本发明涉及天然药物及药物化学领域，具体涉及一类新的冬青素衍生物，采用了拼合原理和点击化学反应，分别将具有不同作用机制的阿司匹林和一氧化氮分子链接到冬青素分子的C3，19-OH以及C24orand28-COOH上，从而制备了一系列新的冬青素衍生物。本发明还公开了这些冬青素衍生物的制备方法以及使用这些新型衍生物用于抗血小板聚集的用途。
背景技术：
据世界心脏联盟统计，全世界范围内每死亡3人中，就有1人的死因是心血管病症。心血管疾病的死亡率仍远高于包括癌症、艾滋病在内的其他疾病，成为人类健康的“第一杀手”。在我国近年来随着居民生活水平的不断提高，自然环境的不断恶化，老年人心血管疾病的患病率、发病率和死亡率都呈逐年上升的趋势。据报道城市老年居民患心血管的病率高达62％。可见老年人心血管疾病的发病率是如此之高。在我国预防治疗心血管疾病已经变得刻不容缓。心血管疾病主要包括冠心病、高血压、中风和外周血管病。为了寻找到更安全、有效，并能够长期使用，或者具有增效减毒作用的抗血栓药物，我们将具有抗心血管疾病作用的传统中药材冬青科(Aquifoliaceae)冬青属植物毛冬青(IlexpubescensHook.etArn.)作为研究对象，并从中分离得到了大量的五环三萜类化合物冬青素(IlexgeninA)。YongNamHan等研究表明，冬青素具有很强的抑制凝血酶诱导的血小板聚集过程中产生的丙二醛的作用，其IC50为0.71mmol。(ArchPharmRes，1991，14(4)：352-356；1993，16(3)：209-212；1987，10(2)：115-120)，然而关于冬青素的化学研究、衍生物抗血小板聚集作用及其他通路抗血小板聚集作用的研究却非常少见。此外，迄今为止阿司匹林仍然是治疗心脑血管疾病的一线用药，但是由于阿司匹林的耐药性限制了其使用范围。另一方面，一氧化氮是具有扩张血管功能的内源性小分子气体化合物，在心脑血管疾病中的血小板聚集和血栓形成疾病的治疗中起到非常重要的作用。考虑到血小板聚集是由不同途径引起的，目前抗血小板聚集通常联合使用具有不同作用机制的药物进行治疗。因此，我们采用了拼合原理和点击化学反应，分别将阿司匹林和一氧化氮分子链接到冬青素分子上，从而制备了一系列新的冬青素衍生物。
技术实现要素：
本发明在研究抗血小板聚集活性物质的基础上采用了拼合原理和点击化学反应，分别将具有不同作用机制的阿司匹林和一氧化氮分子链接到冬青素分子的C3，19-OH以及C24orand28-COOH上，从而制备了一系列新的冬青素衍生物。本发明还公开了这些冬青素衍生物的制备方法以及使用这些新型衍生物用于抗血小板聚集的用途。初步药理实验显示NO和阿司匹林与冬青素拼合的产物对ADP诱导的血小板聚集有较好效果，且活性普遍为阿司匹林的4-9倍，而对凝血酶诱导的血小板聚集效果与阿司匹林相当。本发明的化合物结构式如下：本发明还包括化合物I的对映异构体和非对映异构体，还涉及它们与可药用的酸或碱加成而成的盐，这些化合物同样包括在本发明范围内，具有同样的药效。结构式I化合物中R1代表氢、苯甲酰基、苯乙酰基、C1-C6的烷酰基；或被1～3个相同的或不同的X基团取代的上述基团，也即被1～3个相同的或不同的X基团取代的苯甲酰基、苯乙酰基、C1-C6的烷酰基。X代表直链或支链的C1-C6的烷基、OH、COOH、甲酰基、氰基、羟甲基、C1-C6烷基取代的氨基或卤原子。R2代表氧原子、苯甲酰基、苯乙酰基、C1-C6的烷酰基；或被1～3个相同的或不同的X基团取代的上述基团，也即被1～3个相同的或不同的X基团取代的苯甲酰基、苯乙酰基、C1-C6的烷酰基。R3代表苄基、苯乙基、C1-C6的烷基；(CH2)nBr，(CH2)nONO2，(CH2)nN3，n＝2～10。R4代表氢、苄基、苯乙基、C1-C6的烷基；(CH2)nBr，(CH2)nONO2，(CH2)nN3，n＝2～10。R1代表氢、苯甲酰基，更优选氢。R2代表氢、氧原子、苯甲酰基，更优选氢、氧原子。R3优选代表(CH2)nBr，(CH2)nONO2，(CH2)nN3，n优选3～6。R4优选代表H，(CH2)nBr，(CH2)nONO2，(CH2)nN3，n优选3～6。根据本发明，本发明化合物可以根据下面反应路线制备：其中R1、R2、R3的定义同权利要求1。该方法更详细更优选的包括如下步骤：其中R1、R2、R3的定义同权利要求1。本发明的化合物和含有它们的药物组合经证实对ADP诱导的血小板聚集抑制率普遍为阿司匹林的4-9倍，而对凝血酶诱导的血小板聚集的抑制效果与阿司匹林相当。从而能够确定：本发明产物可用于治疗与血小板聚集作用相关的疾病，主要为心血管系统疾病。这些化合物将优选于治疗心血管疾病，更优选与治疗与血小板聚集有关的心血管疾病。本发明还涉及药物组合物，其包含至少一种式(I)化合物本身或其药学上可接受的盐的制备方法或其与可药用的赋型剂的组合。下面是本发明部分化合物的药理学试验及数据。抗ADP和抗凝血酶诱导的血小板聚集活性药物筛选1、试剂与材料1.1动物：清洁级雄性SD大鼠，300～350g，许可证号：SCXK(浙)2008-0033，由浙江省实验动物中心提供。1.2试剂：二磷酸腺苷(adenosinediphosphate，ADP)，LOT078K7001，Sigma；氨基甲酸乙酯，批号：100816，上海青析化工科技有限公司；柠檬酸三钠，批号：09-09-05，上海凌峰化学试剂有限公司；凝血酶，批号：200905008，南京新百药业有限公司。1.3仪器：低温离心机，型号1-15K，SigmaCorporation；血小板聚集仪，型号LBY-NJ，北京普利生仪器有限公司。2、试验方法2.1Born比浊法测定血小板聚集功能大鼠腹腔注射20％乌拉坦1g/kg麻醉，腹主动脉取血，用3.8％枸橼酸钠抗凝(血与抗凝剂体积比为9∶1)。将其1000r/min，离心10min，取上清液(即富血小板血浆PRP)，剩余部分3000r/min，离心10min，取上清液(即贫血小板血浆PPP)。用PPP调整PRP中血小板数为3～4×1011/L。以0.5％DMSO作为溶媒对照，测定时以PPP调零，将溶媒或药物(10μL)与PRP(280μL)在37℃比浊杯内孵育5min，分别加入诱导剂ADP溶液10μl(终浓度为10μM)或凝血酶溶液10μl(终浓度为5U/ml)，按Born比浊法测定血小板聚集率，记录5min内最大聚集率。2.2结果计算聚集抑制率％＝(对照组聚集率-药物组聚集率)/对照组聚集率×100％3、试验结果3.1化合物对ADP诱导大鼠血小板聚集的影响结果如表1所示，本发明冬青素衍生物均具有抑制ADP诱导的血小板聚集活性，且比阳性药冬青素和阿司匹林活性要强很多，特别是NO-冬青素和阿司匹林-冬青素杂合物活性普遍较好，是冬青素的2-3倍，是阿司匹林的约25倍。表1本发明部分化合物抑制ADP诱导的血小板聚集率IC50值3.2化合物对凝血酶诱导大鼠血小板聚集的影响结果如图1所示，本发明冬青素(IlexgeninA)衍生物除I-1、I-2、I-9、I-10、I-16外均具有抗凝血酶诱导的血小板聚集活性，且大部分化合物在0.1mM浓度下比阳性药阿司匹林(0.25mM)活性要强，其中化合物I-3、I-4、I-6、I-11、和I-13在0.1mM浓度下与阿司匹林(0.25mM)活性相当。附图说明图1化合物对凝血酶诱导大鼠血小板聚集的影响大鼠腹腔注射20％乌拉坦1g/kg麻醉，腹主动脉取血，用3.8％枸橼酸钠抗凝(血与抗凝剂体积比为9∶1)。将其1000r/min，离心10min，取上清液(即富血小板血浆PRP)，剩余部分3000r/min，离心10min，取上清液(即贫血小板血浆PPP)。用PPP调整PRP中血小板数为3～4×1011/L。以0.5％DMSO作为溶媒对照，测定时以PPP调零，将溶媒或药物(10μL)与PRP(280μL)在37℃比浊杯内孵育5min，加入诱导剂凝血酶溶液10μl(终浓度为5U/ml)，按Born比浊法测定血小板聚集率，记录5min内最大聚集率，计算聚集抑制率，结果以表示。*：p＜0.05，**：p＜0.01vscontrolgroup(0.0％)(Student’s-ttest).具体实施方式实施例1IlexgeninA溴代烷酯衍生物(I-1)称取冬青素502mg(1mmol)溶于20mlDMF中，加入1.105g(8mmol)碳酸钾室温下搅拌30分钟，然后各加入8mmol1，3-二溴丙烷0.81ml，继续搅拌3h停止反应。过滤，滤液中加入2倍量的盐酸水溶液，再加入1倍量的水饱和乙酸乙酯萃取2-3次，合并乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯，固体经硅胶柱层析，石油醚乙酸乙酯洗脱，得白色粉末395mg，收率78％。无色针晶(甲醇)，m.p.＞300℃，ESI-MSm/z780.9[M+H]+，分子量为744，分子式为C36H56Br2O6.1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.35(1H，t-like)，4.08-4.31(4H，m，CH2O-×2)，3.43-3.50(4H，m，-CH2Br)，2.58(1H，s，18-H)，0.73(3H，s)，0.79(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.6Hz)，1.21(3H，s)，1.27(3H，s)，1.42(3H，s)。实施例2IlexgeninA溴代烷酯衍生物(I-2)制备过程同I-1，用1，4-二溴丁烷取代1，3-二溴丙烷得产物I-2，白色粉末，收率为81％。ESI-MSm/z773[M+H]+，分子量为772，分子式为C38H60Br2O6。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.36(1H，t-like)，3.97-4.17(4H，m，CH2O-×2)，3.43(4H，m，-CH2Br×2)，3.08(1H，m，H-3)，2.59(1H，s，18-H)，0.72(3H，s)，0.78(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.6Hz)，1.21(3H，s)，1.26(3H，s)，1.41(3H，s)。实施例3IlexgeninA溴代烷酯衍生物(I-3)制备过程同I-2，用1，5-二溴丁烷取代1，4-二溴丙烷得产物I-3，白色粉末，收率为45％。ESI-MSm/z801[M+H]+，分子量为800，分子式为C40H64Br2O6。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.36(1H，t-like)，3.96-4.14(4H，t，J＝6.7，13.4Hz，CH2O-×2)，3.40(4H，m，-CH2Br×2)，3.09(1H，m，H-3)，2.60(1H，s，18-H)，0.72(3H，s)，0.78(3H，s)，0.96(3H，d，J＝6.4Hz)，1.21(3H，s)，1.26(3H，s)，1.41(3H，s)。实施例4IlexgeninA溴代烷酯衍生物(I-4)制备过程同I-3，用1，6-二溴丁烷取代1，5-二溴丙烷得产物I-4，白色粉末，收率为72％。ESI-MSm/z829[M+H]+，分子量为828，分子式为C42H68Br2O6。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.35(1H，t-like)，3.94-4.13(4H，m，CH2O-×2)，3.41(4H，m，-CH2Br×2)，3.07(1H，m，H-3)，2.60(1H，s，18-H)，0.72(3H，s)，0.78(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.8Hz)，1.21(3H，s)，1.26(3H，s)，1.41(3H，s)。实施例5IlexgeninA硝酸酯衍生物(I-5)称取I-1约0.5mmol，溶于四氢呋喃/乙腈(1∶1)混合溶剂15ml中，分别加入约1.2mmol的AgNO3，避光加热回流2-3h，反应结束后过滤，母液回收溶剂后，固体经硅胶柱层析，石油醚∶丙酮洗脱，得白色粉末40mg，收率40％。ESI-MSm/z747[M+K]+，分子量为708，分子式为C36H56N2O12。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.35(1H，brs，H-12)，4.11-4.53(8H，m，COOCH2×2，CH2ONO2×2)，3.09(1H，m，H-3)，2.58(1H，s，H-18)；2.00-2.53(4H，m，COO-CH2CH2CH2-ONO2×2)，0.68(3H，s)，0.77(3H，s)，0.93(3H，d，J＝4.0Hz)，1.21(3H，s)，1.26(3H，s)，1.42(3H，s).13CNMR(75MHz，CDCl3)δ：39.0(C-1)，28.0(C-2)，78.3(C-3)，49.0(C-4)，56.3(C-5)，20.3(C-6)，32.9(C-7)，39.7(C-8)，46.4(C-9)，37.4(C-10)，23.7(C-11)，129.0(C-12)，138.1(C-13)，41.1(C-14)，28.1(C-15)，25.4(C-16)，48.0(C-17)，53.2(C-18)，73.0(C-19)，41.3(C-20)，25.8(C-21)，37.3(C-22)，24.1(C-23)，177.6(C-24)，13.2(C-25)，16.6(C-26)，23.6(C-27)，177.4(C-28)，27.3(C-29)，16.0(C-30)，69.9(CH2ONO2×2)，60.3，60.2(COOCH2×2)，26.2(COOCH2CH2CH2ONO2×2).实施例6IlexgeninA硝酸酯衍生物(I-6)制备过程同I-5，用I-2取代I-1得产物I-6，白色粉末，收率为81％。ESI-MSm/z737[M+H]+，分子量为736，分子式为C38H60N2O12。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.34(1H，brs，H-12)，4.48(4H，q，J＝6.2，12.5Hz，-CH2ONO2×2)，4.00-4.17(4H，-COOCH2-×2)，3.09(1H，dd，J＝4.2，11.8Hz，H-3)，2.57(1H，s，H-18)，1.56-1.87(8H，m，OCH2(CH2)2CH2ONO2×2)，0.70(3H，s)，0.78(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.6Hz)，1.21(3H，s)，1.29(3H，s)，1.40(3H，s)。实施例7IlexgeninA硝酸酯衍生物(I-7)制备过程同I-6，用I-3取代I-2得产物I-7，白色粉末，收率为45％。ESI-MSm/z799.6[M+Cl]-，m/z765.5[M+H]+，分子量为764，分子式为C40H64N2O12。实施例8IlexgeninA硝酸酯衍生物(I-8)制备过程同I-7，用I-4取代I-3得产物I-8，白色粉末，收率为72％。分子量为792，分子式为C42H68N2O12。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：5.35(1H，brs，H-12)，4.48(4H，q，J＝5.3，11.8Hz，-CH2ONO2×2)，4.00-4.17(4H，m，-COOCH2-×2)，1.35-1.86(16H，m，OCH2(CH2)4CH2ONO2×2)，3.09(1H，H-3)，2.58(1H，s，H-18)，0.70(3H，s)，0.77(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.6Hz)，1.21(3H，s)，1.27(3H，s)，1.41(3H，s)。实施例9IlexgeninA叠氮衍生物(I-9)称取I-1约0.58mmol，溶于DMF溶剂15ml中，加入约1.2mmol的NaN3，加热回流4h，反应结束后，回收溶剂，固体经硅胶柱层析，石油醚：丙酮洗脱，得白色粉末，305mg，收率46％。ESI-MSm/z703.7[M+Cl]-，691.5[M+Na]+，669[M+H]+，分子量为668，与I-1相比质荷比少了76，正好等于两个溴原子被叠氮基所取代的产物分子量，氢谱中4.03-4.24(4H，m，-COOCH2-×2)，3.43(2H，t，J＝6.6，13.3Hz，-CH2N3)，3.39(2H，t，J＝6.6，13.3Hz，-CH2N3)，1.56-1.94(4H，m，-COOCH2CH2CH2N3×2)，均证明了叠氮基的存在，分子式为C36H56N6O6。实施例10IlexgeninA叠氮衍生物(I-10)制备过程同I-9，用I-2取代I-1得产物I-10，白色粉末，收率为52％。ESI-MSm/zm/z719.5[M+Na]+，分子量为696，与II-2相比，质荷比少了76，正好等于两个溴原子被叠氮基所取代的产物分子量。红外光谱IR(KBr，cm-1)中2097.5(N3)也证实了叠氮基已经连接到母核上；氢谱1H-NMR(CDCl3，500MHz)中4个连氧质子信号δ：3.98-4.17(4H，m，-COOCH2-×2)，4个与硝酸酯连接质子信号δ：3.32(4H，m，-CH2ONO2×2)以及烷基质子信号δ：1.50-1.81(8H，m，-COOCH2CH2CH2CH2N3×2)，确定分子式为C38H60N6O6。实施例11IlexgeninA叠氮衍生物(I-11)制备过程同I-10，用I-3取代I-2得产物I-11，白色粉末，收率为52％。ESI-MSm/z747.5[M+Na]+，分子量为724，与II-3相比，质荷比少了76，正好等于两个溴原子被叠氮基所取代的产物分子量，结合氢谱中δ：3.95-4.14(4H，m，-COOCH2-×2)，3.26-3.29(4H，m，-CH2N3)，确定分子式为C40H64N6O6。实施例12IlexgeninA叠氮衍生物(I-12)制备过程同I-11，用I-4取代I-3得产物I-12，白色粉末，收率为46％。ESI-MSm/z775.6[M+Na]+，分子量为752，与化合物II-4相比，质荷比少了76，正好等于两个溴原子被叠氮基所取代的产物分子量。氢谱1H-NMR(CDCl3，500MHz)中24个连氧质子信号3.93-4.14(4H，m，-COOCH2-×2)，24个连硝酸酯质子信号3.25-3.37(4H，m，-CH2ONO2×2)以及烷基质子信号1.53-1.83(8H，m，-COOCH2CH2CH2CH2CH2CH2N3×2)；与氢谱相对应的碳谱13CNMR(125MHz，CDCl3)数据δ：63.2，63.2(-COOCH2-×2)，58.3，58.2(CH2CH2N3-×2)，20.9，25.5，27.0，33.0(-COOCH2CH2CH2CH2CH2CH2N3×2)，最终确定分子式为C42H68N6O6。实施例13IlexgeninA1，2，3-三唑类衍生物(I-13)将称好的I-9约0.47mmol和乙酰水杨酸丙炔酯(0.94mmol)，溶于CH2Cl2溶剂5ml中(液1)，另外称取5H2O·CuSO4(0.61mmol)于反应瓶中，加水3ml溶解(液2)，在N2保护下加入维生素C钠(1.22mmol)溶液2ml(液3)，N2保护下加入液1，80℃加热回流3h，TLC检测反应，反应结束后，回收溶剂，固体经硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯洗脱，得白色粉末，166mg，收率55％。SI-MSm/z1127.7[M+Na]+，分子量为1104，分子式为C60H76N6O14。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：7.71，7.66(2H，s，吡咯环上氢)，7.99(2H，d，J＝7.8Hz，Ar-H)，7.54(2H，J＝7.8，15.4Hz，Ar-H)，7.29(2H，m，Ar-H)，7.08(2H，J＝8.0Hz，Ar-H)，5.36(1H，brs，H-12)，5.29(4H，s，-CH2OCO-×2)，4.41-4.45(4H，m，-COOCH2×2)，4.17-4.00(4H，CH2-N×2)，3.08(1H，m，H-3)，2.57(1H，s，H-18)，2.27(6H，s，CH3O-×2)，0.70(3H，s)，0.77(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.6Hz)，1.21(3H，s)，1.27(3H，s)，1.42(3H，s)。13CNMR(125MHz，CDCl3)δ：39.0(C-1)，28.2(C-2)，78.2(C-3)，49.1(C-4)，56.3(C-5)，20.3(C-6)，33.0(C-7)，39.7(C-8)，46.5(C-9)，37.3(C-10)，23.8(C-11)，129.0(C-12)，138.0(C-13)，41.1(C-14)，27.9(C-15)，25.5(C-16)，48.0(C-17)，53.3(C-18)，73.0(C-19)，41.3(C-20)，25.9(C-21)，37.4(C-22)，24.0(C-23)，177.7(C-24)，13.3(C-25)，16.8(C-26)，23.7(C-27)，177.5(C-28)，27.3(C-29)，16.0(C-30)，60.8，60.4(-CH2OCO-)，47.3，47.2(CH2CH2N-×2)，123.7(NCHCHCH2O×2)，150.6(NCHCCH2O×2)，58.2，58.1(-CHCHCH2OCO-×2)，164.4(ArCOO-×2)，134.0×2，131.8×2，125.9×2，123.7×2，124.0，123.0(Ar-C)，142.8(CH3COOCCH×2)，169.6(ArCO-×2)，29.3，29.2(COOCH2CH2CH2N×2)，20.9(CH3COO-×2)。实施例14IlexgeninA1，2，3-三唑类衍生物(I-14)制备过程同I-13，用I-10取代I-9得产物I-14，白色粉末，收率为63％。ESI-MSm/z1155.7[M+Na]+，分子量为1132，分子式为C62H80N6O14。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：10.6(2H，s，OH)，7.64(2H，s，吡咯环上氢)，8.00(2H，dt，J＝8.0Hz，Ar-H)，7.55(2H，td，J＝1.7，8.0Hz，Ar-H)，7.29(2H，tt，J＝1.1，5.0Hz，Ar-H)，7.08(2H，d，J＝8.0Hz，Ar-H)，5.32(1H，brs，H-12)，5.29(4H，s，-CCH2OCO-×2)，4.36-4.39(4H，m，-COOCH2×2)，3.99-4.17(4H，m，CH2-N×2)，3.08(1H，m，H-3)，2.57(1H，s，H-18)，2.26(6H，CH3O-×2)，0.67(3H，s)，0.74(3H，s)，0.93(3H，d，J＝6.7Hz)，1.20(3H，s)，1.27(3H，s)，1.38(3H，s)。实施例15IlexgeninA1，2，3-三唑类衍生物(I-15)制备过程同I-14，用I-11取代I-12得产物I-15，白色粉末，收率为71.3％。ESI-MSm/z1183.7[M+Na]+，分子量为1160，分子式为C64H84N6O14。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：10.62(2H，s，OH)，7.63(2H，s，吡咯环上氢)，8.00(2H，d，J＝8.0Hz，Ar-H)，7.55(2H，tt，J＝1.5，7.5Hz，Ar-H)，7.29(2H，tt，J＝1.5，7.5Hz，Ar-H)，7.08(2H，d，J＝8.0Hz，Ar-H)，5.32(1H，brs，H-12)，5.29(2H，s，-CCH2OCO-×2)，4.32-4.38(4H，m，-COOCH2×2)，3.92-4.13(4H，CH2-N×2)，3.06(1H，m，H-3)，2.56(1H，s，H-18)，2.26(6H，CH3O-×2)，0.69(3H，s)，0.76(3H，s)，0.94(3H，d，J＝7.0Hz)，1.20(3H，s)，1.26(3H，s)，1.38(3H，s)。实施例16IlexgeninA1，2，3-三唑类衍生物(I-16)制备过程同I-15，用I-12取代I-11得产物I-16，黄色油状物，收率为86.7％。HR-ESI-MSm/z1189.7[M+H]+，分子量为1188，分子式为C66H88N6O14。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：7.61(1H，s，吡咯环上氢)，7.61(1H，s，吡咯环上氢)，7.97(2H，dd，J＝1.5，8.0Hz，Ar-H)，7.51(2H，ddd，J＝2.0，8.0Hz，Ar-H)，7.25(2H，ddd，J＝1.5，7.5Hz，Ar-H)，7.04(2H，dd，J＝1.0，8.0Hz，Ar-H)，5.30(1H，brs，H-12)，5.38(2H，s，-CCH2OCO-×2)，4.27-4.34(4H，m，-COOCH2×2)，3.86-4.10(4H，m，CH2-N×2)，3.03(1H，dd，J＝4.5，12HzH-3)，2.54(1H，s，H-18)，2.22(6H，CH3O-×2)，0.66(3H，s)，0.72(3H，s)，0.90(3H，d，J＝7.0Hz)，1.16(3H，s)，1.22(3H，s)，1.35(3H，s)。1HNMR(500MHz)and13CNMR(125MHz)，DEPT、1H-1HCOSYandHMBCdataforI-16(CDCl3，δinppm，JinHz).实施例17IlexgeninA1，2，3-三唑类衍生物(I-17)制备过程同I-16，用I-12取代I-11得产物I-17，黄色油状物，收率为20％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ：10.63(1H，brs，COH)，7.67(1H，s，吡咯环上氢)，7.64(1H，s，吡咯环上氢)，8.01(1H，dd，J＝2.0，8.0Hz，Ar-H)，7.84(1H，dd，J＝1.5，8.0Hz，Ar-H)，7.55(1H，ddd，J＝2.0，8.0Hz，Ar-H)，7.45(1H，ddd，J＝2.0，8.5Hz，Ar-H)，7.29(1H，ddd，J＝1.5，8.0Hz，Ar-H)，7.08(1H，dd，J＝1.0，8.0Hz，Ar-H)，6.97(1H，dd，J＝1.0，8.5HzAr-H)，6.86(1H，m，Ar-H)，5.34(1H，brs，H-12)，5.50，5.44(2H，s，-CCH2OCO-×2)，4.33-4.37(4H，m，-COOCH2×2)，3.91-4.11(4H，m，CH2-N×2)，3.07(1H，dd，J＝4.5，12HzH-3)，2.58(1H，s，H-18)，2.27(3H，CH3O-)，0.70(3H，s)，0.76(3H，s)，0.94(3H，d，J＝6.5Hz)，1.20(3H，s)，1.26(3H，s)，1.39(3H，s)。