一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，所述的工艺包括以下步骤：（1）将茯苓粉碎过筛成20目粗粉，然后加入5～10倍的去离子水，得到料液；（2）将步骤（1）得到的料液经过离心机过滤；（3）将步骤（2）得到的滤液用微滤膜PP棉过滤；（4）将步骤（3）得到的滤液用公称截留分子量为10000道尔顿的聚砜中空纤维式超滤膜（UF）进一步过滤；（5）将步骤（4）所得滤液通过真空冷冻干燥的方式进行干燥；（6）将步骤（5）制备的茯苓多糖，以果蝇为动物模型，进行抗氧化防衰老的研究；（7）将步骤（5）制备的茯苓多糖。本发明操作简单、大提高了多糖的纯度及效率。
【专利说明】一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物提取及分离【技术领域】。发明涉及一种以茯苓为原料制备茯苓多糖的提取分离纯化方法，及其降血糖和抗氧化活性的功效评价。
【背景技术】
[0002]茯苓属于非褶菌目多孔菌科茯苓属，为真菌类中药。味甘、淡、平、归心、脾、肾经，具有利水渗湿、健脾宁心等功效。茯苓中的主要药效成分为茯苓多糖。茯苓多糖具有抗肿瘤，抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、保肝、催眠、抗炎、消石等作用，可广泛的应用于医疗保健、食品等领域。茯苓多糖可用于抗肿瘤药物的研发、从而为肿瘤、癌症的治疗提供新的方法，还可作为免疫增强剂，用于保健品的开发与研制。茯苓多糖的生产工艺有很多，目前国内外大多采用水提醇沉法、碱提醇沉法、微波超声波辅助法、发酵醇沉法提取，再进一步通过季铵盐沉淀法、分布沉淀法、凝胶层析法等方法对茯苓多糖进行分离纯化，成为单一组分多糖。目前的提取分离方法，虽然具有价廉、无毒、操作安全等优点，但是浸提时间过长且提取率较低，不能够得到有效的单一成分的茯苓多糖。
[0003]本发明的提取分离方法在于采用超声辅助逆流煮提方法代替传统的浸提方法，并结合集成膜分离制备茯苓多糖。本发明的提取、膜分离去杂纯化工艺具有工艺简便、提取率高，产品质量好、综合效益显著的优点，适用于工厂扩大化生产。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的主要技术问题是:
(1)提供一种有效的去离子水浸提新方法高效提取茯苓多糖；` (2)提供一种新型膜分离技术分离纯化茯苓多糖，该工艺具有操作简单，条件温和，分离效率高，已经成为多糖分离纯化研究的重要手段。
[0005]本发明通过以下技术方案实现:
一种有效的去离子水浸提新方法利用的辅助技术为超声或者微波；
一种有效的去离子水浸提新方法利用的浸提新工艺为逆流煮提；
一种用于茯苓多糖分离纯化的膜分离系统按截留分子量或孔径分:
微滤陶瓷膜0.1 μ m
微滤膜PP棉I~10 μ m
超滤膜10000~30000
一种膜分离纯化茯苓多糖的工艺，所述的工艺包括以下步骤:
(1)将茯苓粉碎过筛成20目粗粉，然后加入5~10倍的去离子水，超声逆流加热煮沸IOOmin ;超声功率0.5~20 MHz，浸提过程中间歇搅拌原料，控制降温速度为I~10°C /小时，然后留取料液；按照相同条件继续煮提三次，合并四次料液；
(2)将步骤(1)得到的料液经过离心机过滤，去除200目以下的杂质，料液冷却至30°C以下；(3)将步骤(2)得到的滤液用微滤膜PP棉过滤，操作温度25~35°C，压力0.1~0.5Mpa ；
(4)将步骤(3)得到的滤液用公称截留分子量为10000道尔顿的聚砜中空纤维式超滤膜(UF)进一步过滤，操作温度25~35 °C，压力0.05~0.1Mpa ；
(5)将步骤(4)所得滤液通过真空冷冻干燥的方式进行干燥；
(6)将步骤(5)制备的茯苓多糖，以果蝇为动物模型，进行抗氧化防衰老的研究。
[0006](7)将步骤(5)制备的茯苓多糖，采用体外α -葡萄糖苷酶抑制模型进行酶抑制活性研究。
[0007]所述的工艺还包括从步骤(1)到步骤(5)均在密闭容器内进行。
[0008]所述的工艺还包括:
(I):步骤(3)中的微滤包括孔径为0.1~10 μ m的纤维素膜、陶瓷膜或PP棉。
[0009](2):步骤(4)中的超滤膜为公称截留分子量为10000道尔顿聚砜或聚丙烯超滤膜。
[0010]所述的生产工艺采用冷冻干燥或喷雾干燥或低温真空带式干燥将步骤(4)得到的浓缩液进行干燥。
[0011]本发明有益效果:本发明所使用的超声辅助逆流煮提方法能够大幅度的缩短提取时间，增加有效成分的提取率，减少杂质的溶出。该方法不受有效成分极性、分子量大小的限制，加快可溶物质有效成分高效充分的溶出、扩散。本发明采用的膜分离纯化方法能有有效的去除茯苓多糖中的大分子蛋白、多酚、色素等物质，且与传统的除蛋白和脱色方法相比，操作简单、条件温和、不仅可以避免茯苓多糖在操作过程中活性降低，还大大提高了多糖的纯度，也提高了多糖进一步分离纯化的效率。
【具体实施方式】
[0012]实施例1
取茯苓5kg，投入浸提罐，加入去离子水30kg后，加盖密封，控制温度为90°C，辅助超声波功率为10 MHz，每小时间歇搅拌5分钟，浸提80min后，滤出滤液，再分别加入IOkg去离子水进行三次次提取(每次煮提30min)，合并四次煮提液经离心机粗过滤后共滤出55kg，冷却至30°C ;将滤液用孔径为5 μ m的微滤膜PP棉过滤，操作温度25°C，压力0.3Mpa，得到滤液51kg ;得到的滤液用公称截留分子量10000道尔顿的聚砜超滤膜PS-10进一步过滤，操作温度25°C，压力0.05Mpa，得到滤液49kg ;滤液浓缩后经冷冻干燥得到茯苓多糖粉末3.7kg。
[0013]实施例2
取茯苓10kg，萃取剂100kg，并投入提取罐，控制温度为95°C，辅助超声波功率为15MHz，每小时间歇搅拌10分钟，浸提，IOOmin后，滤出滤液，再加入50kg萃取剂提取lOOmin，两次提取液合并后离心过滤去除杂质；滤液146kg冷却至30°C后，用孔径为10 μ m的微滤膜PP棉过滤，操作温度30°C，压力0.5Mpa，得到滤液143kg ;将滤液用公称截留分子量30000道尔顿的卷式聚丙烯超滤膜HPS-30进一步过滤，操作温度30°C，压力0.2Mpa，得到滤液138kg ;滤液浓缩后经冷冻干燥得到藏红花素粉末7.8kg。
【权利要求】
1.一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，它包括去离子水煮提、离心过滤、集成膜分离；其特征在于:包括以下步骤: (1)去离子水煮提:将茯苓粉碎过筛成20目粗粉，然后加入5~10倍的去离子水，超声逆流加热煮沸IOOmin,提取4次； (2)离心除杂:将提取液经过离心机进行分离除杂，合并滤液； (3)微滤膜去除大分子杂质:经离心机分离除杂后的滤液，用微滤膜PP棉过滤，操作温度 25 ~35°C，压力 0.1 ~0.5Mpa ； (4)超滤膜分离茯苓多糖:将(3)得到的滤液用公称截留分子量为10000道尔顿的聚砜中空纤维式超滤膜(UF)进一步过滤，操作温度25~35 °C，压力0.05~0.1Mpa ； (5)产品的干燥:将步骤(4)所得滤液通过真空冷冻干燥的方式进行干燥； (6)茯苓多糖抗氧化作用:将步骤(5)制备的茯苓多糖，以果蝇为动物模型，进行抗氧化防衰老的研究； (7)茯苓多糖降血糖作用 :将步骤(5)制备的茯苓多糖，采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型进行降血糖作用研究。
2.根据权利要求1所述的一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，其特征在于步骤(1)中超声逆流煮提方法，其特种在于所述的方法为超声辅助煮沸的去离子水逆流提取。
3.根据权利要求1所述的一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，其特征在于步骤(2)中离心机，其特征在于所述的离心机从平板离心机、卧式离心机和碟式离心机中选择。
4.根据权利要求1所述的一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，其特征在于步骤(3)中的膜系统，其特征在于所用的膜是微滤陶瓷膜、微滤PP棉、中空式纤维超滤膜或卷式超滤膜。
5.根据权利要求1所述的一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，其特征在于步骤(5)中的干燥方式为冷冻干燥或喷雾干燥。
6.根据权利要求1所述的一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，其特征在于步骤(6)中的抗氧化作用研究，以果蝇为动物模型，通过饲喂茯苓多糖进行抗氧化防衰老的研究。
7.根据权利要求1所述的一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，其特征在于步骤(7)中的降血糖作用研究，其特征在于采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型进行降血糖作用研究。
【文档编号】C08B37/00GK103772523SQ201410015582
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年1月14日 优先权日:2014年1月14日
【发明者】何静仁, 洪峰, 刘莉, 段李歌, 蔡小双, 齐敏玉 申请人:武汉新国峰科技开发有限公司