岩白菜素类衍生物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物合成领域，涉及岩白菜素类衍生物及其制备方法，具体是涉及一 类岩白菜素8位羟基类衍生物及其制备方法，以及该类化合物在制备抗血小板聚集药物中 的应用。
【背景技术】
[0002] 心脑血管疾病包括缺血性冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）、脑卒中和（或） 周围血管病，是导致人类死亡的主要病因。动脉粥样硬化血栓形成是心、脑血管疾病的病理 基础。血小板激活和聚集在其形成过程中起核心作用。在体内，血小板通过粘附、聚集在血 管损伤的部位参与初级血栓的形成，此外通过血小板的释放产物，可进一步引起血管收缩， 刺激白细胞，损伤内皮细胞，促进血液凝固，导致血栓形成。抗血小板治疗有助于减少心、脑 血管不良事件的发生。随着抗血小板聚集药物在心脑血管疾病中的良好应用，越来越多的 学者对其进行研究。
[0003] 岩白菜素（bergenin)，其结构如式I表不
是虎耳草、岩 白菜、厚叶岩白菜、矮地茶等虎耳草科植物的主要活性成分，2010版《中华人民共和国药典》 收为镇咳祛痰药，已有片剂应用于临床。已有学者报道了岩白菜素及其衍生物的抗血小板 聚集活性，为了发现更新、更有效和更广谱的抗血小板聚集新药，开发具有抗血小板聚集活 性的岩白菜素衍生物作为新型抗血小板聚集药物研发具有良好的应用前景。基于以上背 景，本发明合成了岩白菜素8位羟基结构修饰的衍生物，并进行了体外抗血小板聚集实验 研究。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是通过对岩白菜素进行衍生化反应，增强其抗血小板聚集作用，提 供一系列岩白菜素类衍生物。
[0005] 本发明的另一个目的是提供岩白菜素类衍生物的制备方法。
[0006] 本发明的另一个目的是提供岩白菜素类衍生物的用途。
[0007] 本发明的目的是通过技术方案实现的：
[0008] 如式II所示的岩白菜素类衍生物：
[0009]
[0010] 其中，n= 1~10的整数；R选自氯、溴、含1个或多个N的杂环基、
NR2R3;Ri选自氢、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、Ci5烷基、卤代Ci5烷基、Ci5烷氧基，X选自S、 〇 ;R2、R3相同或不同，各自独立的选自H、Ci6烷基。
[0011] 作为优选方案，n= 2~5的整数；R选自氯、溴、含1个或多个N的杂环基、
_NR2R3 ;Ri选自氢、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、Cl5烷基、卤代C1 5烷基，C1 5烷 v 氧基，X选自S、0;R2、R3相同或不同，各自独立的选自H、C13烷基。
[0012] 作为进一步的优选方案，n= 2~5的整数；R选自Br、含1个或多个N的杂环基、
t为0、1或2,1?4选自羟基、羧基、羟甲基、Ci4烷基、Ci3烷氧基、C1 4烷氧基取代 的C14烷基；m为0、1或2，R5选自C14烷基、C13烷氧基、C14烷氧基取代的C14烷基；y为0、 1或2, &选自甲基、甲氧基取代的C: 2烷基；z为0、1或2,R7选自C: 4烷基；k为0、1或2， Rs选自C: 4烷基、C: 3烷氧基；R9选自氣、C: 4烷基、
&。选自C: 4烷基，p为1或2,q为1、2或3,Rn、R12相同或不同，各自独立的选自H、C: 3烷 基；Rl；3选自氣、卤素、羟基、氣基、硝基、氛基、Ci4烷基、Ci3烷氧基；
[0013]
[0024] 本发明所述的岩白菜素类衍生物优选自：8-0-(2-溴乙基）岩白菜素，8-0-(3_溴 丙基）岩白菜素，8-0-(4_溴丁基）岩白菜素，8-0-(5_溴戊基）岩白菜素，8-0-(2_吡咯 烷基乙基）岩白菜素，8-0-(3_吡咯烷基丙基）岩白菜素，8-0-(4_吡咯烷基丁基）岩白菜 素，8-〇-(5_P比略烷基戊基）岩白菜素，8-〇-(2_吗啡啉基乙基）岩白菜素，8-〇-(3_吗啡 啉基丙基）岩白菜素，8-0-(4-吗啡啉基丁基）岩白菜素，8-0-(5-吗啡啉基戊基）岩白菜 素，8-0-(2-(4-甲基哌嗪基）乙基）岩白菜素，8-0-(3-(4-甲基哌嗪基）丙基）岩白菜素， 8-0-(4-(4_甲基哌嗪基）丁基）岩白菜素，8-0-(5-(4_甲基哌嗪基）戊基）岩白菜素， 8-〇-(2-(4_漠-1-苯疏基）乙基））-岩白菜素，8-〇-(3-(4_漠-1-苯疏基）丙基））-岩 白菜素，8-〇-(4-(4_溴-1-苯疏基）丁基））-岩白菜素，8-〇-(5-(4_溴-1-苯疏基）戊 基））_岩白菜素，8-〇_ (2- (4-甲基-1-苯疏基）乙基））-岩白菜素，8-〇_ (3- (4-甲基-1-苯 疏基）丙基））_岩白菜素，8-〇_ (4- (4-甲基-1-苯疏基）丁基））-岩白菜素，8-〇_ (5- (4-甲 基-1-苯疏基）戊基））-岩白菜素，8-〇_ (2- (4-溴-1-苯酸基）乙基））-岩白菜素， 8-0-(3-(4_溴-1-苯酚基）丙基））-岩白菜素，8-0-(4-(4_溴-1-苯酚基）丁基））-岩 白菜素，8-0-(5-(4-溴-1-苯酚基）戊基））-岩白菜素，8-0-(2-(4-甲基-1-苯酚基）乙 基））-岩白菜素，8-0-(3-(4_甲基-1-苯酚基）丙基））-岩白菜素，8-0-(4-(4_甲基-1-苯 酚基）丁基））-岩白菜素，8-0- (5- (4-甲基-1-苯酚基）戊基））-岩白菜素。
[0025] 本发明所述的岩白菜素类衍生物的制备方法：
[0026] 当R为C1或Br时，以岩白菜素和二氯代烷或二溴代烷为原料，在缚酸剂作用下反 应生成岩白菜素类衍生物，即8-0-氯代烷基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白菜素，其反应式 为：
[0027]
[0028] 所述的岩白菜素和二氯代烷或二溴代烷的摩尔比为1 :1. 1~1. 6。所述的二氯代 烷或二溴代烷为二氯或二溴取代的C2i。直链烷烃，优选为二氯或二溴取代的C2 5直链代烷， 典型的为1，2-二氯乙烷，1，3-二氯丙烷，1，4-二氯丁烷，1，5-二氯戊烷，1，6-二氯己烷， 1，2-二溴乙烷，1，3-二溴丙烷，1，4-二溴丁烷，1，5-二溴戊烷，1，6-二溴正己烷。
[0029] 所述的缚酸剂为碳酸氢钠。所述的岩白菜素和碳酸氢钠的摩尔比为1 :1~3。所 述的反应在无水N，N-二甲基甲酰胺中（DMF)，氮气保护下进行；所述的反应温度为60~ 80°C。反应进行时，碳酸氢钠作为缚酸催化剂将反应产生的HBr中和，促进反应向正方向进 行。
[0030] 进一步的，反应结束后，反应液降至室温，加入等体积的乙酸乙酯和水萃取，水相 用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯相，再用蒸馏水洗涤三次，乙酸乙酯相经无水硫酸钠 干燥后过滤，减压蒸干溶剂，得到的残留物经硅胶柱层析，洗脱剂是二氯甲烷/甲醇=30 : 1 (V/V)，得到白色固体粉末状目标产物8-0-氯代烷基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白菜素。
[0031] 本发明中优选采用二溴代烷和岩白菜素为原料，以碳酸氢钠为缚酸剂，在无水DMF 中、氮气保护、温度60~80°C下反应生成岩白菜素类衍生物，即8-0-溴代烷基岩白菜素。
[0032] 当R为含1个或多个N的杂环基.
或仲胺基_NR2R3时，合成步骤包括： (1)、以岩白菜素和二氯代烷或二溴代烷为原料，在缚酸剂作用下先反应生成8-0-氯代烷 基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白菜素；（2)、8-0-氯代烷基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白 菜素再进一步和含1个或多个N的杂环.
或仲胺HNR2R3反应生成式II所示的岩 白菜素类衍生物；其反应式为：
[0033]
选自羟基、羧基、羟甲基、Ci4烷基、Ci3烷氧基、Ci4烷氧基取代的Ci4烷基；m为0、1或2，R5 选自G4烷基、Ci3烷氧基、Ci4烷氧基取代的Ci4烷基；y为0、1或2，R6选自甲基、甲氧基 取代的C12烷基；Z为0、1或2,R7选自C14烷基；k为0、1或2,Rs选自C14烷基、C13烷氧 基；馬选自氢、q4烷基
选自C14烷基，p为 1或2，q为1、2或3，Rn、R12相同或不同，各自独立的选自H、C13烷基；R13选自氢、卤素、羟 基、氨基、硝基、氰基、Q4烷基、Ci3烷氧基。
[0035] 优选的，含1个或多个N的杂环选自：吡咯烷、吡咯烷-2-甲醇、吡咯烷-2-羧 酸、4-羟基吡咯烷-2-甲酸、2-甲基吡咯烷、3-甲基吡咯烷、3-乙基吡咯烷、3-丙基吡咯 烷、2-丙基吡咯烷、2-异丙基吡咯烷、3-甲氧基吡咯烷、3-乙氧基吡咯烷、3-丙氧基吡咯 烷、2-(甲氧基甲基）吡咯烷、2-(乙氧基甲基）吡咯烷、3-(甲氧基乙基）吡咯烷、哌啶、 2-甲基哌啶、3-甲基哌啶、4-甲基哌啶、2, 6-二甲基哌啶、3, 5-二甲基哌啶、2-乙基哌啶、 4_异丙基哌啶、4- 丁基哌啶、3-甲氧基哌啶、4-甲氧基哌啶、4, 4-二甲氧基哌啶、3-乙氧 基哌啶、4-n-丙氧基哌啶、4-乙氧基哌啶、4-甲氧基甲基哌啶、3-甲氧基甲基哌啶、2-甲氧 基甲基哌啶、吗啡啉、2, 6-二甲基吗啡啉、3-甲氧基甲基吗啉、2-甲氧基乙基吗啉、咪唑、 2-甲基咪唑、4-甲基咪唑、2-乙基咪唑、2-丙基咪唑、2-异丙基咪唑、2- 丁基咪唑、4, 5-二 甲基-1H-咪唑、苯并咪唑、5-甲基苯并咪唑、5, 6-二甲基苯并咪唑，5-甲氧基苯并咪唑， 5, 6-二甲氧基苯并咪唑、N-甲基哌嗪、N-乙基哌嗪、N-乙氧羰基哌嗪、N-甲氧羰基哌嗪、 1-(2_嘧啶基）哌嗪、1-(4_吡啶基）哌嗪、N-(2-羟乙基）哌嗪、1-(N，N-二甲基丙胺基）哌 嗪、N-苯基哌嗪、1-(2_氟苯基）哌嗪、1-(3_氟苯基）哌嗪、1-(4_氟苯基）哌嗪、1-(4_甲基 苯基）哌嗪、4-(1-哌嗪基）苯酚、1-(4-硝基苯基）哌嗪、4-(4-甲基哌嗪）苯胺、1-(2-苯 甲腈）哌嗪、1-(2-甲氧苯基）哌嗪。
[0036] 最优选的，含1个或多个N的杂环选自吡咯烷、N-甲基哌嗪、吗啡啉。
[0037] 所述的
中，&选自氢、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、C15烷基、卤代C15烧 基、C15烷氧基，X选自S、0 ;优选的，L选自氢、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、q5烷基、卤代G5烷基，Ci5烷氧基，X选自S、0。
[0038] 最优选的，
选自对溴苯硫酚、对甲苯硫酚、对溴苯酚、对甲苯酚。
[0039] 所述的仲胺HNR2R3中，R2、R3相同或不同，各自独立的选自H、Ci6烷基；优选的，R2、 R3相同或不同，各自独立的选自H、Ci3烷基。
[0040] 反应步骤（2)中，所述的8-0-氯代烷基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白菜素和含 1个或多个N的杂环
K仲胺HNR2R3的摩尔比为1 :1. 1~1. 6,优选为1 :1. 4~ 1. 6〇
[0041] 所述的8-0-氯代烷基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白菜素和含1个或多个N的杂 环或仲胺HNR2R3在乙腈中、氮气保护、反应温度70~80°C下进行。进一步的，反应结束后， 除去溶剂，得到的粘稠状物采用硅胶柱层析、以乙酸乙酯：甲醇=5 :1为洗脱液进行纯化， 得到式II所示的岩白菜素类衍生物纯品。
[0042] 或所述的8-0-氯代烷基岩白菜素或8-0-溴代烷基岩白菜素和
％原料、 加入碳酸钾作为催化剂，在乙腈中、氮气保护、反应温度70~80°C下进行。进一步的，反应 结束后，过滤除去不溶物，除去滤液中的溶剂，得到的残留物采用硅胶柱层析、以二氯甲烷： 甲醇=25 :1为洗脱剂进行纯化，得到式II所示的岩白菜素类衍生物纯品。
[0043] 经药理实验表明，本发明所述的岩白菜素类衍生物具有明显的抗血小板聚集活 性，对ADP诱导兔血小板聚集反应的抑制作用均明显高于原料岩白菜素及阳性对照药物阿 司匹林，本发明所述的岩白菜素类衍生物的IC5。值在5~62yM之间。本发明所述的岩白 菜素类衍生物在制备抗血小板聚集药物中的应用。
[0044] 和现有技术相比，本发明的有益效果：
[0045] 本发明从易得的天然产物出发，以岩白菜素为起始原料，合成了一系列8位取代 的岩白菜素类衍生物，合成方法简单，具有较好的可操作性和反应收率，以岩白菜素为原 料，首先在岩白菜素8位酚羟基上引入一条烷基链，该步收率在50%以上，在此基础上与不 同的含N杂环化合物或苯环衍生物反应，合成了一系列岩白菜素类衍生物，该步收率至少 为69%以上，总收率最尚可达49%。
[0046] 制得的岩白菜素类衍生物具有明显的抗血小板聚集活性，对ADP诱导兔血小板聚 集反应的抑制作用均明显高于原料岩白菜素及阳性对照药物阿司匹林，为岩白菜素类化合 物在治疗心脑血管疾病中提供参考。
【具体实施方式】
[0047] 通过【具体实施方式】对本发明的技术方案作进一步的说明。
[0048] 实施例1 8-0-(2-溴乙基）岩白菜素（化合物2)
[0049] 称取岩白菜素（化合物 1，lOOmg, 0? 30mmol)、碳酸氢钠（50mg, 0? 6mmol)，用 5ml 无水DMF溶解，在室温下滴加1，2-二溴乙烷（39yL，0. 45mmol)，氮气保护下逐渐加热至 80°C反应，TLC(薄层硅胶板）监测至反应完全。反应完毕后冷却至室温，加入10ml水和 10ml乙酸乙酯萃取，分离得到有机相，有机相用蒸馏水洗涤三次后，再用无水Na2S04干燥， 减压蒸除有机溶剂后得到的残留物用硅胶柱层析，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇=30 :1，得到 8-0-(2-溴乙基）岩白菜素（化合物2, 72. 8mg，产率是54% )。
[0050]
[0051]化合物2:白色晶体，m.p. 254-256°C?ESI-MSm/z:471. 0[M+C1] ?IR(KBr)cmh34 07, 3230, 2959, 2926, 2818, 1736, 1602, 1488, 1457, 1399, 1345, 1277, 1245, 1135.
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