLouis，MO)。具有通过伯胺基团封端的八个臂的8臂PEG胺(MW二10000)购自NektarTransformingTherapeutic(Huntsville,AL)。高碘酸钠(99%纯度，CASNo.7790-28-5)购自AcrosOrgamcs(MornsPlains,新泽西)。除非另有指示，否则全部的其它试剂获自Sigma-Aldrich。氧化右旋糖苷的制备使用下面的程序(类似于在Azzam,T.;Raskin,A.;Makovitzki，A.;Brem,H.;Vierling，P.;Lineal,M.;Domb,A.J.Macromolecules2002，35,9947-9953中所公开的程序)从分子量为10000道尔顿的右旋糖苷来制备右旋糖苷二醛，其具有大约48%的醛成分转化率。类似的程序用于具有40000、60000和250000道尔顿分子量的右旋糖苷。如下所述，通过改变所用的高碘酸盐溶液的浓度来获得其它的醛转化率。将右旋糖苷(18.9g)加入在500mL圆底烧〗f瓦中的170.1g蒸馏水中(来得到10wt。/。水溶液)。将该溶液搅拌15-30min。然后，将在158.4g蒸馏水中17.6g的NalO4(10wt。/。水溶液)加入到该右旋糖苷溶液中。该高碘酸盐溶液的浓度可以根据期望的醛转化率来变化。将该混合物在室温搅拌5h。此后，将溶液从圆底烧瓶除去，分成四个等体积份，并分配到4个渗析膜管(MEMBRA-CELTM渗析管，3500道尔顿的分子量分离点(cutoff)，获自ViskaseCompanies,Inc.,Willowb謂k,IL)中。对于具有40000、60000和250000道尔顿分子量的右旋糖苷，使用14000道尔顿分离点的渗析膜管(ViskaseCompanies,Inc.)。将该渗析管插入到含有4.5L蒸馏水的5L烧瓶中，并渗析高到4天。在该渗析过程中，将蒸馏水在2天后更换。将样品从渗析膜管中除去并放入冷冻干燥机容器中。使用液氮冷冻该样品并放入冷冻干燥机24-48h或者直到全部的水蒸发。使用下面的方法来测量所形成的氧化右旋糖普中的二醛含量。将氧化右旋糖苷(0.1250g)加入到在250mL厄伦美厄(Erlenmeyer)烧瓶中的10mL的0.25MNaOH中。将该混合物轻轻地回荡，然后放入40。C的温度受控的超声波粉碎器浴中5min，直到全部的材料溶解，得到暗黄色溶液。将样品从浴中除去，并立即在冷自来水下冷却5min。然后，将15.00mL的0.25MHC1加入到该溶液中，随后加入50mL蒸馏水和lmL的0.2%酚酞溶液。使用50mL滴定管用0.25MNaOH滴定该溶液，通过从黄色到紫红色/紫色的颜色变化来确定终点。使用下面的式子来计算在氧化右旋糖苦样品中的二醛含量(在此处也被称为氧化转化率)二醛含量=(Vb—Va)s(Vb-Va)p-------...................X100(%)Ws/MWp/MVb^咸的总毫克当量Va二酸的总毫克当量W^干样品重量(mg)M-重复单元的分子量-162S-氧化的样品P-初始4羊品MW10000的8-臂星型PEG氯化物的合成。该8-臂星型PEG氯化物是以下面的方式，通过将8-臂星型PEG-OH与亚石危酰氯在无溶剂下进行反应而制备的8-臂星型PEG-OH(MW10000,通过羟基端基滴定来测定，并假定全部的聚合物分子具有八个臂)获自NOF美国公司(WhitePlains,纽约)。该8-臂星型PEG-OH(00g,在500mL的圆底烧瓶中)的干燥是通过下面两种方式来进行的在85。C真空(0.06mm汞柱(8.0Pa))搅拌加热4h，或者与50g甲苯在减压下(5mm汞柱(2kPa))和6CTC的釜温下共沸蒸馏。使该8-臂星型PEG-OH冷却到室温。然后，将亚硫酰氯(35mL,0.48mol)加入到装备有回流冷凝器的烧瓶中，并将该混合物在85。C和氮气氛下搅拌加热24h。通过旋转蒸发除去多余的亚硫酰氯(浴温40°C)。将两个连续的50mL甲苯部分加入并在减压(15mm汞柱(2kPa),浴温60°C)下蒸发来完全除去亚硫酰氯。8-臂星型PEG-C1的产率是100.9g(99%)。]H薩R(500MHz,DMSO-d6):53.71-3.69(m,16H),3.67-3.65(m，16H),3.50(s,800H)。通过光散射的带有质量分析的水性SEC[30。C,PBS(10mM磷酸盐,2.7mMKCl，0.137MNaCl,pH7.4),0.5mL/min,两个SupremaLinearM混合床柱(PolymerStandardsServices,SilverSprings,MD),dn/dc0.135mL/g]给出Mw7100，Mw/Mn1.2,Mz/Mw1.2和IV9.1mL/g。通过如下的残留的羟端基的乙酰化作用和'HNMR分析确定的端基转化率是99%。将8-臂星型PEG-C1的样品(0.2g)溶解在0.25mL乙酸酸酐和0.35mL吡啶的混合物中，并在环境温度放置一整夜。通过加入5g冰猝灭反应。将水性层用三个3mL部分的氯仿进行萃取，并将合并的氯仿萃取液用三个lmL部分的20%石克酸氢钠水溶液、两个lmL部分的碳酸氢钠饱和水溶液和lmL水连续清洗。在减压下蒸发氯仿。将残留物溶26解在2mL水中，并将所形成的混浊溶液在减压下浓缩直到透明，来除去残留的氯仿。将溶液冷冻和冷冻干燥，将残留物溶解在DMSO-d6中并用^NMR进行分析。在该8-臂星型PEG-C1中残留的羟端基的比例是通过将-CH20Ac端基的]HNMR峰[5409(t,J=4.7Hz,2H,CAc)和2.00(s，3H,AcO)]的积分与CH2C1端基[53.72-3.68(m,2H，CH2C1)]的积分相比较来确定的。实施例1该实施例说明MW10000的8-臂PEG-胺的合成。将八臂PEG-OH(MW10000，NektarTransformingTherapeutics,100g)在85。C真空(0.06托)搅拌加热4-16h。将干燥的8-臂PEG冷却到室温(RT),加入亚硫酰氯(35mL,0.48mol),并将该混合物在85。C和氮气氛下搅拌加热20h。除去多余的亚硫酰氯来提供8-臂PEG-C1:NMR(500MHz，DMSO-d6)53.71-3.69(m,16H),3.67-3.65(m,16H),3.50(s,800H);通过光散射的带有质量分析的水性SEC[3(TC,磷酸盐緩冲盐(PBS，10mM磷酸盐，2.7mMKC1,0,137MNaCl,pH7.4)，0.5mL/min,两个'/'昆合床4i(PolymerStandardsServicesSupremaLinearM)，dn/dc0.135mL/g]给出Mw7100,Mw/Mn1.2,M美1.2和特性粘度IV9.1mL/g。将该8-臂PEG-Cl(100.9g)溶解在640mL的浓氨水(28。/。w/w)中并在密封容器中在6(TC加热48h,导致形成大约40psig(276kPa)的压力。将该溶液冷却到RT,并用干燥的氮气鼓泡2h来驱除大约50-70g的氨。使该溶液经过氢氧化物形式的阴离子交换树脂柱(Purolite⑧A-860,ThePuroliteCo.,Bala-Cynwyd,PA)。将洗才是液收集并在减压下浓缩到大约200g，按多份进行冷冻和冷冻干燥来提供8-臂PEG-胺(MW10000):!HNMR(500MHz,DMSO-d6)53.50(m，800H),3.34(t,J=5.8Hz,16H),2.62(t,J=5.8Hz，16H);通过光散射的带有质量分析的水性SEC(条件如上所述)给出Mw10300，Mw/Mn1.5,Mz/Mw1.7，IVllmL/g。在吡啶中用过量的乙酸酸酐处理该8-臂PEG-NH2(MW10000)，并通过^NMR测量产物显示-OH端基到-NH2端基的总转化率是99%。实施例2该实施例说明MW2000的8-臂PEG-胺的合成。向冷却到0°C的60g的MW2000的8-臂PEG-OH(NektarTransformingTherapeutics),三乙胺(69mL)和二氯曱烷(1.5L)的溶液中加入甲烷磺酰基氯(37.5mL)。将该混合物在RT搅拌16h,减压(15托，40。C)下浓缩到600mL，并连续的用1.0M磷酸二氢钾(300mL)清洗三次，用饱和的碳酸钾(300mL)清洗一次，和用水(300mL)清洗一次。将二氯曱烷层干燥(硫酸镁)，过滤和浓缩(15托，浴温40。C)来提供八-臂PEG曱烷石黄酸酯(90%产率)NMR(500MHz,DMSO-d6)54.29(m,16H),3.66(m，16H),3.50(m，30H),3.16(s,24H);通过光散射的带有质量分析的水性SEC(与实施例1相同)给出Mw1700,Mw/Mn1.0,M美l.O和IV9.1mL/g。将该8-臂PEG曱烷磺酸酯(22g)溶解在536mL的浓氨水(28。/。w/w)中并在密封容器中在RT搅拌48h。将该溶液用干燥的氮气鼓泡4h来驱除〉50g的氨，浓缩(15托，60。C)到大约200g，以10g碳酸钾使其为碱性，并用100mL的氯仿部分萃取3次。将合并的氯仿萃取液干燥p克酸镁)，过滤和浓缩(15托，4CTC)。将残留物承载到300mL二氯曱烷中，过滤来除去不溶物，并浓缩(15托，4(TC)和千燥(0.06托)来得到8-臂PEG-NH2(MW2000):NMR(500MHz,DMSO-d6)53.51(m,130H)，3.35(t,JN5.8Hz,16H),2.63(t,J-5.8Hz,16H)。实施例3该实施例说明MW10000的6-臂PEG-胺的合成。将6-臂PEG-OH(MW10000,SunBio,Inc.,Orinda,CA;50g)在90'C(O.l托)搅拌加热16h来干燥。冷却该干燥的6-臂PEG到RT,加入亚硫酰氯(13mL,0.18mol),并将该混合物在90°C和氮气氛下搅拌加热16h。通过旋转蒸发(4(TC)除去多余的亚硫酰氯。将两个连续的25mL甲笨部分加入并在减压(15托，6(TC)下蒸发来完全除去亚硫酰氯。将产物在90。C搅拌(0.06托)干燥来提供6-臂PEG-Cl(49.0g,97%产率)]HNMR(500MHz,DMSO-d6)53.71-3.69(m,12H),3.67-3.65(m,12H)，3.50(s,620H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出M、v7300,Mw/Mn1.2,Mz/Mwl.l和IV9.9mL/g。将该6-臂PEG-Cl(48.9g)溶解在232mL的浓氨水(28。/ow/w)中并在密封容器中在6(TC加热48h。将该溶液用干燥的氮气鼓泡2h,然后通过旋转蒸发(15托，60。C)浓缩到大约160g。然后将该溶液通过氢氧化物形式的强碱性阴离子交换树脂(Purolite⑧A-860)柱(450mL的床体积)。收集洗提液，并将三个200mL部分的去离子水通过所述的柱并收集。合并水性部分，浓缩(15托，6(TC)到大约130g,以多份冷冻和冷冻干燥来得到6-臂PEG-胺(MW10000,46.6g,96%产率)HNMR(500MHz,DMSO-d6)53.50(m，700H),3.34(t,JN5.8Hz,12H)，2.63(t，J=5.8Hz，12H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出Mw10000,Mw/Mn1.3,Mz/Mw1.4,IV5.7mL/g。实施例4该实施例说明MW2000的4-臂PEG-胺的合成将4-臂PEG-OH(MW2000,NOF美国，100g)加入到88mL(1.2mo1)的冷冻到-78。C的亚碌^酰氯中。将该搅拌的混合物升温到RT,然后在60。C和氮气氛下加热20h。通过旋转蒸发(40。C)除去多余的亚硫酰氯，并加入两个连续的50mL部分的甲苯，减压蒸发(15托，60。C)来完成除去亚硫酰氯。将该产物在RT和搅拌(0.06托)下干燥来提供4-臂PEG-C1:!HNMR(500MHz,DMSO-d6)53.72-3.68(m,8H),3.68-3.64(m,8H),3.58-3.44(m,170H),3.31(s,8H)。将该4-臂PEG-Cl(100g)和1000g无水氨在密封容器中在60。C加热48h(形成360psig的压力)。冷却反应混合物到RT,使得多余的氨蒸发。将所形成的残留物溶解到大约700mL的去离子水中。将所形成的溶液通过氢氧化物形式的阴离子交换树脂柱(Purolite⑧A-860,ThePuroliteCo.,Bala-Cynwyd,PA)。收集洗提液并减压浓缩来得到4-臂PEG-胺(MW2000):!HNMR(500MHz,CDC13)53.70-3.47(m,170H)，3.45(t,J=5.2Hz,8H),3.35(s,8H),2.80(m,8H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(条件如上所述)给出Mw2400，Mw/Mn1.4，Mz/Mw1.5，IV2mL/g。实施例5该实施例说明双官能交联剂PEG4000二曱磺酸酯的合成。向溶解在140mL的二氯曱烷中的PEG(20g,MW4000)中加入2.9mL三乙胺和1.6mL甲烷磺酰基氯。将该混合物在RT搅拌，用200mL氯仿稀释，用3xl00mL的1M磷酸二氬钾清洗，随后用100mL饱和碳酸钾清洗，干燥(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，40°C)。将产物干燥(0.06托)来提供PEG4000二甲磺酸酯(9.8g,95%产率)^NMR(500MHz,DMSO-d6)54.29(m,4H)，3.66(m,4H),3.50(m,360H),3.16(s,6H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出Mw3700，Mw/Mnl.l,Mz/Mw1.0和IV5.1mL/g。实施例6该实施例说明双官能交联剂PEG6000二曱磺酸酯的合成。向溶解在95mL的二氯曱烷中的PEG(20g，MW6000)中加入1.9mL三乙胺和l.OmL曱烷磺酰基氯。将该混合物以类似实施例5的方式处理来提供PEG4000二甲磺酸酯(17.4g,85%产率)'HNMR(500MHz，DMSO-d6)54.29(m，4H)，3.64(m，4H)33.55(m,580H)，3.15(s，6H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出Mw4900，MwZMnl.l，Mz/Mwl.l和IV6.5mL/g。实施例7该实施例说明双官能交联剂PEG8000二甲石黄酸酯的合成。向溶解在70mL的二氯甲烷中的PEG(20g,MW8000)中加入1.5mL三乙胺和0.8mL甲烷磺酰基氯。将该混合物以类似实施例5的方式处理来提供PEG8000二曱磺酸酯(16.4g,80%产率)HNMR(500MHz,DMSO-d6)54.29(m，4H),3.64(m,4H),3.55(m,700H),3.15(s,6H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出Mw6900，Mw/Mnl.1,M美1.1和IV8.2mL/g。实施例8该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW185O)二甲磺酸酯的合成。向溶解在200mL的二氯甲烷中的Pluronic-L43(10g，MW1850)中加入6.0mL三乙胺和3.3mL甲烷磺酰基氯。将该混合物以类似实施例5的方式处理来提供PEG-PPG-PEGMWl850二曱磺酸酯(9.0g,83%产率)'HNMR(500MHz,DMSO-d6)S4.29(m,4H)，3.66(m,4H),3.50(m,116H)，3.16(s,6H)，1.03(d,J=5.9Hz,75H);通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30。C，.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw2000，Mw/Mnl.l,Mz/Mwl.l和IV7.9mL/g。实施例9该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW2200)二曱磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将10g的PluromcL44(MW2200)在200mL二氯甲烷中与4.9mL三乙胺和2.7mL甲烷磺酰基氯反应来得到(在后处理之后)8.8g(82。/o产率)。!H画R(500MHz，DMSO-d6):54.28(m,4H),3.67(m,4H),3.50(m,146H),3.16(s，6H),1.03(d，J=6.1Hz,~66H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[3(TC,.5mL/min,dn/dc0.060mL/g]给出了Mw2400，Mw/Mnl.l,Mz/Mwl.1和IV7.9mL/g。实施例10该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW4200)二曱磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将20g的PluronicP84在135mL二氯甲烷中与2.7mL三乙胺和1.5mL曱烷磺酰基氯反应来得到(在用25mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)20.4g(99%产率)。&NMR(500MHz,DMSO-d6):54.29(m,4H),3.66(m，4H),3.50(m,260H)，3.16(s,6H)，1.03(d,J=5.9Hz，130H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30。C,.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw4300,Mw/Mn1.1，Mz/Mw1.1和IV12mL/g。实施例11该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW4400)二甲磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将20g的PluronicL121在130mL二氯甲烷中与2.7mL三乙胺和1.5mL曱烷磺酰基氯反应来得到(在用50mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)19.2g(93Q/。产率)。〗HNMR(500MHz,DMSO-d6):54.29(m,4H),3.66(m，4H),3.50(m,~230H)，3.16(s,6H)，1.03(d,J=5.9Hz，180H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[3CTC，.5mL/min,dn/dc0.060mL/g]给出Mw3800,Mw/Mnl.l,M美l.l和IV13mL/g。实施例12该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW5750)二曱磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将20g的PluronicP123在100mL二氯曱烷中与2.0mL三乙胺和l.lmL甲烷磺酰基氯反应来得到(在用35mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)17.1g(83。/。产率)。NMR(500MHz，DMSO-d6):54.29(m,4H),3.66(m,4H)，3.50(m,~300H),3.16(s，6H),〗.03(d，J=5.9Hz,194H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30。C,.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw4900,Mw/Mnl.l，Mz/Mwl.l和IV15mL/g。实施例13该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW5900)二曱磺酸酯的合成。才艮据实施例8的方法，将20g的PluromcP104在lOOmL二氯甲烷中与1.9mL三乙胺和1.0mL曱烷磺酰基氯反应来得到(在用30mL部分的M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)19.0g(92。/o产率)。巾薩R(500MHz,DMSO-d6):M.29(m,4H)3.67(m,4H),3.50(m,~350H),3.15(s，6H)，1.03(d，JN5.9Hz，172H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30。C,.5mL/min,dn/dc0.060mL/g]给出Mw5800,Mw/Mn1.1，Mz/Mw.1和IV14mL/g。实施例14该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW65OO)二曱磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将20g的PluronicP105在90mL二氯甲烷中与1.8mL三乙胺和l.OmL甲烷磺酰基氯反应来得到(在用35mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)17.8g(87。/。产率)。]HNMR(500MHz,DMSO-d6):54.29(m,4H),3.67(m,4H),3.50(m,460H),3.16(s,6H)，1.03(d,J=5.9Hz,~170H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30。C,.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw5300，Mw/MnU,Mz/Mwl.l和IV15mL/g。实施例15该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW6600)二曱磺酸酯的合成。将PluronicF77(20g)根据实施例14的方法进行曱基磺酰化来得到13.3g(65。/。产率)。HNMR(500MHz,DMSO-d6):54.29(m,4H)，3.67(m,4H),3.50(m，520H)，3.16(s,6H)，1.03(d,J=6.1Hz，100H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30。C,.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw5500,Mw/Mn1.0,Mz/Mw1.0和IV17mL/g。实施例16该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW8400)二曱磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将20g的PluronicF68在70mL二氯甲烷中与1.4mL三乙胺和0.75mL曱烷磺酰基氯反应来得到(在用25mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)16.9g(83%产率)。^NMR(500MHz,DMSO-d6):54.29(m,4H)，3.67(m，4H),3.50(m，660H)，3.16(s，6H)，1.03(d,J=6.1Hz,90H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[3(TC,.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw8000,Mw/Mn1.0,Mz/Mw1.0和IV18mL/g。实施例17该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW11400)二曱磺酸酯的合成。才艮据实施例8的方法，将20g的PluronicF88在50mL二氯曱烷中与l.OmL三乙胺和0.54mL甲烷磺酰基氯反应来得到(在用150mL氯仿稀释以及用15mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钾后处理之后)20g(99y。产率)。！HNMR(500MHz,DMSO-d6):54.29(m，4H),3.67(m,4H),3.50(m,1000H),3.16(s,6H),1.03(d,J=6.1Hz,120H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[3(TC,.5mL/min,dn/dc0.060mL/g]给出Mw9400,Mw/Mn1.0，Mz/Mw1.0和IV25mL/g。实施例18该实施例说明双官能交联剂PEG-PPG-PEG(MW14600)二曱磺酸酯的合成。根据实施例8的方法，将20g的PluronicF108在50mL二氯曱烷中与0.76mL三乙胺和0.42mL甲烷磺酰基氯反应来得到(在用150mL氯仿稀释以及用lOmL部分的1M磷酸二氬钾和饱和石友酸钾后处理之后)20g(99。/。产率)。'HNMR(500MHz,DMSO-d6):54.30(m，4H),3.67(m,4H)，3.50(m,1200H),3.16(s,6H)，1.03(d,J=6.0Hz,150H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30°C,.5mL/min，dn/dc0.060mL/g]给出Mw13000，Mw/Mnl.l,Mz/Mwl.1和IV3lmL/g。实施例19该实施例说明双官能交联剂聚氧杂环丁烷(MW2013)二曱磺酸酯的33合成。聚氧杂环丁烷是根据Sunkara和Ng在美国专利申请2005/0020805A1中所述的方法来制备的。根据实施例8的方法，将20g聚氧杂环丁烷(MW2013)在125mL二氯曱烷中与5.6mL三乙胺和3.1mL甲烷磺酰基氯反应来得到(在用100mL氯仿稀释以及用90mL部分的1M磷酸二氢钾和饱和碳酸钟整理之后)18.3g(85。/。产率)。'HNMR(500MHz，DMSO-d6):54.22(t,J=6.3Hz,4H),3.37(m,120H)，3.13(s,6H),1.88(五重峰,J=6.3Hz,4H),1.68(五重峰，》6.3Hz，60H)。通过光散射的具有质量分析的在THF中的SEC[30°C,.5mL/min,dn/dc0.060mL/g]给出Mw2960,Mw/Mn1.5,Mz/Mw1.4和IVUmL/g。实施例20该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG胺和双官能交联剂PEG6000二曱磺酸酯。向溶解在2mL的DMF和lmL的二氯曱烷中的l.Og的8-臂PEG-胺(MW10000,实施例l)中加入31mg的溶解在lmL的二氯甲烷中的PEG6000二曱磺酸酯(实施例6)。在将该混合物室温搅拌一整夜之后，将其过滤、用lOmL氯仿稀释并用3x2mL的饱和碳酸钾清洗。将合并的水性洗涤液用lmL氯仿反萃取。将合并的氯仿层用硫酸镁干燥、过滤和蒸发(15托，40°C)。加入水(l-2g)到残留物中，得到混浊溶液，将其简单浓缩(15托，4(TC)来除去二氯曱烷和氯仿。将该澄清溶液冷冻和冷冻干燥来得到0.98g(95。/o产率)。&丽R(500MHz,CDC13),53.59(m,~960H)，3.46(t,J=5.2Hz,16H),2.81(t，J=5.2Hz，14H),2.76(t,J=5.5Hz,2H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为17860,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为13170。实施例21该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG8000二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MWIOOOO,实施例l)与41mg的PEG8000二甲磺酸酯(实施例7)反应来得到0.87g(84。/o产率)。]HNMR(500MHz，CDC13)53.58(m，1200H),3.48(t,J=5.2Hz,16H),2.82(t,JN4.8Hz,14H)，2.74(t，J=5.4Hz，2H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为18520,相比的Mw为13170。实施例22该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicL43)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MW10000，实施例l)与10mg的PEG-PPG-PEG(MW1850)二甲磺酸酉旨(实施例8)反应来得到0.87g(86。/。产率)。'HNMR(500MHz，CDC13)53.59(m,854H)，2.85(m,14H),2.76(m,2H)，1.09(m,2.8H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为16500，相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为8730。实施例23该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicL44)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MW10000,实施例l)与12mg的PEG-PPG-PEG(Pluronic⑧L44)二甲磺酸酯(实施例9)反应来得到0.85g(84。/。产率)。^NMR(500MHz，CDC13)53.59(m,754H),3.50(t，J=5.2Hz,16H),2,85(m,14H),2.76(m,2H)，1.09(m,3H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例1)给出扩链聚胺的Mw为12600,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为8730。实施例24该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicP84)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MWIOOOO,实施例l)与22mg的PEG-PPG-PEG(PluromcP84)二甲磺酸酯(实施例IO)反应来得到0.76g(74。/。产率)。!HNMR(500MHz,CDCL3)53.59(m,~754H)，3'50(t，J=5.2Hz，鹿)，2.85(t,J=5.1Hz，14H)，2.76(t,J=5.4Hz,2H),1.09(m,3H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为12600,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为8730。实施例25该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicP123)二曱磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MW10000，实施例l)与29mg的PEG-PPG-PEG(PluronicP123)二曱磺酸酉旨(实施例12)反应来得到0.91经(89%产率)。'HNMR(500MHz,CDC13)53.60(m,934H),3.47(t，风8Hz,16H),2.82(t，J=4.8Hz,14H)，2.76(t，J=5.4Hz,2H),1.09(m,IOH)。实施例26该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicP104)二曱磺酸酯。向溶解在80mL的DMF和40mL的二氯曱烷中的40g的8-臂PEG-胺(MWIOOOO，实施例l)中加入1.22g的溶解在40mL二氯曱烷中的PEG-PPG-PEG(PluromcP104)二甲磺酸酯(实施例13),并将该混合物在RT搅拌一整夜。将混合物过滤、用300mL的氯仿稀释和用3x80mL饱和碳酸钾清洗。将合并的水性洗涤液用40mL氯仿反萃取。将合并的氯仿层干燥(硫酸镁)、过滤和蒸发(15托，4(TC)。加入水(35g)到残留物中，得到混浊溶液，将其简单浓缩(15托，4(TC)来除去二氯曱烷和氯仿。将澄清溶液冷冻和冷冻干燥来得到37.74g(92。/o产率)。^NMR(500MHz，DMSO-d6)53.50(m,880H),3.35(t，J=5.8Hz,16H),2.64(t,J=5.8Hz，16H),1.03(d,J=6.0Hz，8.0H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为11630,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为9990。实施例27该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicP105)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MWIOOOO,实施例l)与33mg的PEG-PPG-PEG(PluronicP105)二甲磺酸酯(实施例14)反应来得到0.97g(94。/。产率)。'HNMR:(500MHz,CDC13)53.58(m,1120H),2.82(m，14H),2.74(t，J=5.4Hz,2H),1.08(m,9.2H)。实施例28该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluromcF77)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MW10000,实施例l)与34mg的PEG-PPG-PEG(PluronicF77)二曱磺酸酉旨(实施例15)反应来得到0.88g(85。/o产率)。!H画R:(500MHz,CDC13)53.55(m，~1040H),3.44(t，J=5.3Hz，16H),2.78(t，J=4.8Hz，14H),2.72(t,J=5.4Hz,2H),1.05(m，5.9H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为14810,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为13170。实施例29该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicF68)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MW10000,实施例l)与43mg的PEG-PPG-PEG(PluromcF68)二曱磺酸酉旨(实施例16)反应来得到0.56g(54。/。产率)。^NMR:(500MHz,CDC13)53.59(m，1160H)，3.50(t，片5.2Hz,16H)，2.85(t,J=5.2Hz，14H)，2.76(t,J=5.3Hz,2H),1.09(m,5.4H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为16550，相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为13170。实施例30该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicF88)二曱磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MWIOOOO，实施例l)与58mg的PEG-PPG-PEG(PluronicF88)二曱磺酸酯(实施例17)反应来得到1.02g(96。/o产率)。'HNMR(500MHz,DMSO-d6):53.50(m,990H),3.36(t,J=5.8Hz，16H),2.65(t，J=5.8Hz,16H),1.03(d,J=6.0Hz,5.7H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为14140,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为10800。实施例31该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluromcF108)二甲磺酸酯。根据实施例26的方法，将20g的8-臂PEG-胺(MW10000,实施例l)与1.48g的PEG-PPG-PEG(Pluronic⑧F108)二甲磺酸西旨(实施例18)反应来得到20.9g(97。/。产率)。HNMR(500MHz，DMSO-d6):53.50(m,1060H)，3.36(t，J=5.8Hz,16H),2.65(t,J=5.8Hz,16H),1.03(d,J=6.0Hz,5.7H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出扩链聚胺的Mw为14820,相比较而言8-臂PEG-胺起始材料的Mw为10800。实施例32该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比8.69:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicP104)二甲磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MWIOOOO,实施例l)与70mg的PEG-PPG-PEG(PluronicP104)二曱磺酸酉旨(实施例13)反应来得到0.51g(48。/。产率)。'HNMR(500MHz,CDC13):53.59(m，~866H),3.51(t，J=5.2Hz，16H),2'85(t，J=5.0Hz,14H)，2.75(t,J=5.4Hz,2H),1.08(m，20H)。这里没有用SEC进行洗提。实施例33(对比)粘合剂中的扩链聚胺的测试作为对照物，一种25重量％的MW10000的8-臂PEG-胺溶液(没有加入扩链聚胺产物)是通过将1重量当量的8-臂PEG-胺(MW10000)溶解到3重量当量的去离子水中来制备的。类似的，一种25wt。/。的右旋糖苷二醛溶液(MWIOOOO右旋糖普，具有48%的醛转化率，如上面的标题为"氧化右旋糖普的制备"部分所述来制备)是在去离子水中制备的。在双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入25重量％的右旋糖苷二醛溶液，在另外一个管中装入25重量％的8-臂PEG-胺(MWIOOOO)的溶液，并且该注射器装备有静态混合管尖(tip)(12个梯级，MixPacML2.5-12-DM)。将一种粘合剂水凝胶从每个双管注射器中挤出到玻璃片上，目的是形成大约6cm长和4-5mm直径的延长结构。将该样品在RT38固化并在1-2分钟之后测定弹性。实施例34-44下面的实施例证实了将扩链聚胺产物混入到粘合剂水凝胶的PEG-胺成分中(通常，但不总是)提高了所形成的水凝胶的断裂伸长率。来自实施例20、22-28和30-32的扩链聚胺产物的溶液(25重量％)是通过将1重量当量的扩链聚胺产物溶解在3重量当量的去离子水中来制备的。粘合剂水凝胶是从这些溶液和实施例33所述的相同的右旋糖苷二醛来制备的。每个配方和对比实施例的断裂伸长率是根据下式来确定的，断裂伸长率(。/。)-100x(最终长度-初始长度)/初始长度。结果表示在表5中。表5.衍生自扩链聚胺产物和8-臂PEG胺对照物的粘合剂水凝胶的断裂伸长率实施例No.<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>a括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二甲磺酸酯形式的双官能交联剂。实施例45-52猪肠体外崩裂强度下面的对比实施例45、47和50和实施例46、48、49、51和52i正实了将扩链聚胺产物混入到粘合剂水凝胶中没有削弱所形成的水凝胶对于组织的粘合能力。在双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖苷二醛溶液，并在另外一个管中装入25、30或者50重量％的MW10000的8-臂PEG-胺溶液(作为对照)，或者装入实施例的扩链聚胺产物，并且该注射器装备有静态混合管尖(8个梯级，MixPacML2.5-08-SM)。在6-8cm片段的洁净新鲜的猪肠(获自当地的屠宰场)的壁上沖出0.25英寸圆孔，并将该伤口通过使用从双管注射器中挤出的大约0.4mL的粘合刑水凝胶来封闭。在粘合剂固化2-5分钟之后，将所述肠片段的两端夹紧封闭。将14号的注射器针头插过肠壁进入到肠内腔中，所述的针通过塑料管道与装备有压力表的注射器泵(型号No.22，HarvardApparatus,Holliston，MA)相连接。将该肠片段浸没到透明的水槽盘中，并将空气通过注射器泵以11mL/h速度泵入到肠片段中。记录每个密封的伤口泄漏时的压力。结果在表6中给出。在这些测量中典型的试验误差是至少+/-20%。因此，实施例52可能是例外，全部的例子中的结果基本上是相同的。但是，实施例52仍然表现出了显著高于大约lpsi肠压的崩裂压力，并且仍然被认为是有用的。表6.当用来密封猪肠的孔时，含有8-臂PEG-胺(对照物)或者扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶的体外崩裂强度。实施例No.扩链聚胺产物awt%8-臂PEG-胺或者扩链聚胺产物崩裂压力，psi对比例45无253.646实施例26(Plu匪c⑧P104)253.7对比例47无303.048实施例30(Pl腦nic⑧F88)302.949实施例31(PluronicF108)303.0对比例50无503.551实施例30(PluronicF88)503.652实施例31(PluronicF108)502.5a括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二曱磺酸酯形式的双官能交联剂。实施例53-60粘合剂水凝胶的体外降解下面的实施例证实了在粘合剂水凝胶中的扩链聚胺产物不危及所形成的粘合剂水凝胶的稳定性。将双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖普二醛溶液，并在另外一个管中装入25重量％的MW10000的8-臂PEG-胺溶液(作为对照)，或者装入扩链聚胺产物，并且该注射器装备有静态混合管尖(8个梯级，MixPacML2.5-08-SM)。从每个双管注射器中将粘合剂水凝胶挤出到聚碳酸酯圓形染料(dye)(10mm直径x3mm厚度)中来形成小丸。称量小丸的初始重量，然后各个放入到含有磷酸盐緩沖盐水(PBS,pH7.4)的广口瓶中，并在设定为80rpm的定轨振荡器中在37'C进行培养。通过视觉观察和通过重量增加或降低来监控小丸随着时间变化的降解。结果汇总在表7中。表7.在pH7.4的PBS中在37。C和80rpm培养的粘合剂水凝胶小丸的质量(初始质量的％)。__<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>a除非另有指示，10%的8-臂PEG-胺(MWIOOOO)分子是通过Pluromc⑧交联剂来交联的。Cb表示对比实施例。"nd"表示没有测量。实施例61-66对于NIH3T3人类成纤维细胞的体外生物适应性下面的实施例证实了在粘合剂水凝胶中的扩链聚胺产物不危及NIH3T3人类成纤维细胞培养物。该测试是使用NIH3T3人类成纤维细胞培养物根据ISO10993-5:1999来进行的。NIH3T3人类成纤维细胞获自AmericanTypeCultureCollection(ATCC;Manassas,VA),并且在补充有0。/。胎牛血清的Dulbecco改进基础培养基(DMEM)中生长。在双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖苷二醛溶液，并在另外一个管中装入30或者50重量％的MW10000的8-臂PEG-胺溶液(作为对照)，或者装入实施例的扩链聚胺产物，并且该注射器装备有静态混合管尖(12个梯级，MixPacML2.5-12-DM)。将粘合剂水凝胶从每个双管注射器中挤出到聚苯乙烯培养板的孔中来覆盖大约三分之一的孔底部。然后将所述的孔在UV光下灭菌，并种入50000-100000NIH3T3细胞。在37。C培养48小时之后，检查细胞培养物的细胞变圆(表示死亡)、孔底的铺满包覆层(confluentcoating)、水凝胶边缘的生长和水凝胶的蔓延(表示细胞培养物对于水凝胶的粘接力)。结果汇总在表8中，该结果表明对于NIH3T3人类成纤维细胞培养物没有不利的影响。表8.在含有8-臂PEG-胺(对照物)或者扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶对于NIH3T3人类成纤维细胞的体外生物适应性。实施例61Cb62Cb63646566扩链聚胺产物a无无实施例26(PluronicPI04)实施例26(PluronicPI04)实施例31('PluronicP108)实施例31(PluronicP108)Wt%8-臂PEG-胺或者扩链聚胺产物305030503050细胞变圆否否否否否否铺满包覆层是是是是是是水凝胶边缘的生长是是是是是水凝胶的蔓延否否否否否否a括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二曱磺酸酯形式的双官能交联剂。Cb表示对比实施例。实施例67-74没有体外炎症应答下面的实施例证实了在粘合剂水凝胶中的扩链聚胺产物在使用J774巨噬细胞的体外测试中不产生炎症应答。该测试是使用J774小鼠腹膜巨噬细胞培养物根据ISO10993-5:1999来进行的。该J774小鼠腹膜巨噬细胞获自ATCC,并且在用10%胎牛血清补充的DMEM中进行生长。在双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖苷二醛溶液，并在另外一个管中装入30或者50重量％的MWIOOOO的8-臂PEG-胺溶液(作为对照)，或者装入实施例的扩链聚胺产物，并且该注射器装备有静态混合管尖(12个梯级，MixPacML2.5-12-DM)。将粘合剂水凝胶从每个双管注射器中挤出到聚苯乙烯培养板的孔中来覆盖大约三分之一的孔底部。然后将所述44的孔在UV光下灭菌，并种入J774小鼠腹膜巨噬细胞。在37。C培养48小时之后，使用ELISA试验，按照Lara等人在{JournalofDentalResearch82(6):460-465,2003}中所述来分析细胞培养物的胂瘤坏死因子-a(TNF-a),该因子是一种炎症应答的指示剂。将该TNF-a滴度与无任何添加剂所培养的J774细胞(负对照)或者用脂多糖(革兰氏阴性细菌细胞壁的一种成分，7.5lug/mL)培养的J774细胞(正对照)之进行比專交。结果汇总在表9中，该结果表明没有炎症应答。表9.当曝露于含有8-臂PEG-胺或者扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时，由J774小鼠腹膜巨噬细胞所产生的TNF-a。<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>a括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二曱磺酸酯形式的双官能交联剂。实施例75-81没有对VEGF分泌的在体外抑制作用血管内皮生长因子(VEGF)是一种细胞因子和有丝分裂原，其促进了血管生成，并因此促进了伤口愈合。下面的实施例证实了在粘合剂水凝胶中的扩链聚胺产物不抑制NIH3T3人类成纤维细胞的VEGF分泌。该测试是使用NIH3T3人类成纤维细胞培养物根据ISO10993-5:1999来进行的。NIH3T3人类成纤维细胞获自ATCC,并且在用10%胎牛血清补充的DMEM中进行生长。在双管注射器(MixPacSDL005-0-50M^々一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖普二醛溶液，并在另外一个管中装入30或者50重量％的MW10000的8-臂PEG-胺溶液(作为对照)，或者装入实施例的扩链聚胺产物，并且该注射器装备有静态混合管尖(12个梯级，MixPacML2.5-12-DM)。将粘合剂水凝胶从每个双管注射器中挤出到聚苯乙烯培养板的孔中来覆盖大约三分之一的孔底部。然后将所述的孔在UV光下灭菌，并种入50000-100000NIH3T3细胞。在37。C培养48小时之后，使用酶联免疫吸附试验(ELISA),按照Lam等人在{JournalofDentalResearch82(6):460-465,2003}中所述来分析细胞培养物的VEGF。将VEGF滴度与在空白孔中所培养的NIH3T3细胞的滴度相比较(负对照)。结果汇总在表10中，该结果表明没有VEGF分泌抑制。表IO.当曝露于含有8-臂PEG-胺或者扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时,由NIH3T3细胞所产生的VEGF。<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>a括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二曱磺酸酯形式的双官能交联剂。实施例82-87未损伤组织的体内组织应答下面的实施例证实了当用于完整的兔子肠浆膜上时，在粘合剂水凝胶中的扩链聚胺产物不产生不利的组织应答。将在高压灭菌的橡胶盖管瓶中的与实施例33所述的同样的右旋糖苷二醛溶液(25重量o/o,在去离子高压灭菌水中)、MW10000的8-臂PEG-胺溶液(30重量％，在去离子高压灭菌水中)和实施例的扩链聚胺产物溶液(30重量％，在去离子高压灭菌水中)、双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)和静态混合管尖(8-梯级，MixPacML2.5-08-SM)通过Y放射进行灭菌。在灭菌手术区中，将该灭过菌的双管注射器的一个管中装入灭过菌的25重量％的右旋糖苷二醛溶液，在另外一个管中装入灭过菌的30重量％的MW10000的8-臂PEG-胺溶液(对照)，或者装入实施例的扩链聚胺产物，并且该注射器装备有灭菌静态混合管尖。将五个雌性白色新西兰兔(4.0-4.6kg)禁食一整夜，麻醉，剃毛，洗净和盖上消毒盖布(dmped)。通过常规剖腹手术技术将每个兔子的小肠取出，并将消过毒的粘合剂水凝胶(大约0.6mL)从消过毒的双管注射器挤出来形成包围肠浆膜表面的1.5cm宽的带子，从肠系膜到肠系膜。将水凝胶粘合剂施用到两个位置。位置1是十二指肠，到小肠起点为10cm;位置2是回肠，在位置1下方10-20cm。在进一步处理所述的肠之前，将水凝胶在每个位置保持30秒。使用常规的手术程序将该腹膜和腹部闭合。手术后三天，通过吸入二氧化碳使兔子安乐死，并立即检查所述的处理位置的粘合剂存在、总体的组织应答和纤维性粘合的形成。根据用于ISO10993-12皮内反应性试验的得分体系来评价在施用位置处的红斑和水肺。结果汇总在表ll中，该结果表明没有不利的组织应答。47表ll.当未损伤的组织曝露于含有8-臂PEG-胺或者扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时的体内组织应答。实施例扩链聚胺产物a位置粘合剂的存在粘合水胂红斑对比例82无1疋否bobob对比例83无2疋否bobob84实施例26(PluronicP104)1專b疋否bobob85实施例26(Plu画c⑧P阔2疋否bobob86实施例31(Plu画c⑧F108)1疋否bobob87实施例31(Plu讓c⑧F阔2疋否boba括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二曱磺酸酯形式的双官能交联剂。b五个兔子每一个的观测或者得分是相同的。实施例88-89损伤组织的体内组织应答下面的实施例证实了当用于切开的(enterotomized)兔子肠浆膜上时，在粘合剂水凝胶中的扩链聚胺产物不产生不牙'J的组织应答。制备与实施例33所述相同的右旋糖苷二醛的已灭菌的溶液和实施例的扩链聚胺产物，并如同实施例82-85—样将其装入已灭菌的双管注射器中，该注射器装备有静态混合管尖。将五个雌性白色新西兰兔(4.0-4.6kg)禁食一整夜，麻醉，剃毛，洗净和盖上消毒盖布。通过常规剖腹手术技术将每个兔子的小肠取出，并将消过毒的粘合剂水凝胶(大约0.6mL)从消过毒的双管注射器挤出来形成包围十二指肠的浆膜表面的1.5cm宽的带子，到小肠起点为10cm，从肠系膜到肠系膜(位置1)。使粘合剂水凝胶保持2min。将回肠在位置1下方10-20cm和肠系膜对面切出长度为0.5cm并垂直于纵轴的切口。将伤口用3或者4个中断的6/0Vicryl缝线进行闭合，并将消过毒的粘合剂水凝胶从消过毒的双管注射器挤出来形成包围回肠的浆膜表面的1.5cm宽的带子，从肠系膜到肠系膜，目的是覆盖肠切开的位置(位置2)。在该水凝胶保持2min之后，使用常规的手术程序将该腹膜和腹部闭合。手术后三天，通过吸入二氧化碳使兔子安乐死，并立即检查所述的处理位置的粘合剂存在、总体组织应答和纤维性粘合的形成。根据用于ISO10993-12皮内反应性试验的得分体系来评价在施用位置处的红斑和水肿。结果汇总在表12中，该结果表明没有不利的组织应答。表12.当损伤的组织曝露于含有扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时的体内应答。<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>0a括号中的名称表示用于制造扩链聚胺产物的二曱磺酸酯形式的双官能交联剂。b五个兔子每一个的观测或者得分是相同的。实施例90将染料混入到含有扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶中该实施例证实了当染料混入到含有扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时，染料的颜色稳定性。该染料在任意一个用于形成粘合剂水凝胶的组份溶液中也是稳定的。实施例26的扩链聚胺产物溶液(25重量％，含有333ppm的酸性绿25)和与实施例33所述的相同的右旋糖苷二醛溶液(25重量％,其含有333ppm的酸性绿25)是在去离子水中制备的。将该溶液在RT和环境压力下储存并定期观察。42天之后，两种溶液仍然都是暗的土耳其玉色。在双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖苷二醛溶液，并在另外一个管中装入25重量％的实施例26的扩链聚胺产物溶液(含有333ppm的酸性绿25)，并且该注射器装备有静态混合管尖(12个梯级，MixPacML2.5-12-DM)。将粘合剂水凝胶从双管注射器挤出到玻璃板上来形成大约4mm宽的珠子。将该密封剂珠大概分为两半。一部分放在10mL的PBS中，另一部分放到含有彻底用去离子水弄湿的纸巾的ziplock塑料带中。定期观察样品。在l、10和21天之后，在ziplock袋中的水凝胶是绿色的。没有观察到颜色的浸出或者褪色。在24h和10天之后，储存在PBS中的样品仍然是明显绿色的，但是大约40%的染料已经浸出到PBS溶液中。实施例91对比当混入到含有扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时，酸性靛蓝颜色不稳定性该实施例证实了当混入到含有扩链聚胺产物的粘合剂水凝胶时或者当混入到用来形成该粘合剂水凝胶的任意一个组份成分溶液中时，对比的酸性凝蓝(FD&CBlue#2)的颜色不稳定性。实施例26的扩链聚胺产物溶液(25重量％，含有750ppm的酸性散蓝(FD&CBlue#2))和与实施例33所述的相同的右旋糖苷二醛溶液(其含有1000ppm的酸性龍蓝)是在去离子水中制备的。将该溶液在RT和环境压力下储存并定期观察。在16h之后，两个溶液都从从深蓝色褪色为铁锈橙。在双管注射器(MixPacSDL005-01-50M)的一个管中装入与实施例33所述的相同的25重量％的右旋糖苦二醛溶液，并在另外一个管中装入25重量％的实施例26的扩链聚胺产物溶液(含有1000ppm的酸性欷蓝)，并且该注射器装备有静态混合管尖(12个梯级，MixPacML2.5-12-DM)。将粘合剂水凝胶从双管注射器挤出到玻璃板上来形成大约4mm宽的珠子。将该密封剂珠大概分为两半。一部分放在10mL的PBS中，另一部分放在到含有彻底用去离子水弄湿的纸巾的ziplock塑料带中。在2h之后，两个样品都明显褪色。在16h之后，两个水凝胶样品已经褪色为黄橙色，但是没有观察到浸出。实施例92该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比为20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂聚氧杂环丁烷(MW2013)二曱磺酸酯。根据实施例20的方法，将l.Og的8-臂PEG-胺(MWIOOOO，实施例l)与11mg的聚氧杂环丁烷(MW2013)二曱磺酸酯(实施例19)反应来得到0.77g(76。/。产率)。NMR(500MHz，CDC13):53.58(m,930H)3.46(t,J=5.3Hz,16H)，3.42(t,J=6.4Hz，16H)，2.81(t,J=5.1Hz,14H),2.74(t,J=5.4Hz，2H),1.76(五重峰，J=6.4Hz,4.1H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出该扩链聚胺的M、、,为13150，比较而言8-臂PEG-胺初始材料的Mw为U040。实施例93该实施例说明具有亲电子端基的多臂聚醚(8-臂PEG(MW10000)八甲磺酸酯)的合成。向溶解在100mL二氯曱烷中的20g的8-臂PEG-OH(MW10000,NektarTransformingTherapeutics)中加入4.5mL三乙胺和2.5mL甲烷石黄酰基氯。将该混合物在RT搅拌一整夜，用200mL氯仿稀释，用3x80mL的1M磷酸二氬钾清洗，随后用80mL饱和碳酸钾清洗，干燥(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，4CTC)。将产物干燥(0.06托)来提供8-臂PEG(MWIOOOO)八曱磺酸酯(20.lg,94%产率):HNMR(500MHz,DMSO-d6)54.29(m，16H),3.67(m,16H)，3.50(m,900H),3.16(s，24H);通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出Mw7300,Mw/Mn1.0,Mz/Mw1.0和IV4.7mL/g。实施例94该实施例说明伯二胺交联剂PluronicP104二胺的合成。向溶解在16mL乙腈中的PluronicP104二甲磺酸S旨(实施例13,10g)中加入30mL浓氨水(28。/。w/w)。将该混合物在密封容器中在RT搅拌48h。将反应混合物用氮气鼓泡lh,然后浓缩(15托，40°C)。剩余的溶液用20mL饱和碳酸钾溶液稀释，用2x50mL氯仿萃取。将合并的氯仿层干燥(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，40°C)。残留物溶解在10mL水中，并将所形成的溶液蒸发直到透明(15托，40°C),冷冻和冷冻干燥来得到7.02g(72。/o产率)。HNMR(500MHz,DMSO-d6):53.50(m,~500H),2.62(m,4H)，1.03(d，JH5.8Hz，260H)。实施例95该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的具有亲电子端基的多臂聚醚(8-臂PEG(MW1OOOO)八甲磺酸S旨)和伯二胺交联剂(PluronicP104二胺)。向溶解在10mL的DMF中的5.0g的8-臂PEG(MW10000)八甲磺酸酯(实施例91)中加入在2mL的DMF中的139mg的PluronicPI04二胺(实施例92)。在将该混合物RT搅拌一整夜之后，将其与32mL浓氨水51合并，并且在密封容器中RT搅拌3天。将反应混合物用氮气鼓泡lh,与2g碳酸钾合并，并用3x25mL二氯甲烷萃取。将合并的二氯曱烷层干燥(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，40°C)。将产物进一步干燥(0.06托)来得到4.9g(87。/。产率)。)HNMR(500MHz,CDC13)53.60(m，10隨)，3.47(t,J=5.2Hz,16H)，2.82(t，J=5.3Hz，15H)，2.76(t，J=5.5Hz,1H)，1.10(m,9.8H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出该扩链聚胺的Mw为37660,比较而言8-臂PEG八曱磺酸酯初始材料的Mw为7300。实施例96该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的4-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG-PPG-PEG(PluronicP104)二甲磺酸酯。向溶解在2mL的DMF和lmL二氯甲烷中的l.OOg的4-臂PEG-胺(MW2000,实施例4)中加入溶解在lmL二氯甲烷中的0.151g的PEG-PPG-PEG(PluronicP104)二曱磺酸酯(实施例13),将该混合物RT搅拌一整夜。混合物用lOmL氯仿稀释，用3x2mL的1M碳酸钾清洗。将合并的水性洗涂液用lmL氯仿反萃取。将合并的氯仿层千燥(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，40。C)来得到.07g(93。/。产率)。^NMR(500MHz，CDCl3)53.60(m，238H),3.38(m,14H),2.82(m,7H)，2.76(t，J=5.4Hz，1H)，l.lO(m，10.5H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC(同实施例l)给出该扩链聚胺的Mw为3600,比较而言4-臂PEG-胺初始材料的Mw为2420。实施例97该实施例说明伯二胺交联剂PEG6000二胺的合成。向溶解在4mL乙腈中的PEG6000二甲磺酸酯(实施例6，3.0g)中加入8mL浓氨水(28。/。w/w)。将该混合物在密封容器中在RT搅拌48h。将反应混合物在30mL氯仿和10mL饱和碳酸钾溶液之间分配。干燥氯仿层(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，4(TC)。残留物进一步真空下(0.2托，RT)干燥来得到2.64g(89Q/。产率)。HNMR(500MHz,DMSO-d6):53.50(m，578H),2.63(t,J=5.8Hz,4H)。实施例98该实施例说明二异氰酸酯交联剂PEG6000二异氰酸酯的合成。向溶解在25mL的甲苯中的lg的PEG6000二胺(实施例97)中加入60mg三光气和0.28mL的二异丙基乙胺。将反应混合物在氮气下在70-80。C加热3h。将反应混合物冷却到RT，并用20mL石油醚稀释。通过过滤分离形成的沉淀物，用石油醚清洗，并真空干燥(0.2托，RT)。&NMR(500MHz,CDC13):53.60(m,708H),3.37(t，JN5.2Hz,4H)。将该产物无需进一步净化而用于实施例99中。实施例99该实施例说明扩链聚胺产物的制备，该聚胺产物衍生自摩尔比20:1的8-臂PEG-胺和双官能交联剂PEG6000二异氰酸酯。向溶解在3mL二氯曱烷中的l.OOg的8-臂PEG-胺(MW10000,实施例l)中加入溶解在lmL二氯曱烷中的36mg的PEG6000二异氰酸酯(实施例98),将该混合物RT搅拌lh。混合物用10mL氯仿稀释，用2x2mL的1M磷酸二氢钾清洗，随后用3x2mL的1M碳酸钾清洗。将合并的水性洗涤液用lmL氯仿反萃取。将合并的氯仿层干燥(硫酸镁)，过滤和蒸发(15托，40。C)来得到扩链聚胺产物。！HNMR(500MHz,CDC13)53.61(m,1000H),3.32(q,J=5.4Hz,14H),2.78(t，J=5.0Hz,12H)。通过光散射的具有质量分析的水性SEC[30°C,磷酸盐緩沖盐水(PBS,10mM磷酸盐,2.7mMKCl，0.137MNaCl,pH7.4)，0.5mL/min，两个S叩remaLinearM混合床柱+1LuxS，ema訓OA柱(PolymerStandardsServices),dn/dc0.135mL/g]给出该扩链聚胺的Mw为18230,比较而言8-臂PEG-胺初始材料的Mw为13170。权利要求1.一种通过下面的方法制得的物质合成物，所述的方法包括任选在第一反应溶剂中，将至少一种具有至少三个臂的多臂聚醚胺与至少一种下式的双官能交联剂进行反应X1-R-X2该多臂聚醚胺与该双官能交联剂的摩尔比是大约4∶1-大约50∶1，由此形成扩链聚胺产物；并且其中(i)该多臂聚醚胺的至少三个臂是用伯胺基团封端的；(ii)该多臂聚醚胺具有大约450-大约200,000道尔顿的重均分子量；(iii)X1-R-X2是一种聚合物，其具有大约2,000-大约20,000道尔顿的重均分子量；(iv)R是二价聚合物基团；(v)X1和X2是能够与伯胺基团反应形成碳-氮键的基团；条件是该扩链聚胺产物的特征在于20℃时其在水中的溶解度至少是20wt％。2.权利要求1的合成物，其进一步的特征在于其通过尺寸排阻色谱法所测定的重均分子量比用来制造该扩链聚胺产物的多臂聚醚胺的重均分子量至少高约10%。3.权利要求1的合成物，其中X'和乂2选自-CHO，-C02H,-CC^R1,-NCO，-NCS,-COC1,-COBr，-COF，-〇Ms,-OTs,-OTf,三氟乙磺酸酯，Cl，Br，I和缩水甘油醚；其中R'是N-琥珀酰亚胺基、4-硝基苯基、2，4-二硝基苯基或者五氟苯基基团。4.权利要求1的合成物，其中X!和X2选自-OMs，-OTs,-OTf,三氟乙磺酸酯，Cl,Br和I。5.权利要求1的合成物，其中二价聚合物基团R选自环氧乙烷的二价均聚物；和环氧乙烷与环氧丙烷的二价嵌段和无规共聚物。6.权利要求1的合成物，其中多臂聚醚胺具有大约2,000-大约40,000道尔顿的重均分子量。7.权利要求1的合成物，其中多臂聚醚胺是一种八臂聚乙二醇，其具有用伯胺基团封端的八个臂，并具有大约9,000-大约11,000道尔顿的重均分子量。8.—种通过下面的方法制得的物质合成物，所述的方法包括步骤a)任选的在第二反应溶剂中，将至少一种具有至少三个臂和具有至少三个亲电子端基的多臂聚醚，与下式的伯二胺交联剂进行反应NH2-R2-NH2该多臂聚醚与该伯二胺交联剂的摩尔比是大约4:l-大约50:1,由此形成具有残留亲电子端基的扩链聚合物；和，b)任选的在第三反应溶剂中，处理所述的扩链聚合物，目的是将残留的亲电子端基转化为胺端基来提供扩链聚胺产物；其中(i)所述的多臂聚醚至少三个臂是用亲电子端基封端的，该亲电子端基能够与伯胺反应形成碳-氮键；(ii)该多臂聚醚具有大约450-大约200,000道尔顿的重均分子量；和(iii)W是二价聚合物基团；(iv)NH2-R、NH2是一种聚合物，其具有大约2,000-大约20,000道尔顿的重均分子量；条件是该扩链聚胺产物的特征在于2(TC时其在水中的溶解度至少是20wt%。9.权利要求8的合成物，其中亲电子端基选自-OMs，-OTs，-OTf,三氟乙磺酸酯，Cl,Br和I;并且步骤(b)包括将扩链聚合物与氨进行反应来提供扩链聚胺产物。10.权利要求8的合成物，其中亲电子端基选自-OMs,-OTs，-OTf，三氟乙磺酸酯，Cl，Br和I;并且步骤(b)包括下面的步骤(i)将扩链聚合物与碱金属叠氮化物反应来提供扩链的叠氮基聚合物；和(ii)将该扩链叠氮基聚合物用还原剂还原来提供扩链聚胺产物。11.权利要求8的合成物，其中亲电子端基是羧酸；步骤(a)进一步包括二酰亚胺脱水剂；并且步骤(b)包括下面的步骤(i)将扩链聚合物与足量的酰基卣试剂进行反应来提供扩链的酰基卤聚合物；(ii)将该扩链的酰基卣聚合物与足够的氨反应来提供扩链伯酰胺聚合物；和(iii)将该扩链伯酰胺聚合物与足够的活性离素源和碱金属氢氧化物进行反应来提供扩链聚胺产物。12.权利要求8的合成物，其中亲电子端基是羧酸；步骤(a)进一步包括二酰亚胺脱水剂；并且步骤(b)包括下面的步骤(i)将扩链聚合物与足量的酰基卣试剂进行反应来提供扩链的酰基由聚合物；(ii)将该扩链的酰基卣聚合物与足够的碱金属叠氮化物反应来提供扩链的酰基叠氮聚合物；和(iii)加热该扩链的酰基叠氮聚合物来引起重排，用以提供扩链聚胺产物。13.权利要求8的合成物，其中亲电子端基是活化的羧酸酯或者羧酰氯；并且步骤(b)包括下面的步骤(i)将扩链聚合物与足够的氨反应来提供扩链伯酰胺聚合物；和(ii)将该扩链伯酰胺聚合物与足够的活性卣素源和碱金属氩氧化物反应来提供扩链聚胺产物。14.权利要求8的合成物，其中亲电子端基是活化的羧酸酯或者羧酰氯；并且步骤(b)包括下面的步骤(!)将扩链聚合物与足够的碱金属叠氮化物反应来提供扩链酰基叠氮聚合物，和(ii)加热该扩链酰基叠氮聚合物来引起重排，以提供扩链的聚胺反应产物。15.权利要求8的合成物，其中亲电子端基是醛，并且步骤(b)包括下面的步骤(i)将扩链聚合物与足够的氨反应来提供扩链的亚胺聚合物；和(ii)还原该扩链的亚胺聚合物来提供扩链聚胺产物。16.权利要求8的合成物，其进一步的特征在于其通过尺寸排阻色谱法所测定的重均分子量比用来制造该扩链聚胺产物的多臂聚醚的重均分子量至少高约10%。17.权利要求8的合成物，其中二价聚合物基团W选自环氧乙烷的二价均聚物；和环氧乙烷与环氧丙烷的二价嵌段和无规共聚物。全文摘要本发明的一种实施方案是一种由下面的方法制得的可水溶的扩链聚胺产物，所述的方法包含将多臂聚醚胺与式X¹-R-X²的双官能交联剂进行反应。另外一种实施方案是一种由下面的方法制得的可水溶的扩链聚胺产物，所述的方法包含将具有至少三个臂和三个亲电子端基的多臂聚醚与式NH₂-R²-NH₂的伯二胺交联剂进行反应，随后处理该扩链产物来将残留的亲电子端基转化为胺端基。所述的扩链聚胺产物与氧化多糖的交联提供了具有改进弹性的有用的组织粘合剂，该粘合剂提供了与基础组织更大的相容性以及在水性环境中提高的稳定性。文档编号C08G73/02GK101479320SQ200780024511公开日2009年7月8日申请日期2007年6月22日优先权日2006年6月30日发明者G·D·菲古利,H·K·舍诺申请人:纳幕尔杜邦公司